乙型肝炎病毒抗体诊断(胶体金法SOP)标准操作程序1

乙型肝炎病毒抗体诊断（胶体金法SOP）
测定标准操作程序
编写者：宿金涛
日期：2012年3月1日
一. 原理：乙型肝炎病毒表面抗原、表面抗体、e抗原、e抗体、核心抗体检测试剂盒（胶体金法）采用胶体金免疫层析分析技术、将五个诊断意义相关的试剂通过一个包装组合在一起，同时进行乙型肝炎病毒五项标志物的检测，在不影响各自性能的情况下，便于客户的储存和使用。

HBsAg检测试剂采用双抗体夹心法，试剂含有被事先固定于膜上测试区(T)的抗体。

测试时，标本滴入试剂加样处，标本与预包被的胶体金颗粒结合的抗HBsAg抗体反应。

然后，混合物随之在毛细效应下向上层析。

如是阳性，胶体金抗体在层析过程中先于标本中的HBsAg结合，随后家何物会被固定在膜上的抗HBsAg抗体结合，在测试区内（T）会出现一条紫红色带。

这条带是HBsAg抗体-HBsAg-HBsAg抗体金标粒子的复合物在膜上结合形成的。

如是阴性，则测试区内（T）将没有紫红色带。

无论HBsAg是否存在于标本中，一条紫红色带都会出现在指控内（C）。

质控区内（C）所显现的紫红色条带是判定是否有足够标本，层析过程是否正常的标准，同时也作为试剂的内控标准。

HBsAb检测试剂双抗原夹心法，试剂含有被事先固定于膜上测试区（T）的乙肝表面抗体。

测试时，标本滴入试剂加样处，标本与预包被的胶体金颗粒结合的HBsAg反应。

然后，混合物随之在毛细效应下向上层析。

如是阳性，胶体金抗体在层析过程中先于标本中的HBsAg结合，随后结合物会被固定在膜上的HBsAg抗体结合，在测试区内(T)会出现一条紫红色条带。

这条带是HBsAg-HBsAb-HBsAg金标粒子的复合物在膜上结合形成的。

如果阴性，则测试区内(T)将没有紫红色条带。

无论HBsAg是否存在于标本中，一条紫红色条带都会出现在质控区内(C)。

质控区内(C)所显现的紫红色条带是判定是否有足够标本，层析过程是否正常的标准，同时也作为试剂的内控标准。

HBeAg检测试剂采用双抗体夹心法，试剂含有被事先固定于膜上测试区（T）的乙肝e抗体。

测试时，标本滴入试剂加样处，标本与预包被的胶体金颗粒结合的HBeAg抗体反应。

然后，混合物随之在毛细效应下向上层析。

如是阳性，胶体金抗体在层析过程中先于标本中的HBeAg结合，随后结合物会被固定在膜上的HBeAg抗体结合，在测试区内(T)会出现一条紫红色条带。

这条带是HBeAg抗体-HBeAg-HBeAg抗体金标粒子的复合物在膜上结合形成的。

如果阴性，则测试区内(T)将没有紫红色条带。

无论HBeAg抗体是否存在于标本中，一条紫红色条带都会出现在质控区内(C)。

质控区内(C)所显现的紫红色条带是判定是否有足够标本，层析过程是否正常的标准，同时也作为试剂的内控标准。

HBeAb,HBcAb检测试剂才有竞争抑制法，试剂含有被事先固定于膜上测试区(T)的抗体。

测试时，血清或血浆标本滴入试剂加样处，随之标本在毛细效应下向上层析。

如标
本中含有相应的抗体，则同膜上测试区(T)的抗体竞争与预包被在金标粒子的相应抗体反应。

如果标本中没有相应抗体，预包被在金标粒子的复合物的相应抗原则同膜上测试区(T)的抗体全部结合。

阳性标本，测试区内(T)将没有紫红色条带，阴性标本，测试区内(T)将会出现明显的紫红色条带。

无论相应的抗体是否存在于标本中，一条紫红色条带都会出现在质控区内(C)。

质控区内(C)所显现的紫红色条带是判定是否有足够标本，层析过程是否正常的标准，同时也作为试剂的内控标准。

二. 试剂：英科新创乙肝五项检测卡（胶体金法）。

规格为25人份/盒。

产品标准编号：YZB/国0378-2009。

三.操作步骤：
1、将待测标本从储存条件下取出，平衡至室温（18－25℃）并编号。

2、将胶体金测试卡从包装盒中取出，打开铝箔包装袋，平置于台面上。

编号（与样品相对应）；
3、用塑料滴管加2-3滴样本血清或血浆，加入试剂板的五个加样孔。

4、等待紫红色条带的出现，测试结果应在测定开始后20分钟开始读取。

30分钟后判断无效。

四. 参考范围：正常人为阴性。

五、结果判定
HBsAg HBsAb HBeAg
阳性：两条紫红色条带出现。

一条位于测试区（T）内，另一条位于质控区（C）。

阳性结果表明：标本中含有待测物质。

阴性：仅质控区（C）出现一条紫红色条带，在测试区（T）内无紫红色条带出现。

阴性结果表明：标本中检测不出待测物质
无效：质控区（C）未出现紫红色条带，表明不正确的操作过程或试剂已变质损坏。

在此情况下，应再次仔细阅读说明书，并用新的试剂重新测试。

如果问题仍然存在，应立即停止使用此批号产品，并与当地供应商联系。

注意：测试区（T）内的紫红色条带可显现出颜色深浅的现象。

但是，在规定的观察时间内，不论该色带颜色深浅，即使只有非常弱的色带也应判定为阳性结果。

HBeAb HBcAb
阳性：仅质控区（C）出现一条紫红色条带，在测试区（T）内无紫红色条带出现。

阳性结果表明：标本中含有待测物质。

阴性：两条紫红色条带出现，一条位于测试区（T）内，另一条位于质控区（C）。

阴性结果表明：标本中检测不出待测物质。

无效：质控区（C）未出现紫红色条带，表明不正确的操作过程或试剂已变质损坏。

在此情况下，应再次仔细阅读说明书，并用新的试剂重新测试。

如果问题仍然存在，应立
即停止使用此批号产品，并与当地供应商联系。

六．临床意义：
乙肝肝炎病毒引起的感染带来了严重的公共卫生问题。

母婴传播、性传播和血液传播是最主要的传播途径。

尽早的发现感染可以有效的减少疾病的传播。

乙肝五项检测卡（胶体金法）定性检测人血清、血浆中的乙肝表面抗原、表面抗体、e抗体、核心抗体、用于乙型肝炎病毒感染的辅助诊断。

七. 病人及样本要求：
1、本品适用于血清、血浆样本，血浆样本对临床常用抗凝剂（EDTA、肝素、枸椽酸钠）无要求；样本的采集须遵循常规的医疗样本的采集方法并遵守相关的医学规定。

2、采集静脉血样本必须在无菌条件下操作，并避免样品溶血。

3、如果血清和血浆样品收集后7天内检测，样品须放在2-8℃保存；大于7天须
－20℃以下冷冻保存。

4、溶血、粘稠及高脂标本不适于本试剂。

含特珠物质（如强氧化剂）的标本可能
会导致检测结果不稳定，在检测前须清除。

八. 注意事项：
1、检测必须符合实验室管理规范和物物安全守则的规定，操作时必须戴手套、穿工
作服、严格健全和执行消毒隔离制度。

2、乙型肝炎病毒表面抗原、表面抗体、e抗原、e抗体、核心抗体检测试剂盒（胶
体金法）适用于测试血清或血浆标本，其他标本或溶液进行检测可能出现异常结果。

3、由于在技术上和操作上可能出现的失误，同时也由于标本中存在干扰物质，检测
结果有可能错误。

4、请保证适量的标本用于检测，过多或过少的标本量都有可能导致结果的偏差。

5、测试结果应在测定开始后20分钟读取，30分钟后判定无效。

6、本产品为目视读取结果，为保证判定结果的正确，请勿在光线昏暗处对结果进行
判读。

7、试剂可在室温下保存，谨防受潮。

低温下保存的试剂应平衡到室温方可使用。

8、试卡从铝箔袋中取出后，应尽快进行实验，置于空气中时间过长，卡内的纸条会
受潮失效。

9、实验环境应保持一定温度，避风。

避免在过高温度下进行实验。

10、检测线颜色的深浅程度与样品中被测物的浓度没有必然联系。

11、所用样品、废弃物等都应按传染物处理。

九、英科新创乙肝五项检测卡说明书。