实验一异烟肼原料药的质量分析

实验一、异烟肼原料药的鉴别及质量分析

一、目的要求

1. 复习并掌握吡啶类药物鉴别反应的实验原理。

2. 复习并掌握溴酸钾法测定异烟肼含量的实验原理。

3. 掌握红外光谱法鉴别药物的操作方法。

4. 掌握溴酸钾法测定异烟肼含量的操作方法。

二、仪器及试药

1. 器材

岛津FTIR－8400型傅立叶变换红外分光光度计，电子天平（精度0.01），万分之一分析天平，称量瓶，称量纸，药匙，研钵，量筒，玻璃棒，酸式滴定管，锥形瓶（250 mL）

2.试药

异烟肼原料药，盐酸（AR），甲基橙（AR），溴酸钾（AR），碘化钾（AR），硫酸（AR），硫代硫酸钠（AR），无水碳酸钾（AR），重铬酸钾（基准试剂），可溶性淀粉（AR），纯化水。

三、实验溶液配制

1. 甲基橙指示液：取甲基橙0.1 g，加水100 mL使溶解，即得。

2. 0.01667 mol/L溴酸钾滴定液：取溴酸钾2.8 g，加水适量使溶解成1000 mL，摇匀。

3. 0.01667 mol/L溴酸钾滴定液的标定：精密量取本液25 mL，置碘量瓶中，加碘化钾2.0 g 与稀硫酸5 mL，密塞，摇匀，在暗处放置5 分钟后，加水100 mL稀释，用硫代硫酸钠滴定液（0.1 mol/L）滴定至近终点时，加淀粉指示液 2 mL，继续滴定至蓝色消失。根据硫代硫酸钠滴定液（0.1 mol/L）的消耗量，算出本液的浓度，即得。室温在25 ℃以上时，应将反应液及稀释用水降温至约20 ℃。

4. 稀硫酸：取浓硫酸57 mL，加水稀释至1000 mL，即得。本液含硫酸应为9.5%-10.5%。

5. 0.1 mol/L硫代硫酸钠滴定液：取硫代硫酸钠26 g与无水碳酸钠0.20 g，加新沸过的冷水适量使溶解成1000 mL，摇匀，放置1个月后滤过。

6. 0.1 mol/L硫代硫酸钠滴定液的标定：取在120 ℃干燥至恒重的基准重铬酸钾0.15 g ,精密称定，置碘量瓶中，加水50 mL使溶解，加碘化钾2.0 g，轻轻振摇使溶解，加稀硫酸40 mL,摇匀，密塞；在暗处放置10分钟后，加水250 mL稀释，用硫代硫酸钠滴定液（0.1 mol/L）滴定至近终点时。加淀粉指示液 3 mL，继续滴定至蓝色消失而显亮绿色，并将滴定的结果用空白试验校正。每1 mL硫代硫酸钠滴定液（0.1 mol/L）相当于4.903 g的重铬酸钾。根据滴定液的消耗量与重铬酸钾的取用量，算出本液的浓度，即得。室温在25 ℃以上时，应将反应液及稀释液用水降温至约20 ℃。

7. 淀粉指示液：取可溶性淀粉0.5 g ，加水5 mL 搅匀后，缓缓倾入100 mL 沸水中，随加随搅拌，继续煮沸2分钟，放冷，倾取上层清夜，即得。本液应临时新制。

四、实验原理

异烟肼又称雷米封，异盐酸肼。主要用于各型肺结核的进展期、溶解播散期、吸收好转期，尚可用于结核性脑膜炎和其他肺外结核等。本品常需和其他抗结核病药联合应用，以增强疗效和克服耐药菌。此外，异烟肼对痢疾、百日咳、麦粒肿等也有一定疗效。

1.原料药的鉴别

红外光谱常用于有机化合物的结构确定,是一种专属性很强、应用较广的药物鉴别方法，固体、液体、气体样品均可采用红外光谱法鉴别。它多用于组分单一、结构明确的原料药，因其专属性较强，特别适合于其他方法不易区别的同类药物。异烟肼的分子结构中具有N-H 和C=O 等官能团，另外还具有吡啶杂环，通过红外光谱定性，能鉴别出其主要特征吸收峰的归属情况。异烟肼标准红外光谱图见下图：

异烟肼标准红外光谱图

2. 原料药的含量测定

异烟肼结构中的酰肼基团具有还原性，在强酸性介质中可与溴酸钾发生定量反应，反应式如下：

N

CONH NH

2

KBr O 3

2H Cl

3

N

COOH

N 2

3H 2O

3KBr

2

五、实验内容及步骤

1.鉴别

用岛津FTIR －8400型傅立叶变换红外分光光度计进行官能团定性。本品的红外光吸收图谱应与对照的图谱一致。

2.含量测定

实验方法：取本品约0.2 g,精密称定，置100 mL 量瓶中,加水使溶解并稀释至刻度。摇匀；精密量取25 mL,加水50 mL 、盐酸20 mL 与甲基橙指示液1滴，用溴酸钾滴定液(0.01667 mol/L)缓缓滴定(温度保持在18-25 ℃)至粉红色消失。每1 mL 溴酸钾滴定液(0.01667 mol/L)相当于3.429 mg 的C 6H 7N 3O 。平行实验三次。

中国药典（2005）规定，本品按干燥品计算，含C 6H 7N 3O 不得少于99.0%。

六、 数据记录及处理

1. 根据红外谱图归纳出异烟肼中官能团的归属情况。

2. 异烟肼原料药的含量测定 数据记录表：

W= g ，溴酸钾滴定液的浓度= 。

C 6H 7N 3O% =

1001000

25.0⨯⨯⨯⨯⨯W F

T V % （0.25 表示从100 mL 中移取了25 mL ）

V ：消耗的溴酸钾滴定液的体积，mL ； T ：滴定度. mg/mL, T = M ⨯

a

b

⨯ B ；（M ：滴定液的浓度，B ：被测物的分子量，a ：滴定液的摩尔数，b ：被测物的摩尔数） F ：溴酸钾滴定液的浓度校正系数，F =

N

N '

；（'N ：溴酸钾滴定液的实际浓度，N ：溴酸钾滴定液的标准浓度，0.01667 mol/L ） W ：供试品的取样量，g ；

七、 实验注意事项

1. 本实验中的指示剂褪色是不可逆的，因此滴定过程中必须充分振摇，以避免因滴定剂局部过浓导致的指示剂提前褪色。为防止误判，实验时，可补加1滴指示剂以确证终点真正达到。