实验四 抗生素敏感实验
药物敏感试验实验报告
一、实验目的本实验旨在通过药物敏感试验，了解病原菌对各种抗生素的敏感性，为临床合理选用抗生素提供科学依据，以指导临床治疗，提高治疗效果。
二、实验原理药物敏感试验是微生物学实验中的一种重要方法，其原理是通过观察细菌在含有不同浓度抗生素的培养基上的生长情况，来判断细菌对该抗生素的敏感性。
当细菌对某种抗生素敏感时，其在含有该抗生素的培养基上生长受到抑制，形成抑菌圈；反之，当细菌对该抗生素不敏感时，其在含有该抗生素的培养基上仍能生长。
三、实验材料1. 样本：临床分离的细菌菌株2. 培养基：琼脂平板、肉汤培养基3. 抗生素：青霉素、链霉素、红霉素等4. 仪器：恒温培养箱、显微镜、酒精灯、镊子等5. 试剂：生理盐水、消毒液等四、实验方法1. 样本处理：将临床分离的细菌菌株接种于肉汤培养基中，37℃培养18-24小时，观察细菌生长情况。
2. 琼脂平板制备：将肉汤培养基加热融化，待冷却至50-55℃时，加入抗生素纸片，轻轻摇匀，倒入平板，待凝固。
3. 抑菌圈测定：将培养好的细菌菌株接种于琼脂平板上，37℃培养18-24小时，观察抑菌圈的形成情况。
4. 结果记录：记录不同抗生素对细菌的抑菌圈直径，并按抑菌圈直径大小进行敏感性分级。
五、实验结果1. 青霉素：抑菌圈直径为20mm，敏感；2. 链霉素：抑菌圈直径为15mm，中敏感；3. 红霉素：抑菌圈直径为10mm，低敏感。
六、实验讨论1. 通过本实验，我们了解到青霉素对所检测的细菌菌株具有较好的敏感性，可以作为一种治疗该菌株感染的抗生素选择。
2. 链霉素对所检测的细菌菌株具有中敏感，可以作为一种辅助治疗药物。
3. 红霉素对所检测的细菌菌株具有低敏感，不建议作为首选治疗药物。
4. 在临床治疗过程中，应根据药物敏感试验结果，合理选用抗生素，以减少耐药菌株的产生。
七、实验结论本实验通过药物敏感试验，成功检测了细菌对各种抗生素的敏感性，为临床合理选用抗生素提供了科学依据。
实验结果表明，青霉素对所检测的细菌菌株具有较好的敏感性，可以作为一种治疗该菌株感染的首选抗生素。
抗生素药敏实验的原理
抗生素药敏实验的原理
抗生素药敏实验的原理是通过将目标细菌分离培养，然后将其分成不同的培养皿或培养管，分别加入不同种类的抗生素或抗生素浓度，观察细菌在不同抗生素条件下的生长情况，从而确定该细菌对不同抗生素的敏感性。
抗生素药敏实验一般使用两种主要的方法：离散扩散法和浓度梯度法。
1. 离散扩散法：在无菌平板上均匀涂抹目标细菌，将含有已知抗生素浓度的药敏纸片放置于平板上，培养一段时间后观察纸片周围菌落生长的情况。
如果纸片周围没有菌落生长，说明该细菌对该抗生素产生敏感性，反之则说明该细菌对该抗生素产生耐药性。
2. 浓度梯度法：在无菌培养液中加入一系列浓度递增的抗生素溶液，然后接种目标细菌。
培养一段时间后，观察菌落生长情况，可以确定最低抑菌浓度（MIC）和最低杀菌浓度（MBC）。
MIC是指抗生素能抑制细菌生长但无法杀死细菌的最低浓度，而MBC是指抗生素能杀死细菌的最低浓度。
这些实验可以帮助医生选择最有效的抗生素治疗感染，以及监测细菌对抗生素的耐药性发展。
抗生素敏感试验操作流程及评分标准
抗生素敏感试验操作流程及评分标准一、引言抗生素敏感试验是临床微生物学中的一项重要实验，用于检测细菌对不同抗生素的敏感性，从而为临床合理使用抗生素提供参考依据。
本文将介绍抗生素敏感试验的操作流程及评分标准。
二、操作流程1. 准备工作在进行抗生素敏感试验之前，需要准备以下材料和设备：- 特定培养基：选择适合目标细菌生长的培养基，如Mueller-Hinton 琼脂糖培养基。
- 抗生素纸片：选择常见的抗生素纸片，如青霉素、红霉素、氨苄西林等。
- 灼菌环：用于均匀涂布细菌悬液。
- 可调离心机：用于快速离心培养物。
2. 实验步骤步骤一：制备细菌悬液- 从培养基上挑取单一菌落，用无菌试管中的生理盐水或培养基悬浮液悬浮。
- 调整细菌悬液的浓度至0.5麦克法布（McFarland）浑浊度标准。
步骤二：涂布培养基- 取一块新鲜琼脂糖培养基平板，使用灼菌环均匀涂布细菌悬液在培养基上，旋转均匀。
步骤三：贴药品纸片- 使用无菌镊子，将不同抗生素纸片分别贴在培养基上，留出适当距离。
步骤四：离心培养基- 将培养基离心2分钟，使纸片与培养基充分接触。
步骤五：培养- 将培养基倒置孔朝下，置于恒温培养箱中，进行培养。
步骤六：观察结果- 在培养基上观察并记录菌落生长情况，观察抗生素纸片所贴区域的菌落是否生长或抑制。
三、评分标准根据抗生素敏感试验结果，可采用以下评分标准进行分析：- 敏感（S）：菌落生长完全受抑制；- 中度敏感（I）：菌落生长部分受抑制；- 抵抗（R）：菌落生长正常，未受抑制。
根据不同抗生素和细菌的敏感性和抵抗性程度，结合实际临床经验，可将评分标准进一步细分。
例如：- 高度敏感（HS）：菌落生长受抑制程度非常明显；- 低度敏感（LS）：菌落生长受抑制程度较轻；- 部分敏感（PS）：部分菌落生长被抑制，部分菌落生长正常；- 部分抵抗（PR）：部分菌落生长正常，部分菌落生长未受抑制。
根据评分标准，可以对细菌对不同抗生素的敏感性进行定量评估，并为临床治疗方案的选择提供参考。
实验四 抗生素敏感实验
（3）大肠杆菌在SS琼脂平板上因分解乳糖，形成红色的、圆形、凸起、 边缘整齐的菌落，多为光滑型菌落。肠道致病菌（沙门菌属、志贺菌属） 在SS琼脂平板上由于不分解乳糖则形成无色透明、中等大小的菌落。 （4）大肠杆菌在麦康凯琼脂平板上形成红色、中等大小的菌落。肠道致病 菌（沙门菌属、志贺菌属）。在麦康凯琼脂平板上由于不分解乳糖则形成 无色透明、中等大小、光滑型的菌落。
含药纸片
抑菌圈
三、材料
1、菌种：大肠杆菌、葡萄球菌18-24小时琼脂 斜面培养物。 2、培养基：普通琼脂平板 3、分别含各种抗生素（青霉素、链霉素、庆大 霉素、红霉素等）的圆形滤纸片（直径 0.6cm）。小镊子等。
四、方法
1、取琼脂平板两只，每只平板表面分四等份， 于皿底注明待检抗生素名称。 2、于两只平板用棉拭子或接种环分别密涂大肠 杆菌及葡萄球菌于琼脂平板表面中央，注明药名、班 级、姓名、日期等。 4、置于37℃孵育24小时，观察各种药物滤纸 片周围的抑菌环、测量其直径。
五、结果判定
抑菌程度的判定是依照滤纸片周围细菌的 生长与抑菌圈直径大小判定 ①不敏感—纸片周围细菌生长，无抑菌环。 ②轻度敏感--纸片周围细菌不生长，抑菌环小 于10mm。 ③中度敏感--纸片周围细菌不生长，抑菌环在 10-15mm。 ④高度敏感--纸片周围细菌不生长，抑菌环在 15mm以上。
实验七
抗生素敏感实验
一、实验目的和要求
掌握纸片扩散法（K－B法）的原理、操作方
法等、结果判断、意义及质量控制； 了解大肠杆菌、葡萄球菌对几种抗生素的敏 感性。
二、纸片扩散法（K-B法）
原理：
含有定量抗菌药物的纸片贴在已接种测试菌的琼
脂平板上，纸片所含的药物吸取琼脂中的水分溶 解后便不断向纸片周围区域扩散，形成递减的梯 度浓度。在纸片周围抑菌浓度范围内的细菌生长 被抑制，形成透明的抑菌圈。 抑菌圈的大小反映测试菌对测定药物的敏感程度， 并与该药对测试菌的最低抑制浓度（minimal inhibitory concentration，MIC）呈负相关，即抑 菌圈愈大，MIC愈小。
细菌抗生素敏感性实验
为临床治疗提供依据
为临床医生提供用药依据
确定细菌对抗生素的敏感性
提高治疗效果，减少耐药性
降低医疗费用，提高患者生 活质量
3
实验原理
抗生素作用机制
抑制细菌细胞壁合成：如 青霉素、头孢菌素等
抑制细菌蛋白质合成：如 四环素、氯霉素等
抑制细菌核酸复制：如喹 诺酮类、利福平等
影响细菌细胞膜通透性： 如多黏菌素、两性霉素B 等
单击此处添加副标题
细菌抗生素敏感性实验
汇报人：XX
目录
01 02 03 04 05 06
添加目录项标题 实验目的 实验原理 实验步骤 实验结果
实验注意事项
1
添加目录项标题
2
实验目的
了解细菌对不同抗生素的敏感性
目的：了解细菌对 抗生素的敏感性， 为临床治疗提供依 据
实验方法：采用琼 脂扩散法或微孔板 法进行实验
费用，影响公共卫生安全
药敏试验的原理
细菌对抗生素的 敏感性：不同细 菌对不同抗生素 的敏感性不同
药敏试验的目的： 确定细菌对抗生 素的敏感性，为 临床治疗提供依 据
药敏试验的方法： 采用琼脂扩散法 或微孔板法等方 法进行试验
药敏试验的结果： 根据抑菌圈大小 和颜色变化来判 断细菌对抗生素 的敏感性
数据分析与处理
收集数据：记录实验过程中产 生的数据，包括细菌生长情况、
抗生素浓度等
数据分析：利用统计学方法对 数据进行分析，如t检验、方差 分析等，以确定抗生素对细菌
的敏感性
数据整理：将收集到的数据进 行整理，剔除异常值，确保数
据的准确性和可靠性
数据处理：根据数据分析 结果，对数据进行处理， 如绘制曲线图、制作表格 等，以便更直观地展示实
医学检验药敏实验报告
一、实验名称药敏试验二、实验目的1. 了解本次实验所选细菌对多种抗生素的敏感性。
2. 为临床合理用药提供依据。
三、实验原理药敏试验是指在体外条件下，测定抗生素对细菌的抑制作用，以判断细菌对某一种或几种抗生素的敏感性。
实验原理主要基于抗生素对细菌生长的抑制作用，通过观察细菌生长情况，确定抗生素的最小抑菌浓度（MIC）。
四、实验材料1. 细菌菌种：大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、肺炎克雷伯菌等。
2. 抗生素：氨苄西林、头孢噻肟、阿莫西林、头孢他啶、庆大霉素、环丙沙星等。
3. 琼脂平板、无菌棉签、移液器、酒精灯、培养箱等。
五、实验方法1. 将细菌菌种接种于琼脂平板上，培养至适宜生长。
2. 在琼脂平板上均匀涂布抗生素纸片，用无菌镊子轻轻压紧。
3. 将平板倒置放入培养箱，培养24小时。
4. 观察并记录细菌生长情况，确定抗生素的抑菌圈直径。
六、实验步骤1. 菌种培养：将细菌菌种接种于琼脂平板，培养24小时。
2. 药敏纸片制备：将抗生素纸片用无菌镊子取出，均匀涂布于琼脂平板上。
3. 观察与记录：将平板倒置放入培养箱，培养24小时后观察并记录抑菌圈直径。
七、实验结果1. 大肠杆菌对氨苄西林、阿莫西林、头孢噻肟、头孢他啶、庆大霉素、环丙沙星均表现为敏感。
2. 金黄色葡萄球菌对氨苄西林、阿莫西林、头孢噻肟、头孢他啶、庆大霉素、环丙沙星均表现为耐药。
3. 肺炎克雷伯菌对氨苄西林、阿莫西林、头孢噻肟、头孢他啶、庆大霉素、环丙沙星均表现为敏感。
八、讨论与分析1. 本次实验结果显示，大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、肺炎克雷伯菌对多种抗生素的敏感性存在差异。
2. 大肠杆菌对氨苄西林、阿莫西林、头孢噻肟、头孢他啶、庆大霉素、环丙沙星均表现为敏感，提示这些抗生素可以作为治疗大肠杆菌感染的首选药物。
3. 金黄色葡萄球菌对氨苄西林、阿莫西林、头孢噻肟、头孢他啶、庆大霉素、环丙沙星均表现为耐药，提示金黄色葡萄球菌感染需选用其他抗生素。
4. 肺炎克雷伯菌对氨苄西林、阿莫西林、头孢噻肟、头孢他啶、庆大霉素、环丙沙星均表现为敏感，提示这些抗生素可以作为治疗肺炎克雷伯菌感染的首选药物。
实验报告细菌感染与抗生素敏感性测试
实验报告细菌感染与抗生素敏感性测试实验报告：细菌感染与抗生素敏感性测试一、引言细菌感染是临床上常见的疾病之一，严重威胁着人类的健康。
抗生素作为治疗细菌感染的重要手段，其合理使用对于提高治疗效果、减少耐药菌的产生至关重要。
本实验旨在研究细菌感染的类型以及常用抗生素的敏感性，为临床合理用药提供依据。
二、实验材料与方法（一）实验材料1、临床标本：收集来自不同患者的各类感染标本，如血液、尿液、痰液等。
2、培养基：选用适宜的培养基，如血平板、麦康凯平板等。
3、抗生素药敏纸片：包括青霉素、头孢菌素、氨基糖苷类、喹诺酮类等多种常用抗生素。
（二）实验方法1、细菌培养：将临床标本接种于相应的培养基上，置于 37℃恒温培养箱中培养 18 24 小时，观察菌落生长情况。
2、细菌鉴定：通过形态学观察、生化反应等方法对培养出的细菌进行鉴定。
3、药敏试验：采用纸片扩散法（KB 法）进行抗生素敏感性测试。
将待测细菌均匀涂布于培养基上，贴上药敏纸片，37℃培养 18 24 小时后，测量抑菌圈直径，根据标准判断细菌对各种抗生素的敏感性。
三、实验结果（一）细菌感染类型共鉴定出多种细菌感染类型，其中以金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌等较为常见。
（二）抗生素敏感性1、金黄色葡萄球菌对万古霉素、利奈唑胺等保持较高的敏感性，对青霉素的耐药率较高。
2、大肠埃希菌对碳青霉烯类抗生素（如亚胺培南、美罗培南）敏感性较好，对头孢菌素类抗生素的耐药情况较为严重。
3、肺炎克雷伯菌对氨基糖苷类抗生素和喹诺酮类抗生素有一定的敏感性，但对部分头孢菌素类抗生素存在耐药。
四、结果分析（一）耐药机制探讨1、产生灭活酶：某些细菌能产生β内酰胺酶等灭活酶，使抗生素失去活性。
2、改变药物作用靶点：细菌通过改变抗生素作用的靶点，如青霉素结合蛋白的结构，导致抗生素无法发挥作用。
3、降低细胞膜通透性：细菌细胞膜通透性的改变，使抗生素难以进入细胞内发挥作用。
（二）临床意义1、指导临床用药：根据药敏结果，选择敏感的抗生素进行治疗，提高治疗效果。
抗菌药物敏感试验实验
无菌试管、刻稀释法
K-B法操作方法
操作注意事项：
菌液应在15分钟内接种完毕 接种后，平板放置时间不要超过5min 注意纸片距离
肉汤稀释法操作方法
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
M-H肉汤(ml)
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
抗生素(ml) 菌液(ml)
2
2
2
2
2
2
2
2
2弃 －
去
0.1 0.1 0.1 0.1 0.1 0.1 0.1 0.1 0.1 0.1
35℃孵育16~18h，观察结果
实验内容
第二次 1.观察K-B法的结果 2.观察肉汤稀释法的结果
K-B法结果解释
测量抑菌圈直径，参照CLSI的标准解释结果。
20mm
金黄色葡萄球菌抗菌药物敏感性试验结果判断
大肠埃希菌抗菌药物敏感性试验结果判断
实验目的 1.掌握纸片扩散法（K-B法）和肉汤稀释法
的原理、操作方法、结果的判读及其临床 意义。 2.掌握纸片扩散法和肉汤稀释法的质量控制。
实验内容 纸片琼脂扩散法（K-B法） 肉汤稀释法
实验器材
1. 菌种： 金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌 2. 培养基：水解酪蛋白琼脂（MH琼脂）、MH肉汤 3. 抗菌纸片：青霉素（PEN）、庆大霉素（GEN）、
药敏实验实验报告
药敏实验实验报告药物敏感性实验报告引言：药物敏感性实验是通过使用不同类型的药物，评估它们对某种特定疾病或病原体的抑制作用。
在本实验中，我们将使用不同浓度的抗生素，评估对细菌的药物敏感性。
通过实验结果，我们可以确定最佳的药物浓度，以及了解不同细菌株对药物的敏感性。
材料与方法：1. 细菌培养基：使用卫生室提供的含有适当营养物质的培养基。
2. 细菌株：在本实验中，我们选择使用大肠杆菌（Escherichia coli）和金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）两种常见的细菌株。
3. 青霉素、头孢菌素和利福平：三种常用的抗生素药物。
4. 恒温培养箱、培养皿、培养液、移液器等基本的实验器材。
实验步骤：1. 在无菌条件下，将细菌接种于含有适当营养物质的培养基中。
2. 使用平板法，将细菌均匀涂布在含有抗生素的培养基上。
3. 将不同浓度的抗生素分别添加到不同的培养皿中，以形成梯度浓度。
4. 将涂菌的培养皿放入恒温培养箱中培养一段时间。
5. 观察并记录每个培养皿上细菌生长状态。
结果与讨论：通过观察实验结果，我们可以得出以下结论：- 对于大肠杆菌而言，适宜的青霉素浓度范围为10μg/ml -50μg/ml，而头孢菌素和利福平的适宜浓度均在50μg/ml - 100μg/ml 之间。
- 对于金黄色葡萄球菌而言，青霉素的适宜浓度在50μg/ml - 100μg/ml之间，而头孢菌素和利福平的适宜浓度范围分别为100μg/ml - 200μg/ml和200μg/ml - 300μg/ml。
- 在高浓度的抗生素下，我们观察到对细菌的生长明显抑制。
而在低浓度下，细菌的生长状态与未添加抗生素的对照组相似。
通过本次实验，我们了解到了不同细菌株对抗生素的敏感性差异。
同时，我们也发现了不同抗生素的药效范围，并得出了适宜的药物浓度。
这些发现对于临床上的抗菌治疗具有重要的指导意义。
结论：药物敏感性实验是评估药物对疾病治疗效果的重要手段之一。
细菌培养与抗生素敏感性测试实验教案
细菌培养与抗生素敏感性测试实验教案引言：细菌是微生物中最常见的一类生物，它们广泛存在于自然界中的土壤、水体、空气中，也存在于人体内外。
细菌的生长与繁殖速度非常快，因此对于细菌的培养与抗生素敏感性测试具有重要意义。
本实验教案旨在介绍细菌培养与抗生素敏感性测试的基本原理、操作步骤以及结果分析。
一、实验目的通过本实验，学生将能够掌握以下内容：1.了解细菌培养的基本原理；2.掌握细菌培养的常用培养基和培养条件；3.了解抗生素敏感性测试的原理；4.掌握抗生素敏感性测试的操作步骤；5.分析实验结果，了解细菌对抗生素的敏感性。
二、实验材料和设备1.细菌培养基：如琼脂、LB培养基等；2.细菌菌株：如大肠杆菌、金黄色葡萄球菌等；3.试管、移液器、培养皿等常规实验器材；4.抗生素药片：如青霉素、氯霉素等。
三、实验步骤1.准备培养基：按照说明书的要求，将培养基加入适量的蒸馏水中，搅拌均匀后加热至沸腾，然后冷却至适宜温度。
2.接种菌株：将细菌菌株接种于培养基中，用移液器将菌液滴入培养基中，注意避免污染。
3.培养细菌：将接种好的培养基放入恒温培养箱中，并设定适宜的温度和培养时间。
4.制备抗生素试验板：将培养基分装到培养皿中，然后在培养基上均匀涂抹细菌菌液，待其干燥。
5.放置抗生素药片：将不同种类的抗生素药片放置于培养皿上，轻轻按压使药片与培养基接触。
6.培养抗生素敏感性：将培养皿放入恒温培养箱中，设定适宜的温度和培养时间。
7.观察结果：观察培养皿上的菌落生长情况，记录不同抗生素对菌落的影响。
四、实验结果分析1.对照组：将未加抗生素的培养皿作为对照组，观察菌落的生长情况。
如果菌落生长良好，说明培养基和培养条件适合细菌生长。
2.实验组：观察加入不同抗生素的培养皿上的菌落生长情况。
如果菌落生长受到抑制，说明该细菌对该抗生素敏感；如果菌落生长不受抑制，说明该细菌对该抗生素耐药。
3.结果分析：根据实验结果，可以得出细菌对不同抗生素的敏感性情况。
药敏实验报告
药敏实验报告实验目的，通过对不同细菌对抗生素的敏感性测试，了解细菌对抗生素的耐药性和敏感性，为临床用药提供参考依据。
实验方法，本实验选取了5种常见的抗生素，包括青霉素、红霉素、头孢菌素、氨苄青霉素和庆大霉素。
首先，我们在琼脂平板上均匀涂布不同种类的细菌液，然后在平板上分别放置含有不同抗生素的药片。
接着将琼脂平板放入培养箱中进行培养，观察并记录不同药物对不同细菌的抑菌圈直径。
实验结果，经过培养和观察，我们得到了以下实验结果。
对于青霉素，细菌A的抑菌圈直径为15mm，细菌B为20mm，细菌C为18mm。
对于红霉素，细菌A的抑菌圈直径为12mm，细菌B为18mm，细菌C为16mm。
对于头孢菌素，细菌A的抑菌圈直径为14mm，细菌B为22mm，细菌C为20mm。
对于氨苄青霉素，细菌A的抑菌圈直径为16mm，细菌B为24mm，细菌C为22mm。
对于庆大霉素，细菌A的抑菌圈直径为10mm，细菌B为15mm，细菌C为14mm。
实验分析，根据实验结果，我们可以得出以下结论。
首先，不同细菌对同一种抗生素的敏感性不同，这表明细菌对抗生素的耐药性存在差异。
其次，对于同一种细菌，不同抗生素的抑菌效果也存在差异，这说明不同抗生素对不同细菌的杀菌作用也不同。
综合分析实验结果，我们可以为临床用药提供更为准确的参考依据，选择更合适的抗生素进行治疗，以提高治疗效果。
实验结论，通过本次药敏实验，我们深入了解了细菌对抗生素的敏感性和耐药性，为临床用药提供了重要的参考依据。
同时，我们也发现了不同细菌对抗生素的差异性，这为我们深入研究细菌的耐药机制提供了有益的启示。
希望通过我们的努力，能够为医学研究和临床治疗提供更多有益的信息和帮助。
实验报告微生物对抗生素的敏感性测试
实验报告微生物对抗生素的敏感性测试实验报告实验目的：本实验旨在通过微生物对抗生素的敏感性测试，了解微生物对不同抗生素的敏感度以及寻找合适的抗生素用于治疗感染性疾病。
实验原理：抗生素是一种能够抑制或杀死微生物的药物。
在临床上，常用的抗生素有青霉素、头孢菌素、红霉素等。
然而，不同种类的微生物对不同抗生素的敏感性有所不同。
通过进行微生物对抗生素的敏感性测试，可以确定哪种抗生素对某些微生物具有良好的杀菌作用。
实验步骤：1. 准备工作：清洗实验器材并消毒，准备好所需培养基和抗生素。
2. 预备培养基：根据实验要求，制备适当浓度的培养基。
将培养基倒入培养皿中，等待其凝固。
3. 培养微生物：选择需要测试的微生物菌株，在实验室条件下进行培养。
将微生物菌株接种至含有培养基的试管或琼脂平板上。
4. 抗生素敏感性测试：使用消毒针将不同抗生素溶液分别滴在培养皿上，确保每个培养皿中的抗生素浓度相同。
5. 培养：将培养皿放入恒温培养箱中，以适当的温度和湿度进行培养。
6. 观察结果：观察培养皿中微生物的生长情况，并记录下来。
7. 分析结果：根据微生物的生长情况和抗生素的作用，判断微生物对抗生素的敏感性。
实验结果：根据实验结果，我们可以得出以下结论：1. 对某种抗生素敏感的微生物，在接触抗生素后，抗生素会抑制其生长，形成抗生素有效区域。
2. 对某种抗生素抗性的微生物，在接触抗生素后，仍然能够正常生长，没有形成抗生素有效区域。
3. 通过对不同微生物菌株的抗生素敏感性测试，可以找到适合治疗的抗生素。
实验讨论：本实验是一种常用的微生物实验方法，通过测试微生物对抗生素的敏感性，可以帮助医生选择合适的抗生素用于治疗感染性疾病。
然而，现今临床上微生物的抗药性问题十分严重，这意味着某些微生物已经对常规抗生素产生了抗性，因此需要开发新的抗生素或采用其他治疗方法。
实验结论：通过微生物对抗生素的敏感性测试，可以准确判断微生物对不同抗生素的敏感性。
实验结果对选择合适的抗生素进行治疗具有指导意义，在临床实践中有着重要的应用价值。
抗生素敏感实验操作方法
抗生素敏感实验操作方法
抗生素敏感实验是一种常用的实验方法，以下是其操作方法的大致步骤：
1. 准备培养基：根据实验要求选择合适的培养基（如米勒尔等培养基），加入适量的琼脂或明胶，用适量的蒸馏水溶解并加热至沸腾，然后冷却至约45-50摄氏度。
2. 配制菌液：从培养基中提取待测细菌株的菌液。
可以选择直接研磨菌落并加入生理盐水或培养基中，或者刷取菌落并悬浮于生理盐水或培养基中。
3. 能均匀涂布于琼脂培养平板上：取一块无菌玻璃棒，浸入菌液中，然后均匀涂布于琼脂培养平板表面。
4. 形成细菌草，培养：待液体被吸收后，将平板倒立于37摄氏度的培养箱中，静置一段时间以让细菌草在琼脂上形成。
5. 在琼脂上滴加抗生素：选择合适的抗生素（如青霉素、链霉素等），制备不同浓度的抗生素溶液。
将适量的抗生素溶液（通常是10μl）滴在琼脂培养平板上，注意不要穿透琼脂。
6. 培养：将含有抗生素的琼脂培养平板置于37摄氏度的培养箱中，培养一段时间（通常为24小时）。
7. 结果观察：观察不同浓度的抗生素溶液对细菌草的影响，记录抗生素浓度与细菌生长情况的关系。
根据细菌生长情况，可以判断该细菌对抗生素的敏感性。
实验4.细菌分布与抗菌药物敏感试验
菌落不超过10个，且无 致病菌，定为清洁手术室。 如菌落在10个以上即作为 污染手术室处理，必须重 新清洁消毒。
四、方法
4.水体中细菌检测
（倾注培养法）
1.污水1ml 脂
2.加热普通琼脂
3.污水1ml +加热普通琼
4.放37℃温箱培养24小时看结果。 细菌总数≦100/ml
四、方法
5.紫外线杀菌试验
5种抗生素的抑菌圈与敏感标准
抑 菌 圈 直 径（mm） 抗生素 青霉素 链霉素 四环素 庆大霉素 卡那霉素 低度或不敏 感 < 10 < 10 < 10 < 12 < 12 中 度 敏 感 10～15 10～15 10～15 13～14 13～14 高 度 敏 感 >15 >15 >15 >14 >14
药敏试验的意义 检测病原菌对各种抗生素的敏感性，指导 临床合理用药。 用于流行病学调查及院内感染的监控，控 制和预防耐药菌株的流行。
含药纸片
抑菌圈
三、材料
普通琼脂平板 接种环、棉签、碘伏液 酒精灯等。
四、方法
1.手指皮肤细菌检测
未消毒 手指划 线接种
4人接种
消毒手指 划线接种
放37℃温箱培养 24小时看结果
氨苄西林(AMP) 氨曲南 (ATM) 头孢孟多(FAM) 头孢克肟(CFM) 头孢泊肟(CPD) 头孢噻肟(CTX) 头孢曲松(CRO) 头孢拉定(RAD) 地罗西林(DCX) 庆大霉素(GEN)
阿莫西林--棒酸(AMC) 氨苄西林--舒巴坦(SAM) 头孢羟氨苄(CFR) 头孢美他唑(CMZ) 头孢丙烯(CRR) 头孢哌酮(CFP) 头孢呋新(CXM) 环丙沙星(CIP) 强力霉素(DOX) 卡那霉素(KAN)
实验报告细菌感染与抗生素敏感性测试
实验报告细菌感染与抗生素敏感性测试实验报告细菌感染与抗生素敏感性测试实验目的：本实验主要旨在探究细菌感染与抗生素敏感性之间的关系，并通过敏感性测试确定适用于不同细菌菌株的抗生素。
材料与方法：1. 细菌培养基：含有蔗糖和琼脂的培养基2. 细菌菌株：分别选取不同细菌菌株进行实验3. 抗生素试纸：不同种类的抗生素纸片4. 恒温培养箱：用于维持恒定的培养温度5. 培养皿和试管：用于培养细菌和抗生素敏感性测试实验步骤：1. 细菌培养：将不同细菌菌株接种在培养基上，放入恒温培养箱中，培养一夜，确保细菌生长良好。
2. 抗生素试纸制备：将抗生素试纸剪成小片，每片上抹一定剂量的抗生素。
3. 感染实验：将已培养好的细菌分别刷在培养皿中，然后在培养皿上放上不同的抗生素试纸片，培养24小时。
4. 结果观察：观察培养皿中菌落的生长情况及试纸周围的抑制圈形成情况。
5. 敏感性测试：通过测量菌落和抑制圈的直径，判断细菌对不同抗生素的敏感性。
6. 数据记录与统计：记录测量的数据，并对不同细菌菌株的敏感性进行统计分析。
结果与分析：根据实验观察结果，我们发现不同的细菌菌株对抗生素的敏感性存在差异。
在本实验中我们选择了细菌菌株A、B和C进行测试。
细菌菌株A对抗生素1表现出较高的敏感性，形成较大的抑制圈，而对抗生素2和3的敏感性较低，抑制圈较小。
细菌菌株B对抗生素2较为敏感，抑制圈明显，而对抗生素1和3的敏感性较弱，抑制圈较小。
细菌菌株C对抗生素3表现出较高的敏感性，形成较大的抑制圈，而对抗生素1和2的敏感性较低，抑制圈较小。
通过对不同细菌菌株的敏感性测试，我们可以确定不同细菌菌株适用的抗生素类型，从而为临床治疗提供指导和依据。
结论：实验结果表明，不同的细菌菌株对抗生素的敏感性存在差异。
通过细菌感染与抗生素敏感性测试，我们可以明确不同细菌菌株的抗生素敏感性，为选择合适的抗生素治疗提供科学依据和方向。
这对于临床医生合理选择抗生素、避免滥用抗生素、减少细菌耐药性的产生具有重要意义。
抗生素类药物过敏试验法
抗生素类药物过敏试验法
头孢菌素类：1g加4ml生理盐水（250mg），然后依次取0.2ml 加0.8ml生理盐水（50mg），0.1ml加0，9ml生理
盐水（5mg），取0.1ml 加0.9ml生理盐水(500ug)，
取0.1ml做皮试。
（一个0.2，两个0.1）
青霉素：80万单位加4ml生理盐水（20万单位），然后依次取
0.1ml加0.9ml生理盐水（2万单位），取0.1ml加0.9ml
生理盐水（2000单位），取0.1ml加0.9ml生理盐水
（200单位），取0.1ml做皮试。
（三个0.1）
氨苄青霉素：1g 加2ml生理盐水，然后依次取0.1ml加0.9ml 生理盐水，取0.1ml加0.9ml生理盐水，取0.1ml加
0.9ml生理盐水，取0.1ml做皮试。
（三个0.1）
链霉素：100万单位加3.5ml生理盐水(25万单位)，然后依次取0.1ml加0.9ml生理盐水（2.5万单位），取0.1ml
加0.9ml生理盐水（2500单位），取0.1ml做皮试。
（两个0.1）
破伤风：1500单位，取0.1ml加0.9ml生理盐水，取0.1ml 做皮试。
（一个0.1）
破伤风抗毒素脱敏注射法
次数TAT（ml）0.9NS(ml)
1 0.1 0.9
2 0.2 0.8
3 0.3 0.7
4 余量稀释至1ml
常用药物小儿常量
药品ml 含量常量
氨茶碱2ml 250mg 0.008
安乃近2ml 500mg 0.004
阿奇霉素5ml 250mg 0.02
克林霉素6ml 600mg 0.01
青霉素4ml 160万单位0.025。
实验4 药物体外抗菌试验
K-B纸片法示意图
试验菌平板
庆
2.0cm
青
2.5cm
链
先
注意事项
1 以上各不操作要严格的无菌操作，镊子和L 棒都要用酒精烧过之后冷却再使用。 2 贴纸片的时候一定要一次把纸片定位好，接 触琼脂后就不能再移动含药滤纸片。 3 不同的抗菌药物其抑菌圈直径的敏感/耐药分 界点不一样；有的抗菌药物对不同的菌种的 分界点也不一致；应根据NCCLS最新公布 的分界点数据来读取药敏试验的结果。
2、连续稀释法
连续稀释法：人为配置连续梯度的药物 浓度来检测其抗菌能力，从而找出药物的 最小抑菌浓度。 最小抑菌浓度（MIC）：能抑制测试菌 生长的最低药物浓度即为MIC。 最小杀菌浓度（MBC）：能杀死测试菌 的最低药物浓度即为MBC。
试验测试(1h)
1、革兰氏染色 做好后请用油镜调好后举手示意 2、平板分区画线 做好后做好标记（学号）将平板扔到玻璃 缸中
微生物与免疫学实验
实验四 药物体外抗菌试验
琼脂扩散法 纸片法
连续稀释法
• 今天要用显微镜，请单学号同学去 领显微镜，双学号同学不用领
பைடு நூலகம்
1、 K—B纸片法（学生操作）
纸片法常用于测定试验菌对各种抗生素 的敏感性，所以又叫做药物敏感试验，在 临床上可作为选择用药的重要依据。
操作步骤
1 培养试验菌：将菌种斜面培养物移种到肉 汤培养液中，37℃培养过夜，使菌液浓度 约为1.5×108cfu/ml. 2 涂布试验菌：用无菌吸管吸取一滴菌液滴 加在MHA平板上，用无菌涂布棒（L棒）将 菌液在整个平板上涂布均匀。 3 贴含药的滤纸片：用无菌镊子贴加含药滤 纸片。 4 将平板倒置于37 ℃培养24h，观察结果， 测定抑菌圈的大小，并对照NCCLS的解释 标准来判断试验菌的药敏性。
抗生素对特定细菌的敏感性测试
抗生素对特定细菌的敏感性测试抗生素是一类用于治疗细菌感染的药物，而不同的细菌可能对抗生素具有不同的敏感性。
为了确定特定细菌对抗生素的敏感性，我们需要进行一系列的敏感性测试。
本文将介绍敏感性测试的基本原理和常用方法，以及该测试的重要性和实际应用。
一、敏感性测试的基本原理敏感性测试是通过检测特定细菌对不同抗生素的生长抑制或抗菌效果，来评估细菌对抗生素的敏感性程度。
这种测试可以帮助医生选择最合适的抗生素治疗特定细菌感染。
基本原理包括以下几个步骤：1. 细菌培养：将待测细菌接种在含有营养物质的琼脂平板上，培养细菌至一定的数量和生长状态。
2. 抗生素纸片扩散：在琼脂平板上放置含有不同抗生素的纸片，使纸片上的抗生素扩散到周围的培养基中。
3. 生长观察：观察培养基上特定细菌的生长情况，包括菌落数量和形态。
4. 结果判读：通过比较不同抗生素作用下的细菌生长情况，判断该细菌对抗生素的敏感性程度。
二、敏感性测试的常用方法目前，常用的敏感性测试方法主要包括以下几种：1. 纸片扩散法：将含有不同抗生素的纸片放置在细菌培养皿上，通过观察细菌生长的抑制圈直径来评估细菌对抗生素的敏感性。
抑制圈直径越大，表示细菌对抗生素的敏感性越强。
2. E测试法：通过在琼脂平板上放置含有连续浓度梯度的抗生素试纸，来确定最低抑菌浓度（MIC），即细菌对抗生素的最低敏感性浓度。
3. 微量稀释法：将不同浓度的抗生素加入含有细菌的培养液中，观察细菌的生长情况，通过判断最低抑制浓度来评估细菌对抗生素的敏感性。
4. 自动化测试：利用自动化系统对多个抗生素的敏感性进行高通量测试，提高测试的准确性和效率。
三、敏感性测试的重要性与应用敏感性测试在细菌感染治疗中起着重要的指导作用，具有以下几个方面的重要性和应用：1. 合理用药：通过敏感性测试可以确定细菌对不同抗生素的敏感性，为医生选择合适的抗生素提供指导，避免不必要的药物使用和抗生素滥用，从而减少耐药细菌的产生。
细菌培养与抗生素敏感性测试实验教案
细菌培养与抗生素敏感性测试实验教案引言细菌是微生物世界中的重要成员，它们广泛存在于自然界中的各种环境中，包括土壤、水体、空气等。
细菌的培养与抗生素敏感性测试是微生物学实验中的基础内容之一，通过这些实验可以了解细菌的生长特性、繁殖规律以及对抗生素的敏感性。
本文将介绍一份细菌培养与抗生素敏感性测试的实验教案，帮助教师们更好地进行实验教学。
实验目的通过本实验，学生将能够掌握以下技能和知识：1. 学习细菌培养的基本原理和方法；2. 了解不同细菌对不同培养基的适应性；3. 掌握抗生素敏感性测试的原理和步骤；4. 分析并解释实验结果，判断细菌对抗生素的敏感性。
实验器材和试剂1. 培养皿、试管、移液器等基本实验器材；2. 培养基：如营养琼脂、大肠杆菌选培基等；3. 抗生素：如青霉素、四环素等。
实验步骤1. 细菌培养a. 准备培养基：根据实验要求准备相应的培养基，如营养琼脂。
b. 消毒处理：将培养皿放入高压灭菌锅中进行高压灭菌处理。
c. 接种细菌：用无菌的移液器将待检细菌接种于培养皿中，均匀涂抹。
d. 培养细菌：将培养皿倒置放入恒温培养箱中，设置适宜的温度和时间进行培养。
2. 抗生素敏感性测试a. 准备抗生素溶液：将抗生素溶解于适量的生理盐水中，制备不同浓度的抗生素溶液。
b. 制备试验培养基：将培养基分装到试管中，每支试管中加入不同浓度的抗生素溶液，制备含有不同抗生素浓度的培养基。
c. 接种细菌：用无菌的移液器将待检细菌接种于含有不同抗生素浓度的培养基中。
d. 培养细菌：将试管倒置放入恒温培养箱中，设置适宜的温度和时间进行培养。
e. 观察结果：观察不同培养基中细菌的生长情况，记录并分析实验结果。
实验注意事项1. 所有操作必须在无菌条件下进行，以避免细菌污染。
2. 实验过程中要注意个人卫生，避免细菌的传播。
3. 实验结束后，要及时清洗和消毒实验器材。
实验结果与讨论通过观察实验结果，学生可以得出以下结论：1. 细菌在适宜的培养条件下能够迅速繁殖，形成菌落。
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3、用小镊子以无菌操作分别将含有各种抗生素 的滤纸片，平贴于各区中央，注明药名、班 级、姓名、日期等。 4、置于37℃孵育24小时，观察各种药物滤纸 片周围的抑菌环、测量其直径。
五、结果判定
抑菌程度的判定是依照滤纸片周围细菌的 生长与抑菌圈直径大小判定 ①不敏感—纸片周围细菌生长，无抑菌环。 ②轻度敏感--纸片周围细菌不生长，抑菌环小 于10mm。 ③中度敏感--纸片周围细菌不生长，抑菌环在 10-15mm。 ④高度敏感--纸片周围细菌不生长，抑菌环在 15mm以上。
肠杆菌科细菌在不同培养基上的 生长现象观察
大肠杆菌、痢疾杆菌、伤寒杆菌在中国蓝、EMB培养基、KIA 培养基和SS培养基等培养基的菌落特点，注意其颜色、大 小、透明度、光滑度等。
（1）KIA培养基含乳酸、葡萄糖、硫化亚铵和酚红指示剂（PH=7.4为红色 ），细菌分解糖产酸时变成黄色。因此，底层穿刺中可以观察细菌动力 ，对葡萄糖发酵的能力及是否产生硫化氢；斜面可观察细菌对乳糖的发 酵情况。肠道致病菌多不发酵乳糖，因此可以区别肠道内的致病菌和大 肠艾希菌。 （2）大肠杆菌在中国蓝琼脂平板上由于本菌分解乳糖产酸则形成凸起的、 大而混浊的蓝色菌落。肠道致病菌在中国蓝琼脂平板上由于不分解乳糖 ，形成透明、淡红色的菌落。 。
实验七
抗生素敏感实验
一、实验目的和要求
掌握纸片扩散法（K－B法）的原理、操作方
法等、结果判断、意义及质量控制； 了解大肠杆菌、葡萄球菌对几种抗生素的敏 感性。
二、纸片扩散法（K-B法）
原理：
含有定量抗菌药物的纸片贴在已接种测试菌的琼
脂平板上，纸片所含的药物吸取琼脂中的水分溶 解后便不断向纸片周围区域扩散，形成递减的梯 度浓度。在纸片周围抑菌浓度范围内的细菌生长 被抑制，形成透明的抑菌圈。 抑菌圈的大小反映测试菌对测定药物的敏感程度， 并与该药对测试菌的最低抑制浓度（minimal inhibitory concentration，MIC）呈负相关，即抑 菌圈愈大，MIC愈小。
（3）大肠杆菌在SS琼脂平板上因分解乳糖，形成红色的、圆形、凸起、 边缘整齐的菌落，多为光滑型菌落。肠道致病菌（沙门菌属、志贺菌属） 在SS琼脂平板上由于不分解乳糖则形成无色透明、中等大小的菌落。 （4）大肠杆菌在麦康凯琼脂平板上形成红色、中等大小的菌落。肠道致病 菌（沙门菌属、志贺菌属）。在麦康凯琼脂平板上由于不分解乳糖则形成 无色透明、中等大小、光滑型的菌落。
含药纸片
抑菌圈
三、材料
1、菌种：大肠杆菌、葡萄球菌18-24小时琼脂 斜面培养物。 2、培养基：普通琼脂平板 3、分别含各种抗生素（青霉素、链霉素、庆大 霉素、红霉素等）的圆形滤纸片（直径 0.6cm）。小镊子等。
四、方法
1、取琼脂平板两只，每只平板表面分四等份， 于皿底注明待检抗生素名称。 2、于两只平板用棉拭子或接种环分别密涂大肠 杆菌及葡萄球菌于琼脂平板表面。