CLSI M100- S26 药敏试验解读
细菌药敏试验报告的解读
苯唑西林 四环素敏感 氨苄西林
头孢唑啉
红霉素敏感
抗生素
预报药/提示药
预报药
（MIC法）葡萄球菌属对β内酰胺类抗生素 （头孢洛林除外） （K-B法）苯唑西林可以预测肺炎链球菌对青 霉素的敏感性
多西环素和米诺环素敏感
对非产β内酰胺酶的肠球菌，氨苄西林敏感可 以预测阿莫西林-克拉维酸，氨苄西林-舒巴坦 ， 哌拉西林，哌拉西林-他唑巴坦的敏感性， 青 霉素敏感也可预测氨苄西林，阿莫西林-克 拉 维酸，氨苄西林-舒巴坦，哌拉西林，哌拉 西 林-他唑巴坦的敏感性，然而，氨苄西林敏 感 不能认为对青霉素也敏感。
➢作用及意义：
1.了解病原微生物对各种抗生素的敏感（或耐受） 程度，以指导临床合理选用抗生素药物的微生物 学试验。 2.为了解致病菌对哪种抗菌素敏感，以合理用药， 减少体外盲药目敏试性验，是对一种抗菌药物在体内治疗有效性预测性的先决条
件
药敏试验的方法
➢定性的方法（K-B法 mm） 纸片扩散法
➢定量的方法（MIC法 mg/L） 1.肉汤稀释法 肉汤微量稀释法 肉汤微量稀释法 2. 琼脂稀释法 3. E-试验 4.自动化仪器
CLSIM100文件给出了各种细菌的天然耐药表,约有1-3%的天然耐药 菌株可能会由于方法学的差异,突变以及低水平耐药性表达的原因表现 为体外药敏试验敏感
药敏试验基本原则
➢标本中分离的细菌可能有临床意义而非定 值或污染时,才可进行药敏试验. 1.有菌部位标本:采样方法,标本是否合格, 菌 量(定量或半定量),毒力(致病性) 2.无菌部位标本:是否污染或是否感染(如 导 管定植等)
影响药敏结果的因素
培养基
➢应根据试验菌的营养需要进行配制。 ➢倾注平板时，厚度培养皿，倾注培 养基18-20ml为宜。 ➢培养基内应尽量避免有抗菌药物的拮抗物 质，如钙、镁离子能减低氨基糖苷类的抗 菌活性，胸腺嘧啶核苷和对氨苯甲酸 （PABA）能拮抗磺胺药和TMP的活性。
CLSI临床微生物实验室标准解读XXXX
CLSI临床微生物实验室标准解读CLSI2021更新CLSI临床微生物实验室标准解读第三辑2021年CLSI药敏试验的更新中国医学科学院北京协和医学院杨启文王辉美国临床与实验室标准化研究所(TheClinicalandLaboratoryStandardsInstitute,CLSI)是一个国际性、跨学科、非营利的、致力于开展操作标准的教育组织。
其抗菌药物敏感性试验小组委员会(SubcommitteeonAntimicrobialSusceptibilitytesting)每年组织该领域专家和药厂代表等对药敏相关文件M100进行一次修订。
目前我国的临床微生物实验室均以CLSI文件作为药敏指导文件进行试验操作和报告，本文将CLSIM100-S20(2021年)的要紧更新点总结如下：一、要紧格式的更新：下表显示了一些在M100-S19(2021年)中位于最后的附录在M100-S20(2021年)文件中新的命名、编号和位置。
表1.M100-S20的格式更新M100-S19中的名称M100-S20名称/位置附录A(ESBLs的筛选和确证试验) 补充性表格2A-S1/表2A的最后附录G(碳氰酶烯酶的筛选和确证试验) 补充性表格2A-S2/表2A的最后附录B(金黄色葡萄球菌的筛选试验) 补充性表格2C-S3/表2C的最后附录C(凝固酶阴性葡萄球菌的筛选试验) 补充性表格2C-S4/表2C的最后附录D(肠球菌的筛选试验) 补充性表格2D-S5/表2D的最后附录E(药敏结果确实证建议) 附录A/M100-S20的最后，术语表前附录F(药敏试验的质控菌株) 附录B/M100-S20的最后，术语表前二、表1和表2介绍内容中的更新(1)修订了“非敏感〞的定义：M100-S20中对“非敏感〞的定义是由于耐药菌株缺失或稀少因而仅确立了敏感性解释标准。
当药物对菌株的MIC高于或抑菌圈直径低于此折点时需报告为非敏感。
非敏感并不意味着菌株携带某种耐药机制。
CLSI_M100_S26_药敏试验解读
表1A.美国临床微生物学实验室在非苛养菌常规试验和报告中应考虑的具有FDA临床适应证的抗菌药物建议分组•'警告•：对分舅于脑臀液（CSF）中的细菌.下列抗菌药物不应作为选择药物进行常规报告.因为用这些药物治疗某些微生物（即•表2A至2J所包括的细苗）引起的CSF感染可能是无效的：仅通过口服途径给药的药物第•和第二代头砸苗倉（除外头池决*注射刑）和头零素类克林右卷人环内曲类四环素类緘咋诺刷类总注释:A. 对四环素敏感的菌株被认为对多西环素和米诺环素也敏感。
然而，某些对四环素中介或耐药的菌株可能对多西环素、米诺环素或二者敏感。
B. 利福平不能单独用于抗菌治疗。
C. 分离于泌尿道菌株不被常规报告。
肠杆菌科：D. 头抱噻吩仅被用于预报口服药物结果，包括头抱氨苄、头抱泊肟、头抱氨苄和氯碳头抱。
以前关于头抱噻吩结果可预报其他头抱菌素敏感性建议仍然正确，但近年来还没有数据证实此建议。
E. 当测试粪便中分离的沙门菌和志贺菌株时，只有氨苄西林、一种氟喹诺酮类和复方新诺明可用于常规报告。
另外，对肠道外感染沙门菌粉分离株，应测试并报告一种三代头抱菌素，假如需要，也可测试和报告氯霉素。
分离于肠道和肠道外伤寒样沙门菌（伤寒沙门菌和副伤寒沙门菌A-C）需进行药敏试验。
分离于肠道非伤寒样沙门菌不需进行常规药敏试验。
F. 从CSF中分离菌株，试验和报告头抱噻肟和头抱曲松，以取代头抱唑林。
其他非肠杆菌科：G. 其他非肠杆菌科细菌包括假单胞菌和其他非苛养、非发酵葡萄球菌的革兰阴性杆菌，但不包括铜绿假单胞菌、不动杆菌、洋葱伯克霍尔德菌和嗜麦芽窄食单胞菌，因为对这些菌种的建议试验和报告药物表格已分开。
鼻疽伯克霍尔德菌和假鼻疽伯克霍尔德菌试验和报告药物建议请参阅CLSIM45 文件。
葡萄球菌属：H. 仅对金黄色葡萄球菌包括耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA ）I. 青霉素敏感的葡萄球菌对葡萄球菌感染具有临床疗效的其他B酰胺类药物也敏感。
2016年CLSI-M100S主要更新内容解读
2016年CLSI M100S（第26版）主要更新内容解读张雅薇? ? 王辉（通讯作者）北京大学人民医院检验科此文发表在《中华检验医学杂志》2016年3月第39卷第3期，165-169建立和完善病原菌鉴定和体外药敏试验的标准化操作规程，是加强微生物室能力建设的基本要求之一。
其对优化临床药物选择、减缓耐药菌的产生具有重要意义。
CLSI 制定的药敏试验标准是我国实验室遵循的指导性文件。
作为CLSI批准的药敏试验标准（包括M02-A12、M07-A10和M11-A8）的补充文件，2016年M100-S26正式更名为M100S（第26版）。
本文将重点解读CLSI M100S（第26版）文件[1]中的主要更新内容，以供临床实验室参考。
一、常规试验及报告药物的更新CLSI M100S（第26版）文件新增了多种目前新上市的新药如ceftolozane-他唑巴坦、奥利万星、泰地唑胺和特拉万星作为临床选择性报告的药物，并修订了几种抗菌药物的临床药敏报告组别，见表1。
注：a A组：常规测试并报告的药物。
b B组：常规测试，但选择性报告的药物。
c C组：补充性抗菌药物，选择性地报告。
d U组：仅用于泌尿道感染的抗菌药物。
e O组：其他药物，是指对微生物有作用，但在美国不常规要求测试的药物。
f其他非肠杆菌科：包括假单胞菌属和其他非苛养、非发酵糖革兰阴性杆菌（除外铜绿假单胞菌、不动杆菌属、洋葱伯克霍尔德菌和嗜麦芽窄食单胞菌）。
二、药敏折点的相关更新2016年CLSI M100S（第26版）文件修订了头孢唑林对肠杆菌科的纸片法和MIC折点，并建议将头孢唑林药敏结果用于预测口服头孢菌素的药敏。
当头孢唑林用于治疗由大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和奇异变形杆菌引起的非复杂性尿路感染时，建议使用新修订的折点，见表2，折点建立基于的给药方案为1g每12h；除非复杂性尿路感染外，当患者为其他感染时，仍沿用M100-S25中头孢唑林对肠杆菌科的折点。
clsi药敏试验标准2023
CLSI药敏试验标准2023一、药敏试验定义药敏试验（Antimicrobial Susceptibility Testing，AST）是一种实验室方法，用于测定细菌对各种抗菌药物的敏感性或耐药性。
药敏试验可以帮助医生选择最合适的抗菌药物来治疗感染，提高治疗效果并减少耐药性的传播。
二、试验规则1.试验方法：CLSI推荐使用微量稀释法（microdilution method）进行药敏试验。
该方法通过在试管或微孔板中加入细菌悬液和不同浓度的抗菌药物，测定细菌生长情况，从而判断细菌对药物的敏感性。
2.试验菌种：CLSI推荐使用临床分离的细菌菌种进行药敏试验，包括革兰阳性菌、革兰阴性菌、非发酵菌等。
3.药物浓度：药敏试验中使用的抗菌药物浓度应符合CLSI标准，以保证试验结果的准确性。
4.孵育时间：孵育时间应根据菌种和药物特性确定，一般为16-20小时。
5.结果判定：根据细菌生长情况，药敏试验结果可分为敏感（S）、中介（I）和耐药（R）三种类型。
三、质量控制1.室内质控：每次试验应包括阴性对照（无菌生长）和阳性对照（细菌生长），以验证试验的准确性。
2.室间质控：参加CLSI组织的室间质控计划，以确保不同实验室之间的结果具有可比性。
四、抗生素敏感性试验1.常规抗生素：包括β-内酰胺类（如青霉素类、头孢菌素类等）、氨基糖苷类（如链霉素、庆大霉素等）、氟喹诺酮类（如环丙沙星、左氧氟沙星等）等多种抗生素。
2.特殊抗生素：针对某些特定感染，如结核病、真菌感染等，需使用特殊的抗结核药物或抗真菌药物进行药敏试验。
五、抗菌药物分组CLSI将抗菌药物分为五个组别，分别为：β-内酰胺类、氨基糖苷类、氟喹诺酮类、抗真菌药和其他抗菌药物。
药敏试验时应根据抗菌药物的分组选择相应的药敏试验方法。
六、选药流程1.根据感染部位和临床诊断，选择可能有效的抗菌药物。
2.根据细菌培养和药敏试验结果，调整抗菌药物的选择。
3.根据患者个体差异（如年龄、肾功能等）和药物相互作用，选择最合适的抗菌药物。
【指南与规范】2016年CLSI M100S(第26版)主要更新内容解读
一、常规试验及报告药物的更新CLSI M100S（第26版）文件新增了多种目前新上市的新药如ceftolozane-他唑巴坦、奥利万星、泰地唑胺和特拉万星作为临床选择性报告的药物，并修订了几种抗菌药物的临床药敏报告组别，见表1。
注：a A组：常规测试并报告的药物。
b B组：常规测试，但选择性报告的药物。
c C组：补充性抗菌药物，选择性地报告。
d U组：仅用于泌尿道感染的抗菌药物。
e O组：其他药物，是指对微生物有作用，但在美国不常规要求测试的药物。
f其他非肠杆菌科：包括假单胞菌属和其他非苛养、非发酵糖革兰阴性杆菌（除外铜绿假单胞菌、不动杆菌属、洋葱伯克霍尔德菌和嗜麦芽窄食单胞菌）。
二、药敏折点的相关更新2016年CLSI M100S（第26版）文件修订了头孢唑林对肠杆菌科的纸片法和MIC折点，并建议将头孢唑林药敏结果用于预测口服头孢菌素的药敏。
当头孢唑林用于治疗由大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和奇异变形杆菌引起的非复杂性尿路感染时，建议使用新修订的折点，见表2，折点建立基于的给药方案为1g每12h；除非复杂性尿路感染外，当患者为其他感染时，仍沿用M100-S25中头孢唑林对肠杆菌科的折点。
新版标准删除了下列药物对各菌种的折点：替卡西林和头孢噻吩对肠杆菌科的折点；替卡西林对铜绿假单胞菌；替卡西林和美洛西林对不动杆菌属；美洛西林、替卡西林和氨苄西林对其他非肠杆菌科（包括假单胞菌属和其他非苛养、非发酵糖革兰阴性杆菌，除外铜绿假单胞菌、不动杆菌属、洋葱伯克霍尔德菌和嗜麦芽窄食单胞菌）的折点。
同时也删除了美洛西林和替卡西林对厌氧菌的折点。
三、常规药敏试验、补充药敏试验、初筛试验、替代药物检测法和等效药物检测法鉴定抗菌药物的敏感和耐药M100S（第26版）增加了常规药敏试验、补充药敏试验、初筛试验、替代药物检测法和等效药物检测法的说明，见表3～7。
1.常规药敏试验：用于临床常规检测的纸片扩散法、肉汤或琼脂稀释法。
clsim100 32药敏试验标准2023中文版
clsim100 32药敏试验标准2023中文版介绍：药敏试验是一种通过检测细菌或其他微生物对不同抗生素的敏感性来指导临床用药的测试方法。
药敏试验标准是为了确保药敏试验结果的准确性和可比性，临床医生可以根据这些结果来选择合适的抗生素进行治疗。
2023年版的药敏试验标准更新了之前版本的内容，添加了新的试验项目和方法，以更好地适应临床需求。
本文将对2023年版的药敏试验标准进行详细介绍。
一、试验范围：2023年版的药敏试验标准适用于细菌、真菌和其他微生物的药敏试验。
其中包括对常见病原体如大肠杆菌、金黄色葡萄球菌等的药敏试验，以及对罕见病原体如多重耐药菌株、病毒等的药敏试验。
该标准还适用于临床、科研和药品监管等领域。
二、试验项目：2023年版的药敏试验标准包括以下试验项目：1.最小抑菌浓度(MIC)测定：该项目通过测定细菌对抗生素的最低抑制浓度，来评估其对抗生素的敏感性。
MIC测定是药敏试验的核心内容之一。
2.抗生素敏感度测试：该项目通过对不同抗生素的浓度进行渐进性稀释，判断细菌对抗生素的敏感性水平。
3.抗菌圈直径测定：该项目通过测定抗生素在琼脂平板上形成的抗菌圈直径，来评估细菌对抗生素的敏感性。
在临床上，抗菌圈直径的大小通常用来判断细菌对抗生素的敏感性和耐药性。
4.酶联免疫吸附测定(ELISA)：该项目通过检测细菌分泌的特定酶或蛋白质的水平来评估其对抗生素的敏感性。
5.分子生物学检测：该项目通过检测细菌或真菌的特定基因或基因片段的存在与否，来评估其对抗生素的敏感性。
三、试验方法：2023年版的药敏试验标准规定了具体的试验方法，包括实验器材和试剂的准备、试验操作步骤、结果解读等。
标准强调了试验的操作规范和结果的准确性。
四、质量控制：标准强调了药敏试验的质量控制要求。
试验过程中需要使用合适的阳性对照菌株和阴性对照菌株来进行比对和验证。
质控菌株的选取和保存也在标准中有所规定。
五、结果解读和报告：标准对试验结果的解读和报告也进行了明确规定。
药敏试验结果的解读
药敏试验测试和报告中抗菌药选择原则
根据SAST和美国CLSI标准（每年修正） 参照临床分离的病原菌类型 同类同一亚类只选择1-2种抗菌药 选择的药敏药物应有效、不易耐药、经济
二、解释标准（折点，cut-off）
解释标准（折点）
抑菌圈直径解释标准 MIC解释标准 报告结果：S、I、R NS SDD
物过敏的病人、某些不常见的细菌 • U组，仅用于或首选尿道感染的抗菌药物 • O组， 该组药物对细菌有临床适应症，但在美国一般不用做常规试验
和报告的候选。
药敏试验结果抑菌圈直径 及MIC值解释标准
肠杆菌科的抑菌圈直径及MIC判读标准
氨苄西林的测试结果可以预测阿莫西林。药 敏试验适用于肠外和肠内分离的伤寒样沙门 菌（伤寒沙门菌和甲型副伤寒沙门菌）。
解释标准（折点）
测试与报告中抗菌药物的选择
常规试验和报告中抗菌药物建议分组
在标准中抗菌药物建议分成A、B、C 、U四组
• A组，所列的抗菌药物为首选常规药敏测试药物 • B组，为临床使用主要抗菌药物,可用于首选试验，但只是选择性报告 • C组，补充性抗菌药物，用于对基本药物药物耐药的流行菌株、对药
ⅠⅡ代头孢菌素和头霉素在体外可显示对沙 门菌属和志贺菌属有活性，但临床无效，不 应报告敏感
头孢菌素类（注射用药)（包括ⅠⅡ Ⅲ Ⅳ代头孢菌素）
判读标准只能用于预测口服药物的敏感性， 包括头孢羟氨苄、头孢泊肟、头孢氨苄。
头孢曲松1g/q24h,头孢噻肟1g/q8h
敏感：1g/q8h或2g/q12h，SDD： 基于给药方案较高的药物暴露、较 高剂量或增加用药频率
正确理解此处的抗 菌药物种类 青霉素类、含酶抑 制剂复方、头孢类 （注射）、头孢类 （口服）
clsi-m100-s20_2010抗菌药物敏感性试验解释标准(中文)
内部交流资料
Vol . 30 No .1 M1 0 0 - S 20
抗微生物药物敏感性试验的执行标准； 第二十版信息增刊 Performance Standards for Antimicrobial Susceptibility Testing; Twentieth Informational Supplement
抗微生物药物敏感性试验执行标准； 第二十版信息增刊
Volume 30 Number 1
Franklin R. Cockerill, III, MD Karen Bush, PhD Michael N. Dudley, PharmD,FIDSA George M. Eliopoulos, MD Dwight J. Hardy, PhD David W. Hecht, MD Janet F. Hindler, MCLS, MT(ASCP) Janet A. Hindler. MCLS, MT(ASCP) Jean B. Patel, PhD, D(ABMM) Mair Powell, MD, FRCP, FRCPath, MHRA Richard B. Thomson, Jr., PhD John D. Turnidge, MD Melvin P. Weinstein, MD Barbara L. Zimmer, PhD Mary Jane Ferraro, PhD, MPH Jana M. Swenson, MMSc
药敏试验报告的解读2
门菌感染，致病性大肠杆菌我们没有鉴定 血清。
• 怀疑霍乱时，需开霍乱弧菌培养。 • 可能病毒感染(轮状病毒)。
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药敏试验报告的解读2
小结
• 耐药菌，尤其是多重耐药菌的出现，
使临床抗感染治疗面临着困难的用药 决策
• 细菌药敏试验在选择抗菌药物种类上
•超级细菌？
药敏试验报告的解读2
关于细菌耐药我们应该知道什么？
• 天然耐药的抗菌药物（肯定无效） • 可以选择的抗菌药物（可能有效） • 细菌药敏试验可以提供哪些信息？ • 如何解读细菌药敏试验结果？
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药敏试验报告的解读2
泛耐药铜绿假单胞菌/不动杆菌
• 对抗假单胞青霉素（替卡西林、哌拉西林），抗
– 细菌对A组抗生素耐药 – 病人对A组抗生素过敏 – 严重感染或多部位、多种细菌混合感染 – 控制传染病流行 --C组：备选抗生素，在下列情况下使用 – 对一个或多个首选药耐药的地区流行株感染 – 对不常见菌感染的治疗 – 控制传染病的流行 --U组：包含某些仅用于或首选治疗泌尿道感染的抗 菌药物
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药敏试验报告的解读2
解读注意事项
7、因为是体外药敏试验，有些药体外试验敏 感，可能临床治疗无效。举例说明：
头孢哌酮在用药1-3h后胆汁中的浓度是血液浓度的 100倍；
环丙沙星在尿液的浓度可达200mg是血液的50倍； 左氧氟沙星在肾组织的浓度是血液的2-5倍 [4]。 因此如果在上述高药物浓度部位感染时，按CLSI制
所有青霉素类、头孢菌素类抗生素天然耐 药。
• ⑵嗜麦芽窄食单胞菌：对亚胺培南（泰能
）、美罗培南天然耐药。
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clsi药敏试验标准
clsi药敏试验标准CLSI（Clinical and Laboratory Standards Institute）是一个专门制定临床和实验室标准的非营利组织，其制定的药敏试验标准对于临床医学和药物研发具有重要意义。
药敏试验是评估微生物对抗生素或抗真菌药物的敏感性的一种常见实验方法，其结果对于医生选择合适的治疗方案至关重要。
CLSI药敏试验标准覆盖了许多方面，包括试验的操作流程、质控要求、结果解释等。
首先，试验的操作流程需要严格遵循标准操作程序，以确保实验结果的准确性和可靠性。
在进行药敏试验时，需要注意细菌或真菌的培养条件、药物浓度的选择、试验板的布置等细节，这些都在CLSI标准中有详细规定。
其次，质控要求是保证药敏试验结果准确性的重要保障。
CLSI 标准对于质控菌株的选取、质控试验的频率、质控结果的解释等都有明确规定，实验者需要严格按照标准进行质控，以确保实验结果的可靠性。
另外，CLSI标准还对药敏试验结果的解释进行了详细说明。
在得到试验结果后，实验者需要根据标准中提供的解释标准，判断微生物对药物的敏感性或耐药性，从而为临床治疗提供参考。
需要指出的是，CLSI标准是不断更新和完善的，最新版本的标准更能反映当前医学和药学领域的最新进展。
因此，实验者在进行药敏试验时，应当使用最新版本的CLSI标准，以确保实验结果的准确性和临床应用的有效性。
总的来说，CLSI药敏试验标准对于规范药敏试验操作、保证结果准确性、指导结果解释等方面起到了重要作用。
实验者在进行药敏试验时，应当严格遵循CLSI标准，以确保实验结果的可靠性，为临床治疗提供科学依据。
同时，我们也期待CLSI在未来能够继续完善药敏试验标准，以更好地服务于临床医学和药物研发。
药敏试验报告的解读PPT课件
（二）微生物检验标本采集和处理
1、血液及骨髓标本
最常用的方法为血液增菌培养法。成人每瓶需8-10ML,儿 童每瓶需1-3ML。另外，脑脊液和胸腹水也可用儿童血液 培养瓶增菌，采集量同血液。 （1）为了提高阳性率，应在抗生素治疗前，病人寒战或高 热时严格无菌静脉采血后注入血培养瓶。 （2）于已用抗生素不能停用时，可于48小时内分别于下次 用抗生素之前，采取3份血液标本(要求双管双侧）立即送 检，如不能立即送检，应放置室温保存，但不能超过8-9 小时。 （3）必要时可取骨髓1-2ML，无菌注入血培养瓶中送检。 注意：应严格无菌操作避免污染。一般病人在发病初期1-2 天或发热高峰时采集血液保本。
– 细菌对A组抗生素耐药 – 病人对A组抗生素过敏 – 严重感染或多部位、多种细菌混合感染 – 控制传染病流行
--C组：备选抗生素，在下列情况下使用
– 对一个或多个首选药耐药的地区流行株感染 – 对不常见菌感染的治疗 – 控制传染病的流行
--U组：包含某些仅用于或首选治疗泌尿道感染的抗 菌药物
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与临床沟通中常见问题
）、美罗培南天然耐药。
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细菌的天然耐药
• ⑶肺炎链球菌：对氨基糖苷类抗生素天然耐药 • ⑷产气肠杆菌和阴沟肠杆菌：对头孢西丁天然
耐药。
• ⑸克柔念珠菌：对氟康唑天然耐药。 • ⑹肺炎克雷伯菌：对氨苄西林天然耐药。 • ⑺铜绿假单胞菌：对氨苄西林、阿莫西林、阿
莫西林棒酸、复方新诺明、头孢1代、头孢2代 天然耐药。
下面就以上几种情况分别解读
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铜绿假单胞菌
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产ESBL大 肠埃希菌
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CLSI M100- S26 药敏试验解读(参考仅供)
表1A. 美国临床微生物学实验室在非苛养菌常规试验和报告中应考虑的具有FDA 临床适应证的抗菌药物建议分组总注释：A.对四环素敏感的菌株被认为对多西环素和米诺环素也敏感。
然而，某些对四环素中介或耐药的菌株可能对多西环素、米诺环素或二者敏感。
B.利福平不能单独用于抗菌治疗。
C.分离于泌尿道菌株不被常规报告。
肠杆菌科：D.头孢噻吩仅被用于预报口服药物结果，包括头孢氨苄、头孢泊肟、头孢氨苄和氯碳头孢。
以前关于头孢噻吩结果可预报其他头孢菌素敏感性建议仍然正确，但近年来还没有数据证实此建议。
E.当测试粪便中分离的沙门菌和志贺菌株时，只有氨苄西林、一种氟喹诺酮类和复方新诺明可用于常规报告。
另外，对肠道外感染沙门菌粉分离株，应测试并报告一种三代头孢菌素，假如需要，也可测试和报告氯霉素。
分离于肠道内和肠道外伤寒样沙门菌（伤寒沙门菌和副伤寒沙门菌A-C）需进行药敏试验。
分离于肠道内非伤寒样沙门菌不需进行常规药敏试验。
F.从CSF中分离菌株，试验和报告头孢噻肟和头孢曲松，以取代头孢唑林。
其他非肠杆菌科：G.其他非肠杆菌科细菌包括假单胞菌和其他非苛养、非发酵葡萄球菌的革兰阴性杆菌，但不包括铜绿假单胞菌、不动杆菌、洋葱伯克霍尔德菌和嗜麦芽窄食单胞菌，因为对这些菌种的建议试验和报告药物表格已分开。
鼻疽伯克霍尔德菌和假鼻疽伯克霍尔德菌试验和报告药物建议请参阅CLSIM45文件。
葡萄球菌属：H.仅对金黄色葡萄球菌包括耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）I.青霉素敏感的葡萄球菌对葡萄球菌感染具有临床疗效的其他β-内酰胺类药物也敏感。
青霉素耐药葡萄球菌对青霉素酶不稳定青霉素类耐药。
除具有抗-MRSA活性新的头孢菌素外，苯唑西林耐药葡萄球菌对当前所有使用的β-内酰胺类药物均耐药。
因此，仅测试青霉素和头孢西丁或苯唑西林二者中任一种，则可推测对各种β-内酰胺类药物的敏感或耐药性。
除具有抗-MRSA 活性药物外，不建议常规测试其他β-内酰胺类药物。
2016年CLSI-M100S(第26版)主要更新内容解读
2016年CLSI M100S（第26版）主要更新容解读雅薇王辉（通讯作者）大学人民医院检验科此文发表在《中华检验医学杂志》2016年3月第39卷第3期，165-169建立和完善病原菌鉴定和体外药敏试验的标准化操作规程，是加强微生物室能力建设的基本要求之一。
其对优化临床药物选择、减缓耐药菌的产生具有重要意义。
CLSI制定的药敏试验标准是我国实验室遵循的指导性文件。
作为CLSI批准的药敏试验标准（包括M02-A12、M07-A10和M11-A8）的补充文件，2016年M100-S26正式更名为M100S（第26版）。
本文将重点解读CLSI M100S（第26版）文件[1]中的主要更新容，以供临床实验室参考。
一、常规试验及报告药物的更新CLSI M100S（第26版）文件新增了多种目前新上市的新药如ceftolozane-他唑巴坦、奥利万星、泰地唑胺和特拉万星作为临床选择性报告的药物，并修订了几种抗菌药物的临床药敏报告组别，见表1。
注：a A组：常规测试并报告的药物。
b B组：常规测试，但选择性报告的药物。
c C组：补充性抗菌药物，选择性地报告。
d U组：仅用于泌尿道感染的抗菌药物。
e O组：其他药物，是指对微生物有作用，但在美国不常规要求测试的药物。
f其他非肠杆菌科：包括假单胞菌属和其他非苛养、非发酵糖革兰阴性杆菌（除外铜绿假单胞菌、不动杆菌属、洋葱伯克霍尔德菌和嗜麦芽窄食单胞菌）。
二、药敏折点的相关更新2016年CLSI M100S（第26版）文件修订了头孢唑林对肠杆菌科的纸片法和MIC折点，并建议将头孢唑林药敏结果用于预测口服头孢菌素的药敏。
当头孢唑林用于治疗由大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和奇异变形杆菌引起的非复杂性尿路感染时，建议使用新修订的折点，见表2，折点建立基于的给药方案为1g每12h；除非复杂性尿路感染外，当患者为其他感染时，仍沿用M100-S25中头孢唑林对肠杆菌科的折点。
新版标准删除了下列药物对各菌种的折点：替卡西林和头孢噻吩对肠杆菌科的折点；替卡西林对铜绿假单胞菌；替卡西林和美洛西林对不动杆菌属；美洛西林、替卡西林和氨苄西林对其他非肠杆菌科（包括假单胞菌属和其他非苛养、非发酵糖革兰阴性杆菌，除外铜绿假单胞菌、不动杆菌属、洋葱伯克霍尔德菌和嗜麦芽窄食单胞菌）的折点。
2016CLSIM100S(第26版)主要更新内容解读
目录
摘要…………………………………………………………………………1 委员会成员…………………………………………………………………5 本文件主要变化简介 ……………………………………………………13 CLSI建立解释标准和质量控制过程简介 ………………………………22 CLSI参考方法与商品化方法和CLSI与FDA解释标准（折点）…………23 自2010年以来CLSI折点的增加及修订 …………………………………24
Added new section defining routine, supplemental, screening, surrogate agent, and equivalent agent tests, which replaced the original “Screening Tests” section (p. 33).
设、提高临床检验质量和 规范化管理方面具有重要意义。
第1页，共41页。
M100S (第26版)
M100S,26th Edition --Performance Standards for Antimicrobial Susceptibility
Testing , 26th Edition.--抗菌药物敏感性试验执行标准; 第二十六版
MRSA 筛 选 琼脂法
金黄色葡萄球菌
生长增强试验检测碳青霉烯类 水解
显色试验检测碳青霉烯类水解
对于碳青霉烯类敏感性 下降的菌株
结果指示产生某些碳青 霉烯
对于碳青霉烯类敏感性 下降的菌株
结果指示产生某些碳青 霉烯
琼脂稀 释法， 含4%Nacl 和6 检 测 MRSA ， 建 议 使 用
mg/L苯唑西林的MHA
剂和稀释剂
抗菌药物敏感性试验及2019CLSI-精品文档
Yes,假如需要的话
Yes
Yes,假如需要的话
No
未被CLSI重新评估的折点 头孢孟多 头孢尼西 头孢哌酮 拉氧头孢
在USA这些药物通常是不可行的或为被使用 假如使用这些药物的话，我们必须继续在大肠埃希菌 、克雷伯菌属和变形杆菌中做ESBL初筛及确证实验
--ESBL阳性，将头孢菌素类、青霉素类和氨曲南等药物
增加的…MRSA的定义
“MRSA是指表达mecA基因或其它甲氧西林耐药机制( 如青霉素结合蛋白对苯唑西林亲和力改变等）的金黄
色葡萄球菌 MRSA=表达mecA基因 和/或 苯唑西林MIC>2 μ g/ml
CLSI M100CLSI M100--S20. pp. 60
金黄色葡萄球菌或路登葡萄球菌检测苯 唑西林（OX）和头孢西丁（FOX）
“头孢西丁被作为苯唑西林耐药的替代药物；报 告苯唑西林敏感或耐药是基于头孢西丁的结果 。假如头孢西丁和苯唑西林都被用于测定金黄 色葡萄球菌或路登葡萄球菌，那么两种药物中 任一种耐药，该菌株即应被报告为对苯唑西林 耐药。”
金黄色葡萄球菌或路登葡萄球菌检测苯 唑西林（OX）和头孢西丁（FOX）
OX S R R S FOX S R S R 耐药机制 None mecA 相对流行率 OX报告 一般 S 一般 R R* R*
ESBLs试验建议是处理一个新型耐药机制 的短期解决方案
ESBLs检测（2）
•多重耐药机制的出现可能会使ESBL确证实验受阻
----ESBL+AmpC ----ESBL+孔蛋白突变 • ESBLs产生于肠杆菌科细菌，而不仅仅是大肠埃希菌、克雷伯 菌属和奇异变形杆菌,对于其他的菌株确证实验则存在许多问 题
药敏试验及2019年CLSI更新
药敏试验简介
选择性报告 例如
铜绿假单胞菌
– 普通细菌放CO2时由于 碳酸的影响，药物活性
– 抗生素拮抗剂含量（用29212
受到影响，形成假敏感
监控）
或假耐药
– 钙镁离子含量、锌离子含量
– 苛养菌放普通环境生长
（用27853氨基糖苷类和亚胺
不良，导致假敏感
配能结果监控）
• 菌悬液
• 培养时间
– 粘液性铜绿需48小时
– 浓度高抑菌环缩小
• 测量方法
假敏感或假耐药
– 接种效应
• 培养时间
• 浓度高MIC抬高 • 浓度低MIC压低
– 真菌需48小时 – 奴卡菌需5天
Etest 试条
MIC 值标注于试 条的光面
毛面贴于MHA上
Etest 操作程序
按照扩散法标准 操作涂布接种
贴上试条并培养 15-18小时
读取抑菌浓度并 按标准解释
结果读取
肺炎链球菌 青霉素 MIC = 3 mg/ml
104 cfu/ml
mg/ml 4
2
1
0.5 0.25 0.12
0
微量肉汤稀释法
商品化药敏系统
Vitek 2 compact
MicroScan
Phoenix
Sensititre
微量肉汤稀释法 结果读取技巧
• 磺胺类药物容易出现弱生长，只要满足70%以上抑菌率即 可视为未生长
• 真菌药敏三唑类药物容易出现拖尾现象（即低浓度孔易出 现弱生长），判读时以对照孔为参照，＞80%的抑菌率即 可视为未生长
欧洲应用比较广泛的标准clsiclinicallaboratorystandardinstitutionclsi药敏文件m100s22常见菌2012m11a7厌氧菌2007m39a3积累抗菌谱2009m24a分枝杆菌m27a2酵母样真菌mic法2002m44a真菌纸片扩散法2004m45a低频分离菌与苛养菌2006m100updatedyearlym100updatedyearlym2纸片法操作方法m7mic法操作方法m100解释标准临床实验室通常这样使用使用clsi方法记录采用其他方法时使用clsi做参照方法进行比对更新信息更新信息m2m2表格表格扩散法扩散法m7m7表格表格micmic法法附录附录词汇表词汇表iiiclsim100clsim100??抗生素的测试与报告抗生素的测试与报告??质控质控m100m100??抗生素的测试与报告抗生素的测试与报告??质控质控clsim100clsim100s22s22更新信息更新信息clsim100clsim100s22s22glossaryclsim100s22词汇表ipart例如clsim100s22词汇表ii例如我们应该如何测试和报告我们应该如何测试和报告
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表1A. 美国临床微生物学实验室在非苛养菌常规试验和报告中应考虑的具有
FDA 临床适应证的抗菌药物建议分组
总注释：
A.对四环素敏感的菌株被认为对多西环素和米诺环素也敏感。
然而，某些对四
环素中介或耐药的菌株可能对多西环素、米诺环素或二者敏感。
B.利福平不能单独用于抗菌治疗。
C.分离于泌尿道菌株不被常规报告。
D.头孢噻吩仅被用于预报口服药物结果，包括头孢氨苄、头孢泊肟、头孢氨苄
和氯碳头孢。
以前关于头孢噻吩结果可预报其他头孢菌素敏感性建议仍然正确，但近年来还没有数据证实此建议。
E.当测试粪便中分离的沙门菌和志贺菌株时，只有氨苄西林、一种氟喹诺酮类
和复方新诺明可用于常规报告。
另外，对肠道外感染沙门菌粉分离株，应测试并报告一种三代头孢菌素，假如需要，也可测试和报告氯霉素。
分离于肠道内和肠道外伤寒样沙门菌（伤寒沙门菌和副伤寒沙门菌A-C）需进行药敏试验。
分离于肠道内非伤寒样沙门菌不需进行常规药敏试验。
F.从CSF中分离菌株，试验和报告头孢噻肟和头孢曲松，以取代头孢唑林。
G.其他非肠杆菌科细菌包括假单胞菌和其他非苛养、非发酵葡萄球菌的革兰阴
性杆菌，但不包括铜绿假单胞菌、不动杆菌、洋葱伯克霍尔德菌和嗜麦芽窄食单胞菌，因为对这些菌种的建议试验和报告药物表格已分开。
鼻疽伯克霍尔德菌和假鼻疽伯克霍尔德菌试验和报告药物建议请参阅CLSIM45文件。
H.仅对金黄色葡萄球菌包括耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）
I.青霉素敏感的葡萄球菌对葡萄球菌感染具有临床疗效的其他β-内酰胺类药
物也敏感。
青霉素耐药葡萄球菌对青霉素酶不稳定青霉素类耐药。
除具有抗-MRSA活性新的头孢菌素外，苯唑西林耐药葡萄球菌对当前所有使用的β-内酰胺类药物均耐药。
因此，仅测试青霉素和头孢西丁或苯唑西林二者中任一种，则可推测对各种β-内酰胺类药物的敏感或耐药性。
除具有抗-MRSA 活性药物外，不建议常规测试其他β-内酰胺类药物。
J.分离于呼吸道菌株不报告达托霉素结果。
K.头孢西丁纸片扩散法或MIC 试验结果可用于预报金黄色葡萄球菌和路登葡萄球菌分离株是否存在mecA介导的苯唑西林耐药。
对凝固酶阴性葡萄球菌(除路登葡萄球菌外)，检测mecA 介导的苯唑西林耐药，首选方法是头孢西丁纸片扩散法。
头孢西丁可被用于检测苯唑西林耐药替代品；根据头孢西丁结果来报告苯唑西林敏感或耐药。
假如测试青霉素酶稳定青霉素，首选是苯唑西林，其结果适用于其他青霉素酶稳定青霉素类，如氯唑西林、双氯西林和氟氯西林。
L.对试验敏感的葡萄球菌，可使用氨基糖苷类与试验敏感的具有活性的其他药物一起进行联合。
M.警告: 在体外，头孢菌素类、氨基糖苷类(除了筛选高水平耐药)、克林霉素和复方新诺明可表现对肠球菌有活性，但临床上无效，因此，不能报告分离菌对这些药物敏感。
N.对青霉素敏感非产β-内酰胺酶的肠球菌，可预报其对氨苄西林、阿莫西林、氨苄西林/舒巴坦、阿莫西林/克拉维酸、哌拉西林、哌拉西林/他唑巴坦敏感。
然而，对氨苄西林敏感肠球菌不能推测其对青霉素敏感。
假如需要青霉素结果，必须对青霉素进行测试。
严重肠球菌感染，如心内膜炎，除非证明其对庆大霉素和链霉素高水平耐药外，可用氨苄西林、青霉素或万古霉素（敏感株）加一种氨基糖苷类进行联合治疗；上述药物联合对肠球菌可起到协同杀菌效果。
表1B. 美国临床微生物学实验室在苛养菌常规试验和报告中应考虑的具有FDA
临床适应证的抗菌药物建议分组
A.1
B.2
C.3
D.从脑脊液中分离的流感嗜血杆菌，常规中只报告氨苄西林、一种三代头孢菌
素、氯霉素和美罗培南的试验结果。
E.由嗜血杆菌引起的呼吸道感染，可用阿莫西林/克拉维酸、阿奇霉素、头孢克
罗、头孢地尼、头孢克肟、头孢泊肟、头孢丙烯、头孢呋辛、克拉霉素、氯碳头孢和泰利霉素等口服药作为经验治疗，这些抗菌药物的药敏试验结果常常不用于个体患者的管理。
然而，嗜血杆菌对这些药物的药敏试验适合于监测和流行病学研究。
F.氨苄西林的药敏试验结果可用于预报阿莫西林的活性。
大多数耐氨苄西林和
阿莫西林的流感嗜血杆菌分离株产生TEM 型β-内酰胺酶。
在多数情况下，直接β-内酰胺酶试验可以快速检测菌株对氨苄西林和阿莫西林的耐药性。
G.仅针对流感嗜血杆菌。
H.仅适用于接触者预防。
参见表2E。
I.如果发生治疗失败应考虑进行淋病奈瑟菌培养和药敏试验。
试验推荐最少抗
菌药物列在 A 组中。
最新的CDC 治疗和试验指南可在/std/Gonorrhea/网站上获得。
J.对左氧氟沙星敏感的肺炎链球菌分离株，可预报其对吉米沙星和莫西沙星也敏感。
然而，对吉米沙星和莫西沙星敏感分离株，不能推定其对左氧氟沙星敏感。
K.对脑脊液中肺炎链球菌分离株，应用可靠的MIC 试验(如CLSI M07-A9 文件中所描述)测试并常规报告青霉素和头孢噻肟或头孢曲松或美罗培南的敏感性试验结果。
对这些分离株，也可以用MIC 试验或纸片法测万古霉素的敏感性。
从其他部位分离的菌株，可用苯唑西林纸片筛选试验。
如果抑菌圈直径≤19mm，应测定青霉素、头孢噻肟、头孢曲松或美罗培南的MICs。
L.利福平不能单独用于抗菌治疗。
链球菌：
M.青霉素或氨苄西林中介株可能需要与一种氨基糖苷类药物联合治疗，起杀菌作用。
N.治疗β-溶血链球菌感染首选药物是青霉素和氨苄西林。
由于在β-溶血链球菌中极少见非敏感株(青霉素MICs > 0.12 和氨苄西林MICs > 0.25 μg/mL) ，在化脓链球菌中未见报道，因此，FDA 批准的青霉素类和其他β-内酰胺类用于β-溶血链球菌感染的治疗，临床常规工作中不需要对这些药物执行药敏试验。
假如执行试验时，发现任何β-溶血链球菌非敏感株，应对菌株进行重新鉴定、重新试验，当检测为非敏感株时应送参考实验室进一步确证(进一步说明见附录A) 。
O.对化脓链球菌报告。
P.为预防分娩期妇女B 群链球菌感染，推荐使用青霉素或氨苄西林。
尽管低危险性青霉素过敏的妇女推荐用头孢唑啉，高危险青霉素过敏者，建议使用克林霉素或红霉素。
但对氨苄西林、青霉素和头孢唑啉敏感的B 群链球菌，可对红霉素和克林霉素耐药。
当从严重青霉素过敏（高危过敏）的妊娠妇女分离到 B 群链球菌时，应测试红霉素和克林霉素(包括诱导型克林霉素耐药) ，仅报告克林霉素结果。
见表2H-1 补充表1。
Q.此表中，β-溶血链球菌包括形成大菌落的A 群（化脓链球菌）、C 群或G 群抗原的化脓性链球菌及具有B 群（无乳链球菌）抗原的菌株。
形成小菌落具有A、C、F 或G 抗原β-溶血菌株(咽峡炎链球菌群，以前称“米勒链球菌”)被划到草绿色溶血链球菌群，并且使用草绿色溶血链球菌解释标准。
R.分离于泌尿道菌株不报告达托霉素结果。