高效液相色谱法测定食品中栀子黄

[作者简介]　李永利(1972-),男,学士,主管技师,主要从事卫

生理化检验工作。

【化学测定方法】

高效液相色谱法测定食品中栀子黄

李永利,张焱,翟志雷

(河南省疾病预防控制中心,郑州　450016)

[摘要]　目的:建立食品中栀子黄的高效液相色谱测定方法。方法:样品经处理后,采用乙腈、水洗脱,用带有紫外检测

器的高效液相色谱仪测定。结果:方法检测限为1215ng,相对标准偏差藏花酸为312%,藏花素为116%。回收率为

9210～9810%。结论:本方法前处理简便,检测灵敏度高,色谱峰分离效果好,具有良好的稳定性和重现性,适用于食品中栀子黄色素的测定。[关键词]　栀子黄;藏花素;高效液相色谱

[中图分类号]　O65717+

2 [文献标识码]　A [文章编号]　1004-8685(2008)01-0072-02

D eterm i n a ti on of cape j a s m i n e yellow i n food by HPLC

L i Yong 2li,Zhang Yan,Zhai Zhi 2lei

(Henan Center for D iseases Contr ol and Preventi on,Zhengzhou 450016,China )

[Abstract]　O bjecti ve:To establish a high p ressure liquid chr omat ography (HP LC )analyticalmethod for cape jas m ine yell ow in f ood 1M ethods:Sa mp les after extracti on were detected by HP LC 1Results:The method p recisi on was 116%1Detecti on li m it was 1215ng 1The recoveries ranged fr om 9210%t o 9810%1Conclusi on:Thismethod is si m p le,rap id and accurate and can be used t o deter m ine cape jas m ine yell ow in f ood 1

[Key words]　Cape jas m ine yell ow;Cr ocin yell ow;HP LC

栀子黄(Cape jas m ine yell ow,俗称黄栀子),由栀子果实、香椿属植物的花、毛蕊花属植物的花、藏红花的花等制取的一种食用天然黄色素。主要成分为藏花酸和藏花素。其黄色素为糖苷α-藏花素,属于类胡萝卜素系中藏花酸(C 20H 24O 4)的二龙胆糖脂。α-藏花素水解为藏花酸和葡萄糖。α-藏花素为红棕色针状晶体,微臭,熔点180℃,易溶于热水,成为橙色溶液,微溶于无水乙醇、乙醚及其他有机溶剂,不溶于油脂。本文研究运用了高效液相色谱法测定食品中的藏花酸和藏花素的含量,由其含量之和计算样品中栀子黄含量,本方法色谱峰分离效果好,具有良好的稳定性和重现性,具有方便、快捷、灵敏度高的特点。

1　材料与方法111　仪器与试剂

W aters2695液相色谱仪带紫外检测器;乙腈,色谱纯;超

纯水。

112　测定方法

11211　标准溶液配制　准确称取藏花素10mg,藏花酸对照

品10mg,用水溶解定容至100m l,配制成混合标准,标准浓度为100μg/m l 。取标液0,210,410,610,810,1010m l,用水定容至10m l,相当于0,20,40,60,80,100μg/m l,作为标准系列应

用液。　

11212　色谱条件　色谱柱Z ORBAX NH 2416×150mm;柱温:25℃;流动相:乙腈:水(80:20);流速:0180m l/m in;进样量:10μl;紫外检测器:430n m 。

11213　样品制备处理　称取5100g 粉碎样品于三角烧瓶中,

加20m l 水溶解,水浴加热回流30m in,放冷,定容至刻度,过

0145μm 微孔滤膜上机测定。

11214　样品测定　取已制备好的试样10μl,于标准溶液测定

相同的色谱条件下进行分析测定,保留时间定性,峰面积定量。

2　结果与讨论

211　波长的选择

在200～700n m 对标准对照品进行紫外扫描,参照图谱发现,该物质在430n m 有最大吸收,我们选430n m 作为检测波长。

212　标准曲线

在已选定的色谱条件下,将配好的标准溶液系列应用液进行分析,藏花素、藏花酸标准对照品的浓度为横坐标,峰面积为纵坐标,绘制标准校正曲线,藏花素回归方程为Y =

1269817X +401516,r =019997;藏花酸回归方程为Y =865214X +215517,r =019991。

(下转第150页)

图8　添加值与平均值对比图

6　结论

611　保证定性的准确性和可靠性

定性的准确是检验结果准确与否的关键,作为检验机构,

应将检测结果的定性问题放到一个新的高度考虑。本次质控工作给定了检测项目的范围,因此在定性问题上比较容易。612　溶液浓度的准确

标准物质直接关系到最终数据的准确与否,应该加强对操作人员基本功的训练,保证标准溶液浓度配制的准确性,对于在其他单位购置的标准溶液应注意其单位的信誉度。本次质控工作统一发放了标准品,在定量问题上各单位应不存在大的差别。613　加强对检验人员基本功的培养

随着科学技术的不断发展和仪器设备的更新换代

,分析

仪器在检验工作中起的作用越来越大,但分析工作者在分析工作中的作用并不是削弱了,

而是应该不断加强,仪器设备总归属于工具,人才是第一位的,如何保证前处理质量、正确使用仪器设备、对检测结果进行准确判断将是今后检验机构和检验人员需要解决的重要问题。检验人员应该注意学习,通过大量的实际工作发现问题、总结经验。此外,具有丰富经验的老同志应对新同志起到传帮带的作用。614　开展经常性的质量控制工作

国内外大量经验表明,通过分析质量控制样品,可以确定本单位在分析工作过程中是否存在问题,通过查找引起问题的原因并在今后工作中加以解决,是提高检验水平的重要途径。

[参考文献]

[1]钟华,赵飞,刑文革1实验室内质量控制-统计学质量控制应用的

问题[J ]1Chinese Journal of Medical Guide,2006,7(1):60-611

[2]吴嘉慧,李省三1浅谈实验室质量控制中的影响因素[J ]1J Q iqi 2

harMedical College,2006,27(6):7141

[3]杜月娟,刘欣,潘飒1参加省检验检验质控生化项目室间质评结果

回顾性统计分析[J ]1中华现代内科学杂志,2006,3(11):1286-12851

(收稿日期:2007-08-16)

(上接第72页)

图1　藏花酸、藏花素标准图谱

图2　栀子黄样品图谱

213　精密度试验

取藏花素、藏花酸混合标准溶液(100μg/m l )按上述的色

谱条件及检测方法连续进样6次,每次10μl,求得藏花酸RSD 为312%;藏花素RSD 为116%。

表1　方法精密度试验结果

1

2

3

4

5

6

RSD (%)

测量值藏花酸98129615100139717101119212312(μg/m l )藏花素

9713

9612

9518

9915

9817

9912

116

214　回收率试验

称取已测得含量的样品5100g,分别加入藏花素、藏花酸混合标准510,1010m l,按样品处理方法处理,用水溶解并定容至100m l,同时作试剂空白,按上述的色谱条件检测,本方法的回收率如下。

表2　方法回收率试验结果

含量(mg )

添加量(mg )

测得量(mg )

回收率(%)

藏花素13127015131759610藏花酸13127015131739210藏花素13127110141229510藏花酸

13127

110

14125

9810

215　检测限

检测限以3倍噪声水平所相当的待测物质的量计算,本

方法的检测限为1215ng 。

3　小结

本方法测定食品中栀子黄,色谱峰分离效果好,具有良好

的稳定性和重现性,具有方便、快捷、灵敏度高的特点。

[参考文献]

[1]王春芳,鲁静1高效液相色谱法测定栀子中藏红花素的含量[J ]1

药物分析杂志,1997,17(5):321-3231

[2]中华人民共和国药典12005年版1第一部:栀子1

(收稿日期:2007-11-12)