实验室环境和人体表面的微生物观察实验报告YU

微生物学实验报告（一）

题目：实验室环境和人体表面的微生物观察

姓名：喻曙光

学号：

年级班级：生命学院2010级生命基地

组别：4

同组者：

一、实验器材

1．培养基

肉膏蛋白胨琼脂平板

2．溶液和试剂

无菌水，牛肉膏，蛋白胨，NaCl，琼脂、氢氧化钠溶液等。

3．仪器和其他用品

灭菌棉签（装在试管内），试管，试管架，酒精灯，记号笔，废物缸，接种环，三角瓶，烧杯，量筒，玻璃棒，天平，高压蒸汽灭菌锅，pH试纸（pH5.5~9.0），棉花，牛皮纸，麻绳，纱布，平皿、剪刀等。

二、目的要求

1、证实实验室环境与人体表面存在微生物。

2、体会无菌操作的重要性。

3、观察不同菌落类群微生物的菌落形态特征。

4、比较不同条件下细菌的数量及类型。

5、熟练掌握从固体培养物中转接微生物的无菌操作技术。

6、学习掌握培养基的配置原理。

7、通过对几种培养基的配制，掌握配制培养基的一般方法和步骤。

三、基本原理

如何知道我们的周围存在看不见的微生物呢？也就是说任何使看不见的变得看得见呢？第三部分介绍的显微技术是一种方法，这是通过发的微生物个体，使我们能过看到他们。另一种方法是通过放大成子细胞群体（菌落），使我们看到他们的存在，即通过培养的方法是肉眼看不见的单个个体在固体培养基上经过长期的生长繁殖形成几百万的菌聚集在一起的肉眼可见的菌落。本实验将采用后一种方法检查实验室环境和人体表面微生物，从而使我们牢记无菌概念。

高温对微生物具有致死效应，因此在微生物的转接过程中，一般在火焰旁进行，并用火焰直接灼烧接种环，以达到灭菌的目的，但一定要保证其冷却后方可进行转接，以免烫死微生物。

高压蒸汽灭菌。高压蒸汽灭菌是将灭菌的物品放在一个密闭的加压灭菌锅内，通过加热，使灭菌锅隔套间的水沸腾儿产生蒸汽。待水蒸气急剧地将锅内的冷空气从排气阀中驱尽，然后关闭排气阀，继续加热，此时，由于蒸汽不能溢出，儿增加了灭菌锅内的压力，从而使沸点增高，得到高于100°C的温度。导致菌体蛋白质凝固变性而达到灭菌的目的。

四、操作步骤

1．牛肉膏蛋白胨培养基的制备。准确称量各组分倒入烧杯，搅拌溶化，然后调节pH，使pH保持在7.0~7.2。将培养基分装在两个三角瓶里。加塞，包扎。2．灭菌。将18个平板、2个装有无菌水的试管、2个装有培养基的锥形瓶，用牛皮纸包好并标记，置于高压蒸汽灭菌锅中灭菌20min。

3．倒平板。将灭好菌的培养基冷却至50℃，分装到18个平板中。倒平板过程要在严格酒精灯火焰旁进行。待平板冷却凝固后倒置。

4．微生物的接种。接种过程要完全严格在火焰附近进行，操作要尽量迅速准确。

（1）在空气中取样6组。取3个培养皿开盖暴露空气中5min后盖好，并标记后将其中一个平板置于27°C环境下培养，另外两个平板置于

37°C环境下培养；另取3个培养皿开盖暴露与空气中10min后盖好，

并分别标记后将其中一个平板置于27°C环境下培养，另外两个平板

置于37°C环境下培养。

（2）桌面取样3组。取3个培养皿，用浸水后的无菌棉签在桌面上擦拭5cm 后在培养基上涂抹，并分别标记后将其中一个平板置于27°C环境下

培养，另外两个平板置于37°C环境下培养。

（3）手掌表面取样6组。取3个平板，分别用浸水后的无菌棉签在未洗过手掌表面上擦拭后在培养基上“之”字形涂抹，并分别标记后将其中

一个平板置于27°C环境下培养，另外两个平板置于37°C环境下培

养；另取3个平板，分别用浸水后的无菌棉签在洗过的手掌上擦拭后

在培养基上“之”字形涂抹，并分别标记后将其中一个平板置于27°

C环境下培养，另外两个平板置于37°C环境下培养。

（4）自选（纸币、杯口）分别取样3组。取3个平板，分别用浸水后的无菌棉签在纸币上和杯口擦拭后在平板上涂抹，并分别标记后将其中一

个平板置于27°C环境下培养，另外两个平板置于37°C环境下培

养。

5．培养。将接种好的18个平板置于恒温箱中培养7天。

6．观察与描述菌落。（大小、表面、颜色、干湿、边缘）

（2

（3

五：思考题：

（1）列举2至3类微生物，说明它们在本实验条件下（牛肉膏蛋白胨琼脂平板37℃）不能生长。

答：专性厌氧菌，硫细菌。

（2）比较各种来源的样品，哪一种菌落数和菌落类型最多？为什么？

答：菌落数最多的为洗手前手掌上接种的平板。原因是日常生活中手

接触的各种物品表面附着着大量的微生物。在接种时，洗手前手掌上

的微生物种类数量较多，微生物较顽固且适宜在培养基上生长。均落

类型最多的也是洗手前手指接种的平板，原因同样也是日常生活中手

指接触的各种物品表面附着着大量的微生物，取样者实验前一段时间

未时常洗手。

（3）比较洗手前和洗手后菌落数变化，谈谈你的体会。洗手后仍有少量细菌生长，你认为是什么原因？

答：洗手前的菌落数比洗手后的菌落数少。但是洗手前的菌落类型比

洗手后的多。我个人的体会是，经常洗手能够大大减少手上的微生物

种类及数量。出现这种情况的原因个人认为是洗手后剩余的微生物类

型较少、较顽固且适宜在培养基上生长；而洗手前手上有很多霉菌，

霉菌在培养基上的生长抑制了其他微生物的生长。

（4）完成本实验后，你是否已体会到我们生活在微生物的包围中？你如何体会“微生物既是我们的朋友又是我们的敌人”？

答：完成本实验后，我深刻体会到我们生活在微生物的包围中。微生

物作为我们的朋友，在发酵工程、废物降解生物防治等方面发挥着巨

大作用；而作为我们的敌人，微生物经常导致人类及家畜等患病，还

会造成木制品腐朽等其他负面作用。