细胞治疗原理及应用剖析

细胞治疗原理及应用

基本定义：

CIK（cytokine-induced killer，中文名：[自体细胞免疫疗法]多种细胞因子诱导的杀伤细胞），是将人外周血单个核细胞在体外用多种细胞因子（如抗CD3单克隆抗体、IL-2和IFN-γ等）共同培养一段时间后获得的一群异质细胞。由

于该种细胞同时表达CD3+和CD56+两种膜蛋白分子,故又被称为NK细胞样T淋巴细胞,兼具有T淋巴细胞强大的抗瘤活性和NK细胞的非MHC限制性杀瘤优点。因此,应用CIK细胞被认为是新一代抗肿瘤过继细胞免疫治疗的首选方案。

CIK细胞中的效应细胞CD3+和CD56+细胞在正常人外周血中极其罕见，仅1%—5%。2特点

CIK细胞中的效应细胞CD3+CD56+细胞在正常人外周血中极其罕见，仅1%～5%，在体外经多因子培养28～30天，CD3+CD56+细胞迅速增多，较培养前升幅可达1000倍以上。实验证明，扩增出的CD3+CD56+细胞来源于CD3+CD56-T细胞，而非CD3-CD56+NK细胞。同时发现在CD3+CD56-的T 细胞中，除CD4+CD8-T细胞外，其余三种T 细胞亚群（CD4-CD8+、CD4-CD8-、CD4+CD8+）均可通过体外多因子

培养而获得CD56分子的表达，而由于CD4+CD8+细胞和CD4-CD8-细胞在正常人外周血中含量极低而间接提示此CD3+CD56+细胞绝大多数来源于外周血中

CD4-CD8+T细胞。而由于CD4-CD8-T细胞在培养1个月后有近56%的T 细胞同时表达CD56和CD3，表明其也是CIK细胞的重要来源。比较CD3+CD56+CIK细胞中表达CD8+和CD8-,的两群细胞其杀瘤活性没有显著性差异，提示CIK细胞的细胞毒性与CD3CD56表达成相关趋势，而与CD8的表达未表现出相关性。

1.CIK细胞增殖速度快，抗肿瘤活性细胞可大量增殖，且细胞活性也大大增强。

2.CIK细胞具有识别肿瘤的机制，对正常的细胞无毒性作用。

3.杀瘤谱广，可用于白血病、淋巴瘤、肺癌、胃癌、肠癌等多种肿瘤的治疗，对

多重耐药肿瘤细胞同样敏感。

4.是典型的个性化生物治疗模式。将这类细胞回输后，还能使机体免疫能力提高，产生特异的抗病毒作用，从而对肿瘤治疗施以双重的作用。

5.由于CIK细胞是活化的自体细胞，用起来非常安全。

3杀伤原理

CIK细胞能够通过三种途径杀灭肿瘤细胞和病毒感染细胞：

①CIK细胞对肿瘤细胞和病毒感染细胞的直接杀伤：CIK细胞可以通过不同的机制识别肿瘤细胞，释放颗粒酶/穿孔素等毒性颗粒，导致肿瘤细胞裂解。

②CIK细胞释放的大量炎性细胞因子具有抑瘤杀瘤活性：体外培养的CIK细胞可以分泌多种细胞因子，如IFN-γ、TNF-α、IL-2等，不仅对肿瘤细胞有直接抑制作用，还可通过调节机体免疫系统反应性间接杀伤肿瘤细胞。

③ＣIK细胞能够诱导肿瘤细胞的凋亡：CIK细胞在培养过程中表达FasL（Ⅱ型跨膜糖蛋白）通过与肿瘤细胞膜表达的Fas（Ⅰ型跨膜糖蛋白）结合，诱导肿瘤细胞凋亡。

CIK细胞发挥作用的三种途径

4杀瘤特点编辑

应用LAK细胞是目前较为普及的肿瘤过继免疫治疗方案，广泛使用于黑色素瘤、

肾细胞癌、非霍奇金淋巴瘤、肺癌和结肠癌。因LAK细胞扩增数量有限，杀瘤活性也较TIL等T 淋巴细胞为低，故虽然杀瘤谱广，但效果局限。相比较而言，

TIL 细胞本身较LAK细胞具有更强大的抗瘤效力，但由于杀瘤谱窄，制备困难，

及在收集过程中可能导致的功能改变而限制了其临床应用价值。与上述两种效应细胞过继免疫治疗相比，CIK细胞具有独特的优势，列举如下。

1. 增殖速度快

CIK细胞在培养过程中加入IFN-γ、IL-1α、抗CD3、McAb、IL-2等多因子后，细胞增殖速度迅速加快，远超过LAK细胞。在培养第22天增殖曲线达顶峰，约

增加100倍，其中CD3+CD56+细胞不仅绝对数量增加1000倍以上，且所占百分

比也大幅上升，培养至28～30天时达平台期，细胞毒活性亦达峰值，而LAK细胞培养前后数量没有明显增加。

2. 杀瘤活性高

CIK细胞是以CD3+CD56+T细胞为主的异质细胞群，大量体内外实验证实CIK细胞较以NK细胞为主的LAK细胞具备更强大的杀瘤活性，而且其体内杀瘤细胞毒

性的维持不必依赖大剂量外源性IL-2的持续给予。体外实验中，任欢和Lu等均发现在体外等数量的CIK细胞比LAK细胞对肿瘤细胞系的杀伤能力稍高或相近，

但因CIK细胞在培养过程中CD3+CD56+效应细胞增长迅速，故CIK细胞的总杀伤单位（TLU）为LAK 细胞的73倍甚至更高，其杀伤效率显著高于LAK细胞。肿瘤克隆抑制实验显示，CIK细胞的瘤细胞抑制Log指数为2.5～3.5，较LAK细胞的瘤细胞抑制指数高2个Log。体内实验发现，对于在严重联合免疫缺陷小鼠身

上构建的人类B 细胞淋巴瘤SU-DHL4模型，CIK细胞在清除荷瘤鼠体内肿瘤病灶，抑制转移，延长生存期等方面的作用均明显优于LAK细胞。

3. 杀瘤谱广

CIK细胞虽然以CD3+CD56+ T细胞为主要效应细胞，但却没有T 淋巴细胞杀伤时的MHC 限制性，故对于多种肿瘤细胞系（包括NK敏感的K562和NK不敏感的Hela、HL60、人T 细胞急淋白血病细胞系OCRF-CEM，人淋巴瘤细胞系OCI-LY8、LAM53，人结肠癌细胞系HT-29、CR75，人肾癌细胞系A704）和新鲜肿瘤组织均表现出强

大的杀伤活性。

4. 对多重耐药肿瘤细胞同样敏感

，发Wolf用阿霉素和长春新碱诱导出多重耐药细胞系K562/DOX和CCRF-CEM-VBL 现CIK细胞对化疗药物敏感的亲本细胞和不敏感的转化细胞均具有强大的杀伤

活性，两者比较无差别。