外部质控血清的制备和保存

外部质控血清的制备和保存

1、质控血清的制备和保存（以ELISA试验检测HIV抗体为例）

在每次实验中必须包含有内部对照质控血清和外部对照质控血清。

（1）、内部对照质控血清指试剂盒内提供的阳性和阴性对照血清。内部对照是质量控制的基础。每一次检测必须使用内部对照，而且只能在同批号的试剂盒中使用。

（2）、外部对照质控血清是为了监控检测的重复性和稳定性以及试剂盒批间或孔间差异而由实验室设置的一套对照血清，包括强阳性、弱阳性和阴性对照血清。也可以只设置一个弱阳性对照，以该试剂盒临界值（Cut-off）的2～3倍为宜。

2、外部对照质控血清的制备

HIV抗体阳性和阴性血清，56℃30min灭活，3000r/min，离心15min。弱阳性对照可以用HIV抗体阴性血清梯度稀释HIV抗体强阳性血清并标定后得到。按一年使用量配制（可加入不影响检测结果的防腐剂）用0.2μm滤膜过滤除菌。

3、外部对照质控血清的保存

（1）、按一周实验用量分装、分类、标记、封口、-20℃冻存于非自动除霜冰箱中。

（2）、外部对照血清不可反复冻融，一旦融化后应该存放2 8℃，供一周内使用。

4、外部对照质控血清的使用

每一次实验必须使用外部对照质控血清，以便监控实验的重复性和稳定性。同时可以了解各批试剂盒的批间或孔间差异，绘制质量控制图。

5、外部对照质控物的质量要求

质控物的管间或瓶间变异必须小于监测系统预期的变异（CV＜20%＝，并且质控物的成分应在稳定状态中。质控物应无菌，并不含有影响ELISA反应的防腐剂。