流式细胞术对急性白血病免疫分型的临床意义
流式细胞术(FCM)在急性白血病免疫分型中的临床意义研究
流式细胞术（FCM）在急性白血病免疫分型中的临床意义研究发表时间：2016-11-22T17:22:49.410Z 来源：《航空军医》2016年第21期作者：王红艳1 许兴路2 [导读] 白血病是严重威胁人类生命健康的恶性疾病之一，是造血干细胞的恶性克隆性疾病。
1哈尔滨市红十字中心医院黑龙江哈尔滨 150000；2黑龙江省医院黑龙江哈尔滨 150000 【摘要】目的：分析流式细胞术在急性白血病免疫分型中的临床意义。
方法：采用流式细胞术对急性白血病细胞进行免疫分型结合传统细胞形态学检查，对2种检测结果进行分析。
结果：1、临床初诊52例白血病患者中，FAB分型AML27例，ALL25例。
流式细胞术检出单纯型AML19例，伴淋系6例；单纯型ALL14例，伴髓系10例；双表型2例，未分化型1例。
2、AML 形态学分型与免疫分型完全符合率66.7%、部分符合率22.2 %；ALL 形态学分型与免疫分型完全符合率56 %，部分符合率40%。
结论：利用流式细胞术，识别白血病细胞分化抗原（CD）系列的特异性荧光素标记的McAb鉴别膜、浆与核的抗原，对白血病的诊断及分型具有重要作用，是FAB分型的重要补充，两者结合可提高诊断准确率。
【关键词】流式细胞术（FCM）；急性白血病；免疫分型Reserch on the clinical significance of flow sytometry in the classification of acute leukemia 1Wang Hongyan，2Xu Xinglu（1Ha Erbinred cross center hospital，Hei Longjiang，Ha Erbin150000；2Hei Longjiang Provincial Hospital，Hei Longjiang，Ha Erbin150000）【Abstract】 Objective：Analyze the clinical significance of flow cytometry in the classification of acute leukemia.Methods：2 kinds of detection results were analyzed by using flow cytometry to detect the expression of ALL cells in combination with traditional cell morphology.Results：1、52 cases diagnosed leukemia patients，among these，FAB typing AML27 cases，ALL25cases，detect by flow cytometry，AML19 cases，Ly +AML6 cases；ALL14 cases，My +ALL10 cases；HAL2 cases，UAL1 cases. 2、In AML the accordance rate and part accordance rate of the two phenotypes was 66 .7% and 22 .2%.In ALL the accordance rate was and part accordance rate was 56% and 40%.Conclusion：Using flow cytometry，identification of a series of leukemia cell differentiation antigen （CD）- specific fluorescein labeled McAb to identify the membrane，cytoplasm and nuclear antigen，plays an important role in leukemia diagnosis and typing，and also is an important supplement of FAB typing，the combination can improve the accuracy of diagnosis.Key words：flow cytometry；acte leukemia；immunophenotype白血病是严重威胁人类生命健康的恶性疾病之一，是造血干细胞的恶性克隆性疾病，因白血病细胞自我更新增强、增殖失控、分化障碍、凋亡受阻，而停滞在细胞发育不同阶段，白血病细胞大量增殖积聚，致使造血功能不能正常进行[ 1]。
流式细胞术系列之-白血病免疫分型
M1：未分化的原粒细胞白血病；
FAB
分
M2：部分分化的原粒细胞白血病；
型
急非淋
M3：急性早幼粒细胞白血病；
（ANLL） M4：急性粒、单核细胞白血病；
急性髓细胞白 血病(AML)
M5：急性单核细胞白血病； M6：急性红血病或红白血病；
M7：急性巨核细胞白血病。
MIC分型
形态学
(morphology， M ) ：传统的骨髓片检查
B-ALL
在CD45/SS点图中，幼稚细胞群体低SSC信号，与成熟淋 巴细胞比较CD45弱表达
du p eng .0 01
R3
R5 100
R4
101
R1
R2
102
103
CD4 5 PerCP-Cy5.5
104
CD19、CD20、 CD10、cCD72、 CD34、HLA-DR 阳性
AML-M0
AML-M6 （急性红白血病）
• 髓细胞白血病红细胞分化型对应于FAB的M6，在形态学上 幼稚红细胞计数大于髓系细胞的50%且髓系幼稚细胞占非 红细胞的30%以上。然而因为幼红会因标本处理中溶血步 骤而被破坏，当流式细胞仪分析时有核红细胞占总细胞数 的50%以下时，红细胞白血病很难与MDS（骨髓增生异常 综合症）和早期白血病区分开来。
故难圈出独立成群的肿瘤细胞。 • 对于M4病例一般都设多个门对异常细胞进行分析，且每个异常细胞群根据
其成熟度的不同，表型也可能互不相同。 • 本例为M4EO，增多的嗜酸细胞SSC信号与早幼粒相似;CD45信号与单核细
胞相似。
• CD13和/或 CD33阳性， CD33>CD13， HLA-DR、 CD14（+/-）、 CD15与CD11B 阳性。CD34阳 性/阴性，MPO 阳性。
白血病免疫分型初筛方案
白血病免疫分型初筛方案白血病免疫分型初筛方案白血病是一种由于造血干细胞异常增殖引起的恶性血液病，其临床表现及预后差异较大。
对于白血病患者的治疗和预后判断，准确的分型至关重要。
近年来，随着免疫学研究的进展，白血病的免疫分型成为了一个重要且具有指导意义的方面。
本文将介绍白血病免疫分型的初筛方案，以及其对临床的意义和应用。
一、什么是白血病免疫分型？白血病免疫分型是通过检测白血病患者的免疫表型，即细胞上表达的抗原和细胞表面标记物，来确定白血病的类型和亚型。
目前，常见的白血病免疫分型方法主要包括流式细胞术、免疫组化、免疫电镜等。
二、为什么需要白血病免疫分型？白血病患者的治疗和预后与其分型紧密相关。
不同类型的白血病具有不同的临床表现、生物学特点和预后，准确的分型对于指导个体化治疗非常重要。
免疫分型不仅可以帮助医生确定病情严重程度、制定个体化治疗方案，还可以对患者的预后做出评估。
对于一些疑难病例，免疫分型还有助于确定病理诊断和鉴别诊断，减少误诊和漏诊的发生。
三、白血病免疫分型的初筛方案目前，国际上广泛应用的白血病免疫分型初筛方案主要是基于流式细胞术。
这一方法具有快速、准确、多参数检测的特点，使得它成为了白血病免疫分型的首选工具。
白血病免疫分型的初筛方案通常包括以下几个方面的内容：1. 纵向免疫分型纵向免疫分型主要是通过检测白血病细胞表面的免疫表型，确定白血病的类型和亚型。
对于怀疑白血病的患者，医生通常会进行一系列免疫标记物的检测，如CD45、CD34、CD13、CD33、CD14、CD15等。
这些标记物可以帮助医生确定白血病患者的分型，指导后续的治疗和预后评估。
2. 横向免疫分型横向免疫分型则是通过比较不同类型的白血病细胞表面的免疫表型，辅助鉴别白血病的类型和亚型。
在横向免疫分型中，医生通常会检测同一类别不同亚型的白血病患者的共同抗原和独特抗原，以确定其具体的亚型。
3. 免疫细胞化学分析免疫细胞化学分析是一种通过检测白血病细胞内特定抗原的染色反应，来确定白血病的类型和亚型的方法。
流式细胞术在急性白血病细胞免疫表型分析中的价值
维普资讯
主要医学杂志 ２０ 年 ｉ ０６ 月第２ 卷第 １ ８ 期 Ｎｎｘ ｉ Ｊ ． ０．ｏ２．ｏ １ ｉ ｉＩ ｄ ．ａ ２ ６Ｖｌ８Ｎ ． ｇ ａｖ Ｊ ｎ ０ ｅ
文章编号： ０— ９９２０） — ００ ０ １ １ ５ （ ６０ ０３— ３ ０ ４ ０ １
Ｆｌｗ ｙ ｏ ｅｒ ｎａｙ ｉ ｆａ ｔ ｅ Ｉｕｋ ｍｉ ｍ ｍ ｕ ｐ ｎ ｔ ｐｉｇ ｏ ｃ ｔ ｍ ｔ ｙ ａ ｌ ｓｓｏ ｃ ｕ ｅ ｅ ａ ｉ ｎｏ ｈｅ ｏ ｙ ｎ
Ｂ ｏ一 跏 ， ａ
Ｚ ｉ ｏ ｇ ｈ —ｈ ｎ ．
１ ２一ｂ ．Ｔ ｅＡ ｆｉ ｅ ｏｐ ｏ Ｎ ｎ ｘ ｄ ｏ ． Ｙ ｎ ｈ ａ ５ ｏ ４ Ｃ ｉ ） ｉ （ ｈ ｆｌ ｔ Ｈ ｓ ． ｆ ｉ ｉ Ｍｅ ．Ｃ ｌ ， ｉ ｕ ｎ７ ｏ ０ ． ｈ ａ ｎ ｉ ｄ ａ ｇａ １ ｅ ｎ
型。结果 分析 ７ ５例急性 白血病患者 中， 急性 Ｔ淋巴细胞 白血病（ Ｊ） Ｔ一 ． 患者 １ ， １ ． ％； ２例 占 ６ ０ 急性 Ｂ淋 巴细胞
白血病（ Ｂ—Ａ Ｌ） ｌ 患者 ２ ４例， ３ ． ％； 占 ２０ 急性 髓细胞 白血病 （ ＾ 患者 ３ Ａ， ） Ⅱ ７例。 ４ ． ％。混合 型急性 Ｈ Ｉ 占 ９３ ＡＪ Ｂ有 ２ 例 ． ２６ 占 ．％。ＡＪ 患者 除均表 达淋系抗原外． Ｉ 同时伴有髓 系统 抗原的表 达 ；ＭＩ患者除均表达髓 系抗原外 ． Ａ 少部分 同时伴有淋 系抗原 的表达。Ａ Ｉ细胞表 面抗 原表 达百分率 成人明显高 于儿童 （３ ２ ％） Ｍ ７ ％／７ 。结论 流式 细胞技 术 能准确地分析井 鉴别出急性白血病各型别。 白血病 诊断分型的重要手段之一。 是 ［ 关键 词］ 流式细胞术 ； 白血病 ； 荧光抗体 ； 细胞 免疫表 型 ［ 中图分类号 ］ Ｒ ４ ．３ ４６６ ［ 文献标识码】 Ａ
流式细胞术在白血病诊断中的应用价值
流式细胞术在白血病诊断中的应用价值流式细胞术是一种集多种先进技术于一体的较为实用的检测手段，近年来广泛应用于医学研究的各个领域。
本文中笔者结合临床工作中的具体病例，探讨流式细胞术在白血病诊断中的应用价值。
标签：流式细胞术；白血病；诊断；价值流式细胞术是20世纪70年代发展起来的，以流式细胞仪为工具对细胞等生物粒子进行定性及定量分析研究的一种新技术，近年越来越多地应用于医学临床，特别是随着细胞单克隆抗体标记技术的发展，应用流式细胞仪研究、分析恶性血液病细胞的异常免疫表型，已经成为现代医学研究血液病的可靠方法[1-2]。
现结合我科具体病例，探讨流式细胞术在白血病诊断中的应用价值。
1 临床病例病例1，女，25岁，因“反复四肢关节肿痛三年余，伴全身浅表淋巴结肿大、肾功能损害3个月”于2008年9月28日来诊，曾在外院诊断为“①慢性肾功能不全；②系统性红斑狼疮？”来诊时疲倦乏力明显，四肢关节轻度肿胀，疼痛有热感，全身浅表淋巴结肿大，以颈部淋巴结明显，血肌酐、尿素氮轻度升高，血常规示为WBC 6.39×109/L，HGB 65 g/L，PLT 194×109/L，并可见一定数量幼稚细胞。
入院后即行骨髓穿刺及骨髓活检术，作骨髓细胞形态学及病理学检查，并以血常规管抽取静脉血3 ml作流式细胞术分析。
当日骨髓细胞形态学报告提示：淋巴瘤白血病。
2 d后流式细胞检查结果回复：幼稚细胞占61.8%，其表型为CD34＋，CD117-，TDT＋，CD79a＋，CD33＋，CD13＋，HLA-DR＋，CD19＋，CD56-，CD38-，CD10-，CD14-，CD64-，CD2-，CD3-，CD5-，CD7-，结果符合前驱B急性淋巴细胞白血病/淋巴母细胞淋巴瘤。
回顾临床资料，该患者起病以来血小板计数一直正常，并主要以淋巴结肿大、四肢关节肿胀疼痛为表现，符合淋巴母细胞淋巴瘤外周血和骨髓的受累很少导致血小板减少，以及该病主要以淋巴结和骨及骨关节易受侵的特点。
流式细胞术在我院急性白血病免疫分型中的应用
ｄ ｏ ｉ ： １ ０ ． １ １ ７ ４ ８ ／ ｂ ｊ ｍｙ ． ｉ ｓ ｓ ｎ ． １ ０ ０ ６ ． １ ７ ０ ３ ． ２ ０ １ ３ ． ０ ６ ． ０ １ ６
Байду номын сангаас
Ａｐ ｐ ｌ ｉ ｃ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ｏ ｆ Ｆｌ ｏ ｗ Ｃｙ ｔ ｏ ｍｅ ｔ ｒ ｙ ｉ ｎ Ｉ ｍｍｕ ｎｅ ｆ ｒ ｏ ｍ ｔ ｈｅ Ｃｌ ａ ｓ ｓ ｉ ｉｃ ｆ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ｏ ｆ Ａｃ ｕｔ ｅ Ｌｅ ｕｋ ｅ ｍｉ ａ
（ 福建 中医药大学附属三 明市 中西 医结合 医院， 福建 三 明 ３ ６ ５ ０ ０ １ ） 摘要： 目的 探讨本实验室所 用 １ ３种单抗对 白血病免疫分型的应用价值。方法 应 用流式细胞术 （ Ｆ Ｃ Ｍ） 使用 １ ３种单抗
对９ ９例急性 白血病 进行 免疫分型 ， 与形 态学分型相 比较。结果 使 用 １ ３种单 抗从 ９ ９例急性 白血 病 中分 出髓系 白血 病
（ Ａ ＭＬ ） ５ ９例 、 淋 系白血病 （ Ａ Ｌ Ｌ ） ２ ７例 、 混合 型（ Ｍ Ａ Ｌ ） ５例 、 未分化 型 （ Ａ Ｕ Ｌ ） ２例 ， 诊 断率达 ９ ３ ． ９ ％（ ９ ３ ／ ９ ９ ） 。Ａ ＭＬ中各 抗 原表达情况 ： ｃ Ｄ １ ３ ＞Ｃ Ｄ ”＞ ｃ Ｄ ｌ ４ 、 ｃ Ｄ ７ ＞ｃ Ｄ ２ 、 ｃ Ｄ ｌ ９＞ Ｃ Ｄ １ ０＞ Ｃ Ｄ ５＞ Ｃ Ｄ ２ ０ ， 其 中多表达 ｃ Ｄｌ ３ 、 ｃ Ｄ ３ ３ ； Ａ Ｌ Ｌ中各抗 原表 达情 况： Ｃ Ｄ ｌ ９ ＞Ｃ Ｄ ｌ ３ ＞Ｃ Ｄ ｌ ０ ＞Ｃ Ｄ ２ ０ ＞Ｃ Ｄ ３ ３ ＞Ｃ Ｄ ５ ＞Ｃ Ｄ ７ ＞Ｃ Ｄ ２ 、 Ｃ Ｄ …其中 Ｃ Ｄ ｌ ｕ 、 Ｃ Ｄ Ｃ Ｄ Ｃ Ｄ ２ ０ 表达率较高 。免疫分 型与形 态学分型结果相 比较 ， Ａ ＭＬ二者的吻合率 为 ９ ０ ． ５ ％（ ５ ７ ／ ６ ３ ） 、 Ａ Ｌ Ｌ二者 的吻合率 为 ７ ６ ． ５ ％（ ２ ６ ／ ３ ４ ） ； 其 中 １例 Ｍ ０免疫 分 型为 Ｂ ／ Ｍ混合 、 １ 例 Ｍｌ 免疫分 型为 Ｔ ／ Ｍ混合 、 １ 例Ｍ ａ 免疫分 型为 Ｔ ／ Ｍ 混合 、 １ 例Ｌ 。 免疫分型 为 Ｂ ／ Ｍ混 合 、 １例 Ｌ 免 疫分型为 Ｔ ／ Ｂ混合 、 １ 例Ｌ ： 免疫分型为 Ｌ ｙ ＋一 Ａ ＭＬ 、 ２例 Ｌ 免疫 分型 为 Ａ Ｕ Ｌ ； １ 例 形态学 为浆细 胞 白血 病的免 疫分 型为 Ａ ＭＬ 、 １ 例淋单混合型 白血病 Ｃ Ｄ 、 Ｃ Ｄ 。 、 Ｃ Ｄ 。 阳性 。结论 合型和未分化型 白血病 的诊断亦能 明确 。 关键词 ： 流式细胞术 ； 白血病 ； 免疫 分型
白血病免疫学积分系统意义
白血病免疫学积分系统意义白血病是一种恶性肿瘤，由于白血球数量过多，常导致免疫系统功能受损、贫血和感染等问题。
白血病免疫学积分系统（Leukemia Immunophenotyping Scoring System，LISS）是一种流式细胞术用于白血病分类和治疗评估的指南。
本文将重点讨论该系统的意义。
一、白血病分类LISS是根据不同免疫分型信号分子的表达情况诊断血液病的一种方法，通过分析血液细胞表面分子的表达情况，判断其类型和亚型。
白血病在免疫系统内的分化和发展是复杂的，因此需要结合多种免疫学参数来做出准确的分型判断。
LISS包括采用不同的物质特征进行临床分型，如T细胞、B细胞、浆细胞、中性粒细胞等。
由于不同的蛋白质在不同的白血病细胞中表达的量和类型不同，LISS使得这些白血病类型的分析更为准确。
二、白血病治疗LISS对白血病的治疗有着重要的指导意义。
在识别白血病类型后，LISS可以帮助医生鉴别白血病类型和是否有遗传异常，在治疗方案制定和完善中发挥重要作用。
针对广泛应用的治疗方案，如化疗和干细胞移植，LISS也可以提高其疗效，预测疗效和潜在的不良反应。
LISS不仅可以用于血液恶性肿瘤的分型，也可以用于其他类似的疾病分类和治疗评估。
三、临床应用随着科技的创新和发展，LISS已经逐渐应用到诊断实践中。
流式细胞术是目前白血病诊断和分类中最为常用的方法之一，它主要依靠光学原理和荧光染色来测量细胞的物理和生化特性，从而实现白血病的分类和监测。
LISS最初是在1998年被引入到临床中，经过多年的探索和改进，现在已经成为现代医学中的一个基本流程，有望广泛应用于临床诊断和研究领域。
综上所述，LISS是一种基于流式细胞术的免疫学指南，可以辅助诊断、治疗和预测白血病的疗效，对于提高白血病治疗的可行性和可靠性有重要的作用。
随着人类对细胞学和遗传学的认识不断深入，LISS未来还有望在更多的领域和方法中得到应用，成为医学发展前沿的重要一环。
流式细胞术的临床应用
一、诊断性指标如图1所示，图（左）白血病细胞成为一个单一的群体，很难区分原始或病态的白血病细胞和成熟的细胞。
但是通过CD45和（SSC）设门法之后（图右），看到图（左）无法区分细胞被分成了五群。
在这五群中，成熟细胞CD45表达的荧光比较强。
A门里是淋巴细胞，B门里是单核细胞，C门里就是粒细胞群，D门里是原始细胞，一般CD45表达较弱。
一些细胞碎片、红细胞和转移来的瘤细胞，由于不表达CD45，可能位于D门、D门偏下或者E门的位置。
CD45结合侧向散射光之后能把白血病细胞找出来，减少了其它细胞的干扰。
对D门里的白血病细胞做进一步的分型，就能准确看到白血病细胞群免疫分型的表达情况。
图13.白血病的特异性标志免疫表型分析主要是根据细胞的特异表面标志，把白细胞分成T细胞、B细胞和原始细胞。
T淋巴细胞白血病一般表达的分化抗原有胞浆内的cCD3、抗TCRαβ、抗TCRγδ、CD2、CD5、CD8、CD10和CD7；B淋巴细胞白血病一般表达的分化抗原有胞浆内的cCD79a、CD22、CD19 、CD10和CD20；髓系白血病一般表达的分化抗原有胞浆内的cMPO、CD117、CD13、CD33、CD14、CD15和CD64；NK淋巴细胞白血病一般表达的分化抗原有CD16、CD56和CD57；红白血病一般表达的分化抗原有GlyA和CD36；巨核细胞白血病一般表达的分化抗原有CD41、CD42和CD61；一系列非特异标志在不同的白血病中可能都有表达，尤其是表达在早期的造血干组细胞上，一般表达的分化抗原有CD34和HLA-DR。
其中，对T淋巴细胞白血病来讲比较特异的是胞浆内的CD3，当胞浆内CD3出现阳性的时候，高度怀疑是T淋巴细胞白血病。
对于B淋巴细胞白血病来讲，胞浆内的CD79a和CD19是比较特异的，cCD79a最具特异性。
cCD3和cCD79a分别表达于早期T细胞和B细胞。
cMPO是髓系特异标志。
如图2所示为B-ALL的表达图。
流式细胞仪在白血病诊断中的意义
流式细胞仪在白血病诊断中的意义一、流式细胞仪在白血病免疫分型诊断的概述近年来白血病的免疫分型已成为诊断血液恶性肿瘤不可缺少的重要标准之一。
早年曾用过的荧光显微镜或APAAP方法基本被废弃。
国际上公认的通用的方法是流式细胞术（FCM）。
流式细胞术白血病免疫分型是利用荧光素标记的单克隆抗体（McAb）作分子探针，多参数分析白血病细胞的细胞膜和细胞浆或细胞核的免疫表型，由此了解被测白血病细胞所属细胞系列及其分化程度。
1、流式细胞仪诊断白血病的依据（1）FCM能快速，多参数，客观的定性又定量测定细胞膜、浆、核的抗原表达。
（2）至今尚未发现白血病的特异抗原。
（3）能用正常血细胞的单抗来进行免疫分型是基于白血病形成的分化阻断学说。
即白血病细胞基因异常，分化受阻于某阶段形成不同亚型的白血病。
这群细胞充盈于骨髓。
正常血细胞从多能干细胞分化、发育、成熟为功能细胞的过程中，细胞膜、细胞浆或胞核抗原的出现、表达增多与减少甚至消失与血细胞的分化发育阶段密切相关，而且表现出与细胞系列及其分化程度相关的特异性。
因此，这些抗原的表达与否可作为鉴别和分类血细胞的基础。
白血病是造血系统的恶性肿瘤，在形态上变化虽相当大，但仍能表达正常血细胞所具有的抗原，因而仍可依据其抗原的表达谱对白血病进行免疫分型。
2、流式细胞仪诊断白血病的意义（1）骨髓血细胞是形态学分型的基础，FCM白血病免疫分型是对形态学分型的重要补充和进一步深化，国际白血病MIC分型协作组认为免疫分型对每一例急性白血病都是必不可少的，对下列情况意义更大：①用形态学、细胞化学染色不能肯定细胞来源的白血病。
②形态学为急性淋巴细胞白血病（ALL）或急性未分化白血病（AUL）但缺乏特异性淋巴细胞系列抗原标记。
③混合性白血病。
④部分髓系白血病。
目前，免疫分型对粒细胞和单核细胞白血病的鉴别尚有一定困难。
⑤慢性淋巴细胞白血病。
⑥微小残留白血病。
（2）临床预测；可根据抗原的表达情况预测病情的预后：如白血病患者有CD7+与CD34+共表达，预后不好。
急性白血病流式细胞术免疫分型的特点及临床意义
急性白血病流式细胞术免疫分型的特点及临床意义
王桂芝;秦文华
【期刊名称】《中国临床保健杂志》
【年(卷),期】2012(015)002
【摘要】目的探讨急性白血病流式细胞术免疫分型的特点及临床意义.方法 100例急性白血病,采用流式细胞术进行急性白血病免疫表型检测.结果①用特异性抗体将急性淋巴系白血病分为T细胞系列急性淋巴细胞白血病( T-ALL)和B细胞系急性淋巴细胞白血病(B-ALL).②用特异性抗体使急性髓细胞白血病(AML)的分型更明确.③发现急性淋巴细胞白血病(AL)中伴髓系抗原表达(My-ALL)、AML中伴淋系抗原表达( Ly AML)和混合型白血病.结论免疫学分型能反映白血病细胞的特征,提高了诊断的准确性.
【总页数】3页(P141-143)
【作者】王桂芝;秦文华
【作者单位】中平能化集团总医院病理科,平顶山467000;中平能化集团总医院病理科,平顶山467000
【正文语种】中文
【中图分类】R733.71
【相关文献】
1.93例急性白血病流式细胞术免疫分型的特点分析 [J], 袁莉;杨玉琮;陈葳
2.129例急性白血病流式细胞术免疫分型的特点分析 [J], 刘志祥;姚忠红;李瑞明;
王晓勋
3.流式细胞术对急性白血病免疫分型的临床意义 [J], 孔令环;韩梅;鲍彦娜;王雪野;肖中平;陈琳;封韬
4.流式细胞术对急性白血病免疫分型的临床意义 [J], 梁秋
5.流式细胞术对急性白血病免疫分型的临床意义 [J], 金莹
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急性白血病系别判断的流式细胞免疫分型
三、急性白血病系别诊断标准
• EGIL诊断标准缺点： • （1）关于阳性定义，因为影响因素众多，有时存在歧义； • （2）对于某些覆盖率低、特异性高的标志，给予分值低或者未纳入，如CD64、CD14； • （3）对某些常见伴系表达标志予以极低分值，如CD7，未考虑荧光强度的差异； • （4）对于相对特异、在某系别易于伴发的标志，未考虑差异对待，如cCD79a、CD10
三、急性白血病系别诊断标准
• 鉴于几乎没有任何标志是绝对敏感和特异的，做全标志有助于降低误诊风险，因此 在系别筛查时如果出现系别标志表达过多或者过少，或者伴系表达标志的强度超过 标本中残留的正常细胞时，首先应该做全两个诊断标准涉及的相关系别标志，必要 时甚至需要增加CD371等新的髓系标志。
• 在此过程中可以选择一步法或者两步法。选择一步法的实验室，以目前常用3激光8 色机型为例，可供参考的5管法见表3；选择两步法的实验室，第一步进行系别筛查， 包括髓系MPO（或者CD33）和CD117，T系CD7和cCD3、B系CD19和CD22，根据 采用仪器型号不同可能有差异，4色方案可以参考2015年4色流式细胞术中国专家共 识，3激光8色推荐方案见表3。
三、急性白血病系别诊断标准
三、急性白血病系别诊断标准
• 注意几个标志的FCM检测： • （1）MPO：使用克隆号8E6、MPO-7的抗体需要小心，因为均有在B-ALL表达的
报道；阳性阈值虽然大多数沿用10%，但是建议结合荧光强度，并且不典型病例应 该做全其他髓系标志，并结合细胞化学和免疫组化MPO检测结果；FCM破膜处理 可能会使粒细胞的侧向角光散射（side scatter，SSC）降低，从而影响CD45/SSC设 原始细胞门的精确度，导致假阳性结果，正确的方法应结合原始细胞标志修订设门。
流式细胞术免疫分型在急性髓细胞白血病诊断中的应用何文英
·综述·流式细胞术免疫分型在急性髓细胞白血病诊断中的应用江西省抚州市医学科学研究所（344000）何文英南昌大学第一附属医院彭宽流在医学研究领域中，流式细胞仪（flow cytometer，FCM）能够快速分析单个细胞的多种特性，它既可以定性也可以定量，适用于大量标本的检测。
流式细胞仪可以为全血、骨髓、渗出液、脑脊液、尿液和固体组织等很多的样本进行免疫分型，并可检测细胞大小、胞质内容物、DNA、RNA及大量的膜蛋白和胞内蛋白。
临床上采用的急性白血病法，美、英协作组分类标准（FAB）分类方法是基于形态与细胞学检查基础，但这种方法对于来源于同一系列的急性白血病间的鉴别不甚理想，甚至有时对于不同系列的白血病鉴别也较困难[1]。
对伴有髓系抗原表达的急性淋巴细胞白血病（ALL）、伴有淋系抗原表达的急性髓细胞白血病（AML）、区分T-ALL和B-ALL、急性混合型以及细胞形态特征不典型的白血病等的诊断也较困难。
自从Foon与Todd在1986年提出白血病免疫分型以来，FCM已成为诊断血液系统恶性肿瘤不可缺少的重要工具，广泛应用于白血病的临床检测[2]。
其突出的优势是能在分子水平对细胞的理化性质和免疫学特征进行简单、快捷、定性、定量分析，且能够检测残存白血病或标本中幼稚细胞低于50%的白血病[3]。
精确的流式细胞仪技术免疫分型通过分析白血病细胞群中特异抗原（CD）的表达特点，不仅能够给诊断提供客观的指标，而且能够根据某些抗原表达的情况来研究疾病的发展和判断预后[4]。
以下阐述流式细胞仪技术免疫分型在急性髓细胞白血病诊断中的应用。
1流式细胞仪的工作原理流式细胞仪的结构一般可分为5个部分：①流动室及液流驱动系统；②激光光源及光束成形系统；③光学系统；④信号检测与存储、显示、分析系统；⑤细胞分选系统。
流式细胞仪可以检测单个细胞的可见光和荧光特性。
通过检测细胞大小和内容物等物理特性可以对细胞进行分群。
流式细胞术在白血病中应用
病例二（续1）
2008.11 化疗 第20个月： FCM：未见明显表型异常的残留白血 病细胞。（未附图） 基因：未做。 2009.09 化疗 第30个月： FCM：可见残留，在CD45dim/-区域可 见约1.87%的CD10+CD19+CD20-细胞和 约1.55%的HLA-DR+CD19+CD34+细胞， 考虑为残留白血病细胞。（见右图） 基因：未做。
Outline of Leukemic Diagnosis
Primary leukemi
a
Induction
Leukemic cells
1012 100%
Morphology: 1-5%, Cytogenetics: 1-5%, Flow cytometry: 0.1-0.01%, RT-PCR: 0.01-0.001%
病例二（续2）
2010.03 化疗+DC-CIK 第36个月： FCM印象：在CD45/SSC点图上设门分析， CD45阴性略向原始延伸的分布区域可见异常 细胞群体，与有核红细胞无分界，共约占有 核细胞的89%，主要表达HLA-DR、CD10、 CD15、CD19、CD20、CD22、CD34、CD38、 cCD79a、TdT。提示：结合病史，考虑急性B 淋巴细胞白血病（普通型B-ALL）复发。 基因：ALL基因筛查示TSL/ERG阳性，其余均 阴性。
白血病分子诊断的意义
白血病初发
系统诊断
MICM诊断
异常标记
免疫/遗传学靶标
精确诊断 准确预后 指导治疗 科研资料
残留监测 靶向治疗
WHO血液肿瘤新分类实验技术平台
实施WHO血液肿瘤新分类方案高 度依赖流式细胞、细胞遗传和分子生 物学实验技术平台以及掌握这类实验 技能并具有专业知识的人员。
小儿急性白血病的免疫表型分析及其临床意义
［ 关键词 ］ 急性 白血 病 ； 免疫表 型； Ｄ ４；Ｄ Ｃ３ Ｃ７ ［ 中图分类号 ］ Ｒ ２ ． ７５ ５ ［ 文献标识 码］ Ａ
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医学杂志 ２１ 年 ０１
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白血病流式免疫分型
白血病流式免疫分型白血病是一种造血系统恶性肿瘤，由于白细胞数量和质量的异常增加，导致机体免疫功能下降，造成多种系统和器官功能异常。
白血病的治疗首先需要确定其类型和分型，以便制定有效的治疗方案。
流式免疫分型作为一种先进的白血病诊断技术，已被广泛应用于临床实践中。
白血病流式免疫分型是将细胞标记物与荧光标记结合，通过流式细胞术对细胞进行定量、定性的分析，进而确定白血病的类型、分型。
它可以快速、灵敏地检测单个细胞，检测出极低浓度的异常白细胞，并对相关疾病进行准确的诊断和分类，特别是对淋巴瘤和白血病的鉴别诊断。
流式免疫分型在白血病治疗诊断中的应用既可以确定疾病的类型，也可以指导治疗方案的制定。
对于急性白血病的治疗而言，流式免疫分型可以评估化疗药物敏感性、预测预后，以及指导骨髓移植的实施，从而提高治疗的效果和疗效。
对化疗失败的慢性淋巴细胞白血病患者进行流式免疫分型，可以确定其恶性程度、预测预后及制定诊断治疗方案，如靶向药物治疗等新的治疗手段。
不过，需要指出的是，流式免疫分型虽然是一种有效的白血病诊断技术，但其存在一定的局限性。
例如，对于某些罕见的白血病类型，目前流式免疫分型无法完成准确的分类，需要结合其他诊断手段进行综合判断。
同时，由于流式免疫分型涉及大量的细胞学和生化实验，其实验成本也比较高，还需要一定的技术开销和专业操作的知识。
综上所述，白血病流式免疫分型作为一种先进的白血病诊断技术，已经逐步成为临床实践中的标准操作。
它可以对白血病患者进行准确的分类和疾病诊断，指导治疗方案的制定，同时也为临床科研提供了有力的手段和工具。
但需要注意的是，流式免疫分型还需要不断探索和深入，结合其他先进技术和诊疗方法，共同提高白血病治疗的水平和效果。
流式细胞术对急性白血病免疫分型的临床价值
流式细胞术对急性白血病免疫分型的临床价值发布时间：2021-09-03T07:47:06.994Z 来源：《医师在线》2021年5月10期作者：刘玉兰[导读] 研究急性白血病实施流式细胞术对免疫分型的临床价值。
刘玉兰（赣州市人民医院；江西赣州341000）【摘要】目的：研究急性白血病实施流式细胞术对免疫分型的临床价值。
方法：选择50份急性白血病患者的细胞标本，在免疫分型中实施流式细胞术。
结果：此次实验结果得出，淋巴细胞白血病、骨髓性白血病、混合型白血病分别是17例、30例、3例；骨髓性白血病纯骨髓性免疫分型比率明显更高。
结论：急性白血病患者免疫分型中实施流式细胞术，可提高患者免疫分型准确性，有助于患者获得对症治疗。
【关键词】流式细胞术；急性白血病；免疫分型；临床价值临床常见白血病，病情严重，患者存在恶性增殖克隆性造血干细胞情况，会对细胞分化造成影响，骨髓内，大量积累其他物质情况下，会对周围器官以及组织造成干扰，人体正常造血功能会发生障碍，导致出血、贫血、感染等情况发生，若情况严重，会导致患者脏器肿大，例如脾脏、肝脏以及淋巴结等肿大[1]。
临床不断进步现代医疗技术，诊治期间，需要先分型后治疗，有助于患者治疗准确性明显提高。
此次选择50份细胞标本，分析流式细胞术对急性白血病免疫分型的临床价值。
1 资料及方法1.1临床数据从我院2020年1月~2020年12月选择50份急性白血病患者的细胞标本，男女分别是36例、14例，年龄范围是18岁至78岁，平均值36.5岁。
此次实验中，使用骨髓抽样，将标本保留。
1.2方法在免疫分型中实施流式细胞术：检查标本，使用高速离心机、单激光三色流式细胞仪等，将藻红蛋白荧光素、异硫氰酸荧光素等作为荧光标记物，使用直接染色办法，取5ml标本，染色前，记录细胞数量，稀释至10%过程中使用磷酸盐缓冲剂，然后再次计数，控制标本内有核细胞密度在1×106个/ml，在制备完成6h之内，将染色标记工作完成，使用流式专用试管，将相应标记抗体在试管内添加，将抗凝处理之后骨髓标本加入，环境避光[2]，孵化0.5h左右，将2ml溶血素加入，裂解标本中红细胞10min，离心处理试管，将上清液抛弃，将PBS 溶液加入，用于清洗，添加300ul，染色检测胞浆抗原过程中，将破膜剂加入到标本中，细胞膜裂解10min，将PBS加入，用于洗涤，剩余步骤同单克隆抗体检测。
流式细胞术在白血病MICM分型诊断中的作用
50 000/秒(分选) 3：5个激光 4：24色荧光 5：无菌环境
FACSAria II 1：高速分选 2：分选精度1/32滴 3：3个激光 4：13色荧光 5：仪器随开随用
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FCM原理（动画）
FACSCalibur光路图
但是，流式免疫分型结果的解释应与临床、形态学、细胞遗传学等其他方 法结合使用，综合考虑，做出疾病的诊断与分类。
正常血细胞发育过程的抗原表达规律
按《WHO造血和淋巴组织肿瘤分类》（2008年版）
Wood B,etc（2007）
急性白血病的免疫表型
急性髓细胞白血病的免疫表型
细胞碎片
单核细胞
淋巴细胞
阈值
检测信号及意义：
荧光信号 根据荧光素交联的单克隆抗体不同而表达不同的意义
（一）设门 （gating）
（二）荧光强度 （三）单参数分析 （四）多参数分析
二、数据解释及报告
1.定性的描述（阳性或阴性）
2.评估抗原表达强度
3. 区分弱阳性和阴性群体
运用流式分析造血细胞的抗原表达情况，远远多于对形态学结果的简单证 实，能够提供大量的信息，可能帮助形态学确认某些诊断，也可能提出之前 没有考虑的诊断；在一些典型表现下，流式免疫分型可以在其他方法的辅助 之下诊断疾病。
Hale Waihona Puke 免疫分型的抗体组合原则免疫分型的抗体组合原则
一、常用抗体
白细胞分化抗原（leukocyte differentiation antigen）是指血细胞在分化成熟 为不同谱系、不同阶段及细胞活化过程中，出现或消失的细胞表面标记分子。
1982年，国际统一使用分化群（cluster of differentiation，CD）作为白细胞 分化抗原和相应单克隆抗体的命名，CD分子在流式细胞术的血液学应用中发挥着 重要作用。
白血病免疫分型
白血病免疫分型白血病的免疫分型主要是根据造血干细胞再分化发育过程中，不同的阶段，细胞表面的分子标记也不同这一规律，反推出细胞是处于哪个阶段以及细胞属于哪个系别来源。
一般使用流式细胞仪去检测细胞上面表达的抗原，通过检测，我们可以判断出白血病细胞属于哪个系列来源以及处于分化的哪个阶段，最终来确诊白血病的类型。
此种白血病的分型即为免疫分型。
白血病免疫分型是诊断白血病的重要标准，对于白血病选择化疗药物以及估计预后是非常重要的。
白血病的免疫分型最早由欧洲提出来，它主要是根据造血干细胞再分化发育过程中，不同的阶段，细胞表面的分子标记也不同这一规律，反推出细胞是处于哪个阶段以及细胞属于哪个系别来源。
一般使用流式细胞仪去检测细胞上面表达的抗原，通过检测从而判断出，白血病细胞属于哪个系列来源以及处于分化的哪个阶段，最终来确诊白血病的类型。
此种白血病的分型即为免疫分型。
白血病免疫分型一般是对白血病细胞表面表达的分子进行相关检测。
1、白血病的诊断需要骨髓穿刺、骨髓液免疫分型、染色体和基因检查以进一步诊断，骨髓细胞学诊断白血病的准确性仅为70%左右。
如果同时增加白血病的免疫分型，白血病的明确诊断准确率可以接近100%。
2、白血病免疫分型是指对白血病细胞表面表达的分子进行相关检测，可以进一步区分急性髓系白血病、急性淋巴细胞白血病、慢性淋巴细胞白血病和慢性髓系白血病等类型。
同时还需要检查融合基因的染色体，以便对白血病诊断后的预后进行分层，并制定个性化的化疗方案。
建议平时多进行体育锻炼，增强自身免疫力。
急性白血病是造血干细胞的克隆性恶性疾病，发病时骨髓中异常的原始细胞大量增殖并浸润各种器官组织，正常造血受到抑制。
急性白血病分为急性淋巴细胞白血病和急性非淋巴细胞白血病，这两类还可分成多种亚型。
白血病的分型采用MIC分型，即形态学、免疫学和细胞遗传学结合的分型。
根据白血病细胞免疫学标志，不仅可将急性淋巴细胞白血病和急性非淋巴细胞白血病进行区别，而且还可将T细胞和B细胞急性淋巴细胞白血病加以区别。
急性白血病流式细胞术免疫分型的特点及临床意义
·论著·作者简介：王桂芝，主任医师，E-mail ：zhanghw1205@163．com 急性白血病流式细胞术免疫分型的特点及临床意义王桂芝，秦文华（中平能化集团总医院病理科，平顶山467000）［摘要］目的探讨急性白血病流式细胞术免疫分型的特点及临床意义。
方法100例急性白血病，采用流式细胞术进行急性白血病免疫表型检测。
结果①用特异性抗体将急性淋巴系白血病分为T 细胞系列急性淋巴细胞白血病（T-ALL ）和B 细胞系急性淋巴细胞白血病（B-ALL ）。
②用特异性抗体使急性髓细胞白血病（AML ）的分型更明确。
③发现急性淋巴细胞白血病（ALL ）中伴髓系抗原表达（My-ALL ）、AML 中伴淋系抗原表达（Ly AML ）和混合型白血病。
结论免疫学分型能反映白血病细胞的特征，提高了诊断的准确性。
［关键词］白血病；免疫表型分型；流式细胞术中图分类号：R733．71文献标识码：ADOI ：10．3969/J．issn．1672-6790．2012．02．011Investigation of immunophenotype in acute leukemia via flow cytometryWANG Gui-zhi ，QIN Wen-hua （Patho-logical Center of General Hospital of Pingdingshan Coal Group ，Pingdingshan ，467000）［Abstract ］Objective To explore immunophenotyping specificities in acute leucocythemia via flow cytome-try．MethodsFlow cytometry was used to have immunophenotyping of acute leucocythemia tested and assist in mak-ing the diagnosis leukemia detection．Results（1）Acute lymphocytic leukemia was divided into T cells in series ofacute leukemia （T-ALL ）and B cell lines acute leukemia （B-ALL ）by using specific antibodies．（2）with specific an-tibodies ，acute myelogenous leukemia （AML ）can be diagnosed more clear．（3）Acute lymphocytic leukemia （ALL ）with myeloid antigen expression （My-ALL ），AML antigen expression from Ly （AML ）and mixed leukemia were found．ConclusionImmunophenotype can reflect the heterogeneity of leukemia cells more distinctly and consequent-ly ，enhance the exactness of diagnosis．［Key words ］Leukemia ，Immunophenotyping ，flow cytometry急性白血病（AL ）长期以来主要通过骨髓细胞形态学和细胞组织化学进行诊断，但仍有患者由于细胞形态不典型、细胞发育幼稚等导致难以明确诊断和分型。
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孔令环 ， 韩 梅 ， 鲍彦娜 ， 雪野 ， 王 肖中平 ， 陈 琳， 封 韬
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摘要 ： 目的
探讨流 式细胞术 （Ｃ 在急性 白血病免疫分型 中的临床意义 。方法 Ｆ Ｍ）
利用 ＣＭ５ ＳＣ设 门的 四色荧 Ｉ ／Ｓ
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文 章 编 号 ：０７ ２７ ２１ ）０—１７ —０ １０ —４８ （０ ０ １ ５０ ４
流式 细胞 术 对 急 性 白血病 免 疫 分 型 的临 床意 义
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光 Ｆ Ｍ检测 ４ 例急性 白血病病人骨髓细胞 表面标记 。结果 Ｃ ２
分别 以 ｃ Ｄ 、Ｃ ７ ａ Ｍ Ｏ作为 ＴＡ Ｌ ＢＡ工、 Ｍ Ｃ ３ｃ Ｄ ９ 、ｃ Ｐ －工 、 ．Ｊ Ａ Ｌ的 中 ｃ Ｄ ９ 阳性率为 ９ ．％ ．２例患者 中有交叉 Ｃ ７ａ １７ ４
系列 特异性标记 。３ 例 Ａ Ｌ中 ｃ ｅ ０ Ｍ Ｕ Ｏ阳性率为 ９ ．％；１ ００ ２例 Ｂ舭 ．
中图 分 类 号 ： ７３７ Ｒ ３ ．
利用 流式细胞术进行免疫表型分析对急性 白血病的诊断及预后判断具有重要临床意义 。
文献标识码 ： Ａ
关键词 ： 式细胞术 ； 流 白血 病 ； 性 ； 疫 分 型 急 免
Ｔ ｅ Ｃｌ ｉａ ｉｎ ｆ ａ ｃ ｆＦ ｏ Ｃ ｔ ｍｅｅ ｍｍｕ ｏ ｈ ｎ ｔ ｐ ｎ ｒ Ａｃ ｔ ｅ ｋ ｍｉ ＫＯ ｈ ｉ ｃ ｌ ｇ ｉ ｃ ｎ ｅｏ ｌｗ ｙ ｏ ｔ ｒｉ Ｉ ｎ Ｓ ｉ ｎ ｎ ｐ ｅ ｏｙ ｉｇ ｆ ｕ ｅＬ ｕ ｅ ａ ｏ ＮＧＬ ｎ － ｕ ｎ，Ｈ Ｎ Ｍｅ ， Ａ ｉｇ ｈ ａ Ａ ｉＢＯ
免疫标记 的占 ４ ．％ ， 中髓系 白血病中常见交叉表达淋 系抗 原 Ｃ ５ 、 Ｄ 、Ｄ ９ Ｃ １ ； 巴细胞 白血病 中常见交叉 ０５ 其 Ｄ ６ Ｃ ７ Ｃ １ 、Ｄ ０淋 表达髓系抗原 Ｃ １ 、Ｄ ３ 。Ｍ Ｄ ３Ｃ ３ 等 ２出现交叉 表达现象最多见 ， 阳性率为 ７ ．％ ， ６９ 常见 表达 Ｃ ５ 。伴 Ｃ ５ 、 Ｄ Ｄ６ Ｄ ６ Ｃ ７交叉表 达的Ａ ＭＬ预后差 。结论