生物制药工艺学整理

1．生物制药：以生物材料为原料或用生物技术、方法制造的药物。

2．杂交育种：将两个基因型不同的菌株经过吻合或接合，使遗传物质重新组合，从中分离和筛选出具有新性状的过程。

3．葡萄糖效应：培养基中的葡糖糖的浓度过高，会加快菌体的代谢，使培养基中的溶解的氧不能满足有氧呼吸的需要，使葡萄糖的代谢进入不完全氧化途径，产生酸性代谢产物，使pH降低，遏止某些产物的生物合成酶，这种现象叫做葡萄糖效应。

4．浓差极化：当溶剂透过膜而溶质留在膜上时，它使得膜面上的溶质浓度增大高于主体中溶质浓度，这种现象称为浓差极化。5．亲和色谱：利用生物大分子于某些对应的专一分子特意识别和可逆结合的特性而建立起来的一种分离生物大分子的色谱方法。6．次级代谢产物：与微生物的生长繁殖无关的代谢产物，包括：抗生素、色素、生物碱等。

7初级代谢产物主要包括氨基酸，蛋白质，核酸核苷酸，维生素脂肪酸等特点：（1）他们是生物生长繁殖的必须物质（2）是各微生物所共有的产物（3）菌体对初级代谢活动有严格的调控系统一般不能累积多余的初级代谢产物。

8次级代产物的特点：1特定菌种产生的代谢产物2菌体特定生长阶段的产物3多组分的混合物。

9初级代谢产物与次级代谢产物的关系（1）初级代谢产物是次级代谢产物的前体或起始物。（2初级代谢产物的调控影响次级代谢产物的生物合成

10菌种选育的目的：提高发酵的产量。改进菌种的性能。产生新的发酵物。去除多余的组分。

11．诱变育种：利用物理或化学诱变剂，处理均匀分散的微生物细胞群体，促进其突变率大幅度提高，然后采用简便高效的方法，从中选出具有优良性状的突变菌株。

12诱变剂分类物理诱变剂（紫外线UV），化学诱变剂（NTG），生物诱变剂。

13自然选育的一般过程：生产菌种斜面，制备单孢子悬浮液，涂布分离平板，单菌落接种，斜面种子培养，摇瓶发酵，高产菌珠初选，菌种保藏，接种，斜面种子培养，摇瓶种子培养，摇瓶发酵，高产菌珠复选，高产菌种珠验证，放大实验，进一步选育或保障。14菌种分离的一般过程：样品采取，增值培养，纯种分离，生产性能测试。

15原生质体融合的过程：遗传标记的选择，两亲本原生质体的制备体的融合，原生质体的再生和融合子的选择。

16培养基（medium）是人工配置的供微生物生长繁殖和生物合成各种代谢产物所需多种营养物质的混合物。

17培养基按状态分：固体培养基农业生产菌种和孢子的培养和保存广泛应用于实体的真菌类，半固体培养基、加入少量琼脂0.5%—0.8%微生物鉴定，液体培养基，80%-90%是水，有营养成分，工业大规模使用。

18培养基的组成成分：碳源，氮源，硫源，无机离子，前体，诱导物，促进剂和抑制剂，水。

19灭菌方法1 高温灭菌（干热灭菌，湿热灭菌是最基本的灭菌方法）2过滤除菌，3化学物质消毒和灭菌，4其他灭菌（辐射灭菌臭氧静电除菌）

20湿热灭菌优点：利用饱和蒸汽直接作用于需要灭菌的物品足以杀死微生物，蒸汽具有强大的穿透力，冷凝时释放大量潜热。湿热灭菌比干热效果好，经济快速，蒸汽价格低廉来源方便，灭菌效果可靠。

21影响培养基灭菌的因素：湿热灭菌的原理温度和时间，培养基成分，培养基的PH培养基的物理状态，泡沫，培养基的微生物数量★t=-1/k lnNt/No=-2.303/k lgNt/No 注意k的单位换算。N0灭菌开始的活菌数，Nt残留的活菌数。

灭菌常数k与灭菌温度T的关系k=A*e -△E/RT.A-灭菌反应的阿雷尼乌斯常数，E——灭菌产生的活化能，R--气体常数为

8.314/(mol*k)

22无菌检查的方法1显微镜检查2平板划线法3肉汤培养法4斜面培养法

23染菌的原因分析：种子带菌，空气带菌，设备渗漏，灭菌不彻底，操作失误和管理不善等是造成污染杂菌的普遍原因

24影响种子的因素：1培养基2培养条件3种龄4接种量

25发酵过程：当具备了发酵生产所需的条件首先在一定的发酵条件下发酵的直接产物是发酵液对发酵液样品及其他发酵的参数进行抽样检测，可以得到与发酵液相关的各种信息，然后经过对这些信息进行归纳分析，给出相应的调控指令调整发酵条件，并有相应的执行机构执行调控指令。

26菌种保藏的目的：是尽可能保持菌种的存活率和优良性能，保证菌种经过较长时间的保藏后存活和生产能力。菌种保藏对于基础研究和实际应用具有重要意义，在基础研究中，菌种保藏可以保证研究结果具有良好的重复性，对于经济价值的生产菌种，好的保藏条件保证菌种的高产稳产，有利于生产的连续和稳定。

27菌种保藏的原理：根据微生物的生理特性人为的创作条件，使微生物处于代谢不活跃生长繁殖受抑制的休眠状态以减少菌种的变异退化死亡污染，有利于微生物的休眠条件是低温，干燥，缺氧和缺乏营养物质。

28菌种的保藏方法：斜面保藏法，液体石蜡保藏法，沙土管保藏法，麸皮保藏法，冷冻干燥保藏法，液氮低温保藏法，甘油保藏法，孢子滤纸保藏法。

29斜面保藏法：对科研教学工作中与教学工作不需要长期保存的菌种更是方便，特别是不宜用冷冻干燥保藏的菌种斜面保藏较好。相对湿度为50%—70% 的环境中且斜面菌种应保藏相继三代的培养物以便对照防止发生污染和意外。

30斜面保藏的优点：简便易行成本低，随时能观察菌株是否死亡变异或染菌。缺点是由于斜面含有营养和水分菌种的生长和繁殖还没有完全代谢活动能微弱进行，因此存在突变的可能性，短期内多次传代易引起菌种变异和退变污染杂菌的机会也随之增加。

31发酵方法类型按投料方式分类（1分批发酵2补料分批发酵3连续发酵）按与氧的关系分类（1需氧发酵2厌氧发酵)按照发酵动力学参数的关系分类（1生长偶联型2部分生长偶联型3非生长偶联型）

32．盐析法：在生化物质的提取和纯化过程中，目的生物物质常以溶质形式存在于溶液中，通过向这些溶质中加入不同浓度的中性盐，使不同性质的目的物分别从溶液中沉淀出来的分离技术叫做盐析法。

33．等电点沉淀法：利用大分子两性电解质在等电点时溶解度最低的原理而建立的分离法

34．凝胶色谱分离法：指以各种多孔凝胶为固定相，利用流动相中所含各种组分的相对分子质量（Mr）不同而达到物质分离的一种技术。

35、生物制药工艺学：生物制药工艺学是一门新兴的现代制药工艺学，是从事各种生物的研究、生产和制剂的综合应用科学。

36、盐析：当所含盐浓度增大时，蛋白质或酶则可能从溶液中沉淀析出，此现象称盐析。

37、脂质类药物：有些脂质具有特定的生理、药理效应，并已用于疾病的防治，称为脂质类药物。

38、现代生物技术药物：将生物体内生理活性物质的基因分离或者人工合成，利用重组DNA技术加以改造，然后时其在细菌、酵母、动物细胞或转基因动物中大量表达，通过这种生产的新型药物称为生物技术药物。

39、生长因子：细胞生长调节因子又称生长因子，是由细胞产生的蛋白质和多肽类物质，在体内和体外，能够通过与靶细胞的特异性质膜受体相结合，调节细胞的生长、增值和分化。

40前体（precursor）在微生物药物的生物合成中，有些化合物能直接被微生物利用构成产物分子结构的一部分，而化合物本身的结构没有太大的变化。

41膜分离法:是依靠膜的选择性将液体中的组分进行分离的方法，它包括微滤、超滤、反渗透、透析、电渗析。其中超滤是利用膜阻