色谱分析中归一化法、外标法、内标法的区别

色谱分析中面积归一化法、外标法、内标法适用范围及优缺点简介

在色谱分析中，即我们常用的高效液相色谱分析（HPLC）和气相色谱分析（GC）分析中，进行分析时，通常采用三种方法：面积归一化法、外标法、内标法。这三种方法的适用范围及各自的优缺点是什么呢在这里简单做一介绍。

1、归一化法。即在一定分析条件下，样品经过直接溶解，过滤等操作以后,直接进分析仪器检测，得到色谱图。通常用于粗略检查样品中的各出峰成分含量，用于定性和粗略的定量。

优点：与进样量准确度无关、与仪器和分析条件有关。

缺点：a.在此条件之下，所有有效组分必须出峰，且所有组分必须在一个分析周期内流出色谱峰；

b.定量计算必须先知道各成分的校正因子，校正因子的求出较麻烦。

2、易挥发性的油脂类化合物和混合性气体、液体，可用GC归一化法进行定量检测。例如食用油里面各成分的含量测定。

2、外标法。用待测组分的纯品作为对照物质，以对照物质和样品中待测组分的响应信号（即峰面积大小）相比较进行定量的方法。优点：简便；只关注待测成分出峰，不需要所有成分出峰。

缺点：a.必须有被测组分的纯品作为标准对照物；

b.此方法准确性受进样重复性和实验条件稳定性的影响。

3、内标法。选择样品中不含有的纯物质作为内标物加入待测样

品中，以待测组分和内标物的响应信号（即峰面积大小）对比，对待测组分定量的方法。

优点：a.是一种比较准确的定量方法；

b.定量结果与进样量重复性无关（在色谱柱不超载范围内）；

c.只需要内标物与被测物出峰，达到一定的分离度即可；

d.常用于样品的GC定量检测以及微量成分含量检测；

缺点：配置较麻烦；内标物需要跟待测组分在同样条件下出峰，且分离度较好，所以选择合适的内标物比较困难。