替普瑞酮在大鼠体内的药动学研究

dose groups were adopted to the pharmacokinetic experiment． Concentration － time curves were obtained and the pharmacokinetic
parameters were calculated． RESULTS One － compartment model was best fit to the plasma concentration － time curves of three
时自尾静脉取 0． 5 mL 血，血样经肝素钠抗凝后分 取血浆，置 － 20 ℃ 冰 箱 中 保 存。取 血 浆 样 品，按 “1. 2. 2”项方法操作，取 50 μL 上清液进样。计算 替普瑞酮与内标峰面积的比值，代入回归方程，按内 标法计算血药浓度。 1． 2． 9 数据处理及主要药动学参数 用 EXCEL 表 格处理数据得替普瑞酮的血药浓度 － 时间曲线（ 图 2） 。替普瑞酮在体内的处置符合一室模型，主要药 动学参数见表 2。
LI Jing1 ，ZHANG Dan2 ，SUN Wen － xia3*
（ 1． College of Chemistry ＆ Protect Engineering，Southwest University for Nationalities，Chengdu，Sichuan，610041 P． R． China； 2． College of Pharmacy，Sichuan University，Chengdu，Sichuan，610041 P． R． China； 3． Sichuan Industry Institute of Antibiotics，Chengdu，Sichuan， 610051 P． R． China）
A
B
teprenone IS
5
10
15
5
10
15
t/min
图 1 空白血浆（ A） 、空白血浆 + 对照品（ 1． 68 mg·L －1 ） + 内标（ B）
溶液的色谱图
Fig 1 Chromatograms of blank plasma solution（ A） ，blank plasma
solution with control（ 1． 68 mg·L －1 ） and IS solution（ B）
李 婧，等。替普瑞酮在大鼠体内的药动学研究
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mL 具塞试管中，静置平衡 10 min 后，加入适量 NaCl 及 300 μL 磷酸盐缓冲液（ 磷酸二氢钾溶液用盐酸调 pH2. 5） ，混匀，加入 2． 5 mL 叔丁醚，旋混振荡提取 15 min，于 3 × 103 r·min － 1 离心 5 min，吸取有机相于 5 mL 尖底试管中，通氮气流挥干，残渣用 70 μL 流 动相溶解，混匀，于 3 × 103 r·min － 1 离心 5 min，吸取 50 μL 上清夜进样。 1． 2． 3 专属性考察 在“1． 2． 1”项色谱条件下，替 普瑞酮与内标的分离度符合要求，内源性成分无干 扰（ 图 1） 。 1． 2． 4 线性范围及定量限 于 200 μL 空白大鼠血 浆 中 精 密 加 入 对 照 品 溶 液，分 别 配 成 浓 度 为 0. 0084、0． 084、0． 168、0． 336、1． 68、3． 36、4． 2 μg· mL － 1 的标准血浆，按“1． 2． 2”项方法处理和测定，以 替普瑞 酮 峰 与 内 标 峰 面 积 之 比 对 替 普 瑞 酮 浓 度 （ μg·mL － 1 ） 进 行 线 性 回 归，得 回 归 方 程 为： Y = 0. 7485X + 0． 0291 （ r = 0． 9993） 。结果表明： 血浆中 8． 4 × 10 － 3 ～ 3． 36 μg·mL － 1 替普瑞酮与峰面积比值 的线性关系良好，定量限为 8. 4 μg·L － 1 。
表 1 大鼠血浆中替普瑞酮的日内和日间精密度测定结果（ n = 3） Table 1 The results of intra － day and inter － day precision and accuracy of Teprenone in rat plasma（ n = 3）
Added / μg·mL － 1
1 实验部分
1． 1 仪器、试药与动物 LC － 10Atvp 型高效液相色谱仪 （ 日本岛津） 。
替普瑞酮对照品（ 精制品，含量 99． 7% ） 、替普瑞酮 原料药（ 四川 YS 生物科技有限公司） ； 顺丁烯二酸
二异辛酯内标（ 上海试剂总厂） ； 乙腈为色谱纯； 水 为重蒸水； 其余试剂为分析纯。27 只健康 SD 大鼠 （ 四川大学实验动物中心） ，体重 0． 25 ± 0． 05 kg，♀ ♂兼用。 1． 2 方法与结果 1． 2． 1 色谱条件 采用 Luna C8 色谱柱（ 150 mm ×
1． 2． 5 精密度及准确度试验 取 200 μL 空白大鼠 血 浆，分 别 加 入 100 μL 不 同 浓 度 对 照 品 溶 液 （ 0. 0336、3． 36、6． 72 μg·mL － 1 ） 和 10 μL 内标溶液， 制成低、中、高浓度（ 0． 0168、1． 68、3． 36 μg·mL － 1 ） 的质控样品。按“1． 2． 2”项方法处理和测定，考察 日内和日间（ 10 d） 精密度及准确度。计算得 3 种浓 度的日内和日间 RSD 均小于 10% ，准确度为95% ～ 104% （ 表 1） 。
3． 3600 1． 6800 0． 0168
detected 3． 3699 1． 6607 0． 0161
Intra － day recovery / % 100． 30 98． 85 95． 83
RSD / % 3． 65 5． 76 8． 05
detected 3． 3762 1． 6976 0． 0174
4． 6 mm，5 μm） ，流动相为乙腈 － 水（ 88∶12） ，流速 1． 0 mL·min － 1 ，检测波长 205 nm，柱温 25 ℃ 。 1． 2． 2 溶液的制备及血浆样品的预处理 精密称 取适量替普瑞酮精制品，用甲醇溶解制成 8． 4 mg· mL － 1 对照品贮备液，于 4 ℃ 冰箱中保存，临用时，精 密吸取适量贮备液，用甲醇稀释至所需浓度。精密 称取适量顺丁烯二酸二异辛酯内标，用甲醇溶解制 成1 mg·mL － 1 内标贮备液，于 4 ℃ 冰箱中保存，临用 时，用甲醇配制成 300 μg·mL － 1 内标溶液。将 200 μL 血浆样品和 10 μL 300 μg·mL － 1 内标溶液加入 8
Cmax 和 AUC 与剂量间呈线性相关。结论 所用方法简便、灵敏、准确，适用于替普瑞酮的药动学研究。
关键词： 替普瑞酮； 药物动力学； 大鼠； 高效液相色谱法
中图分类号： R917
文献标志码： A
文章编号： 1006 － 0103（ 2012） 06 － 0682 － 03
Study on the pharmacokinetics of Teprenone in rats
Abstract： OBJECTIVE To establish an HPLC method for quantitative determination of Teprenone and to apply it to the study on
pharmacokinetics in rats． METHODS The sample was extracted with tert － butylmethylether and was determined by HPLC． Three
摘要： 目的 采用 RP － HPLC 法测定大鼠血浆中替普瑞酮浓度并用于大鼠药物动力学的研究。方法 血浆样品用叔丁醚萃
取，采用 HPLC 法测定。将大鼠分为高、中、低剂量组，ig 给药后测定血药浓度，绘制药 － 时曲线，计算药动学参数。结果 替
普瑞酮在大鼠体内代谢符合一室模型，3 种剂量的消除半衰期无统计学差异； 随着剂量的增加 Cmax 和 AUC 存在剂量依耐性，且
Inter － day recovery / % 100． 50 101． 00 103． 60
RSD / % 4． 25 7． 65 9． 65
1． 2． 6 回收率试验 取“1． 2． 5”项下 3 种浓度的 质控样品各 6 份，按“1． 2． 2”项方法处理和测定，记 录替普瑞酮的峰面积为 A1 ； 另分别取 100 μL 该 3 种浓度的对照品溶液及 10 μL 内标液，挥干，用 70 μL 流动相溶解，进样 50 μL，记录替普瑞酮的峰面 积为 A2 。以 A1 / A2 × 100% 计算提取回收率。3 种 浓度 样 品 的 提 取 回 收 率 分 别 为 67. 8% ± 9． 3% 、 79. 9% ± 4． 6% 、83． 2% ± 7． 9% （ n = 6） 。 1． 2． 7 稳定性的考察 取“1． 2． 5”项下 3 种浓度 的质控样品数份，分别于室温、－ 20 ℃ 反复冻融 3 次、－ 20 ℃ 存放，定期取样，按“1． 2． 2”项方法处理 和测定，与新鲜配制的各浓度质控样品相比，求得标 准血浆样品的偏差。血浆样品在室温下放置 10 h 基本稳 定，在 冻 融 条 件 下 24 h 内 基 本 稳 定，在 － 20 ℃ 下保存 1 月基本稳定。 1． 2． 8 动物实验 将大鼠试验前适应性喂养 3 d， 全程不禁饮水。将 27 只大鼠均分为高、中、低（ 40、 30、20 mg·kg － 1 ） 剂量组，分别 ig 相应浓度的替普瑞 酮，分别于 ig 前、后 1、2、3、4、5、6、7、8、10、12、24 h
Key words： Teprenone； Pharmacokinetic； Rat； HPLC
CLC number： R917
Document code： A
Article ID： 1006 － 0103（ 2012） 06 － 0682 － 03
替普瑞酮（ Teprenone） 为新型的胃黏膜保护剂， 能直接增加黏液的分泌和促进细胞的再生［1］，对任 何原因引起的胃溃疡均有明显的治疗作用，主要用 于治疗急、慢性胃炎及胃溃疡，在治疗活动性炎症、 提高溃疡愈合质量及降低溃疡复发率等方面的作用 尤为显著。替普瑞酮血药浓度的测定方法常采用 HPLC 结合荧光衍生化或质谱检测［2 － 3］，操作复杂。 现采用 HPLC 法测定大鼠血浆中替普瑞酮的浓度， 并进行大鼠药物动力学研究，为相关药动学研究以 及临床研究提供参考。
基金项目： 西南民族大学 2011 中央高校基本科研业务费专项资金项目（ 编号： 11NZYTD06） 作者简介： 李婧（ 1985—） ，硕士，从事药物分析与药物动力学的研究工作。 * 通信作者（ Correspondent author） ，Email： 27918716@ qq． com
第6 期
groups and there was no significant differences in t1/2，β among the 3 groups． AUC and Cmax increased proportionally with the dose． CONCLUSION This method is simple，sensitive，accurate and reproducible． It is applicable to the pharmacokinetic study of Teprenone．
DOI:10.13375/j.cnki.wcjps.2012.06.033
华西药学杂志 W C J· P S
2012，27（ 6） ∶682 ～ 684
替普瑞酮在大鼠体内的药动学研究
李 婧1 ，张wk.baidu.com丹2 ，孙文霞3*
（ 1． 西南民族大学化学与环境保护工程学院，四川 成都 610041； 2． 四川大学药学院，四川 成都 610041； 3． 四川抗菌素研究所 有限公司，四川 成都 610051）