食品中多种生物胺同时测定方法研究进展

A: 乙腈B乙2 辛醇(1B99)
B: 乙腈 150mlB磷酸 818ml B二乙基环己胺 10ml
ODS2Hypersil 柱 211mm, ID 5Lm)
( 200
@ [ 11]
6
酪胺、组 胺、苯 乙 胺、
微生物培 养液
腐胺、尸胺 等 8 种 生 物胺
Ext relut 色 谱柱净化
邻苯二甲
FD
Key wor ds: biogenic amine, biosensor, HPLC, CE, TLC
生物胺( biogenic amine, BA) 是脂 肪族、酯环族或杂环族的 低分子量有机碱, 常存 在于动 植物体 内及食 品中。食品 中生 物胺主要是 由食品中相关 微生物产 生的酶, 或 食品原 料中固 有的酶, 催化脱去食 品中游离 氨基酸 的羧 基而产 生的[ 1] 。但 有人发现部分脂肪族生物胺可在活的有机体内由相应的醛通 过氨基化而形成[2] 。生物胺存 在于多种食品尤其是发酵食品 ( 如奶酪、葡 萄酒、啤酒、米酒、发 酵香肠、调味 品、水产品 及肉 类产品等)中。有人认为 葡萄酒 中的组 胺及其 它生物 胺可以 作为衡量葡萄酒生产过程 中卫生 条件好 坏的一个 主要指 标。 水产品、肉类制品等蛋白 含量丰 富的食 品中生 物胺含 量与其
[ 8]
奶酪: A, 20mmolPL 磷酸二
奶酪:
氢胺+ 9mmolPL 三甲氨溶
2
奶酪及植 物组织
同时分离组胺等 7 种 生物胺 和 组氨 酸、酪 氨酸等 17 种氨基酸
01 1molPL HCl; 植物
组 织: 5%
咔唑乙酰
荧光
氯 (CRA2Cl)
EX335nmEM365nm
液 与 甲 醇 ( 90B 10 ) ; B, 100% 乙 腈。 植 物 组 织: Spherisorb ODS( 35 e ) 等度 洗脱。 甲醇B乙腈B
Vol. 35 No. 5 Sep. 2006
# 综述#
摘要: 生物胺是低分子量有机 碱, 存在于蛋白质丰富的食品尤其是发酵食品中。人体摄入过 量的生物 胺会引起过敏反应, 严重的还会危及生命。另外, 食品中生物胺含量与食品质量具有一定的相关性。本 文对 近年来食品生物胺的检测方法进行了综述。重点介绍了高效液相色谱、毛细管电泳、生物传感器和 薄层色谱 等方法的特点及其在食品生物胺测定中的应用。
1 高效液相色谱( HPLC)
HPLC 具有分析速度快、柱效高、检测灵敏度高、定量 分析 准确的特点, 是目前食品中生物胺含量分析测定的主要手段。 111 反相高效液相色谱( RP2HPLC)
RP2HPLC 法几乎 可以分离 所有 的有机 化合 物, 被多数 研 究者选择用于对食品中的生物胺 进行分离和定量分析。许多 食品中的生物胺在可 见和紫 外区域既 没有满 意的吸 收, 也没
GromsilODS 柱( 30 e @4mm ID, 5Lm)
)
( 250
[ 10]
C: MeCN( 100% )
奶酪火腿
二硝基苯
4
米酒调 味品
分离 15 种 生物 胺 及 01 1molPL
其前体氨基酸
HCl 提取
甲酰 氯 (Dabs2Cl)
UV486nm
A: 9mmolPL NaH2PO4 +
关键词: 生物胺 生物传感器 高效液相色谱 毛细管电泳 薄层色谱
中图分类号: TS20713
文献标识码: A
Simultaneous determination methods of biogenic amines in food
Li Zhi2jun, Wu Yong2ning, Xue Chang2hu
的检测; 但荧光检测器对于 生物胺 衍生物 具有更 高的灵 敏度 和选择性[ 7] 。食品中生物胺的种类较多, 为了有效分离, 一般 选择混合流动相的梯 度洗脱, 从而 达到同 时测定 多种生 物胺 的目的。附表对 不同 RP2HPLC 方 法分 析食 品中 生物 胺的 应
用情况进行了归纳比较 。
胺反应, 衍生物不稳定, 必须 严格控 制反应 条件, 否则影 响结 附表 RP2HPLC 方法在食品中生物胺分析中的应用比较(1)
21 R ibaya2Mercado JD, Mazariegos M, Tang G, et al . Assessment of tot al body stores of vitamin A in Guatemalan elderly by the deuterated2ret inol2 dilution method. Am J Clin Nutr, 1999, 69: 278284
质量密切 相 关, 有 望成 为 评 价此 类 食品 鲜 度的 一 个 重要 指 标[3] 。
微量生物胺是生物体( 包括 人体) 内的 正常活 性成分, 在
生物活细胞中具有重要的生理功 能。但当 人体摄入过量的生 物胺( 尤其是多 种生 物胺 同时 摄入 ) 时, 会引 起诸 如头 痛、恶 心、心悸、血压变化、呼吸紊乱等过敏反应, 严重的还会危及生 命。本文概述了近年来食品中多种生物胺 同时测定方法的研 究现状与趋势。
[ 9]
HClO4
H2O ( 65 B 31 0 B 32, 含
011molPL 醋酸钠)
3
豆酱鱼露 测定鲱精胺、组胺、酪 01 1molPL 凤尾鱼糊 胺等 11 种生物胺 HCl 提取
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
二硝基苯 甲 酰 氯 二极管陈列 260nm (Dabs2Cl)
A: 97% 011molPL NaOAc
( pH710) 和 3%THF B: 011molPL NaOAc(pH413)
4% 二 甲 基 甲 酰胺 + 011 ~ 012% 三乙胺
SpherisorbODS 柱 ( 50 e ) ( 150 @416mm, ID, 3Lm)
[ 6]
B: 80% 乙腈
组胺、鲱精 胺 等 6 种 5 葡萄酒 生物胺及其前体氨基
酸
荧光甲基
氯甲 酸 (FMOC)
荧光(FD) EX263nmEM313nm
第 35 卷 第 5 期 670 2006 年 9 月
卫生研究 JOURNAL OF HYGIENE RESEARCH
文章编号: 100028020( 2006) 0520670205
食品中多种生物胺同时测定方法研究进展
李志军 综述 吴永宁1 薛长湖 审校
中国海洋大学食品科学与工程学院, 青岛 266003
验结果表明, 其生物胺衍生物室温下可稳定 4 周, - 20e 下稳 定性超过 1 年[6] 。
检测器是 RP2HPLC 系 统 测定 生 物 胺 的重 要 组 成 部分。
UV 检测器是 RP2HPLC 应用最多 的一种 检测器, 灵敏 度较高; 二极管阵列检 测器是 一种 新型 UV 检 测器, 已应 用于 生物 胺
intakes of Filipino elders with Jdequate or low liver vitamin A concentrations as assessed by the deut erated2ret inol2dilut ion method: implicat ions for dietary requirements. Am J Clin Nutr, 2004, 79: 6332641 24 汪之顼. 焦华. 中老年人 B2胡萝卜素转化为维生素 A 的效率. 营 养学报, 2004, 26(1) : 13_18 25 Tanumihardjo SA. Vitamin A status assessment in rats with 13C42ret inyl acetate and gas chromatographyPcombustionPisot ope rat io mass spectrometry. J Nutr Nov, 2000, 130: 284422849 26 Furr HC. Analysis of retinoids and carotenoids: problems resolved and unsolved. J Nutr, 2004, 134( Suppl. ) : 2812285
( 2005210213 收稿)
第 5期
李志军, 等. 食品中多种生物胺同时测定方法研究进展
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有荧光成分, 所以在采用 HPLC 测定时, 一般需 要对生 物胺进 果的重复性[ 4, 5] 。二硝 基甲 酰氯的 稳定 性最 好, Ingolf 等的 试
行化学衍生处理。衍生有柱前衍生和柱后衍生之分。柱后衍 生是样品经 过色谱柱分离 后, 先 进入特 殊的衍 生设备 中进行 衍生化反应, 再通过检 测器鉴 定分析。柱 后衍生 的结果 色谱 图干扰少、重复性好、耗时少, 并且实现了操作的程序化 、自动 化; 但所需的仪器设备昂贵, 投资大。所以研发者多选择各种
序号 食品种类
目标物
样品前 处理
衍生化 试剂( 1)
检测器
流动相
色谱柱
参考 文献
1
葡萄酒
组胺、腐胺、甲 胺、乙 过 01 22Lm 咔唑乙酰 胺等 16 种生物胺 的滤膜 氯( AQC)
荧光检测器 EX250nmEM395nm
A, 01 05molPL 醋 酸 钠 1% 四氢呋喃; B, 乙醇
Spherisorb ODS ( 65 e ) ( 250 @416mm, ID, 5Lm)
23 R ibaya2Mercado JD, Solon FS, Fermin LS, et al . Dietary Vitamin A
基金项目: 科技部中国2 希腊政府间科技合作课题资 助; 国家自然 科学基金资助项目( No. 30571572)
作者简介: 李志军, 男, 讲师, 博士研究生, 工作单位为烟台大学 1 通讯作者
醛( OPA) EX340nmEM450nm
等度洗脱 85ml 甲醇+ 15ml 7% 的三
Superspher
100
RP2C18 柱 [ 12]
乙胺- 醋酸 pH71 5
22 de Pee S, West CE, Muhilal KD, et al. Lack of improvement in vitamin A status with increased consumption of dark2green leafy vegetables. Lancet, 1995, 346: 75281
柱前衍生法。衍生试剂的选择以衍生产物稳定性好、杂 质少、 衍生过 程简 单 为 原 则。常 用 的 柱 前 衍 生 剂 有 邻 苯 二 甲 醛 ( OPA) 、丹磺酰氯( Dns2Cl) 、二 硝基甲 酰氯 ( Dabs2Cl) 等。 邻苯 二甲醛的优点在于衍生反应快, 耗时少, 生物胺衍生物的检测 限可以达到 fmol 水平; 但缺 点也 很明 显, 即其 仅与 初级 生物
College of Food Science and Engineering, Ocean University of China, Qingdao 266003, China
Abstr act: Biogenic amines are organic bases with low molecular weight. They can be expected in all foods that contain proteins or free amino acids. Consumption of food containing high amounts of biogenic amines may cause toxicological effects. The most notorious foodborne intoxications caused by biogenic amines are related to histamine. The article reviewed methods of determination of biogenic amines in foods in recently years and emphasized on the characteristics of HPLC, CE, biosensor and TLC and their applications.