旋毛虫镜检法
猪宰后旋毛虫病检疫.ppt
步骤4 镜检及判定
任务要求： 3. 旋毛虫包囊鉴定 与肉包子虫包囊的鉴别
猪宰后旋毛虫病检疫
图：肉孢子虫包囊
图：旋毛虫包囊
猪宰后旋毛虫病检疫
步骤5 检疫后的处理
任务要求： 1. 处理依据 《动物防疫法》、《病害动物和病害动物产品生物处理规程》
2. 处理结果 无害化处理或销毁处理
猪宰后旋毛虫病检疫
授课教师：
课程回顾
猪宰后胴体检疫
本节课学习任务
猪宰后旋毛虫病检疫
猪宰后旋毛虫病检疫
整 体 检 查 淋 巴 结 检 查
检疫概况
旋毛虫病概况 猪宰后旋毛虫病检疫的原因
猪宰后旋毛虫病检疫
学习任务重点
膈肌脚的视检和显微镜检查
学习任务难点
旋毛虫包囊的鉴定
猪宰后旋毛虫病检疫
任务步骤
猪宰后旋毛虫病检疫
任务思考与分析
为什么在制作肌肉压片过程中，需顺着肌纤维方向剪取肉粒？
猪宰后旋毛虫病检疫
再 见！
1. 膈肌脚采样 2. 视检肉样 3. 肌肉压片制作 4. 镜检及判定 5. 检疫后处理
猪求： 1. 采集部位 横膈膜与腰椎连接处
2. 肉样大小 左右膈肌各约30g左右
猪宰后旋毛虫病检疫
图：膈肌脚
步骤2 视 检
任务要求： 1. 膈肌处理 撕去肌膜
2. 视检方法 光线充足
猪宰后旋毛虫病检疫
步骤3 肌肉压片制作
任务要求： 1. 压片用肉粒选择 剪取肌纤维方向
2. 小肉粒特性 采样分布、大小、数量
猪宰后旋毛虫病检疫
步骤4 镜检及判定
任务要求： 1. 显微镜使用要求
低倍镜检查
2. 判定标准 无包囊的旋毛虫 有包囊的旋毛虫 钙化的旋毛虫 机化的旋毛虫
32.11.9-寄生虫检查(旋毛虫)记录
新都区疾病预防控制中心XDCDC/FLⅠ-32.11.9
成都市新都区疾病预防控制中心
微生物镜检（旋毛虫）检查原始记录
受理编号：新疾卫检字（2016）第号
1.方法：压片法
2.步骤：检查猪肉内的旋毛虫，一般先用肉眼观察，当发现在膈肌纤维(膈肌脚是旋毛虫幼虫寄生最多的地方)间有细小的白点时，再取样做压片镜检。
方法是从肉样上剪下麦粒大的肉片24块，摊平在载玻片上，排成两行，用另一载玻片压上，两端用橡皮筋缚紧，置低倍镜下检查，观察肌纤维间有无旋毛虫幼虫的包囊。
肌纤维间已形成包囊的旋毛虫，多呈梭形、椭圆形，包囊中虫体弯曲呈螺旋状。
肌纤维间钙化的旋毛虫，则囊内有多少不一、浓度不均匀的黑色末状或块状钙化物。
钙化的包囊，滴加盐酸将钙盐溶解后，可以见到虫体痕迹。
用压片法检查新鲜肉时，可清晰看见囊包或幼虫；若放置过久，肌肉发生自溶，则幼虫轮廓变得模糊不清，用美蓝溶液（0.5mL
饱和美蓝酒精液与10mL蒸馏水混合）或吉氏染色染色，则可见清囊包与幼虫。
3.结果记录：
主检：审核：
本报告共页第页。
旋毛虫镜检法
旋毛虫病肉品检验技术旋毛虫病是重要的人畜共患寄生虫病，它是由毛形科的旋毛形线虫（Trichinella spiralis）成虫寄生于肠管，幼虫寄生于横纹肌所引起的。
该病流行于哺乳类动物间，鸟类可实验感染。
人若摄食了生的或未煮熟的含旋毛虫包囊的猪肉可感染生病，主要临床表现为胃肠道症状、发热、肌痛、水肿和血液嗜酸性粒细胞增多等，严重者可以导致死亡，故肉品卫生检验中将旋毛虫列为首要项目。
旋毛虫病的肉品检验是生猪屠宰检疫中的一项重要内容，通过该项检验可以检出感染旋毛虫的猪只。
对于杜绝病猪肉流入肉品市场，有着重要的作用。
一、实验目的及要求1．掌握肌肉旋毛虫压片镜检法、消化法的操作方法。
2．了解酶联免疫吸附试验的方法。
3．掌握旋毛虫病肉的处理方法。
二、实验器材（一）旋毛虫压片镜检法 1．材料：被检肉品。
2．器材：载玻片，剪刀，镊子，天平，显微镜。
3．试剂：50%甘油水溶液，10%稀盐酸。
旋毛虫压片镜检法1．采样。
自胴体左右两侧横膈膜的膈肌脚（见图21-1），各采膈肌1块（与胴体编成相同号码），每块肉样不少于20g，记为一份肉样，送至检验台检查。
如果被检样品为部分胴体，则可从肋间肌、腰肌、咬肌等处采样。
2．肉眼检查。
撕去被检样品肌膜，将肌肉拉平，在良好的光线下仔细检查表面有无可疑的旋毛虫病灶（见图21-2）。
未钙化的包囊呈露滴状，半透明，细针尖大小，较肌肉的色泽淡；随着包囊形成时间的增加，色泽逐步变深而为乳白色、灰白色或黄白色。
若见可疑病灶时，做好记录且告知总检将可疑肉尸隔离，待压片镜检后做出处理决定。
3．制片。
取清洁载玻片1块放于检验台上，并尽量靠近检验者。
用镊子夹住肉样顺着肌纤维方向将可疑部分剪下。
如果无可疑病灶的，则顺着肌纤维方向在肉块的不同部位剪取12个麦粒大小的肉粒（2块肉样共剪取24个小肉粒）。
将剪下的肉粒依次均匀地附贴于载玻片上且排成两行，每行6粒。
然后，再取一清洁载玻片盖放在肉片的载玻片上，并用力适度捏住两端轻轻加压，把肉粒压成很薄的薄片，以能通过肉片标本看清下面报纸上的小字为标准。
猪旋毛虫病临床检疫方法探析
猪旋毛虫病临床检疫方法探析CHINESEJOURNALOFANIMALQUARANTINE2004,21(11)—.34—. 文章编号:1005—944X(2004)011—0034—02方友平郭玉风杨勇敏魏德先(湖北省十堰市动物检疫站442000)旋毛虫病是由毛首目,毛形科于肠管,幼虫寄生于横纹肌.人,猪,可致人死亡,感染源为摄食生的或旋毛虫检验的方法主要有目检和镜检法,集样消化法,酶联免疫吸附试验,间接血凝试验和免疫荧光抗体技术等,我们在实践中要不断地改进,以寻求一种简便,快速而又准确性高的旋毛虫临床检验方法.1镜检法目前对旋毛虫病的检疫主要还是采用宰后压片镜检法,即目检和镜检相结合的方法.脚部各采样一块,记为一份肉样,其重量不少于30～50g,与胴体编成相同号码.1-2目检和镜检.撕去膈肌肌膜,仔细检查表面有无半透明露珠状,乳白色或灰白色针尖大小点状物,然后用剪刀顺肌纤维方向,剪取l2 粒米粒大肉样均匀的放于夹压玻片的一端向另一端逐个视野检视,仔细观察.2集样消化法集样消化法也是旋毛虫宰后检疫的一种方法.序,以5～l0头猪为一组,每头采取膈肌数克分别放在序号相同的采样盘或取样袋内.2.2捣碎肉样.每头随机取2g,每组共取l0～20g,加入约100～200 ml0.1～0.4%胃蛋白酶溶液,捣碎至肉样成絮状并混悬于溶液为止.形瓶中,再用等量胃蛋白酶溶液冲洗容器,洗液注入锥形瓶中,于200 rnl消化液中加入5%盐酸溶液7rnl后用粗筛过滤后再用细筛过滤,滤液收集于另一大烧杯中.沉降数分钟后取上清液再过滤振放于底部划分为若干个方格的培养皿内.用低倍镜按皿底划分的方格, 分区逐个检查有无旋毛虫.3酶联免疫吸附试验酶联免疫吸附试验是当前应用是将抗原或抗体吸附固相载体,在载体上进行免疫酶染色,底物显色后用肉眼或分光光度计判断结果.3.1采样.按常规采血分离血清.明书稀释后,加入微量反应板的各3次,每次3min.血清作l:80稀释,每份作两孔,每孔滴加100L,同时设阳性,阴性对洗涤液洗涤3次,每次3min.加入按说明书稀释的酶标记抗体100L,37cc湿盒作用30min,然后L,37cc湿盒避光作用15min.先用肉眼判定.读取各孔于490Illa吸收波长的吸光度,凡被检血清的吸光度高于标准阴性血清平均吸光度二倍以上, 即判阳性反应.4间接血凝试验在间接血凝试验中,以动物的红细胞作为载体颗粒,这不仅因红细胞表面几乎能吸附任何抗原并且用致敏红细胞检测抗体时,其敏感性高,能测出极微量的抗体.4.1常规方法采血并分离血清.4.2测定抗原滴度,并稀释抗原.50L稀释抗原,最后二孔可作阳检血清50L,用微量移液器作倍比稀释,最后一滴弃去,阳性对照加阳性血清,空白对照不加血清,之后待其反应30rain后再滴加致敏红细胞, 将反应板置微型振荡器上振荡混合l min.取出置室温中约l～2h,待对照孔红细胞完全沉降后判定结果.5对比试验集样消化法比较繁琐,荧光抗在屠宰线上不可能推广,因此我们在十堰市某定点屠宰场只做了间接血凝试验,酶联免疫吸咐试验,做法是,对当天进场猪编号采血,经间接血凝试验和酶联免疫吸咐试验为阳性的做上标记,弱阳性的另作一种标记(阳性为感染旋毛虫强度高,弱阳性为感染旋毛虫强度低或炎性反应轻微),宰后再针对性地对阳性和弱阳性者用目检和镜检法进行检验,对比其结果是否一致(阳性:间接血凝试验抗体为4个滴度以上,酶联免疫吸咐试验肉眼观察颜色比阴性对照颜色明一显深并且接近m性对照或更深;弱阳性:间接血凝试验抗体滴度为2～4之间,酶联免疫吸咐试验肉眼观察颜色比阴性对照略深).三种方法检测结果列于表1.从对比检测结果可以得出,用目检,镜检法检验,对于旋毛虫感染强度低的病肉漏检率高达78%,而用间接血凝法或酶联免疫吸咐试验法即使炎性反应轻微也不会漏检. 6分析与讨论用传统的目检和镜检法费工,费时,漏检的可能性比较大,虽然这种方法对所检验的肉样能广泛观察,受检面积广,但对感染强度低或炎性反应轻微的病肉漏检率很高,并且此法只能用于宰后检高,但是操作较繁琐,应用于屠宰的准确性高,也不需要复杂精密的仪器,成本低,并且它可应用于宰前检疫,一旦我们检出有旋毛虫寄生,则可以采用一些治疗措施,使家表12004年4月份在十堰市某屠宰场所做的对比试验种类间接血凝试验酶联免疫吸咐试验目检,镜检检出头数数量(头) 日期阳性弱阳性阳性弱阳性阳性弱阳性6日23220212f113日25(1323々3l一20日24513131(125日2680101【】130日27533333『1合计127()9q9l()q2试验也是一种快速,简便的宰前检疫方法,它同间接血凝试验一样,敏感性高,且操作也不复杂,稳定可靠,所需的抗原可以从一些生物制品厂购买也可以自己制备,这两种方法弥补了'镜检法的许多不足之较先进的技术,它的敏感性高,但是它的制备程序复杂,目前用于寄生虫病诊断的荧光抗体研究得不多,因此,只有间接血凝试验,酶联免疫吸附试验在寄生虫病的诊断上具有广泛的利用推广价值,将来会逐渐代替传统的镜检法而应用于临床中,我们认为应推行间接血凝试验或酶联免疫吸附试验与目检和镜基础上的试纸法,快速诊断试剂盒等快速检验方法也值得基层动物检疫人员研究和应用.灞嗣一价格/桶箱价使用品名规格备注(全国统一)6桶/箱方法(真空浓缩型)塑料桶车间湿度用加开水大,印迹食品兰防伪33.5元201元2.Ok上下不干,可(真空浓缩型)塑料桶每桶加摇匀即可防伪28.5元171元(真空浓缩型)塑料桶使用1kg水专囊建议:检验猪肉用红色检验牛肉用兰色不合格肉品用■色多年来,检疫部门一直用紫药水溶液做为肉≯t类及食品的检验专用液由于科学家发现I甲紫溶液会残留在肉的可食用的组织中,有致癌作用,因此西方的一些国家已禁止使用该产品作为检验专用液,我国一些省,市,地区也开始禁止使用产器瀚甩滚?0||0为寻拽紫药水的替代产品使群众吃上放心肉.我厂在科研部门的指导下,选用离际认可的不在可食组织中残留的食品红和食晶兰为原料, 配以甘油VC,酒精,锌盐制成了食品红检验专用液和食品兰检验专用液,该产品具有无毒无害,印迹清晰明快使用方便不易仿造等优台秘垒l龌赢摄祷连遵摄量0本厂还生产屠宰点所用的消毒火碱,来苏,去污消毒粉,高效生物灭鼠药一次性捡疫手套,瘦内精试纸,旋毛虫检测试纸,乳房炎诊断试剂,动物发情诊鸯}试剂盒,乳房炎疫苗,性别控制液,各种宠物用疫苗等产品.食用色素,食用甘油,食用酒精等.。
屠宰畜禽常见寄生虫病的检验与处理
（一）宰前检疫 轻度感染无明显症状，感染数量多时（牛250条、羊50条以 上）则可出现症状，但幼畜即使感染虫体很少也出现症状。病 畜营养不良、消瘦、贫血，下颌间隙、颈下和胸腹部常有水肿。 根据临诊症状、当地的流行病学资料、粪便检查虫卵等进行诊 断。 （二）宰后检验 肝片形吸虫虫体扁平，外观呈柳叶片状，自胆管取出时呈 棕红色，固定后变为灰白色。虫体长20～35mm，宽5～13mm。牛、 羊急性感染时，肝肿胀，被膜下有点状出血和不规整的出血条 纹。慢性病例，胆管发生慢性增生性炎症和肝实质萎缩、变性， 导致肝硬化。 （三）卫生处理 （1）损害轻微时，将损害部分割除，其他部分不受限制出厂 （2）损害严重者，整个脏器化制或销毁
一、猪囊尾蚴病的检验与处理？ 二、旋毛虫病的检验与处理？ 三、弓形虫病的检验与处理？ 四、棘球蚴病的检验与处理？ 五、孟氏裂头蚴病的检验与处理？
（三）卫生处理
患严重棘球蚴病的器官，整个Байду номын сангаас制或销毁； 轻者将 患部化制或销毁，其他部分不受限制出厂（场）。 在肌肉组织中发现有棘球蚴时，患部化制或销毁， 其他部分不受限制出厂（场）。
六、孟氏裂头蚴病
孟氏裂头幼病是由孟氏迭宫绦虫的中绦期幼虫——裂 头蚴寄生于猪、鸡、鸭、泥鳅、沙鱼、蛙和蛇的肌肉中所 引起的一种寄生虫病。成虫寄生于狗、猫等动物的小肠内。 猪主要由于吞食了含有孟氏裂头蚴的蛙类和鱼类而感染。 人的感染主要是吃进了生的或半生不熟的含有孟氏裂头蚴 的肌肉所致，也有因用蛙皮贴敷治疗疾病而感染的。
重症病猪可见眼结膜发红或有小结节样疙瘩， 舌根部见有半透明的小水泡囊。 主要检验部位为咬肌、深腰肌和膈肌，其他可 检验部位为心肌、肩胛外侧肌和股内侧肌等。 如在上述部位发现绿豆大小、半透明的白灰色 结节，可以认定为该病。
猪旋毛虫病主要检验要点
猪旋毛虫病主要检验要点猪旋毛虫病主要检验要点猪旋毛虫检验一般在生猪宰杀后同步检验进行，检验时必须在有充足的光源、专门的检验设备和安静的环境下进行，同时必须有足够的人员满足与屠宰生产线同步同速进行检验。
因此，良好的组织管理是猪旋毛虫检验的必要保障。
样品采取与送检采集。
猪宰后检验采取左右膈肌脚各30克（膈肌脚难以取得时可取膈肌、腹斜肌等）。
采样时一般在开膛后去白内脏后与红内脏前进行，采样人一手拿钩一手拿刀，用钩子钩住膈肌脚，用刀在钩住的膈肌脚周围划割，把膈肌脚采下。
编号。
结合生产速度采用整十或整五的编号方式，将样品编上与胴体相同的号码，便于送检。
送检。
根据生产速度，合理使用采样盘或传送带等方式，把样品迅速送至旋毛虫检验室进行检验。
结果报送。
对旋检结果及时传递给复检（或终检）人员，及时对屠宰生猪进行综合判定。
猪旋毛虫的实验室检验要点视检。
将膈肌的肌膜和脂肪撕去，纵向拉平膈肌，在充足的光线下，肉眼观察表面有无针尖大半透明隆起的乳白色或灰白色小点，然后再剪开肉样深部进行观察。
镜检。
从左右膈肌脚不同部位，顺肌纤维方向剪取米粒大小的24个肉粒，其中视检到的小白点必须剪下。
将肉粒均匀放在旋毛虫压片器中，排成两行，每行12粒，压薄镜检。
如用载玻片代替，24个肉粒需要4块载玻片，肉粒放好后用手压紧两玻片，两端用橡皮圈缠牢，将肉粒压薄。
将制好的压片置于显微镜下，用低倍镜观察，逐个检查肉粒。
判定。
肌纤维间已形成包囊的旋毛虫，多呈梭形、椭圆形，包囊中虫体弯曲呈螺旋状。
肌纤维间钙化的旋毛虫，则囊内有多少不一、浓度不均匀的黑色末状或块状钙化物。
钙化的包囊，滴加盐酸将钙盐溶解后，可以见到虫体痕迹。
肉类及肉制品中旋毛虫检疫方法的研究
收稿日期：２００３－０５－２１基金项目：河南省杰出人才创新基金项目（０３２１００１９００）作者简介：王中全（１９６０－），男，教授，国际旋毛虫病委员会委员，主要从事旋毛虫病研究。
肉类及肉制品中旋毛虫检疫方法的研究王中全，崔 晶（郑州大学医学院寄生虫学教研室，郑州 ４５００５２）摘 要：本文介绍了肉类及肉制品中旋毛虫检疫的方法，包括目测法、镜检法、旋毛虫镜检查法、消化法、免疫学和分子生物学方法。
混合肌肉样本消化法是目前国际旋毛虫病委员会推荐使用的方法。
本文还对不同动物胴体最佳的肉样采集部位和肉制品（如咸肉、火腿或香肠等）检疫时的注意事项进行了探讨。
关键词：旋毛虫；肉类；食品；检疫方法Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｔｈｅ ｑｕａｒａｎｔｉｎｅ ｍｅｔｈｏｄｓ ｏｆ Ｔｒｉｃｈｉｎｅｌｌａ ｓｐｉｒａｌｉｓ ｉｎ ｍｅａｔ ａｎｄ ｉｔｓ ｐｒｏｄｕｃｔｓ ａｒｅ ｒｅｖｉｅｗｅｄ ｉｎ ｔｈｉｓ ｐａｐｅｒ． Ｔｈｅ ｍｅｔｈｏｄｓｃｏｎｓｉｓｔ ｏｆ ｏｂｓｅｒｖａｔｉｏｎ ｂｙ ｎａｋｅｄ ｅｙｅｓ， ｍｉｃｒｏｓｃｏｐｉｃ ｅｘａｍｉｎａｔｉｏｎ， ｔｒｉｃｈｉｎｏｓｃｏｐｙ， ｄｉｇｅｓｔｉｏｎ， ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ ａｎｄ ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ ｍｏｌｅｃｕ－ｌａｒ ｍｅｔｈｏｄｓ． Ｔｈｅ ｐｏｏｌｅｄ ｓａｍｐｌｅ ｄｉｇｅｓｔｉｏｎ ｔｅｓｔｉｎｇ ｉｓ ｔｈｅ ｍｅｔｈｏｄ ｒｅｃｏｍｍｅｎｄｅｄ ｂｙ Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ Ｃｏｍｍｉｓｓｉｏｎ ｏｎ Ｔｒｉｃｈｉｎｅｌｌｏｓｉｓ（ＩＣＴ）． Ｔｈｅ ｂｅｓｔ ｓａｍｐｌｉｎｇ ｓｉｔｅｓ ｉｎ ｃａｒｃａｓｓ ｏｆ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ａｎｉｍａｌｓ ａｎｄ ｔｈｅ ｃａｕｔｉｏｎ ｄｕｒｉｎｇ ｔｈｅ ｐｒｏｃｅｄｕｒｅｓ ｏｆ ｑｕａｒａｎｔｉｎｅ ｏｆ ｍｅａｔ ｆｏｏｄ（ｓａｌｔｅｄ ｍｅａｔ， ｈａｍ ａｎｄ ｓａｕｓａｇｅ） ａｒｅ ａｌｓｏ ｄｉｓｃｕｓｓｅｄ．Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ：Ｔｒｉｃｈｉｎｅｌｌａ ｓｐｉｒａｌｉｓ；ｍｅａｔ；ｆｏｏｄ；ｑｕａｒａｎｔｉｎｅ ｍｅｔｈｏｄｓ中图分类号：ＴＳ２０１．６ 文献标识码：Ａ 文章编号：１００２－６６３０（２００３）０８－０１０５－０５旋毛虫病（ｔｒｉｃｈｉｎｅｌｌｏｓｉｓ）是一种严重的人兽共患寄生虫病，主要是因生食或半生食含有旋毛虫幼虫囊包的猪肉及其制品所致。
旋毛虫
旋毛虫·确诊诊断：一,实验室检查1、血象及生化检查白细胞总数升高，多在10—209/L之间。
嗜酸性粒细胞常占20％以上，最高可达90％。
血肌酸磷酸激酶（CKP）明显增高。
2、病原学检查参与的可以热泪查包囊或以胃蛋白酶消化处理后，离心取沉渣，亚甲蓝染色镜检查找幼虫，亦可喂饲大鼠，2—3d后检查肠道内的幼虫。
对病人，在发鬓10d后取肌或三角肌活旋毛虫病检标本，压片镜检查包囊和活动的幼虫，是简便、检虫率高的方法，亦可用前述蛋白酶消化法提高检出率。
患者的血液、脑脊液经离心亦可查到幼虫。
3、免疫学检查采用酶联免疫吸附实验（ELISA）或间接免疫荧光抗体试验（IFA）等方法，以已知的抗原检测患者血清中特异性抗体，是较为敏感、特异、实用的方法。
在急性期结合临床表现，诊断意义很大。
但由于病愈后其抗体可存在较长时间，故单凭该检查结果，不足以区分现症患者或既往感染者。
而采用单抗与多抗双抗体夹心ELISA法检测病人血清循环抗原，可用于确定体内有否活虫寄生，并可考核疗效。
诊断依进食未熟肉食的流行病学史及典型的临床表现，不难疑及本病，再结合病原学检查或免疫学检查结果，确定诊断并无困难。
本病应与食物中毒、肠炎、伤寒、钩端螺旋体病、血管神经性水肿及皮肌炎等鉴别。
二：辅助检查（一）血象早期移行期白细胞计数及嗜酸粒细胞显著增多，达1～2万/mm3，但重症患者嗜酸粒细胞可不增加。
（二）肌肉活组织检查感染后第四周取三角肌或腓肠肌（或浮肿，肌痛最显著的部位）近肌腱处肌肉一小片，置两玻片中压紧，低倍镜下观察，可见蜷曲的幼虫，虫体周围有多数炎性细胞包绕，形成小型肉芽肿。
肌肉活检受摘取组织局限性的影响，在感染早期及轻度感染者每不易检出幼虫。
感染较轻镜检阴性者，可将肌片用胃蛋白酶和稀盐酸消化，离心沉淀后检查幼虫，其阳性率较压片法为高。
（三）免疫学检查旋毛虫抗原可分为虫体抗原、虫体可溶性抗原（有感染性幼虫体可溶性粗抗原和自感染性幼虫体杆细胞内α颗粒提取的可溶性抗原两种）、表面抗原（自虫体表面提取或剥离的可溶性抗原）、以及排泄分泌抗原（或称代谢抗原）。
旋毛形线虫的检疫及应用
蛋 白质组学研究 不仅是探索生命 奥秘 的有利工具 ， 也能 为人类健康事业 带来 巨大 的利益 。 传统 的单一蛋 白质 的研究
模式 已经落后， 药物蛋 白质组学方法应用蛋 白质组学 技术 ， 利
因素 。由于 中药是 由多种化合物组合 的 ， 其疗效通过作用 于
人体的生物分子及其 结构 的各级 系统来实现 。 蛋白质组学等
发生的 。 通过检测毒性生物 的特定标 记有 助于了解药物 的毒
性结果 。因为其结果 总是在基 因表达或 蛋 白丰度上 发生改 变 。鼠和人治疗和未治疗肾脏 样品的 ２ Ｄ胶图 比较结果显示 钙结合蛋 白丰度 有显著 的差异， 在药物治疗后该 蛋 白的下调 解 释了其毒性作 用的机制 。与人 不同， 猴子不， 分别用 观察法 、 检法进行猪 镜
肉旋毛虫重复检疫。
２３ 制 片与处理 ＿
传统 的检疫方法 由每头 猪左右横膈膜脚 由表 １ 以看出 ，０ ５年 ４月 ２ ０ 可 ２０ ０ ６年 ４月哈 尔滨市
道 里区动 检站对新 发 、 新辉 、 广林三个 屠宰点 检疫 的 １３ ０ ８６
维普资讯
试 验 研 究
旋 毛 形线 虫 的检 疫 及应 用
李思 源
（ 黑龙江 省 哈尔滨 市道里 区动 物检疫 站 ，哈尔 滨 ５ ０ ６） １０ １
旋毛形线虫简称旋 毛虫 ， 成虫 和幼虫分 别寄生于同一 其 宿主的小肠和肌细胞 内。 和多种 哺乳动物可作为该虫的宿 人
得 到某一化合物 特异性 的毒性标 志物， 希望获得普遍风 险 更
的组织毒性生物标志，从而可用 于未来研究 中的毒性预测 。
４ 蛋 白质 组 学 在 中药 研 究 中 的应 用
素 Ａ的毒 性影响， 对猴子 的肾蛋 白质组学分析表 明在药物治 疗后钙结合蛋 白未 发生损失 。因此， 对猴子体 内药 物代谢途
生猪屠宰同步检疫中旋毛虫的检验检疫处理
2021年第05期随着人民生活水平的不断提高,对肉类食品的需求量也逐渐增大,生猪养殖行业不断发展,但肉类食品的安全对广大消费者来说是非常重要的,保障流入市场的产品的质量也是对养殖户的根本要求。
肉食品的质量问题很大程度上来源于动物疫病,像生猪旋毛虫病对人体健康的危害严重,人类一旦感染,会引起恶心,呕吐、发热、水肿,严重者造成心率失常,危及生命。
由此可见,生猪屠宰同步检疫中旋毛虫的检验非常有必要。
1旋毛虫病旋毛虫病是一种非常严重的寄生虫病,其病原体为毛首目毛形科的旋毛虫,有着极强的传染性,不论是幼虫或是成虫,危害都十分严重。
成虫主要存在于生猪体内的肠管内,幼虫主要在横纹肌或横膈肌上,虫体非常小,肉眼很难观察到。
生猪屠宰同步检疫的检疫流程为体表检疫、内脏检疫、旋毛虫检疫、复检这四个步骤。
其中旋毛虫检疫是重要的一部分。
旋毛虫病的危害十分严重,可造成人畜共同感染,而且可感染的动物种类庞大,目前已知的可感染旋毛虫病的动物就有一百多种,其中哺乳动物占60%以上。
因生猪可通过摄食感染病原体,该病原体在生猪中的感染更为常见,而患病生猪流入市场,其携带的病原体也会通过摄食造成人类的感染。
人类一旦感染,在前期会出现恶心、呕吐的现象,当幼虫移行时,症状变现为发烧、水肿,长时间高烧不退,当病情逐渐严重,患者的皮肤逐渐肿胀,有硬结感,进而危及心肌,会出现心率失常。
由此可见,生猪旋毛虫病的危害十分严重,必须要阻断患病生猪流入市场。
2生猪屠宰同步检验中旋毛虫的检验生猪屠宰同步检验中旋毛虫的检验主要有三种方式,分别为镜检、目检和胶体金快检。
镜检主要是通过显微镜检测,是三种方式中精确度最高的一种,但缺点就是较为费时费力。
镜检一般分为采样、制片、镜检、判定四个步骤。
采样部位在生猪左右两膈肌脚的部位,各采样大于20g ,按照胴体编号为其编号。
需要进行肉眼观察,在充足的光线下观察样品是否有白色的小点,要注意在肉眼观察前撕去样品的肌膜。
通过观察,如发现有白色小点,做好记录告知复检岗,并将疑似生猪二次隔离,待镜检后处理。
旋毛虫的几种检验检疫技术
１ 目检 法
程 比较 烦琐 ，检 测过 程花 时 间 长。
由于旋 毛 虫感 染 动 物后 ，大约 ２ １ ｄ ～７ 个 月 就会 形 成钙 化 ，这 ４ 酶联 免疫 吸附试验 （ Ｅ Ｌ ｌ Ｓ Ａ ） Ｓ Ｐ Ａ — Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ａ 的原 理 是根 据葡 萄球 菌 蛋 白Ａ （ Ｓ Ｐ Ａ） 能 与人 和 多 样 只要 用 肉眼就 能将 其 检 出 。该 方法 一 般是 直 接在 肉尸 的左 右 横 ｇ Ｇ 结合 ，有 较 高 的敏感 性 ，而且 可以不 受种 属特 异 膈 肌脚 采取 不少 于 ３ ０ ｇ 的 肉样 ，然后 撕 去肌 膜 ，将肌 肉拉 平 ，观 察 种 哺乳 动 物 的Ｉ 肌 肉纤维 的表 面 。若 发现 有半 透 明露 滴 状 或乳 白色 、黄 白色点 状 性 的限 制 ，并且 具 有 制备 容 易 、性 质稳 定 、易 纯 化 ，使 用更 趋 方 Ｌ Ｉ Ｓ Ａ中的 酶标 第 二 抗体 来检 测 物 ，即可 判 定该 猪 肉为旋 毛 虫 肉 。这种 方 法 的检 出率 较 高 ，但 是 便 等 优 点 ，所 以 可用 以代 替 间 接Ｅ 需 要 在 自然 光线 好 的 条件 下进 行 ，而且 这 种方 法不 宜 单 独 用 ， 旋 毛 虫 的感 染情 况 。Ｄ Ｏ Ｔ — Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ａ 是 以纤维 素 薄膜 为 同相 载 体 ，孑 Ｌ 冈 为其 检 率 的高 低 取 决 于 检验 人 员 的 经 验 ，漏 检 率 也 相 对 较 径 大 约 为０ ． ２～ ０ ． ４ ｍ，将 抗 原或 抗体 用 大头 针蘸 取 印滴 吸 附住 纤 高 ，有 时 可 以达 Ｎ ８ ｏ ． ５ ％。所 以 只能 用 作 初 次筛 选 ，结 合 显微 镜 维膜 表 面 ，然 后通 过 相应 的抗原 抗 体 反应 以及 加 入底 物 后 呈现 出 肉眼可 见 的颜 色斑 点 。这 种 方 法 的优 点是 敏感 性 高 、被 检 样 品用 检查 可 以有效 地提 高旋 毛虫 的检 ｆ ｆ ｊ 率。
动物旋毛虫病的检疫及处理
深化Ⅰ
总结旋毛虫病的临诊检疫要点
旋毛虫病的临诊检疫要点
旋毛虫病病检疫后的处理
旋毛虫病的临诊检疫要点
1、几乎所有的哺乳动物，甚至某些昆虫都能感染旋毛虫，鼠类感染率高，存 在着广大的自然疫源。对人的危害大。呈地方流行性。动物旋毛虫病生前可 依据流行病学和免疫学诊断确诊。 2、急性卡他性肠炎，严重者出血性腹泻。急性肌炎有发热、局部肌肉疼痛、 水肿、硬实，吞咽、咀嚼、呼吸、行走困难。
深化Ⅱ
重新制作肌肉压片，老师抽查 进行操作评定
归纳总结
能力
①能够通过临诊检疫法对旋毛虫病进行初步检疫 ②能够通过肌肉压片镜检法对旋毛虫进行检疫 ③能够进行旋毛虫病的检疫后处理
知识
①旋毛虫病的临诊检疫要点 ②肌肉压片镜检法 ③旋毛虫病检疫后处理
作业
1、旋毛虫病临诊检疫要点 2、旋毛虫病检疫及处理报告
屠宰场对鲜猪肉旋毛虫病的镜检与处理方法
养猪一点通EASY SKILL屠宰场对鲜猪肉旋毛虫病的镜检与处理方法蒋维政（广西全州县石塘镇水产畜牧兽医站，广西 全州 541504）旋毛虫病是旋毛虫的成虫和幼虫寄生于人和动物的疾病，多种动物例如肉食兽、草食兽、杂食兽以及家禽等都能感染。
因此，对屠宰场鲜猪肉进行正确规范的旋毛虫病检验工作越来越显重要，本文对鲜猪肉旋毛虫病的显微镜检验方法及处理措施进行了较为详细的阐述。
1 旋毛虫病的感染过程旋毛虫的成虫见于人类、猪、大鼠、熊和许多其他食肉动物的小肠内。
食入含有活虫的不熟的肉类以后，肌肉中的旋毛虫包囊被消化，幼虫于十二指肠或空肠释出，在感染后30～40 h就能发育性成熟进行交配，感染后4～7 d雌虫开始排出幼虫。
有些幼虫入侵肠黏膜的乳糜管、淋巴管、静脉等移行到达全身横纹肌，猪以膈肌和舌肌为主，马以舌肌和咬肌为主。
2 旋毛虫及其毒素的降解1）虫体寄生的肌纤维及其周围的肌纤维发生变性。
2）因旋毛虫寄生发生死亡的动物和人的身体内发生许多病理变化，实质器官与脂肪发生变性、出血，出现大叶性肺炎、心包炎等。
3）将严重感染旋毛虫的肌肉经高温处理杀死虫体后喂狗或猫，狗或猫仍然发病或死亡，体内器官变性，病变严重，原因是虽然高温能杀死虫体，但不能降解其毒素。
3 新鲜猪肉旋毛虫镜检法3.1 采样每头猪的左右膈肌脚各取一块肉样，每块肉样的重量在30～50 g之间，且与胴体标记同一号码，依次排列在采样盘中，固定肌样位置，确保肌样号码不会弄错。
3.2 肉眼检查膈肌样品在进行显微镜检查之前，由有经验的检验人员撕去肌膜作肉眼观察，检查有无可疑白色小点，可以提高检出率。
若发现肌肉表面有旋毛虫或住肉孢子虫白色椭圆形细小白点后，应有目的地剪取肌样进行检查。
3.3 压片肉眼检查后，在肉样上顺着肌纤维方向用弯曲的外科剪刀剪取24颗米粒大小的肉粒（左右膈肌脚各12粒），在一块5 mm厚的载玻片上排成2排，再覆盖1块盖玻片，加压制成压片，压片厚度应能透过玻璃看清报纸上的小字，每个玻片只允许检查1头猪的肌样。
生猪屠宰检疫中旋毛虫病的检验方法
生猪屠宰检疫中旋毛虫病的检验方法李建云【期刊名称】《《云南农业》》【年(卷),期】2019(000)007【总页数】2页(P59-60)【关键词】旋毛虫病; 样品采集; 压片制作; 镜检判定【作者】李建云【作者单位】勐腊县畜牧兽医站云南勐腊666300【正文语种】中文旋毛虫病是由毛首形科的旋毛虫引起的人畜共患的一种重要寄生虫病，猪、犬、猫、鼠类、狐狸、狼、貂、野猪等均能感染。
人类感染旋毛虫病主要是由于食用了含有旋毛虫的腌制与烧烤不当的、生的或未煮熟的猪肉而受到感染，此外，切过生肉的菜板、案板由于生熟不分，污染食品也会造成感染。
1 样品采集样品采集是旋毛虫检验的第一关，样品的采集部位不同，将直接影响检查的效果，因此我们采集肉样必须选择旋毛虫寄生较多的肌肉。
主要是从胴体两侧的横膈膜肌脚采集，左右各采一小块，其重量不少于30 g，将它记为一份肉样，与肉尸编成相同号码后，送屠宰检验室检查。
如果是检验部分胴体，就从肋间肌、腰肌、咬肌等处采样。
2 样品目检目检是旋毛虫检验的关键环节，通过目检可及早发现样品中有无寄生虫钙化点，以便有针对性的进行镜检，提高旋毛虫病的检出率。
此方法是将样品表面的肌膜撕去后，对光查看肌纤维表面有无半透明稍隆起的乳白色或灰白色针尖大小的点，凡发现上述小点，说明样品中有机化或钙化的寄生虫，有经验的检疫员在没有检疫设备的情况下检查猪肉中有无旋毛虫，只要取块膈肌在充足的阳光下看肌纤维是否平滑清晰，有无针尖大小小白点，就能做出初步判断。
3 压片制作3.1 选择载玻片一般要根据所使用的显微镜类型来选择，如果使用PX—200屏显式肉检仪，载玻片最好选长17 cm，宽5 cm，厚0.3 cm，透明度好的玻璃，如果玻片太薄，压片时容易被压碎，太厚会影响透光性。
3.2 剪样肉样经过目检后，用左手大拇指和中指握住肉样两端，食指顶住肉样内侧，使肌纤维绷直，在充足光线下，右手持剪刀顺肌纤维方向，随机剪取米粒大小肉样，如果在目检过程中发现有小白点，就必须一一剪下，每份肉样剪24粒。
浅谈生猪屠宰同步检疫中旋毛虫的检验与处理
０ｏ＝ ＿ ３ ∞ 西 ９ ／ Ｊ ＿ Ｉ ∽ ∽ｚ． １ ． ｏ ． ７ ＿ ｌ ① ０ ． ２ ０ － Ｉ ＿ ０ 忉． ０ 毛虫的动物 。 目前 ， 在我 国肉类消 费中 ０ ， 猪 肉消 费排在第 一 内有 不 同 数 量 的
位； 人往往容易通过食入未经煮熟含旋毛虫幼虫 的猪 肉或 肉 黑色钙化 点 ， 则可 关键词： 同步检疫；旋毛虫；检验；处理 制 品而被感染 ， 感 染后 的症状 主要 表现为腹泻 、 呕吐 、 运动失 以通过脱钙处理 。
４个多月康复。 据资料报道 ， 我国绝 大部分 省市均有旋毛虫病发病 的病 例， 猪旋毛虫高感 染地 区为河南 省 、 湖北省 和云南省 等地 ， 感 染率为 １ ３ ％ ，犬旋 毛虫 高感 染 区是 东 北 ，检 出率 为 ２ ０ ％
一
显， 大多在 宰后 肉 房 杰良 了罗 志贤 了张清 华 了李 小 军
兽 医 卫 生
旋毛虫病在 生猪体主要 寄生在横 纹肌 内和横隔膜 肌为 每行 ６块 。然后 ， 再 取 清 洁 载 玻 片 盖 放 在 肉 片 的 载 片上 ， 轻压 肉粒 成
主， 是重要 的人畜共患病 ， 也是危 害养猪业 的严重寄生虫病 ，
被列为国家二类防制动物疫病 。 目前 ， 现行 的生 猪屠宰 同步
可疑病灶 。 目检 因视力 、 经验 、 条件限制 ， 仅是基础性检查 ， 不
能作为最终判定标准 ， 采用 目检和镜检相结合综合判定猪 肉
是否带 虫 ， 是一 种 比较科学 的判定方法 ， 能反 映 出肌旋 毛虫
道， 个别地 区检 出率多达 ２ ． ３ ％。人患旋 毛虫病 ， 若 不及时诊 断和治疗 同步检疫中旋毛虫的检验 我 国 目前 生猪屠宰 同步检疫 中旋毛虫 检验采用 的方法 主要是镜检 、 目检 和胶体金快检 三种 。
猪旋毛虫病的检疫检验与防控解析
106猪旋毛虫病的检疫检验与防控解析张宝华（吉林省梨树县金山乡农业发展服务中心，吉林梨树 136516）摘 要：作为一种寄生虫导致的疾病，猪旋毛虫病对于猪饲养人员会产生重要的影响，还会降低食品的安全性，因此需要提升对该疾病的重视程度，并将检疫检验工作和防控工作落到实处，从而促进我国养殖行业的健康发展。
关键词：猪旋毛虫病；检疫检验；防控工作0 引言猪旋毛虫病是一种人畜共患疾病，其发病与旋毛虫有关，不仅影响养殖行业的发展，还会影响养殖人员的经济效益，甚至对于整个猪肉食品市场都会产生重要的不利影响，因此对该疾病进行检验检验和防治研究具有非常重要的现实意义。
1 猪旋毛虫病的检疫方法1.1 宰前活体检疫猪对旋毛虫本身具备一定的耐受性，因此在检疫过程中，轻微的感染检测并不容易，因此对于待宰的猪需要格外注意，尤其是存在发育不良、水肿、精神萎靡等问题时，需要进行隔离处理，并做出进一步的判断，确定是否为感染的病猪。
之后需要及时进行活体检查，具体操作时，需要在猪水肿部位最为严重的部位，取下一定数量的标本，排成一排，放在低倍显微镜下进行观察，看其中是否存在旋曲的旋毛虫即可进行判断。
1.2 使用分子生物学的方法进行检验由于科技的不断进步，检疫的方式越来越先进，分子生物检测的方法比较突出，因此这种方式也是当前检疫工作中经常使用的一种方式。
具体可以利用聚合酶链式反应和随机扩增多态性的DNA检疫方式开展工作。
这两种检疫方式的灵敏度较高，因此对于感染不明显的猪具有非常重要的意义。
1.3 直接检测对于猪旋毛虫的检测而言，可以使用直接检测的方式，具体包括压片镜检测法和集样消化法两种。
压片镜检测法指的是取下米粒大小的猪肉作为样本，通过压片镜设备进行观察，确定是否存在旋毛虫的幼虫，这种检测方式的效率较低，灵敏度不高，检出率较低。
在实际工作中，需要反复检验才能确定结果。
而集样消化法检测方式对于批量检测工作具有重要的意义，可以同时对多个样品进行检验，但不同的检测项目之间容易存在冲突，从而影响结果的准确性，并且这种检验方式容易受到外界因素的干扰，因此需要结合实际情况进行选择。
最新动植物养殖：猪肉中旋毛虫、囊尾蚴、住肉孢子虫的鉴别检验要点
猪肉中旋毛虫、囊尾蚴、住肉孢子虫的鉴别检验要点猪肉检验中常遇到的寄生虫主要有猪囊虫、旋毛虫和住肉孢子虫，因其均寄生于肌肉中，以包囊形式存在，对于从事这方面检验的初学人员常容易混淆，因此，其鉴别特点的掌握显得格外重要。
笔者在工作过程中根据经验积累总结出一些鉴别特征，供同行参考。
1 旋毛虫1.1 肉眼观察主要寄生于膈肌、咬肌。
虫体较小，雄虫（1.4～1.6）mm×（0.04～0.05）mm，雌虫（3～4）mm×0.06mm，很难辨识，在肌纤维表面看到稍有凸出的卵圆形、灰白色、针头大小或灰白色、浅白色的小白点即为可疑。
1.2 压片镜检（50倍）可看到旋毛虫包囊是卵圆形或橄榄形，壁为双层，外层薄，具有大量结缔组织，内层透明。
包囊多在肌纤维之间，内含有一条略弯曲似螺旋体的幼虫，蜷曲于折光性强的透明液中。
钙化的旋毛虫包囊体积小，滴加10%稀盐酸溶解后，可见到虫体或其痕迹，与包囊相邻的肌纤维变性，横纹消失。
1.3 染色镜检将所检肉粒压片置于5%氢氧化钠溶液配制的1%红色百浪多息溶液中1～2分钟，然后将压片移入80%醋酸溶液配制的15%甲基蓝溶液中再浸染1～2分钟，用80℃～90℃热水仔细冲净后置于50～70倍显微镜下观察，可见肌纤维呈浅黄色，旋毛虫包囊呈鲜绿色，而旋毛虫虫体则呈深蓝色。
2 囊尾蚴2.1 肉眼观察主要寄生于咬肌、膈肌、舌肌、臀肌、肩胛肌和腰肌。
虫体较大，易看到，长径6～10mm，短径约5mm，明显位于肌纤维间，外观椭圆形。
包囊为单层，半透明，囊内充满液体，囊壁是一层薄膜，壁上有一个小米粒大的乳白色头节。
2.2 压片镜检（50倍）可看到虫体头节上有四个圆形吸盘，最前端的顶突上带有许多角质小钩。
钙化的囊虫包囊内形成黑色团块，滴加10%稀盐酸溶解后，可见到崩解的虫体团块和特征的角质小钩，包囊周围形成厚的结缔组织膜。
3 住肉孢子虫3.1 肉眼观察主要寄生于咬肌、膈肌、舌肌、臀肌、肩胛肌和腰肌。
旋毛虫压片镜检实训报告
一、实训背景旋毛虫病是由旋毛虫引起的急性寄生虫病，主要通过食用含有旋毛虫幼虫的肉类而感染。
猪旋毛虫是其中一种常见的寄生虫，其成虫寄生于小肠，幼虫则寄生于肌肉中。
为了保障食品安全和人民健康，对猪肉进行旋毛虫检测具有重要意义。
本实训旨在通过压片镜检的方法，学习旋毛虫的检测技术，提高对猪肉品质的监控能力。
二、实训目的1. 熟悉旋毛虫的生活史和形态特征。
2. 掌握旋毛虫压片镜检的操作方法。
3. 培养实际操作技能，提高对猪肉品质的监控能力。
4. 深化对食品安全和公共卫生的认识。
三、实训内容1. 旋毛虫的生活史和形态特征2. 旋毛虫压片镜检的操作方法3. 实验操作及结果分析四、实训过程1. 实验准备（1）实验材料：猪肉样本、显微镜、载玻片、盖玻片、生理盐水、酒精、吸管、镊子等。
（2）实验步骤：1. 将猪肉样本用手术刀切下24粒麦粒大小的肉粒，分别置于载玻片上。
2. 用镊子将肉粒轻轻压碎，使肉粒均匀分布在载玻片上。
3. 加入适量的生理盐水，用盖玻片覆盖。
4. 将载玻片放置在显微镜下观察。
2. 旋毛虫压片镜检（1）显微镜下观察：在低倍镜下寻找肌肉组织，然后切换到高倍镜观察。
注意观察肌肉组织中的旋毛虫幼虫，其形态特征为：细长、呈螺旋状，两端钝圆，长度约为0.5-1.5mm，直径约为0.03-0.05mm。
（2）结果分析：根据观察到的旋毛虫幼虫数量和形态特征，判断猪肉样本是否含有旋毛虫。
五、实训结果本次实训中，共检测了10个猪肉样本，其中3个样本检出旋毛虫幼虫。
检出率为30%。
这说明旋毛虫在猪肉中较为普遍，需加强食品安全监管。
六、实训总结1. 通过本次实训，我们对旋毛虫的生活史和形态特征有了更深入的了解，掌握了旋毛虫压片镜检的操作方法。
2. 实验过程中，我们发现旋毛虫幼虫在肌肉组织中较为隐蔽，需要仔细观察才能发现。
因此，在实际工作中，应加强猪肉品质的监控，确保食品安全。
3. 本次实训提高了我们的实际操作技能，增强了我们对食品安全和公共卫生的认识。
旋毛虫病肉品检验技术
旋毛虫病肉品检验技术旋毛虫病是重要的人畜共患寄生虫病，它是由毛形科的旋毛形线虫（Trichinella spiralis）成虫寄生于肠管，幼虫寄生于横纹肌所引起的。
该病流行于哺乳类动物间，鸟类可实验感染。
人若摄食了生的或未煮熟的含旋毛虫包囊的猪肉可感染生病，主要临床表现为胃肠道症状、发热、肌痛、水肿和血液嗜酸性粒细胞增多等，严重者可以导致死亡，故肉品卫生检验中将旋毛虫列为首要项目。
旋毛虫病的肉品检验是生猪屠宰检疫中的一项重要内容，通过该项检验可以检出感染旋毛虫的猪只。
对于杜绝病猪肉流入肉品市场，有着重要的作用。
一、实验目的及要求1．掌握肌肉旋毛虫压片镜检法、消化法的操作方法。
2．了解酶联免疫吸附试验的方法。
3．掌握旋毛虫病肉的处理方法。
二、实验器材（一）旋毛虫压片镜检法1．材料：被检肉品。
2．器材：载玻片，剪刀，镊子，天平，显微镜。
3．试剂：50%甘油水溶液，10%稀盐酸。
（二）旋毛虫集样消化法1．材料：被检肉品。
2．器材：组织捣碎机，采样盘，磁力加热搅拌器，圆盘转动式计数镜检台，集虫器，载玻片，表面皿，烧杯，剪刀，镊子，天平，温度计，显微镜。
3．试剂：0.04%胃蛋白酶溶液，盐酸。
（三）旋毛虫酶联免疫吸附试验（ELISA）1．材料：被检肉品。
2．器材：滤纸片，玻璃瓶，剪刀，酶标测定仪，反应板，加样器。
3．试剂：（1）阳性血清，阴性血清；（2）旋毛虫抗原；（3）酶标抗体（又称酶结合物、酶标记免疫球蛋白）；（4）包被液：Na2CO3 1.59g、NaN3 0.2g、NaHCO3 2.93g，用蒸馏水加至1000ml，调整pH为9.6。
放4℃冰箱中保存备用。
（5）洗涤液：NaCl 8.9g、Tween-20 0.5g、KH2PO4 0.2g、NaN3 0.2g、Na2HPO4·12H2O 2.9g、KCl 0.2g，用蒸馏水加至1000ml，调整pH为7.4。
（6）底物溶液（OPD-H2O2）：称取邻苯二胺40mg，溶解于100ml pH5.0磷酸-柠檬酸缓冲液（0.1M 柠檬酸24.3m1，加0.2M NaH2PO4 25.7ml，加水50ml）中，然后加30％过氧化氢0.15ml，现配现用。
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旋毛虫病肉品检验技术
旋毛虫病是重要的人畜共患寄生虫病，它是由毛形科的旋毛形线虫（Trichinella spiralis）成虫寄生于肠管，幼虫寄生于横纹肌所引起的。
该病流行于哺乳类动物间，鸟类可实验感染。
人若摄食了生的或未煮熟的含旋毛虫包囊的猪肉可感染生病，主要临床表现为胃肠道症状、发热、肌痛、水肿和血液嗜酸性粒细胞增多等，严重者可以导致死亡，故肉品卫生检验中将旋毛虫列为首要项目。
旋毛虫病的肉品检验是生猪屠宰检疫中的一项重要内容，通过该项检验可以检出感染旋毛虫的猪只。
对于杜绝病猪肉流入肉品市场，有着重要的作用。
一、实验目的及要求
1．掌握肌肉旋毛虫压片镜检法、消化法的操作方法。
2．了解酶联免疫吸附试验的方法。
3．掌握旋毛虫病肉的处理方法。
二、实验器材
（一）旋毛虫压片镜检法 1．材料：被检肉品。
2．器材：载玻片，剪刀，镊子，天平，显微镜。
3．试剂：50%甘油水溶液，10%稀盐酸。
旋毛虫压片镜检法
1．采样。
自胴体左右两侧横膈膜的膈肌脚（见图21-1），各采膈肌1块（与胴体编成相同号码），每块肉样不少于20g，记为一份肉样，送至检验台检查。
如果被检样品为部分胴体，则可从肋间肌、腰肌、咬肌等处采样。
2．肉眼检查。
撕去被检样品肌膜，将肌肉拉平，在良好的光线下仔细检查表面有无可疑
的旋毛虫病灶（见图21-2）。
未钙化的包囊呈露滴状，半透明，细针尖大小，较肌肉的色泽淡；随着包囊形成时间的增加，色泽逐步变深而为乳白色、灰白色或黄白色。
若见可疑病灶时，做好记录且告知总检将可疑肉尸隔离，待压片镜检后做出处理决定。
3．制片。
取清洁载玻片1块放于检验台上，并尽量靠近检验者。
用镊子夹住肉样顺着肌纤维方向将可疑部分剪下。
如果无可疑病灶的，则顺着肌纤维方向在肉块的不同部位剪取12个麦粒大小的肉粒（2块肉样共剪取24个小肉粒）。
将剪下的肉粒依次均匀地附贴于载玻片上且排成两行，每行6粒。
然后，再取一清洁载玻片盖放在肉片的载玻片上，并用力适度捏住两端轻轻加压，把肉粒压成很薄的薄片，以能通过肉片标本看清下面报纸上的小字为标准。
另一块膈肌按上法制作，两片压片标本为一组进行镜
检
4．镜检。
把压片标本放在低倍（4×10）显微镜下，从压片的一端第一块肉片处开始，顺肌纤维依次检查。
镜检时应注意光线的强弱及检查速度，切勿漏检。
5．结果判定。
（1）没有形成包囊的幼虫，在肌纤维之间呈直杆状或逐渐蜷曲状态，但有时因标本压得太紧，可使虫体挤入压出的肌浆中。
（2）包囊形成期的旋毛虫，在淡黄色背景上，可看到发光透明的圆形或椭圆形物。
包囊的内外两层主要由均质透明蛋白质和结缔组织组成，囊中央是蜷曲的虫体。
成熟的包囊位于相邻肌细胞所形成的梭形肌腔内。
（3）发生机化现象的旋毛虫。
虫体未形成包囊以前，包围虫体的肉芽组织逐渐增厚、变大，形成纺锤形、椭圆形或圆形的肉芽肿。
被包围的虫体有的结构完整，有的破碎甚至完全消失。
虫体形成包囊后的机化，其病理过程与上述相似。
由于机化灶透明度较差，需用50％甘油水溶液作透明处理，即在肉粒上滴加数滴50%甘油水溶液，数分钟后，肉
片变得透明，再覆盖上玻片压紧观察。
（4）钙化的旋毛虫。
在包囊内可见数量不等、浓淡不均的黑色钙化物，包囊周围有大量结缔组织增生。
由于钙化的不同发展过程，有时可能看到下列变化：①包囊内有不透明黑色钙盐颗粒沉着；②钙盐在包囊腔两端沉着，逐渐向包囊中间扩展；③钙盐沉积于整个包囊腔，并波及虫体，尚可见到模糊不清的虫体或虫体全部被钙盐沉着。
此外，在镜检中有时也能见到由虫体开始钙化逐渐扩展到包囊的钙化过程（多数是由于虫体死亡后而引起的钙化）。
发现钙化旋毛虫时，可以通过脱钙处理，滴加10%稀盐酸将钙盐溶解后，可见到虫体及其痕迹，与包囊毗邻的肌纤维变性，横纹消失。
（5）鉴别诊断。
在旋毛虫检验时，往往会发现住肉孢子虫和发育不完全的囊尾蚴，虫体典型者，容易辨认，如发生钙化，死亡或溶解现象时，则容易混淆，在检查时可参
旋毛虫、住肉孢子虫、囊尾蚴肉眼检查及镜下区别。