核酸染色剂SYBR—Gold染色特性分析

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ｗａｓｍｕｃｈｍｏｒｅｓｅｎｓｉｔｉｖｅｔｈａｎＥＢｔＯｄｅｔｅｃｔｄｏｕｂｌｅｓｔｒａｎｄＤＮＡ．ＢｕｔｔｈｅｅｆｆｅｃｔｏｆｒｅｓｏｌｕｔｉｏｎａｎｄｔｈｅｍｏｂｉｌｉｔｙｏｆＤＮＡ
摘要：目的
检测ＳＹＢＲ — Ｇｏｌｄ前染色与后染色的优缺点。方法
采用前染色、后染色的方法使用ＳＹＢＲ — Ｇｏｌｄ对
双链ＤＮＡ进行染色检测，ＥＢ染色作为参照，琼脂糖凝胶电泳为检测手段，凝胶成像系统拍照观察。结果ＳＹＢＲ－Ｇｏｌｄ其前染色与后染色对于双链ＤＮＡ检测能力均强于ＥＢ染色，但是ＳＹＢＲ－Ｇｏｌｄ预混凝胶前染色其分辨效果及ＤＮＡ迁移速度受到ＤＮＡ浓度的影响；ＳＹＢＲ－Ｇｏｌｄ预混样品的前染色方式对于目的基因的判读误差较大。结论ＳＹＢＲ — Ｇｏｌｄ不适合预混样品前染色，ＤＮＡ样品浓度过大（大于２５０ｎｇ）不适合预混凝胶前染色，ＳＹＢＲ — Ｇｏｌｄ后染色是理想的染色方式。关键词：ｓＹＢＲ．Ｇｏ１ｄ；溴化乙锭；核酸染色剂；琼脂糖凝胶电泳
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ＭｏｌｅｃｕｌａｒＢｉｏｌｏｇｙＴｅａｃｈｉｎｇ．ＸｕｚｈｏｕＭｅｄｉｃａｌＣｏｌｌｅｇｅ，Ｘｕｚｈｏｕ，Ｊｉａｎｇｓｕ２２１００２，Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：ＯｂｊｅｃｔｉｖｅＩｔｉｓａｎａｌｙｓｅｔｗｏｍｅｔｈｏｄｆｏｒｓｔａｉｎｉｎｇＤＮＡｆｒａｇｍｅｎｔｓｉｎａｇａｒｏｓｅｗｉｔｈＳＹＢＲ— Ｇｏｌｄ．ＭｅｔｈｏｄｓＩｔ
一
１９４ Hale Waihona Puke Baidu
文章编号：１００７ —４２８７（２０１５）０２ —０１９４—０５
核酸染色剂ＳＹＢＲ — Ｇｏｌｄ染色特性分析
金磊
（徐州医学院医学生物化学与分子生物学教学实验中心，江苏徐州２２１００２）
中图分类号：Ｒ３９２．３文献标识码：Ａ
ＴｈｅＣｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎｏｆＳＹＢＲＧｏｌｄｎｕｃｌｅｉｃａｃｉｄｄｙｅＪＩＮＬｅｉ．（ＥｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌｃｅｎｔｅｒｆｏｒＭｅｄｉｃａｌＢｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙａｎｄ