三大有机物的鉴定全解
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二苯胺
15．下列实验中所用试剂错误的是（ ） A．在观察植物细胞有丝分裂实验中，使用醋酸 洋红溶液使染色体着色 B．在提取叶绿体色素实验中，使用丙酮提取色 素 C．在DNA的粗提取与鉴定实验中，使用氯化钠 溶液析出DNA D．在蛋白质的鉴定实验中，使用苏丹Ⅲ染液鉴 定蛋白质
D
实验流程图示(
p14 )
C
学而时习之，不亦说乎？
化合物产生特定颜色反应的原理和方法，还可以 解决以下问题： (1)对生物组织进行某种成分的检测。 (2)在医学上进行疾病的诊断，如糖尿病、肾炎。 (3)可以鉴定某些消化液中含有蛋白质。 (4)用于劣质奶粉的鉴定。 (5)不同生物组织中含糖量高低的测定。
(2010· 茂名质检)根据相关实验，回答下列问题： (1)鉴定成熟苹果果肉中存在还原性糖，所用的试 剂是 斐林试剂 ，该试剂与细胞内还原性糖发生 作用，形成
实验材料的选取
在生物学实验中正确选择实验材料是实验成功的 保证。我们学习过的很多科学家的经典实验如恩 格尔曼实验、孟德尔实验和赫尔希和蔡斯实验等 都巧妙地选择了实验材料。 ①在还原性糖、脂肪和蛋白质的鉴定中选择的实 验材料要注意两个方面：量多、色淡，实验材料 的颜色不能影响显色反应的观察。 ②观察有丝分裂选择根尖的分生区。 ③观察减数分裂选择动物的精巢或植物的花药。 ④提取细胞膜要选择哺乳动物的成熟红细胞。 ⑤观察细胞的质壁分离和质壁分离复原要选择含 有紫色大液泡的紫色洋葱表皮细胞。
C.常温ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ件下，蛋白质与双缩脲试剂发生作用呈
现紫色
D.常温条件下，核糖核酸与甲基绿作用呈现绿色
归类总结
待测物质
DNA RNA 染色体 脂肪 还原糖 蛋白质 淀粉 酒精 CO2
DNA
物质分离鉴定类实验
原理 操作步骤 检测试剂
甲基绿
实验现象
染 色
吡罗红 龙胆紫或醋酸洋红 苏丹Ⅲ（Ⅳ）
发生 显色 反应
斐林试剂 双缩脲试剂 碘液 重铬酸钾 溴麝香草酚蓝水溶 液或澄清石灰水
2．斐林试剂与双缩脲试剂比较
斐林试剂 甲液 乙液 0.1 g/mL 0.05 g/mL NaOH溶液 CuSO4溶液 可溶性还原糖 甲乙两液等量混匀后 立即使用 双缩脲试剂 A液 B液 0.1 g/mL 0.01 g/mL NaOH溶液 CuSO4溶液 蛋白质 先加入A液1 mL，摇匀，再 加入B液4滴，摇匀
脂肪+__________
苏丹Ⅲ（Ⅳ） 切片，显微镜
双缩脲试剂 蛋白质+__________
碘液 淀粉+__________
蓝色
2.下列关于鉴定还原糖、脂肪和蛋白质实验操作的叙 述中,正确的是 ( )
B
A.鉴定还原糖的斐林试剂甲液与乙液，可直接用于蛋 白质的鉴定 B.鉴定脂肪的存在，可用显微镜观察是否有被染成橘 黄色或红色的颗粒
(2009·烟台学段测试)在还原糖、蛋白质和 脂肪的鉴定中，下列有关操作及其作用，错 误的一项是 D A．在鉴定前留出一部分样液，作用是设置 对照 B．制备蛋白质稀释液，防止蛋白质与双缩 脲试剂反应后粘在试管壁上 C．研磨梨或苹果时加入石英砂，是为了研 磨充分 D．脂肪鉴定中加入乙醇，目的是保持细胞 的活性，有利于观察
将淀粉溶液分别与发生显色反应的两种溶液 (3) 区分发生显色反应一组溶液的方法及鉴定结果 混合，一段时间后，用斐林试剂分别处理上述两 种混合液，观察到无颜色变化的溶液是稀蛋清溶 是 。 液，出现砖红色的溶液是淀粉酶溶液
（2008山东卷）从细胞膜上提取了某 种成分,用非酶法处理后,加入双缩脲试 剂出现紫色；若加入斐林或班氏试剂 并加热，出现砖红色。该成分是 A、糖脂 B、磷脂 C、糖蛋白 D、脂蛋白
(2009· 广东高考改选)对下表中所列待测物质的 检测，所选用的试剂及预期结果都正确的是 （双选） 待测物质 A B C D DNA 脂肪 淀粉 蛋白质 (BD ) 检测试剂 甲基绿 苏丹Ⅲ 斐林试剂 双缩脲试剂 预期显色结果 红色 橘黄色 蓝色 紫色
实验原理： 某些化学试剂能够使生物组织中的有关化 合物，产生特定的显色反应 斐林试剂 还原糖+__________ 水浴加热 砖红色沉淀 橘黄色（红色） 紫色
(2007· 海南高考)现有无标签的稀蛋清、葡萄糖、淀粉和 淀粉酶溶液各一瓶，可用双缩脲试剂、斐林试剂和淀粉溶 液将它们鉴定出来。请回答：
(1)用一种试剂将上述4种溶液区分为两组，这种试剂
是 双缩脲试剂 ，其中发生显色反应的一组是 稀蛋清
和 淀粉酶
和 淀粉
溶液，不发生显色反应的一组是葡萄糖
溶液。
(2)用 斐林试剂 试剂区分不发生显色反应的一组溶液。
砖红色
沉淀，因此，可用该
试剂检验糖尿病人尿液中 葡萄糖 的含量。 (2)鉴定黄豆组织中存在蛋白质时，向组织液中加 入双缩脲试剂A摇匀，再向样液中加入双缩脲试剂 B 摇匀。其中双缩脲试剂 滴，而不 (2) 过量的双缩腺试剂 BB的量只有 会与试剂3～ A 4 反应，使溶
能过量，为什么？ 液呈蓝色，而掩盖生成的紫色
成分
鉴定 物质 添加 顺序 反应 条件 反应 现象
水浴50 ℃～65 ℃加 热
样液变砖红色
不需加热，摇匀即可
样液变紫色
(2007· 广东理基)下列健康人的4种液体样本中，能 与双缩脲试剂发生紫色颜色反应的是(双选) A.尿液 B.胃液 C.汗液 D.唾液
BD
利用某些化学试剂能够使生物组织中有关有机
先根据选材预测实验结果，然后再实验验证， 因此本实验属验证性实验。
选择实验材料的基本要求是： ①材料要符合实验的要求； ②所选择的材料要容易获得； ③实验材料不能对实验结果的观察产生干扰
实验材料的选择是科学探究中的一个关键环节， 材料选对了就等于实验成功了一半。下面有关洋 D 葱实验材料的叙述中正确的是( ) A．表皮细胞大，容易观察，可用于低温诱导染 色体数目变化的实验 B．根尖细胞分裂旺盛，可用于观察细胞的减数 分裂实验 C．表皮细胞呈紫色，可用于叶绿体色素的提取 实验 D．表皮细胞具有大液泡，可用于观察植物细胞 的吸水和失水实验
(1)可溶性还原糖的鉴定实验中，最理想的实验 材料是还原糖含量较高，而且组织的颜色较浅， 易于观察的组织(或器官) 。可选用苹果、梨、 白色甘蓝叶、白萝卜等。 (2)脂肪的鉴定实验中，实验材料最好选富含脂 肪的组织，若利用显微镜观察，则最好选择花生 种子。如果是新鲜花生种子，可不必浸泡，浸泡 效果反而不好，如果是干种子，需浸泡3h～4h最 适宜切片(浸泡时间短，不容易切片；浸泡时间 过长，组织太软，切下的薄片不易成形)。 (3)蛋白质的鉴定实验，最好选用富含蛋白质的 组织。植物材料常用大豆，且浸泡1d～2d，适于 研磨，动物材料常用鸡卵清蛋白。
三、实验注意的问题 (1)在鉴定可溶性还原糖的实验中，加热试管中 的溶液时，应该用试管夹夹住试管上部，放入盛 50 ℃～65 ℃温水的大烧杯中加热。注意试管底 部不要接触烧杯底部；斐林试剂应现配现用。 (2)还原糖、蛋白质的鉴定实验中，在加相应试 剂鉴定之前，要留出一部分组织样液，以便与鉴 定后的样液颜色作对比，增强实验的说服力。 (3)在蛋白质的鉴定实验中，如果用蛋清稀释液 作为实验材料，一定要稀释到一定程度，否则， 与双缩脲试剂发生反应后会粘在试管的内壁上， 使反应不彻底，试管也不易洗刷干净。
C.鉴定可溶性还原糖时，先加入斐林试剂甲液摇匀后， 再加入乙液 D.鉴定蛋白质时，双缩脲试剂A液与B液要混合均匀后 再加入含样液的试管中
(2009· 江苏高考)下列有关实验及显色结果的叙述， 错误的有(多选) ( ) ABD A.水浴加热条件下，蔗糖与斐林试剂发生作用生 成砖红色沉淀 B.沸水浴条件下，脱氧核苷酸与二苯胺发生作用 呈现蓝色
15．下列实验中所用试剂错误的是（ ） A．在观察植物细胞有丝分裂实验中，使用醋酸 洋红溶液使染色体着色 B．在提取叶绿体色素实验中，使用丙酮提取色 素 C．在DNA的粗提取与鉴定实验中，使用氯化钠 溶液析出DNA D．在蛋白质的鉴定实验中，使用苏丹Ⅲ染液鉴 定蛋白质
D
实验流程图示(
p14 )
C
学而时习之，不亦说乎？
化合物产生特定颜色反应的原理和方法，还可以 解决以下问题： (1)对生物组织进行某种成分的检测。 (2)在医学上进行疾病的诊断，如糖尿病、肾炎。 (3)可以鉴定某些消化液中含有蛋白质。 (4)用于劣质奶粉的鉴定。 (5)不同生物组织中含糖量高低的测定。
(2010· 茂名质检)根据相关实验，回答下列问题： (1)鉴定成熟苹果果肉中存在还原性糖，所用的试 剂是 斐林试剂 ，该试剂与细胞内还原性糖发生 作用，形成
实验材料的选取
在生物学实验中正确选择实验材料是实验成功的 保证。我们学习过的很多科学家的经典实验如恩 格尔曼实验、孟德尔实验和赫尔希和蔡斯实验等 都巧妙地选择了实验材料。 ①在还原性糖、脂肪和蛋白质的鉴定中选择的实 验材料要注意两个方面：量多、色淡，实验材料 的颜色不能影响显色反应的观察。 ②观察有丝分裂选择根尖的分生区。 ③观察减数分裂选择动物的精巢或植物的花药。 ④提取细胞膜要选择哺乳动物的成熟红细胞。 ⑤观察细胞的质壁分离和质壁分离复原要选择含 有紫色大液泡的紫色洋葱表皮细胞。
C.常温ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ件下，蛋白质与双缩脲试剂发生作用呈
现紫色
D.常温条件下，核糖核酸与甲基绿作用呈现绿色
归类总结
待测物质
DNA RNA 染色体 脂肪 还原糖 蛋白质 淀粉 酒精 CO2
DNA
物质分离鉴定类实验
原理 操作步骤 检测试剂
甲基绿
实验现象
染 色
吡罗红 龙胆紫或醋酸洋红 苏丹Ⅲ（Ⅳ）
发生 显色 反应
斐林试剂 双缩脲试剂 碘液 重铬酸钾 溴麝香草酚蓝水溶 液或澄清石灰水
2．斐林试剂与双缩脲试剂比较
斐林试剂 甲液 乙液 0.1 g/mL 0.05 g/mL NaOH溶液 CuSO4溶液 可溶性还原糖 甲乙两液等量混匀后 立即使用 双缩脲试剂 A液 B液 0.1 g/mL 0.01 g/mL NaOH溶液 CuSO4溶液 蛋白质 先加入A液1 mL，摇匀，再 加入B液4滴，摇匀
脂肪+__________
苏丹Ⅲ（Ⅳ） 切片，显微镜
双缩脲试剂 蛋白质+__________
碘液 淀粉+__________
蓝色
2.下列关于鉴定还原糖、脂肪和蛋白质实验操作的叙 述中,正确的是 ( )
B
A.鉴定还原糖的斐林试剂甲液与乙液，可直接用于蛋 白质的鉴定 B.鉴定脂肪的存在，可用显微镜观察是否有被染成橘 黄色或红色的颗粒
(2009·烟台学段测试)在还原糖、蛋白质和 脂肪的鉴定中，下列有关操作及其作用，错 误的一项是 D A．在鉴定前留出一部分样液，作用是设置 对照 B．制备蛋白质稀释液，防止蛋白质与双缩 脲试剂反应后粘在试管壁上 C．研磨梨或苹果时加入石英砂，是为了研 磨充分 D．脂肪鉴定中加入乙醇，目的是保持细胞 的活性，有利于观察
将淀粉溶液分别与发生显色反应的两种溶液 (3) 区分发生显色反应一组溶液的方法及鉴定结果 混合，一段时间后，用斐林试剂分别处理上述两 种混合液，观察到无颜色变化的溶液是稀蛋清溶 是 。 液，出现砖红色的溶液是淀粉酶溶液
（2008山东卷）从细胞膜上提取了某 种成分,用非酶法处理后,加入双缩脲试 剂出现紫色；若加入斐林或班氏试剂 并加热，出现砖红色。该成分是 A、糖脂 B、磷脂 C、糖蛋白 D、脂蛋白
(2009· 广东高考改选)对下表中所列待测物质的 检测，所选用的试剂及预期结果都正确的是 （双选） 待测物质 A B C D DNA 脂肪 淀粉 蛋白质 (BD ) 检测试剂 甲基绿 苏丹Ⅲ 斐林试剂 双缩脲试剂 预期显色结果 红色 橘黄色 蓝色 紫色
实验原理： 某些化学试剂能够使生物组织中的有关化 合物，产生特定的显色反应 斐林试剂 还原糖+__________ 水浴加热 砖红色沉淀 橘黄色（红色） 紫色
(2007· 海南高考)现有无标签的稀蛋清、葡萄糖、淀粉和 淀粉酶溶液各一瓶，可用双缩脲试剂、斐林试剂和淀粉溶 液将它们鉴定出来。请回答：
(1)用一种试剂将上述4种溶液区分为两组，这种试剂
是 双缩脲试剂 ，其中发生显色反应的一组是 稀蛋清
和 淀粉酶
和 淀粉
溶液，不发生显色反应的一组是葡萄糖
溶液。
(2)用 斐林试剂 试剂区分不发生显色反应的一组溶液。
砖红色
沉淀，因此，可用该
试剂检验糖尿病人尿液中 葡萄糖 的含量。 (2)鉴定黄豆组织中存在蛋白质时，向组织液中加 入双缩脲试剂A摇匀，再向样液中加入双缩脲试剂 B 摇匀。其中双缩脲试剂 滴，而不 (2) 过量的双缩腺试剂 BB的量只有 会与试剂3～ A 4 反应，使溶
能过量，为什么？ 液呈蓝色，而掩盖生成的紫色
成分
鉴定 物质 添加 顺序 反应 条件 反应 现象
水浴50 ℃～65 ℃加 热
样液变砖红色
不需加热，摇匀即可
样液变紫色
(2007· 广东理基)下列健康人的4种液体样本中，能 与双缩脲试剂发生紫色颜色反应的是(双选) A.尿液 B.胃液 C.汗液 D.唾液
BD
利用某些化学试剂能够使生物组织中有关有机
先根据选材预测实验结果，然后再实验验证， 因此本实验属验证性实验。
选择实验材料的基本要求是： ①材料要符合实验的要求； ②所选择的材料要容易获得； ③实验材料不能对实验结果的观察产生干扰
实验材料的选择是科学探究中的一个关键环节， 材料选对了就等于实验成功了一半。下面有关洋 D 葱实验材料的叙述中正确的是( ) A．表皮细胞大，容易观察，可用于低温诱导染 色体数目变化的实验 B．根尖细胞分裂旺盛，可用于观察细胞的减数 分裂实验 C．表皮细胞呈紫色，可用于叶绿体色素的提取 实验 D．表皮细胞具有大液泡，可用于观察植物细胞 的吸水和失水实验
(1)可溶性还原糖的鉴定实验中，最理想的实验 材料是还原糖含量较高，而且组织的颜色较浅， 易于观察的组织(或器官) 。可选用苹果、梨、 白色甘蓝叶、白萝卜等。 (2)脂肪的鉴定实验中，实验材料最好选富含脂 肪的组织，若利用显微镜观察，则最好选择花生 种子。如果是新鲜花生种子，可不必浸泡，浸泡 效果反而不好，如果是干种子，需浸泡3h～4h最 适宜切片(浸泡时间短，不容易切片；浸泡时间 过长，组织太软，切下的薄片不易成形)。 (3)蛋白质的鉴定实验，最好选用富含蛋白质的 组织。植物材料常用大豆，且浸泡1d～2d，适于 研磨，动物材料常用鸡卵清蛋白。
三、实验注意的问题 (1)在鉴定可溶性还原糖的实验中，加热试管中 的溶液时，应该用试管夹夹住试管上部，放入盛 50 ℃～65 ℃温水的大烧杯中加热。注意试管底 部不要接触烧杯底部；斐林试剂应现配现用。 (2)还原糖、蛋白质的鉴定实验中，在加相应试 剂鉴定之前，要留出一部分组织样液，以便与鉴 定后的样液颜色作对比，增强实验的说服力。 (3)在蛋白质的鉴定实验中，如果用蛋清稀释液 作为实验材料，一定要稀释到一定程度，否则， 与双缩脲试剂发生反应后会粘在试管的内壁上， 使反应不彻底，试管也不易洗刷干净。
C.鉴定可溶性还原糖时，先加入斐林试剂甲液摇匀后， 再加入乙液 D.鉴定蛋白质时，双缩脲试剂A液与B液要混合均匀后 再加入含样液的试管中
(2009· 江苏高考)下列有关实验及显色结果的叙述， 错误的有(多选) ( ) ABD A.水浴加热条件下，蔗糖与斐林试剂发生作用生 成砖红色沉淀 B.沸水浴条件下，脱氧核苷酸与二苯胺发生作用 呈现蓝色