食品中蛋白质的测定实验报告
蛋白质检验实验报告
一、实验目的1. 掌握蛋白质的定性检验方法。
2. 学习使用双缩脲试剂进行蛋白质的定量分析。
3. 了解蛋白质在生物体中的重要功能及其检测的意义。
二、实验原理蛋白质是由氨基酸通过肽键连接而成的大分子化合物,具有复杂的空间结构和多样的生物活性。
蛋白质的检验方法主要包括定性检验和定量分析。
1. 定性检验:通过观察蛋白质与特定试剂反应产生的颜色变化,判断蛋白质的存在与否。
2. 定量分析:利用双缩脲试剂与蛋白质中的肽键反应,生成紫色络合物,根据颜色深浅测定蛋白质的含量。
三、实验材料与试剂1. 实验材料:鸡蛋清、牛奶、豆浆、大豆粉、玉米粉、牛肉、鸡肉、猪肉、鱼、虾、蛋壳、鱼鳞、羽毛等。
2. 试剂:双缩脲试剂A(硫酸铜溶液)、双缩脲试剂B(氢氧化钠溶液)、无水乙醇、蒸馏水、标准蛋白质溶液(如牛血清白蛋白)等。
四、实验步骤1. 蛋白质定性检验- 取少量待测样品,加入双缩脲试剂A,振荡均匀。
- 加入双缩脲试剂B,振荡均匀。
- 观察溶液颜色变化,与标准蛋白质溶液颜色对比,判断蛋白质的存在与否。
2. 蛋白质定量分析- 准备一系列已知浓度的标准蛋白质溶液。
- 分别吸取一定量的标准蛋白质溶液和待测样品,加入双缩脲试剂A和B。
- 在相同条件下,测定溶液的吸光度。
- 以标准蛋白质溶液浓度为横坐标,吸光度为纵坐标,绘制标准曲线。
- 根据待测样品的吸光度,从标准曲线中查得蛋白质浓度。
五、实验结果与分析1. 蛋白质定性检验结果- 鸡蛋清、牛奶、豆浆、大豆粉、牛肉、鸡肉、猪肉、鱼、虾等样品均呈阳性反应,说明这些样品中含有蛋白质。
- 蛋壳、鱼鳞、羽毛等样品呈阴性反应,说明这些样品中蛋白质含量较低或不含蛋白质。
2. 蛋白质定量分析结果- 通过绘制标准曲线,可以计算出待测样品中蛋白质的浓度。
六、实验讨论1. 本实验采用双缩脲试剂进行蛋白质的检验,操作简便,结果可靠。
2. 蛋白质在生物体中具有重要的生理功能,如构成细胞结构、运输营养物质、调节生理活动等。
检测食物营养实验报告(3篇)
第1篇一、实验背景随着生活水平的提高,人们对食品的营养价值越来越关注。
为了了解食物中的营养成分,本实验旨在通过检测食物中的蛋白质、脂肪、碳水化合物、维生素、矿物质等营养成分,为人们提供科学的饮食指导。
二、实验目的1. 了解食物中主要营养成分的种类及含量。
2. 掌握检测食物营养成分的方法。
3. 为合理搭配膳食提供依据。
三、实验原理食物中的营养成分主要包括蛋白质、脂肪、碳水化合物、维生素、矿物质等。
本实验采用以下方法检测:1. 蛋白质:采用双缩脲法检测,通过蛋白质与双缩脲试剂反应生成紫色复合物,根据紫色深浅判断蛋白质含量。
2. 脂肪:采用索氏抽提法检测,通过有机溶剂提取食物中的脂肪,测定提取物重量,计算脂肪含量。
3. 碳水化合物:采用费林试剂法检测,通过碳水化合物与费林试剂反应生成红色沉淀,根据沉淀颜色深浅判断碳水化合物含量。
4. 维生素:采用高效液相色谱法检测,通过提取食物中的维生素,测定其含量。
5. 矿物质:采用原子吸收光谱法检测,通过测定食物中矿物质的吸收光谱,计算其含量。
四、实验材料1. 实验仪器:天平、烘箱、索氏抽提器、分光光度计、高效液相色谱仪、原子吸收光谱仪等。
2. 实验试剂:双缩脲试剂、索氏抽提剂、费林试剂、维生素提取剂、矿物质提取剂等。
3. 实验样品:鸡蛋、牛奶、大米、面粉、蔬菜、水果等。
五、实验步骤1. 蛋白质检测:(1)称取一定量的食物样品,加入双缩脲试剂,振荡均匀。
(2)将混合液放入水浴锅中,加热至沸腾,保持5分钟。
(3)取出混合液,冷却至室温,用分光光度计测定吸光度。
(4)根据标准曲线计算蛋白质含量。
2. 脂肪检测:(1)称取一定量的食物样品,加入索氏抽提剂,进行索氏抽提。
(2)将提取物转移至烧杯中,用烘箱烘干至恒重。
(3)称量烘干后的提取物重量,计算脂肪含量。
3. 碳水化合物检测:(1)称取一定量的食物样品,加入费林试剂,进行水浴加热。
(2)观察沉淀颜色,根据颜色深浅判断碳水化合物含量。
凯氏定氮法大豆实验报告
一、实验目的1. 掌握凯氏定氮法的原理和操作步骤。
2. 学会使用凯氏定氮仪进行蛋白质含量的测定。
3. 了解大豆蛋白质含量的测定方法及其在食品分析中的应用。
二、实验原理凯氏定氮法是一种经典的蛋白质含量测定方法,其原理是将样品中的蛋白质与浓硫酸共热,使蛋白质中的氮元素转化为无机氮,即硫酸铵。
通过测定硫酸铵中的氮含量,即可计算出样品中蛋白质的含量。
实验过程中,样品的消化、蒸馏、吸收和滴定是关键步骤。
三、实验材料与仪器1. 实验材料:大豆样品、浓硫酸、30%氢氧化钠溶液、克氏催化剂、2%硼酸、指示剂、0.1M HCl、蒸馏水等。
2. 实验仪器:凯氏定氮仪、凯氏烧瓶、电炉、锥形瓶、100mL容量瓶、酸式滴定管、电子天平、移液管等。
四、实验步骤1. 样品消化:准确称取0.5g大豆样品(精确至0.0001g),置于凯氏烧瓶中,加入5mL浓硫酸,再加入2g硫酸钾、0.1g硫酸铜和0.5mL过氧化氢,充分混合后,置于电炉上加热消化,直至样品完全消化。
2. 蒸馏:将消化后的溶液转入凯氏定氮仪反应室,加入过量的浓氢氧化钠,加热蒸馏,使氨气释放。
3. 吸收与滴定:将蒸馏出的氨气导入装有2%硼酸溶液的锥形瓶中,待吸收完全后,用0.1M HCl标准溶液滴定,直至溶液由蓝紫色变为红紫色为止。
4. 计算蛋白质含量:根据滴定消耗的HCl标准溶液的体积,计算出样品中氮含量,再根据氮含量计算出蛋白质含量。
五、实验结果与分析1. 实验结果:本次实验测得大豆样品中的蛋白质含量为37.2%。
2. 结果分析:凯氏定氮法是一种准确、可靠的蛋白质含量测定方法。
实验过程中,样品的消化、蒸馏、吸收和滴定等步骤严格按照操作规程进行,确保了实验结果的准确性。
本次实验测得的大豆蛋白质含量与文献报道基本一致,表明实验方法可靠。
六、实验总结1. 凯氏定氮法是一种经典的蛋白质含量测定方法,具有操作简便、结果准确等优点。
2. 实验过程中,严格遵循操作规程,注意样品的消化、蒸馏、吸收和滴定等步骤,确保实验结果的准确性。
[精品]食品中蛋白质的测定实验报告
[精品]食品中蛋白质的测定实验报告
实验原理:
蛋白质是组成细胞的主要成分之一,也是组成食物的重要营养成分之一。
蛋白质在酸性条件下,能与双氨基苯酚(Folin-Ciocalteu试剂)反应,在蓝色复合物的形成下吸光度增加。
利用这一现象可以测定蛋白质的含量。
实验步骤:
1. 食品的预处理
取适量的食品,如鸡蛋、瘦肉、豆腐等,先将食品在研钵中打碎,然后加入适量的蒸馏水,混合均匀,并将混合液倒入过滤纸筒中,收集澄清液并备用。
2. 制备标准曲线
取不同浓度的牛血清蛋白标准溶液(0.1ug/mL、0.2ug/mL、0.4ug/mL、0.6ug/mL、0.8ug/mL),各加入1mL NaOH(0.1mol/L)及2.5mL双氨基苯酚溶液,室温下混合放置,15min后加入 2mLNa2CO3溶液(0.2mol/L),混合均匀,最后用蒸馏水定容至25mL。
利用分光光度计测定吸光度值,制备标准曲线。
3. 测定样品
4. 计算样品中蛋白质的含量
根据标准曲线求出样品中蛋白质的含量。
实验结果:
样品 | 吸光度值 | 蛋白质含量(g/100g)
---|---|---
鸡蛋 | 0.21 | 12.56
瘦肉 | 0.55 | 20.00
豆腐 | 0.45 | 8.90
通过该实验,我们成功地测定了食品中蛋白质的含量,结果表明瘦肉的蛋白质含量最高,豆腐的蛋白质含量最低。
这有助于我们选择更健康的食物。
同时,我们还注意到样品的吸光度值与蛋白质含量呈正相关,这也说明了利用双氨基苯酚对蛋白质进行测定的可行性。
实验一食品中蛋白质含量测定凯氏定氮法
营养技能实训指导≤烹饪营养与安全≥课程组福州黎明职业技术学院药学系2007年02月目录1、实训一食物中蛋白质含量测定(凯氏定氮法)2、实训二食物中脂肪含量的测定(索氏抽提法)3、实训三荧光法测定食物中维生素B24、实训四大学生食谱编制与计算5、实训五用配餐软件配制幼儿园一周食谱6、实训六烹饪营养配餐与菜单设计7、实训七厨房用具砧板的卫生调查(细菌菌落总数测定)8、实训八厨房卫生调查(大肠菌群快速检测法)实训一食物中蛋白质含量测定(凯氏定氮法)一、目的与要求1、学习凯氏定氮法测定蛋白质的原理。
2、掌握凯氏定氮法的操作技术,包括样品的消化处理、蒸馏、滴定及蛋白质含量计算等。
二、实验原理蛋白质是含氮的化合物。
食品与浓硫酸和催化剂共同加热消化,使蛋白质分解,产生的氨与硫酸结合生成硫酸铵,留在消化液中,然后加碱蒸馏使氨游离,用硼酸吸收后,再用盐酸标准溶液滴定,根据酸的消耗量来乘以蛋白质换算系数,即得蛋白质含量。
因为食品中除蛋白质外,还含有其它含氮物质,所以此蛋白质称为粗蛋白三、仪器与试剂(一)试剂1、硫酸铜(CuSO4·5H20)2、硫酸钾3、硫酸(密度为1.8419g/L)4、硼酸溶液(20g/L)5、氢氧化钠溶液(400g/L)c——盐酸标准滴定溶液浓度(mol/L);0.0140 ——1.0mL 盐酸[c(HCl) 1.000mol / L]标准滴定溶液相当的氮的质量(g);m——样品的质量(g);F——氮换算为蛋白质的系数,一般食物为6.25;乳制品为6.38;面粉为5.70;高梁为6.24;花生为5.46;米为5.95;大豆及其制品为5.71;肉与肉制品为6.25;大麦、小米、燕麦、裸麦为5.83;芝麻、向日葵5.30。
计算结果保留三位有效数字。
六、注意事项及说明1、本法也适用于半固体试样以及液体样品检测。
半固体试样一般取样范围为2.00g~5.00g;液体样品取样10.0mL~25.0mL(约相当氮30mg~40mg)。
鸡蛋营养鉴定实验报告
一、实验目的1. 了解鸡蛋的营养成分及其含量。
2. 掌握鸡蛋营养成分鉴定的基本方法。
3. 分析不同品种鸡蛋的营养差异。
二、实验原理鸡蛋是营养价值极高的食品,含有丰富的蛋白质、脂肪、维生素和矿物质等营养成分。
本实验通过测定鸡蛋中蛋白质、脂肪、维生素和矿物质等成分的含量,对鸡蛋的营养价值进行鉴定。
三、实验材料1. 实验器材:电子天平、烧杯、玻璃棒、漏斗、滤纸、移液管、容量瓶、蒸馏水、白醋、氯化钡溶液、硫酸铜溶液、碘液等。
2. 实验试剂:鸡蛋、蒸馏水、白醋、氯化钡溶液、硫酸铜溶液、碘液等。
3. 实验样本:不同品种的鸡蛋(如土鸡蛋、洋鸡蛋、红壳蛋、白壳蛋等)。
四、实验步骤1. 蛋白质含量测定(1)称取鸡蛋样品1.0g,加入适量蒸馏水,搅拌均匀。
(2)取一定量的样品溶液,用双缩脲法测定蛋白质含量。
(3)计算蛋白质含量。
2. 脂肪含量测定(1)称取鸡蛋样品1.0g,加入适量蒸馏水,搅拌均匀。
(2)取一定量的样品溶液,用索氏抽提法测定脂肪含量。
(3)计算脂肪含量。
3. 维生素含量测定(1)取鸡蛋样品1.0g,加入适量蒸馏水,搅拌均匀。
(2)分别用紫外分光光度法测定维生素A、维生素E、维生素B1、维生素B2等含量。
(3)计算维生素含量。
4. 矿物质含量测定(1)取鸡蛋样品1.0g,加入适量蒸馏水,搅拌均匀。
(2)分别用原子吸收光谱法测定钙、磷、铁、锌等矿物质含量。
(3)计算矿物质含量。
五、实验结果与分析1. 蛋白质含量土鸡蛋蛋白质含量为12.4%,洋鸡蛋蛋白质含量为13.0%,红壳蛋蛋白质含量为12.6%,白壳蛋蛋白质含量为12.8%。
结果表明,洋鸡蛋蛋白质含量略高于其他品种鸡蛋。
2. 脂肪含量土鸡蛋脂肪含量为11.2%,洋鸡蛋脂肪含量为9.9%,红壳蛋脂肪含量为10.1%,白壳蛋脂肪含量为9.8%。
结果表明,土鸡蛋脂肪含量最高,白壳蛋脂肪含量最低。
3. 维生素含量土鸡蛋维生素A含量为27.8μg/g,维生素E含量为1.5mg/g,维生素B1含量为0.14mg/g,维生素B2含量为0.18mg/g。
测蛋白质含量实验报告
测蛋白质含量实验报告测蛋白质含量实验报告蛋白质是生物体内最基本的组成部分之一,具有重要的生理功能。
因此,准确测定蛋白质含量对于生物学研究和食品科学等领域具有重要意义。
本文将介绍一种常用的测定蛋白质含量的方法——布拉德福法,并通过实验结果探讨其应用范围和局限性。
布拉德福法是一种基于蛋白质与染料结合的原理来测定蛋白质含量的方法。
该方法利用染料与蛋白质之间的亲和作用,通过测定染料的吸光度来间接测定蛋白质的含量。
在实验中,我们使用了布拉德福试剂和标准蛋白质溶液,以及待测样品。
首先,我们需要制备一系列不同浓度的标准蛋白质溶液。
通过将已知浓度的标准蛋白质与布拉德福试剂混合,形成一种混合物。
然后,利用分光光度计测定该混合物的吸光度,并绘制标准曲线。
标准曲线的横坐标为标准蛋白质的浓度,纵坐标为吸光度。
通过测定待测样品的吸光度,并利用标准曲线,我们可以计算出待测样品中蛋白质的浓度。
在实验过程中,我们发现布拉德福法具有一定的优点和局限性。
首先,该方法操作简单,结果可靠。
布拉德福试剂与蛋白质结合后会发生颜色变化,通过测定吸光度可以准确测定蛋白质的含量。
其次,该方法适用范围广。
无论是高浓度还是低浓度的蛋白质溶液,布拉德福法都可以进行测定。
此外,该方法对于不同种类的蛋白质也适用。
无论是动物蛋白质还是植物蛋白质,布拉德福法都可以准确测定其含量。
然而,布拉德福法也存在一些局限性。
首先,该方法对于某些特定的蛋白质可能不适用。
某些蛋白质的氨基酸组成可能会影响其与布拉德福试剂的结合情况,从而导致测定结果的不准确。
其次,该方法对于含有干扰物的样品可能会出现误差。
某些样品中可能存在与蛋白质结合的其他物质,这些物质可能会干扰布拉德福试剂与蛋白质的结合,导致测定结果的偏差。
综上所述,布拉德福法是一种常用的测定蛋白质含量的方法,具有操作简单、适用范围广的优点。
然而,该方法也存在一定的局限性,对于某些特定的蛋白质和含有干扰物的样品可能会出现误差。
蛋白质含量测定实验报告
蛋白质含量测定实验报告一、实验目的。
本实验旨在通过测定食物中蛋白质含量的方法,掌握蛋白质的测定原理和操作技能,加深对蛋白质的认识,为日常饮食提供科学依据。
二、实验原理。
本实验采用了比色法测定蛋白质含量。
比色法是根据蛋白质与双酚类物质在碱性条件下生成紫色化合物的原理,利用紫外可见光谱法测定其吸光度,从而计算出蛋白质的含量。
三、实验步骤。
1. 样品制备,将食物样品研磨成粉末状。
2. 蛋白质提取,取适量样品加入提取液,振荡离心,收集上清液。
3. 比色反应,将提取液与试剂混合,待反应完成后进行测定。
4. 吸光度测定,用紫外可见光谱仪测定吸光度。
5. 计算蛋白质含量,根据吸光度值计算出样品中蛋白质的含量。
四、实验结果。
经过实验测定,得出食物样品中蛋白质含量为Xg/100g。
五、实验分析。
通过本次实验,我们了解了蛋白质含量测定的原理和方法,掌握了比色法测定蛋白质含量的操作技能。
同时,也发现不同食物样品中蛋白质含量的差异,为我们科学合理地进行日常饮食提供了参考。
六、实验总结。
蛋白质是人体生命活动的重要组成部分,合理摄入足够的蛋白质对维持身体健康至关重要。
通过本次实验,我们不仅学会了测定蛋白质含量的方法,也增加了对蛋白质的认识,为我们的健康饮食提供了科学依据。
七、实验感想。
本次实验让我深刻认识到蛋白质在日常饮食中的重要性,也让我对科学实验有了更深的理解和体会。
希望通过今后的学习和实践,能够更好地运用所学知识,为自己和他人的健康提供帮助。
八、参考文献。
1. 《食品分析实验指导》,XXX,XXX出版社,XXXX年。
2. 《食品化学与分析》,XXX,XXX出版社,XXXX年。
以上就是本次蛋白质含量测定实验的报告内容,希望对大家有所帮助。
蛋白质含量的测定实验报告
蛋白质含量的测定实验报告一、实验目的。
本实验旨在通过测定食品中蛋白质含量的方法,掌握蛋白质含量的测定原理和操作技能,为食品质量的检验提供科学依据。
二、实验原理。
蛋白质含量的测定方法有多种,本实验采用的是经典的凯氏试剂法。
该方法是利用碱性铜溶液与蛋白质中的蛋白质结合成紫色沉淀,通过比色计算出蛋白质含量。
三、实验仪器和试剂。
1. 仪器,量筒、烧杯、比色皿、分析天平等。
2. 试剂,凯氏试剂、蛋白质标准品、硫酸铜溶液、碱液等。
四、实验步骤。
1. 样品制备,将待测样品称取适量,加入适量的硫酸铜溶液,摇匀后放置一段时间。
2. 沉淀分离,将沉淀转移到预先称量的滤纸上,用水洗涤至无碱性铜试剂残留。
3. 沉淀溶解,将沉淀与少量硫酸铜溶液混合,加入碱液溶解。
4. 比色计算,用比色皿盛放试液,通过比色计算出蛋白质含量。
五、实验结果。
通过实验测得样品的蛋白质含量为XXg/100g。
六、实验分析。
根据实验结果,可以初步判断样品的蛋白质含量符合标准要求。
但需要注意的是,蛋白质含量的测定结果受到多种因素的影响,如样品制备不均匀、操作不规范等,因此在实际应用中还需要结合其他分析方法进行综合判断。
七、实验结论。
本实验通过凯氏试剂法测定了样品的蛋白质含量,结果表明样品的蛋白质含量符合标准要求。
但仍需注意实验操作的规范性,以确保结果的准确性和可靠性。
八、实验总结。
通过本次实验,我们掌握了蛋白质含量的测定方法和操作技能,提高了对食品质量检验的能力,为今后的实验和工作积累了经验。
以上就是本次蛋白质含量的测定实验报告,希望对大家有所帮助。
食品中蛋白质的测定实验报告
食品中蛋白质的测定实验报告食品中蛋白质的测定实验报告引言:蛋白质是构成生物体的基本营养成分之一,对人体的生长发育和维持正常功能起着重要作用。
因此,准确测定食品中蛋白质含量对于评估食品的营养价值具有重要意义。
本实验旨在通过测定食品中蛋白质的含量,探究不同食品样品中蛋白质的差异。
材料与方法:1. 实验仪器:显微镜、离心机、分光光度计、电子天平等。
2. 实验试剂:硫酸铜溶液、碱式碘化钾溶液、稀硫酸溶液、双氯苯酚溶液等。
3. 样品准备:选取不同食品样品,如鸡蛋、牛奶、豆腐等。
4. 实验步骤:a. 样品预处理:将样品进行研磨或切碎,以增加样品与试剂的接触面积。
b. 蛋白质提取:将样品加入适量的稀硫酸溶液中,使用离心机进行离心分离。
c. 硫酸铜法测定:取一定量的蛋白质提取液,加入硫酸铜溶液和碱式碘化钾溶液,观察溶液颜色变化。
d. 分光光度计测定:将上述溶液转移到分光光度计中,测定其吸光度。
e. 通过标准曲线计算:制备不同浓度的蛋白质标准溶液,测定吸光度,并绘制标准曲线。
结果与讨论:通过以上实验步骤,我们成功测定了不同食品样品中蛋白质的含量,并绘制了标准曲线。
根据实验结果,我们发现不同食品样品中蛋白质含量存在显著差异。
首先,我们发现鸡蛋中蛋白质含量最高,这与其作为高蛋白食物的常识相符。
鸡蛋是一种优质蛋白质的来源,含有人体所需的多种氨基酸。
因此,适量食用鸡蛋可以提供人体所需的蛋白质,并满足身体的生理需求。
其次,牛奶中蛋白质含量也较高。
牛奶是一种常见的蛋白质来源,富含乳清蛋白和酪蛋白,具有较高的生物活性。
牛奶中的蛋白质对于人体的骨骼生长和免疫系统的健康起着重要作用。
因此,适量饮用牛奶可以提供必要的蛋白质和营养物质。
另外,豆腐中蛋白质含量也相对较高。
豆腐是一种常见的植物蛋白食品,富含大豆异黄酮和植物雌激素。
豆腐中的蛋白质对于人体的心血管健康和预防乳腺癌具有一定的保护作用。
因此,适量食用豆腐可以提供植物蛋白和其他营养物质。
【实验】蛋白质的定性实验报告
【关键字】实验蛋白质的定性实验报告篇一:蛋白质功能性质的检测实验报告华南农业大学实验报告专业班次13 食工 1 班题目蛋白质功能性质的检测姓名黄俊怡组别XX 日期通过本实验定性地了解蛋白质的主要功能性质。
二、实验原理蛋白质的功能性质一般是指能使蛋白质成为人们所需要的食品特征而具有的物理化学性质,即对食品的加工、贮藏、销售过程中发生作用的那些性质,这些性质对食品的质量和风味起着重要的作用。
蛋白质的功能性质与蛋白质在食品体系中的用途有着十分密切的关系,是开发和有效利用蛋白质资源的重要依据。
蛋白质的功能性质可分为水化性质、表面性质、蛋白质-蛋白质相互作用的有关性质三个主要类型,主要包括有吸水性、溶解性、保水性、分散性、粘度和粘着性、乳化性、起泡性、凝胶作用等。
三、实验材料、试剂和仪器1. 实验材料(1)2%蛋清蛋白溶液:取2g 蛋清加98ml 蒸馏水稀释,过滤取清夜。
(2)卵黄蛋白:鸡蛋除蛋清后剩下的蛋黄捣碎。
2. 试剂(1) (2) (3) (4) 3. 仪器(1) (2) (3) 刻度试管100ml 烧杯冰箱硫酸铵、饱和硫酸铵溶液氯化钠、饱和氯化钠溶液花生油酒石酸1四、实验步骤1. 蛋白质水溶性的测定在10ml 刻度试管中加入0.5ml 蛋清蛋白,加入5ml 水,摇匀,观察其水溶性,有无沉淀产生。
在溶液中逐滴加入饱和氯化钠溶液,摇匀,得到澄清的蛋白质的氯化钠溶液。
取上述蛋白质的氯化钠溶液3ml,加入3ml 饱和硫酸铵溶液,观察球蛋白的沉淀析出,再加入粉末硫酸铵至饱和,摇匀,观察清蛋白从溶液中析出,解释蛋清蛋白质在水中及氯化钠溶液中的溶解度以及蛋白质沉淀的原因。
2. 蛋白质乳化性的测定取0.5ml 卵黄蛋白于10ml 刻度试管中,加入 4.5ml 水和 5 滴花生油;另取5ml 水于10ml 刻度试管中,加入 5 滴花生油;再将两支试管用力振摇2~3min,然后将两支试管放在试管架上,每隔15min 观察一次,共观察4 次,观察油水是否分离。
食品中蛋白质的测定实验报告
食品中蛋白质的测定实验报告一、实验目的准确测定食品中蛋白质的含量,掌握常见的蛋白质测定方法及原理,评估食品的营养价值和质量。
二、实验原理蛋白质是含氮的有机化合物。
食品与浓硫酸和催化剂一同加热消化,使蛋白质分解,其中碳和氢被氧化为二氧化碳和水逸出,而样品中的有机氮转化为氨与硫酸结合成硫酸铵。
然后加碱蒸馏,使氨蒸出,用硼酸吸收后再以标准盐酸或硫酸溶液滴定。
根据标准酸消耗量可计算出蛋白质的含量。
三、实验材料与仪器(一)材料1、牛乳、鸡蛋、大豆等食品样品。
2、浓硫酸(比重 184)。
3、硫酸铜、硫酸钾。
4、 40%氢氧化钠溶液。
5、 2%硼酸溶液。
6、混合指示液:1 份 01%甲基红乙醇溶液与 5 份 01%溴甲酚绿乙醇溶液临用时混合。
7、 005mol/L 盐酸标准溶液。
(二)仪器1、消化炉。
2、定氮蒸馏装置。
3、凯氏烧瓶(500ml)。
4、容量瓶(100ml、500ml)。
5、移液管(10ml、20ml)。
6、酸式滴定管(50ml)。
四、实验步骤(一)样品消化1、准确称取 02 20g 固体样品或 2 5g 半固体样品或吸取 10 20ml 液体样品(约相当氮 30 40mg),移入干燥的 500ml 凯氏烧瓶中,加入 02g 硫酸铜、3g 硫酸钾及 20ml 浓硫酸,摇匀。
2、将凯氏烧瓶以 45°角斜支于有小孔的石棉网上。
用电炉小心加热,待内容物全部炭化,泡沫完全停止后,加强火力,并保持瓶内液体微沸,至液体呈蓝绿色澄清透明后,再继续加热 05h。
取下放冷,小心加 20ml 水,放冷后,移入 100ml 容量瓶中,并用少量水洗定氮瓶,洗液并入容量瓶中,再加水至刻度,混匀备用。
(二)蒸馏与吸收1、按图装好定氮蒸馏装置。
在水蒸气发生瓶内装水至约三分之二处,加甲基红指示液数滴及数毫升硫酸,以保持水呈酸性,加入数粒玻璃珠以防暴沸,加热煮沸水蒸气发生瓶内的水。
2、向接收瓶内加入 10ml 2%硼酸溶液及混合指示液 1 滴,并使冷凝管的下端插入液面下。
食品中氨基酸及蛋白质的测定(实验报告)
测定食品中的蛋白质---2013.3.25组员:***实验目的:(1)会测定食品中粗蛋白的含量。
(2)明确常见的食品蛋白质含量,以及测定原理。
实验原理:将被检样品加入浓硫酸,以硫酸铜,硫酸钾为催化剂共同加热消化食品中蛋白质分解为氨,并与硫酸结合成硫酸铵,通过碱化蒸馏,使氨分离出来,用硼酸吸收形成硼酸按后,再用盐酸标准溶液滴定,根据消耗的标准盐酸的体积,通过换算系数,可测定食品中蛋白质的含量。
实验仪器:凯氏烧瓶、可调式电炉、定氮蒸馏装置试剂:①硫酸铜CuSO4.5H2O ②硫酸钾③硫酸(密度为1.8149g/L)④40g/L 硼酸溶液⑤混合试剂;1g/L甲基红乙醇溶液与1g/L亚甲基蓝乙醇溶液,用时按2:1的比例混合。
实验步骤:数据处理:标定0.1000mol /L 盐酸标准溶液微量蒸馏按下式计算:X=⨯⨯⨯⨯-10010m c0.014)(0V V F 100⨯式中 X 食品中蛋白质质量分数,%;V 滴定试样时消耗盐酸标准滴定溶液的体积,mL;V 0 空白试验时消耗盐酸标准滴定溶液的体积mL ;C 盐酸标准滴定溶液的浓度; 0.014 氮的毫摩尔质量,g/mmol; m 试样的质量,g;F 氮换算蛋白质的系数。
注意事项:①本实验对蛋白质含量进行测定,因样品中常含有核酸、生物碱、含氮类脂以及含氮色素等非蛋白质的含氮化合物,故结果称为粗蛋白质含量。
②为减少实验误差,所有试剂溶液应用无氨蒸馏水配置。
③消化过程要不断转动凯氏烧瓶,以利于附着在烧瓶上的固体残渣被洗下,促进其消化;同时为防止造成氮损失,不要用强火,应保持缓和沸腾。
④样品中含脂肪或糖较多,消化过程中易产生大量泡沫,为防止泡沫外溢,在消化开始时用小火加热,并时时摇动,并可以加入少量辛醇、液体石蜡或硅油消泡剂,并控制热源强度。
⑤一般消化至呈透明后,继续消化30min即可,但对于含有特别难以氨化的氮化合物的样品,如含赖氨酸、组氨酸、色氨酸、酪氨酸或脯氨酸等时,呈较深绿色。
双缩脲法测定蛋白质含量实验报告
双缩脲法测定蛋白质含量实验报告实验目的:通过双缩脲法测定不同食品中蛋白质的含量,掌握蛋白质含量的测定方法,为食品质量检测提供参考。
实验原理:双缩脲法是一种测定蛋白质含量的方法,其基本原理是将蛋白质与双缩脲在酸性条件下发生酸水解反应,生成氨氮。
然后利用盐酸与氢氧化钠溶液将氨氮中和,最后用硫酸亚铁溶液滴定未反应的氢氧化钠,从而计算出蛋白质的含量。
实验步骤:1. 样品制备,将不同食品样品按照一定比例加入试管中,加入适量的双缩脲溶液和盐酸溶液,混合均匀后静置片刻。
2. 酸水解反应,将试管放入沸水中进行酸水解反应,控制时间和温度,使反应充分进行。
3. 氨氮的中和,取出试管,加入氢氧化钠溶液,使氨氮中和。
4. 滴定,用硫酸亚铁溶液滴定未反应的氢氧化钠,记录滴定消耗的体积。
5. 计算,根据滴定的体积计算出样品中蛋白质的含量。
实验结果:经过实验测定,不同食品样品中蛋白质含量分别为,样品A为12.5g/100g,样品B为9.8g/100g,样品C为15.2g/100g。
实验分析:通过实验测定得出的结果,可以看出样品C中蛋白质含量最高,样品B次之,样品A最低。
这与我们平常对这些食品的认知基本一致,也验证了实验方法的准确性和可靠性。
实验结论:双缩脲法是一种简便、准确的测定蛋白质含量的方法,通过本次实验,我们成功测定出不同食品中蛋白质的含量,并得出了合理的结论。
这为我们今后进行食品质量检测提供了参考和依据。
总结:本次实验通过双缩脲法测定了不同食品中蛋白质的含量,掌握了该方法的操作步骤和原理,提高了我们对蛋白质含量测定方法的理解和掌握程度。
同时,也增强了我们对食品质量检测的实际操作能力和实验数据分析能力,为今后的实验和科研工作打下了坚实的基础。
蛋白质的定量测定实验报告
蛋白质的定量测定实验报告一、实验目的掌握几种常见的蛋白质定量测定方法,如凯氏定氮法、双缩脲法、Folin酚试剂法(Lowry 法)和考马斯亮蓝法,并比较它们的优缺点和适用范围。
通过实验操作,提高实验技能和数据处理能力,培养严谨的科学态度。
二、实验原理1、凯氏定氮法蛋白质是含氮的有机化合物。
食品与浓硫酸和催化剂一同加热消化,使蛋白质分解,分解的氨与硫酸结合生成硫酸铵。
然后碱化蒸馏使氨游离,用硼酸吸收后再以硫酸或盐酸标准溶液滴定,根据酸的消耗量乘以换算系数,即为蛋白质含量。
2、双缩脲法双缩脲(NH₂CONHCONH₂)在碱性溶液中能与 Cu²⁺作用形成紫红色的络合物。
蛋白质分子中含有多个肽键,其结构与双缩脲相似,也能与 Cu²⁺发生双缩脲反应。
在一定条件下,其颜色深浅与蛋白质浓度成正比,可用比色法进行测定。
3、 Folin酚试剂法(Lowry 法)蛋白质中的肽键在碱性条件下与铜离子反应生成复合物,然后该复合物还原 Folin酚试剂中的磷钼酸和磷钨酸,产生蓝色化合物。
蓝色的深浅与蛋白质含量成正比,可用比色法进行测定。
4、考马斯亮蓝法考马斯亮蓝 G-250 在游离状态下呈红色,当它与蛋白质结合后变为蓝色。
在一定范围内,其颜色的深浅与蛋白质浓度成正比,可用比色法进行测定。
三、实验材料与仪器1、实验材料标准蛋白质溶液(如牛血清白蛋白)、待测蛋白质溶液、各种试剂(如硫酸铜、氢氧化钠、硫酸、硼酸等)。
2、实验仪器凯氏定氮蒸馏装置、分光光度计、离心机、移液器、容量瓶、试管等。
四、实验步骤1、凯氏定氮法(1)消化:准确称取一定量的样品(如 05g)放入干燥的凯氏烧瓶中,加入硫酸铜、硫酸钾和浓硫酸,摇匀后在通风橱中加热消化,直至溶液呈透明的蓝绿色。
(2)蒸馏:消化液冷却后,加入适量水,转移至蒸馏装置中,加入氢氧化钠溶液进行蒸馏,使氨逸出。
(3)吸收与滴定:用硼酸溶液吸收蒸馏出的氨,然后用盐酸标准溶液滴定,直至溶液由蓝色变为微红色,记录盐酸的用量。
食品蛋白测定实验报告
一、实验目的1. 掌握凯氏定氮法测定蛋白质的原理和操作技术。
2. 熟悉样品处理、消化、蒸馏、滴定及蛋白质含量计算等实验步骤。
3. 通过实验,了解食品中蛋白质含量的重要性,以及如何保证实验结果的准确性。
二、实验原理凯氏定氮法是一种经典的蛋白质测定方法,其原理基于蛋白质中的氮含量。
具体步骤如下:1. 样品与浓硫酸、硫酸铜、硫酸钾等试剂混合,加热消化,使蛋白质分解,产生的氨与硫酸结合生成硫酸铵。
2. 将消化液碱化,蒸馏使氨游离,用硼酸吸收。
3. 最后用盐酸标准溶液滴定硼酸溶液,根据消耗的酸量计算出蛋白质含量。
三、实验材料与仪器1. 实验材料:鸡蛋、牛奶、面粉等食品样品。
2. 仪器:凯氏定氮装置、电子天平、滴定管、烧杯、试管等。
四、实验步骤1. 样品处理:准确称取一定量的食品样品,加入适量水,搅拌均匀。
2. 消化:将处理好的样品与浓硫酸、硫酸铜、硫酸钾等试剂混合,放入凯氏烧瓶中,加热消化至溶液呈透明状态。
3. 蒸馏:将消化液转移至蒸馏装置中,加热蒸馏,使氨游离并进入硼酸吸收液中。
4. 滴定:用盐酸标准溶液滴定硼酸吸收液,根据消耗的酸量计算出蛋白质含量。
五、实验结果与分析以鸡蛋样品为例,实验结果如下:| 样品名称 | 样品质量 (g) | 消化液体积 (mL) | 滴定液体积 (mL) | 蛋白质含量 (%) || :-------: | :-----------: | :--------------: | :--------------: | :--------------: || 鸡蛋 | 1.000 | 10.00 | 20.00 | 12.5 |根据实验结果,该鸡蛋样品的蛋白质含量为12.5%。
六、实验讨论1. 实验过程中,样品的处理和消化是关键步骤,需要严格控制反应条件,以确保实验结果的准确性。
2. 蒸馏过程中,需要注意控制蒸馏速度,避免氨气逸出,影响实验结果。
3. 滴定过程中,需要准确读取滴定液的消耗量,并注意滴定终点,以确保实验结果的可靠性。
食品生化实验报告
一、实验目的1. 了解食品中常见的生化成分及其生理功能。
2. 掌握食品生化实验的基本操作方法。
3. 学会运用生化方法检测食品中的主要成分。
二、实验原理食品生化实验是研究食品中各种生化成分的组成、性质、生理功能及其相互关系的一门科学。
本实验主要检测食品中的蛋白质、脂肪、碳水化合物、维生素等成分。
三、实验材料与仪器1. 实验材料:鸡蛋、牛奶、面粉、水果、蔬菜等。
2. 实验仪器:电子天平、显微镜、离心机、紫外可见分光光度计、恒温水浴锅、滴定管等。
四、实验方法1. 蛋白质测定(1)原理:利用双缩脲试剂与蛋白质中的肽键发生反应,产生紫色复合物,根据紫色复合物的吸光度值判断蛋白质含量。
(2)步骤:①称取1g鸡蛋清,加入9mL蒸馏水,搅拌均匀。
②取2mL上述溶液,加入2mL双缩脲试剂,摇匀,室温放置5min。
③用紫外可见分光光度计在波长540nm处测定吸光度值。
2. 脂肪测定(1)原理:利用索氏抽提法提取食品中的脂肪,再通过比色法测定脂肪含量。
(2)步骤:①称取2g牛奶,加入10mL石油醚,用索氏抽提器提取脂肪。
②将提取的脂肪用蒸馏水洗至无色,干燥后称重。
③根据脂肪重量计算脂肪含量。
3. 碳水化合物测定(1)原理:利用斐林试剂与碳水化合物中的还原糖反应,产生红色沉淀,根据沉淀颜色深浅判断还原糖含量。
(2)步骤:①称取1g面粉,加入10mL蒸馏水,搅拌均匀。
②取2mL上述溶液,加入2mL斐林试剂,水浴加热5min。
③观察沉淀颜色深浅,判断还原糖含量。
4. 维生素测定(1)原理:利用紫外可见分光光度计测定食品中维生素的含量。
(2)步骤:①称取1g水果,加入10mL蒸馏水,搅拌均匀。
②用紫外可见分光光度计在特定波长下测定吸光度值。
③根据吸光度值计算维生素含量。
五、实验结果与分析1. 蛋白质含量:鸡蛋清中蛋白质含量为8.6%,牛奶中蛋白质含量为3.4%。
2. 脂肪含量:牛奶中脂肪含量为3.8%,水果中脂肪含量为0.2%。
食品中蛋白质的测定实验报告
食品中蛋白质的测定实验报告实验目的:通过实验学习如何利用生化方法来测定食品中蛋白质含量。
实验原理:蛋白质是由氨基酸组成的生物大分子,可被各种生物化学方法检测。
其中,最广泛应用的是利用蛋白质与双糖试剂(如低氮量蒽醌磺酸试剂)在碱性环境下反应生成深蓝色化合物的方法。
通过比色法可以计算出样品中蛋白质的含量。
实验材料:1. 食品样品:鸡蛋、牛奶、豆浆、面粉。
2. 二氧化碳3. 磷酸盐缓冲液4. 双糖试剂5. 氢氧化钠6. 氢氧化钾7. 酒精8. 聚丙烯薄膜实验步骤:1. 对各样品进行热处理。
将样品分别加热至100℃,保持5 min,使蛋白质变性,有利于比色反应的进行。
2. 取2 mL 10% 去离子水溶液加入样品管中,称量0.1 g 标准牛肉蛋白,加水调至2 mL,作为对照组。
3. 取样品管中的样品和对照组的各管加入2 mL 0.1 M 磷酸盐缓冲液,加入10 mL 双糖试剂,混合均匀,放置在水浴中加热至70 ℃,保持几分钟直至出现深蓝色。
4. 将反应液立即放入冰水中降温,冷却后,用0.1 M 氢氧化钠稀释到标线。
样品管和对照组的吸光度在660 nm 的波长下测定。
实验结果:样品鸡蛋牛奶豆浆面粉吸光度 0.412 0.779 1.239 0.573蛋白质含量 11.11 g/100 g 3.96 g/100 g 6.52 g/100 g 7.63 g/100 g实验结论:通过实验可以得出不同食品中蛋白质的含量不同。
其中豆浆中蛋白质含量最高,达到6.52 g/100 g,而牛奶中蛋白质含量最低,只有3.96 g/100 g。
此外,通过与对照组的比较,可以得出样品中蛋白质含量的相对浓度,有利于制定膳食策略。
实验注意事项:1. 样品需进行热处理,使蛋白质变性,有利于比色反应的进行。
2. 坚持标准操作规范,避免污染。
3. 实验中需严格控制实验条件,使实验结果更加准确。
4. 实验后及时清洗仪器和玻璃仪器,保持卫生。
蛋白质含量的测定实验报告
蛋白质含量的测定实验报告蛋白质含量的测定实验报告引言:蛋白质是生命体内最基本的组成部分之一,对于维持生命活动具有重要作用。
因此,准确测定蛋白质含量对于生物学、医学等领域的研究具有重要意义。
本实验旨在通过一系列的实验步骤,准确测定样品中蛋白质的含量。
实验材料和方法:1. 实验材料:- 样品:选择具有高蛋白含量的食品样品,如鸡蛋、牛奶等。
- 试剂:含有蛋白质的测定试剂盒,如BCA试剂盒。
- 标准品:含有已知蛋白质含量的标准品。
2. 实验步骤:1) 样品预处理:将样品加热至一定温度,使蛋白质变性,以便更好地释放出蛋白质。
2) 标准曲线制备:取一系列已知浓度的标准品,按照试剂盒说明书的要求进行处理,制备标准曲线。
3) 样品处理:将经过预处理的样品与试剂盒中的试剂混合,按照说明书的要求进行反应。
4) 光度测定:使用分光光度计测定反应液的吸光度,并与标准曲线进行比较,计算出样品中蛋白质的含量。
结果与讨论:通过实验测定,我们得到了样品中蛋白质的含量。
根据实验数据,我们可以得出以下结论:1. 样品与标准品的比较:通过与标准品的比较,我们可以确定样品中蛋白质的相对含量。
如果样品的吸光度与标准品相近,说明样品中蛋白质含量较高;反之,如果吸光度较低,则说明样品中蛋白质含量较低。
2. 实验误差的影响:在实验过程中,存在一定的误差。
这些误差可能来自于样品的处理过程、试剂的质量以及实验操作的技巧等方面。
因此,在进行实验时,需要注意控制这些误差,以保证测定结果的准确性和可靠性。
3. 实验结果的应用:蛋白质的测定结果可以应用于许多领域。
例如,在食品工业中,可以通过测定食品样品中的蛋白质含量来评估其营养价值;在医学研究中,可以通过测定体液中的蛋白质含量来诊断疾病。
结论:通过本实验,我们成功地测定了样品中蛋白质的含量。
在实验过程中,我们掌握了一系列的实验技巧和操作步骤,并了解了蛋白质测定的原理和应用。
蛋白质的测定对于生物学和医学等领域的研究具有重要意义,通过准确测定蛋白质含量,我们可以更好地理解生命活动的机制,促进科学的发展和进步。
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1.目的
掌握凯氏定氮法测蛋白质的原理、操作、条件、注意事项。
2.原理
蛋白质是含氮有机化合物。
食品与硫酸和催化剂一同加热消化,使蛋白质分解。
分解的氨与硫酸结合生成硫酸铵。
然后碱化蒸馏使氨游离,用硼酸吸收后在以硫酸或盐酸标准溶液滴定,根据酸的消耗量计算含氮量再乘以换算系数,即为蛋白质含量。
3.试剂
3.1浓硫酸、硫酸铜、硫酸钾,所有试剂均用不含氮的蒸馏水配制
3.2混合指示液
1份(1g/L)甲基红乙醇溶液与5份1g/L溴甲酚氯乙醇溶液临用时混合。
也可用2份甲基红乙醇溶液与1份1g/L次甲基蓝乙醇溶液临用时混合。
3.3氢氧化钠溶液(400g/L)
3.4标准滴定溶液
硫酸标准溶液[c(1/2H2SO4)=0.0500mol/L]或盐酸标准溶液[c(HCl)
0.0500mol/L]
3.5硼酸溶液(20g/L)
4.仪器
定氮蒸馏装置
5.样品
全蛋(2.47g)
6.操作
6.1样品处理
准确称取2—5g半固体样品,小心移入干燥洁净的500mL凯氏烧瓶中,然后加入研细的硫酸铜0.5g,硫酸钾10g和浓硫酸20mL,轻轻摇匀后于瓶口放一小漏斗,将瓶以45°角斜放于加有石棉网的电炉上,小火加热,待内容物全部炭化后,泡沫完全消失后,加强火力,并保持瓶内液体微沸,至液体呈蓝绿色呈请透明后,再继续加热0.5h,取下放冷,慢慢加入20mL水。
放冷后,移入100mL容量瓶中,并用少量水洗定氮瓶,洗液并入容量瓶中,再加水至刻度,混匀备用。
取与处理样品相同的硫酸铜、硫酸钾、硫酸按同一方法做试剂空白试验。
6.2连接装置
装好定氮装置,于水蒸气发生器内装水至2/3处,加甲基红指示剂数滴及少量硫酸,以保持水呈酸性,加入数滴玻璃珠以防暴沸,用调压器控制,
加热至水沸腾。
6.3蒸馏、吸收及滴定
向接收瓶(锥形瓶)内加入10mL20g/L硼酸溶液及混合指示剂1-2滴,并使冷凝管的下端插入液面下。
用移液管移取10.00mL样品消化稀释液有小漏斗室流入反应室,在将10mL 400g/L氢氧化钠溶液倒入碱液管中,提起玻璃塞使其缓缓流入反应室,并加水于小漏斗中以防止漏气。
开始蒸馏。
蒸气通入反应室使氨通过冷凝管而进入接收瓶内,蒸馏5min,移动接收瓶,是冷凝管下端离开液面,再蒸馏1min,然后用少量的水冲洗冷凝管下端外部。
取下接收瓶,以0.05 mol/L盐酸标准溶液滴定至由蓝色变为微红为终点,记录盐酸溶液用量。
同时吸取10.00mL空白消化液按以上操作为空白实验,记录空白试验消耗盐酸标准溶液的体积。
7.数据记录
7.1原始数据
7.2可疑值弃留
实验获得的数据均合理,无可疑值。
7.3整理数据
精滴/mL
粗滴/mL
平行试验1 平行试验2 平行试验3 空白试验
5.90 5.30 5.50 5.60 0.45
8.计算
(V标-V0)×Ca×0.014
X = ———————————— ×100×K
m样/V定×V测
式中:X—样品中蛋白质含量,%;
V标—主试验(测定用液)消耗硫酸或盐酸标准溶液的体积,mL;
V0—空白试验消耗硫酸或盐酸标准溶液的体积,mL;
Ca—硫酸或盐酸标准溶液的物质的量浓度,mol/L;
0.014—氮的物质的量质量×103,g/mol;
m样—样品的质量(体积),g(mL);
V定—消化液定容体积,mL;
V测—消化液参加测定(测定用液)的体积,mL;
K—氮换算为蛋白质的系数,蛋白质中的氮含量一般为15~17.6%,按16%计算乘以6.25即为蛋白质,乳制品为6038,面粉为5.70,玉米、高粱
为6.24,花生为5.46,米为5.95,大豆及其制品为5.71,肉或肉制品
为6025,大麦、小米、燕麦、裸麦为5.83,芝麻、向日葵为5.30。
9.结果
V标=(V1+V2+V3)/ 3 =(5.30+5.50+5.60)/ 3 = 5.47
(V标-V0)×Ca×0.014 (5.47mL-0.45mL)×0.0500mol/L×0.014 X =——————————×100×K=—————————————————m样/V定×V测 2.47g/100mL×10mL ×100×6.25=8.89%
10.结果可靠性分析
10.1精密度
平均偏差=(0.17+0.03+0.13)/3=0.11
相对平均偏差=(0.11/5.47) ×100%=0.02%
10.2误差分析
10.2.1根据实际操作情况分析误差的产生原因
在做空白实验前可能由于定氮瓶未完全清洗干净,有之前的样液残留或者之前样液产生的氨气未排空而导致空白实验消耗的标准溶液过多,使实验结果偏低。
10.2.2误差的方向性
本实验产生误差为负误差。
11.结论
三次平行试验均吸取10mL消化液,产生的氨气经吸收后以0.05 mol/L盐酸标准溶液滴定,消耗盐酸浓度依次为5.30mL、5.50mL、5.60mL(相对平均偏差为0.02%)。
取三者平均值5.47mL计算得样品蛋白质含量为8.89%。
由于空白实验前定氮瓶未完全清洗干净,有之前的样液残留或之前样液产生的氨气未排空导
致空白实验消耗的标准溶液过多,结果偏低,产生误差为负误差。
12.思考题
12.1为什么叫粗蛋白?
样品中常含有核酸、生物碱、含氮类脂、卟啉以及含氮色素等非蛋白质的含氮化合物,非纯蛋白质,故称粗蛋白。
12.2试剂及用途?
浓硫酸:消化、氧化剂
硫酸铜:催化剂、指示消化终点
硫酸钾:使消化温度升高到400℃
混合指示剂:指示滴定终点
氢氧化钠溶液:用于蒸馏,使氨气溢出。
硼酸溶液:吸收液,将氨气固定于吸收液中,形成硼酸铵。
硫酸标准溶液或盐酸标准溶液:用于滴定,与硼酸铵反应
12.3各步终点?
消化终点:溶液由黑色变为蓝绿色澄清透明。
蒸馏终点:凯氏瓶内溶液变为深蓝色或产生黑色沉淀,然后用表面皿接几滴馏出液,用奈氏试剂检查,如无红棕色物生成,表示蒸馏完毕。
滴定终点:用盐酸标准溶液直接滴定至溶液由蓝色变为微红色即为终点。
12.4注意事项?
移液管不可交叉使用,防止酸碱试剂污染;蒸馏装置不能漏气;消化时,火力由弱到强,烧瓶倾斜呈45°;瓶口放一长颈漏斗;蒸馏与吸收,先进行吸收操作,冷凝管末端必须插入吸收液中,然后再进行蒸馏的操作;蒸馏结束时,将管离开液面,蒸馏1min,再用少量蒸馏水洗管外壁;滴定,先粗滴,后精滴。
12.5叙述整个实验中有关颜色的变化,为什么?
消化终点:由黑色变为蓝绿色澄清透明。
因为浓硫酸具有脱水性和氧化性,使有机物炭化呈黑色,待有机物全部被消化完后,不再有硫酸亚铜生成,溶液呈现清澈的蓝绿色。
蒸馏终点:凯氏瓶内溶液变为深蓝色或产生黑色沉淀。
加入氢氧化钠后,与硫酸铜反应生成氢氧化铜沉淀,在高温下分解呈氧化铜,产生黑色沉淀。
滴定终点:用盐酸标准溶液直接滴定至溶液由蓝色变为微红色即为终点。
硼酸铵是强碱弱酸盐,呈碱性,混合指示剂会显蓝色。
用盐酸滴定后,溶液呈酸性,因此指示剂显微红色。