注射液中不溶性微粒检查法

3.仪器的校正与检定
• 中国药典：所用仪器应每6个月校正1次 • （1）取样体积的准确性： • （2）微粒记数的准确性： • （3）传感器的分辨率： • 测定仪器经校正合格后方可使用。
英国药典和欧洲药典：
使用已知大小的10μm和25μm 的标准粒子（Spherical Particles,EPCRS），分散于微粒 检查用水中，分散时应注意防止微 粒的聚集，对仪器进行校正。
＞25µm≤2粒／ml ≤100ml，＞10µm≤3000粒／支， ＞25µm≤300粒／支 (含无菌粉针)
限度要求同USP与EP。值得注意的是限度要求大、小针的单位不同。
注射液中不溶性微粒检查法附录
• 起草情况简介
四、影响测定结果的因素
1、环境因素 2、检品取样方法 3、仪器因素：全体积取样法 4、安瓿质量 5、样品性质：黏度等 6、样品稀释倍数
4.检测方法
• 英国药典：取供试品，翻转5次，静置2分钟后， 取4份溶液测定（每份溶液不少于5ml），弃去第 一份数据，取后三份的平均值。固体粉末用适宜 的纯化水或其他溶剂制备成溶液后测定。
• 欧洲药典：取供试品，翻转20次，静置2分钟或超 声除气后，大容量注射液和25ml小容量注射液取 样直接测定，小于25ml的小容量注射液可合并10 个以上容器的内容物，使得到不少于25ml的测定 溶液。取4份溶液测定（每份溶液不少于5ml，）， 弃去第一份数据，取后三份的平均值。固体粉末 用适宜的纯化水或其他溶剂制备成溶液后测定。
注射液中不溶性微粒检查法
• 一、定义、危害及来源 • 二、国内外药典的检查法比较 • 三、中国药典2005年版附录介绍 • 四、影响测定结果的因素
一、定义、危害及来源
• 1、定义
• 注射剂中不溶性微粒是指除气泡外可流动 的、随机存在于液体制剂包括灭菌粉针剂 所制成的药液中的不溶性外来物质。
• 特点：不溶于水
• 中国药典1985年版增订了对100ml以上大容量注射 液的不溶性微粒检查法（微孔滤膜-显微镜法）， 1990年版、1995年版均未做改变。
• 中国药典2000年版增订了光阻法。
• 中国药典2005年版增加对100ml以下静脉注射液、 静脉注射用无菌粉末及注射用浓溶液中的不溶性 微粒检查小容量
二、美国药典
美国药典（29版）
三、英国药典
英国药典（1968年版）仅规定对注射液作澄明度检 查，使用目视灯检法，只能检查较大粒子（50μm）。
英国药典（1973年版）收载注射液中不溶性微粒检 查法，检查方法为电阻法[Electrical Zonesensing Method（the coulter principle）]。
5、增加小针剂检查 ≥25ml 5ml×3 ＜25ml 合半数支使总体积大于20ml 5ml×3 或逐支检查(取样体积以不吸入气 泡为限) (粉针）
6、供试品数量 3支以上 7、判定 光阻法：＞100ml，＞10µm≤12粒／ml，
＞25µm≤2粒／ml ≤100ml，＞10µm≤3000粒／支， ＞25µm≤300粒／支 (含无菌粉针) 显微镜法：＞100ml，＞10µm≤12粒／ml，
Ⅸ C 注射液中不溶性微粒检查法
1、名称：>50µm 澄明度 可见异物 2～50µm 不溶性微粒 不可见微粒
2、光阻法和显微镜法检验结论不同时，以后 者为准。
3、取样体积5ml或随容器的标示体积决定
4、环境及溶剂 10ml，≥10µm，＜10粒；≥25µm，<2粒，光阻法 50ml，≥10µm，＜20粒；≥25µm，<5粒，显微镜法
•
不能被代谢
•
肉眼看不见（2～50µm ）
2、不溶性微粒对人体的危害
2.1形成肉芽肿

2.2局部组织栓塞坏死

2.3静脉炎

2.4肿瘤或肿瘤样反应

2.5还可引起变态反应
3、来源
不溶性微粒主要由钙、硅等无机微粒， 或是炭黑、纤维、细菌、霉菌、芽孢和结 晶体、玻璃屑，以及塑料微粒、橡胶微粒 等组成。主要来自
1993年版规定如果出现电阻法不适用的情况，可采 用根据光阻原理制造的仪器进行测定。
1998年版修订为光阻法（Light Blockage Principle）。
2000年版增加100ml和100ml以下注射液的检查
2002年版
欧洲药典（第4版）
附录2.9.19 Particulate Contamination :Sub-Visible Particles
• 1.材料与用具：层流净化台、双目显微镜、微 孔滤膜、捕集不溶性微粒的组合滤器。
• 纯化水：（1）中国药典、日本药局方：每 10ml中含10μm以上的微粒应在10粒以下，用 前经0.45μm滤膜滤过。
• （2）英、美、欧洲药典：每50ml中含10μm 以上的微粒应在20粒以下，25μm以上的微粒 应在5粒以下
2.检测
• 英国药典：量取混合均匀的溶液25ml过滤，放大 100倍，检定微粒的大小及特性，并记录数量。
• 日本药局方：量取混合均匀的溶液40ml过滤，分 别用30ml纯化水洗涤3次，滤膜经50℃干燥后，检 测。
• 欧洲药典、美国药典：取混合均匀的溶液滤过， 最后用纯化水洗涤，取经空气干燥的滤膜，放大 100倍测定。
1.光阻法 2.显微镜法
具体方法和限度的比较
一、光阻法 1.仪器与装置： 中国药典：通常包括取样器、传感器和数据处理三部分。测
量范围应包括2μm～50μm，检测微粒浓度0～5000个/ml。 英国药典和欧洲药典：符合光阻挡原理的仪器，能自动测定
微粒的大小和数量。 美国药典：具有光阻传感器、取样器及测定微粒的电子记数
5.限度
• 中国药典 • 英国药典、欧洲药典、美国药典、日本药局方： （1）标示装量大于100ml：每1ml中≥10μm 的微
粒不得过25个，≥ 25μm的微粒不得过3个。
（2）标示装量为100 ml或以下：每个容器中 ≥10μm 的微粒不得过6000个，≥ 25μm的微粒 不得过600个。
二、显微镜计数法
美国药典（19版）仅规定对注射液作澄 明度检查，使用目视灯检法，只能检查较 大粒子（50μm）。
美国药典（19版）第一增补本对100ml 以上大容量注射液的不溶性微粒检查法 （微孔滤膜-显微镜法），20版、21版及 22版未做修订。
美国药典（23版）增订光阻法，增订小 容量注射液的不溶性微粒检查法。
美国药典：测试溶液超声除气30秒或静置，依法 测定不少于3次（每次不少5ml ），弃去第一份数 据。 1.液体制剂：（1）装量小于25ml：取10个或 更多的容器，每个翻转20次，合并内容物使体积 不少于20ml 。（2）装量为25ml或25ml以上： 翻转容器20次，直接测定。 2.干品或冻干品：用适宜体积的纯化水或其他溶 剂溶解内容物，合并或分别测定适宜数量的容器。 3.配有溶剂的固体制剂：按标签所示混合溶解， 然后按液体制剂下的操作方法测定。 4.多剂量容器：对于标明药物大包装的制剂，按 液体制剂项下“装量为25ml或25ml以上”的操作 方法测定，按照标签上的最大剂量计算（最大剂量 相当于一个满包装内容物）
（1）药品生产、储存、运输过程及临床 配药操作污染等途径
（2）药物配伍使用时发生物理或化学性 质变化。
国内外药典检查法的比较
• 一、历史沿革 • 二、现版药典收载的检查方法和一般要求 • 三、具体方法和限度的比较
历史沿革
• 一、中国药典 • 中国药典自1977年版仅规定对注射液作澄明度检
查，使用目视灯检法，只能检查较大粒子 （50μm）。
收载了两种方法：光阻法和显微镜法
检查大容量注射液（大于100ml）和小容 量注射液(100ml和100ml以下）
四、日本药局方
日本药局方（第九改正版）仅规定对注射液 作澄明度检查，使用目视灯检法，只能检查较 大粒子（50μm）。
日本药局方（第十改正版）收载100ml以上 大容量注射液的不溶性微粒检查法（微孔滤 膜-显微镜法），直至第十三改正版，检查法 一直未做修订。
Βιβλιοθήκη Baidu本药局方（第十四改正版）增订光阻法， 增订小容量注射液的不溶性微粒检查法。
现版药典收载的检查方法和一般要求
• 中国药典 • 2005年版
美国药典 29版
• 1.显微镜法 1.光阻法 • 2.光阻法 2.显微镜法
欧洲药典 第四版
英国药典 2002年版
1.光阻法 光阻法 2.显微镜法
日本药局方 第十四版
日本药局方：测试溶液超声除气30秒或静置，依 法测定不少于3次（每次不少5ml ），弃去第一 份数据。 1.液体制剂（1）装量小于25ml：取适当数量 的容器，每个翻转20次，合并内容物使体积不少 于25ml 。（2）装量为25ml或25ml以上：翻 转容器20次，直接测定。 2.无菌干品或冻干品：用适宜体积的纯化水或其 他溶剂溶解内容物，合并或分别测定适宜数量的 容器。 3.配有溶剂的固体制剂：按标签所示混合溶解， 然后按液体制剂下的操作方法测定。
3.限度
• 中国药典： • 美国药典、欧洲药典和日本药局方： • （1）大容量注射液（ ≥ 100ml ）：每1ml中
≥10μm 的微粒不得过12个，≥ 25μm的微粒不得过 2个。 • （2）小容量注射液（ 小于100ml ）：每个容器中 ≥10μm 的微粒不得过3000个，≥ 25μm的微粒不得 过300个。
系统。仪器进行检测时，应确保操作参数适当，以得到所 需精度的实验结果。 日本药局方：具有光阻传感器、取样器及测定微粒的电子记 数系统。光源可采用钨灯、发光二极管（LED）或激光， 取样方式可采用压缩或抽气方式。
2.实验环境
• 中国药典：规定实验所处环境应不能导入明显的微粒，所 用玻璃仪器和其他所用器械都应洁净。检查用纯化水每 10ml中含10μm以上的微粒应在10粒以下。
• 美国药典和日本药局方均规定当光阻法测定不符合规定时，应用显微镜计 数法测定并做最后判断。
三、中国药典2005年版附录介绍
国家标准即是国家为保证人体用药安全有效所制订的上市 药品所必须达到的法定质量要求。 正确理解和执行国家标准的前提－药品管理法及药典附录 通则。 作用：技术监督－国家对上市药品实施监督抽验的法定依 据。
美国药典：所用仪器应每6个月校正1次 （1）样品体积准确性 （2）样品流速： （3）微粒体积响应曲线： （4）传感器的分辨率： （5）微粒计数准确性：
日本药局方：仪器校正至少每1年校正1次 （1）样品体积准确性： （2）样品流速：。 （3）微粒体积响应曲线： （4）灵敏度： （5）传感器的分辨率： （6）微粒计数准确性： （7）阈值的准确度：
• 日本药局方：实验环境应洁净，避免外来微粒的污染。检 查用纯化水每10ml中含10μm以上的微粒应在5粒以下， 25μm以上的微粒应在2粒以下。
• 英国药典和欧洲药典：实验应在层流室中进行，检查用水 每25ml中含10μm以上的微粒应在25粒以下。
• 美国药典：实验应在装有高效微粒过滤器（HEPA）的层 流室中进行,检查用纯化水每10ml中含10μm以上的微粒应 在10粒以下，25μm以上的微粒应在2粒以下。