基因杂质的评估和控制 ICH M

6
危害性评估要素
采用数据库和诱变以及细菌诱变数据文献
检索对实际和可能杂质进行分析，根据分
类表将其分类为1类、2类或5类；
若无法获得这样的分类数据，则应进行结
构-活性关系（SAR）评估。着重关注细菌
诱变性预期。可能导致被分类为3类、4类
或5类。
(Q)SAR方法计算
两个互补方法：
1、依据专家规则 2、基于统计方式
EMA《遗传毒性杂质限度指导原则》
ICH M7 为限制潜在致癌风险而对药物中DNA活性（诱变性）杂质进行的评估和控制 目的：提供使用框架，以应用于这些诱变杂质的鉴别、分类、定性和控制，对潜在致癌风 险进行了控制。 强调：在建立诱变性杂质水平时考虑安全性和质量风险管理两方面 人用条件下，给出对原料药或制剂中残留或可能残留的诱变性杂质评估和控制的建议
4.2 上市后变更—制剂研发、生产和控制 包括：制剂（如：成分、生产工艺、剂型）发 生变更时 原则：1、所有新的诱变性降解产物 2、已有诱变性降解产物更高的可接受标准 不建议：原料药未发生变更 不需评估：制剂生产场所变更
4
已上市药品要考虑的问题
4.3 上市后药品临床使用变更 已上市药品临床应用变更拒收情节包括： 重新评估诱变杂质限度时，1、使用剂量显 著增加 2、用药时长显著增加 3、病情严重或危及生命的病患状态下可摄 入量较高，变为不那么严重的病患情况后， 原有的可接受摄入量可能不再适当 4、使用新的给药途径 5、扩大使用患者群，从而包括孕妇和/或小 儿
7
控制
- 物料特性控制（原料、起始物料、中间体
控制从六个方面阐述
、试剂、溶剂、内包材）
1、工艺相关杂质的控制
√
- 设施和设备操作条件
2、控制方法需考虑的问题
√
- 生产工艺设计中的控制内涵
3、定期检测要考虑的问题
√
- 中控（包括中控检测和工艺参数）
4、降解产物的控制
√
- 原料药和制剂控制（如放行检测）
未发现警示结构，足以得出 结论无诱变可能
（Q）SAR方法使用基于预定义规则 的预测计算机建模描述化学结构和化 学相关生物活性之间的关系，或用于 发现生物活性和分子结构或化合物特 性之间的相关性的统计工具。
主要应用于风险评估、药物开发和监 管决策。 -----摘自《(Q)SAR: A Tool for the Toxicologist.》
5、生命周期管理
分类为1、2或3类的杂质时，控制策略十分
6、临床研发要考虑的问题
重要。
7
控制
8.1 工艺相关杂质的控制--四种方法供选择应用原料药控制策略
方法一
方法二
方法三
原料药质量标准中 加入杂质检测并制 定质量标准。 可用于定期检测。 （ICH Q6A）
-----当原料药诱变杂质在 至少6个连续的中试批次 或3个连续的生产批次中 ，测定结果均低于可接受 限度的30%，则可论述进 行定期确认检查（ periodic verification testing ）。否则建议常规 检查。
8.4 降解产物的控制 首先了解该降解途径是否与原料药和制剂的生产工艺和/或其所拟的包装和储存条件有关。（加速试验） 若有关，则监控采用所拟储存条件长期稳定性试验中原料药或制剂的质量。
“关注队列”
3
通用原则
线性外推举例：类似于TTC计算方法
环氧乙烷计算：
根据致癌效应数据库，环氧乙烷的TD50为21.3mg/kg体重/天（大鼠）和63.7mg/kg体重/天（小鼠）。在
计算可接受摄入量时，采用了较低的大鼠值（即更保守）。
计算十万分之一概率致癌剂量，将该值除以50,000：21.3mg/kg÷50,000 = 0.42μg/kg.
4.4 已上市药物的其它需考虑问题 两种情况，需要考虑对杂质进行评估： 1、新杂质的相关危害性数据所采用的研究方法 具有高质量科学性，且与相关法规测试指南一 致，其数据记录或报告易于获得 2、新的杂质被确知属于第1类或第2类诱变性 此时，申报人需要实施本指南所要求的评估
5
原料药和制剂杂质评估
杂质产生：对于原料药， 合成过程中、储存过程、生产过程 对于制剂， 储存条件 杂质评估分为两个阶段： 1、已被鉴定的实际存在的杂质应考虑其潜 在诱变性（已知杂质） 2、可能存在于原料药中的潜在杂质进行评 估，已确定是否需要对其潜在诱变性进行进 一步评估
为基因毒性。
➢ 如果有足够后续试验，可由单独的体外试验结果，可以对它的体内关联性进行评估。 ➢ 若缺乏这些信息时，体外基因毒性物质经常被考虑为假定的体内诱变剂和致癌剂。 ----摘自EMA《毒性杂质限度指南》
✓ 为何重点研究基因毒性杂质？ 基毒杂质特点：很低浓度时即可造成人体遗传物质的损伤，进而导致基因突变并可能促使肿瘤发生。
ICH 法规培训之
诱变性杂质评估和控制
2014年6月23日发布
试剂
活性 化学 物质
溶剂
催化剂
其他工 艺助剂
1
概述
合成 产物
降解产 物
杂质
1
概述
ICH Q3A(R2) 新原料药中的杂质 ICH Q3B(R2) 新制剂中的杂质
关于主要杂质定性和控制的指南
ICH M3(R2) 药物人用临床试验和上市许可中的非临床安全性研究
6
危害性评估要素
分类 定义
拟定控制措施（详见7部分）
1
已知诱变致癌性
控制不高于化合物可接受限度
2
已知具有诱变性，致癌效应未知 控制不高于可接受限度（适当
（细菌诱变呈阳性*，无啮齿动物 的TTC）
致癌数据
3
警示结构，与原料药结构无关， 控制不高于可接受限度（适当
无诱变数据
的TTC）或检测细菌诱变含量
在原料、起始物料 或中间体的质量标 准中加入对杂质的 检测，或作为中控 检测同时制定可接 受标准，或采用适 当的分析方法，将 杂质控制在可接受
限度以下。
在原料、起始物料或 中间体的质量标准中 加入对杂质的检测， 或作为中控检测，同 时制定一个高于原料 药中可接受限度的质 量标准，采用适当的 分析方法，配合经过 证明杂质致命知识、 杂质在后续工艺中被 清除的知识，并对后 续工艺进行控制。
分析数据主要包括：后续化学反应中杂质的结 构去向、中试批次分析数据以及加标实验。 重点证明该杂质的去向/清除论证是严谨的。 2、不能采用第3、4种方法时，申报资料中应包括 原料、起始物料或中间体质量标准对杂质进行 的检测，或中控（方法2）或原料药（方法4） 在可接受限度水平所进行的测试。 3、在较后合成的步骤中引入杂质—方法1
10
1.5
治疗期 日总摄入量（μg/天）
≤1月 120
多个杂质的可接受日总摄入量 ＞1-12月 60
＞1-10年 30
＞10年到终生 5
4
已上市药品要考虑的问题
4.1 上市后变更—原料药研发、生产和控制 包括：合成路线、试剂、溶剂、工艺条件发 生变更时，诱变性杂质对潜在风险影响的评 估 原则：1、是否有新的诱变性杂质产生； 2、受变更影响的步骤中已知诱变杂质含量 是否升高 3、上游步骤中的已知诱变性杂质是否升高 不建议：对不受变更影响的杂质重新评估 不需评估：1、原料药、中间体或起始物料 的生产场所发生变更 2、原料供应商发生变更
：
如无诱变性=第5类
具有诱变性=第2类
4
警示结构，与原料药或有关物质 与非诱变性杂质同等对待
有相同警示（如，工艺中间体）
，经测试为无诱变性
5
无警示结构，或警示结果具有充 与非诱变性杂质同等对待
分数据证明其不具备诱变性和致
癌性
*或其他相关阳性诱变数据，说明与诱导基因编写的DNA反应活性（例如，体内基因 诱变研究显示阳性）
首次用于药物中的、化学合成的辅料中的杂质
生物/生物技术制品、肽类、寡核苷酸、放射药物、发酵产品、草药制 品和动 物/植物来源的粗品 ICH S9中所定义的晚期癌症指征用原料药和制剂 已上市药物中使用的辅料、调味剂、着色剂和香料 药物包材中的可浸出杂质
3
通用原则
在EMA《遗传毒性杂质限度指导原则》中引入了可接受风 险的摄入量，即毒性物质限量，或毒理学关注门槛（TTC， Threshold of Toxicological Concern）这个概念。设置了限度 值 TTC(1.5 μg/day)，即相当于每天摄入1.5 μg的基因毒性 杂质，被认为对于大多数药品来说是可以接受的风险（一 生中致癌的风险小于十万分之一）。按照这个阈值，可以 根据预期的每日摄入量计算出活性药物中可接受的杂质水 平。 TTC是一个风险管理工具，采用的是概率的方法。 TTC不能被理解为绝对无风险的保障。
---实验室级实验数据限制 原料药中杂质水平低于可
接受限度的30%
方法四
当诱变杂质残留可 风险评估已确定是 可以忽略的，可采 用对工艺的控制来 取代分析方法控制
。
---适用于本质上来说不稳 定的杂质（亚硫酰氯等） 、合成路线早起引入但已
被有效清除的杂质。
7
控制
8.2 控制方法要考虑的问题 1、采用第4种方法时，需分析数据来支持。
2
适用范围
研发期间和上市申报期间的新原料药和新制剂的杂质 已上市药物的批准源自文库申报，已经之前已批准上市的制剂中同原料药生产的另 一制剂的新上市申报
➢原料药合成变更，导致产生新杂质或已有杂质可接受标准增加 ➢配方变更、组分变更或生产工艺变更，导致产生新的降解产物或已有降解产物可接受标准增加 ➢指征变更或给药方案变更，导致可接受癌症风险水平受到重大影响
补充
1
概述
✓ 何为基因毒性杂质、诱变杂质（Genotoxic Impurities，Mutagenic Impurities）？ 基因毒性杂质（或遗传毒性杂质，Genotoxic Impurity ，GTI）是指化合物本身直接或间接损伤细胞DNA，
产生基因突变或体内诱变，具有致癌可能或者倾向。 在以DNA反应物质为主要研究对象的体内体外试验中，如果发现它们对DNA具有潜在的破坏性，及可称之
计算人类每日总摄入量：0.42μg/kg×50kg体重 = 21.3μg/人/天。
因此，永久性每日服用21.3μg环氧乙烷对应理论致癌风险为十万分之一是环氧乙烷作为药品中的杂质时可
接受的摄入值。
单个杂质的可接受日总摄入量
治疗期
≤1月
＞1-12月
＞1-10年
＞10年到终生
日总摄入量（μg/天）
120
20
✓关于基因杂质警示结果的具体详细信息科参考 欧盟发布的警示结构《Development of structure alerts for the in vivo micronucleus assay in rodents》。或进入 The Carcinogenic Potency Database (CPDB)，里面有 1547 种致 癌物质的列表，结构式，CAS 号，作用部位， TTC 值等一系列信息。应当注意， 含有警示结 构并不意味着该杂质一定具有遗传毒性， 而确 认有遗传毒性的物质也不一定会产生致癌作用 。 ✓杂质的理化性质和其他结构特点（如相对分子 质量、亲水性、分子对称性 / 空间位阻、反应活 性以及生物代谢速率等）会对其毒性产生抑制或 调节作用。
5
原料药和制剂杂质评估
5.1 合成杂质 实际杂质：原料药中超出ICH Q3A报告阈的杂质（若杂质水平超过了ICH Q3A鉴别阈，则需进行鉴别） 潜在杂质：原料药中起始物料、试剂和从起始物料到原料药合成路线中的中间体（需评估） 原料药合成后期引入的起始物料，需要评估起始物料合成的最终步骤中的潜在诱变性杂质 已知结构和这些潜在杂质均按照第6部分要求评估其潜在诱变性 5.2 降解产物 原料药和制剂中的潜在降解产物是指经过合理推测，在长期存储条件下可能会形成的物质，也包括在加速稳定性试 验中和ICH Q1B光照稳定性试验中形成的超出ICH Q3A/B的鉴别限，但尚未确认的物质 原料药：存在于内包装和外包装内，拟定的长期储存条件下观察到高于ICH Q3A报告阈的物质 制剂：存在于内包装和外包装内，拟定的长期储存条件下观察到高于ICH Q3B报告阈的物质；生产过程中产生的杂质 。 相关降解途径的知识有助于指导选择性的评估潜在杂质的诱变性，如：降解化学原料、相关强降解试验和研发稳定 性研究。 只要知道结构，存在于原料药和制剂中的降解产物，亦按照第6部分要求评估其诱变性
8.3 定期检测要考虑的问题 定期检测—方法1 - 不需要对每批均进行放行例行检测。 - 当检测结果显示，诱变性杂质的水平无法符合
定期检测所建议的可接受标准，则药品生产商 要立即实施全检，直至找出超标的原因、实施 纠正措施，并且所记录工艺重新处于受控状态 - 若定期确认性检测失败，需通知法规当局，以 对之前为进行检测的批次进行风险/利益评估 。