茶叶中氨基酸的提取方法研究
茶叶中游离氨基酸的测定
茶叶中游离氨基酸的测定茶叶是一种传统的饮品，具有多种保健功效。
而茶叶中的游离氨基酸是决定茶叶品质的重要因素之一。
本文将探讨茶叶中游离氨基酸的测定方法及其意义。
一、茶叶中游离氨基酸的意义游离氨基酸是构成蛋白质的基本组成部分，也是人体所需的重要营养物质之一。
在茶叶中，游离氨基酸的含量与茶叶的品质有着密切的关系。
茶叶中游离氨基酸的含量高低直接影响着茶叶的口感和香气，也是评价茶叶质量好坏的重要指标之一。
因此，准确测定茶叶中游离氨基酸的含量对于茶叶品质的评价具有重要意义。
常用的测定茶叶中游离氨基酸含量的方法主要有色谱法、高效液相色谱法和光谱法等。
以下将分别介绍这几种方法的原理和步骤。
1. 色谱法色谱法是一种常用的游离氨基酸测定方法。
其原理是利用色谱柱将茶叶样品中的游离氨基酸分离出来，再通过检测器测定其浓度。
具体步骤如下：（1）样品制备：将茶叶样品粉碎并称取适量，加入适量溶剂提取游离氨基酸。
（2）色谱柱分离：将提取得到的茶叶样品溶液注入色谱柱进行分离，根据游离氨基酸的特性选择合适的色谱柱。
（3）浓度测定：通过色谱柱后，游离氨基酸会进入检测器，根据吸光度或荧光强度等参数测定游离氨基酸的浓度。
2. 高效液相色谱法高效液相色谱法（HPLC）是一种常用的分离和测定游离氨基酸的方法。
其原理是利用高效液相色谱仪将茶叶样品中的游离氨基酸分离出来，并通过检测器测定其浓度。
具体步骤如下：（1）样品制备：将茶叶样品粉碎并称取适量，加入适量溶剂提取游离氨基酸。
（2）色谱柱分离：将提取得到的茶叶样品溶液注入高效液相色谱仪进行分离，根据游离氨基酸的特性选择合适的色谱柱。
（3）浓度测定：通过高效液相色谱柱后，游离氨基酸会进入检测器，根据吸光度或荧光强度等参数测定游离氨基酸的浓度。
3. 光谱法光谱法是一种简单快速的游离氨基酸测定方法。
其原理是利用游离氨基酸在特定波长下的吸收特性来测定其浓度。
具体步骤如下：（1）样品制备：将茶叶样品粉碎并称取适量，加入适量溶剂提取游离氨基酸。
茶叶氨基酸检测方法的研究进展_倪君
收稿日期:2007-01-15 修改稿收稿日期:2007-01-24作者简介:倪 君(1982年—),女,江苏镇江人,浙江大学茶学系硕士研究生,从事茶叶品质检验、茶饮料加工工艺方面研究。
茶叶氨基酸检测方法的研究进展倪 君 须海荣(浙江大学茶学系 杭州 310029) 摘 要 氨基酸是构成茶叶滋味的重要组成部分,因此对茶叶中氨基酸的检测是非常必要的。
近年来,氨基酸的分析手段不断更新和发展,本文就学者们对其方法的研究做了综述。
关键词 茶;氨基酸;检测方法 中图分类号:S 571.1;Q 517 文献标识码:A 文章编号:0577-8921(2007)02-063-04Research progressesin the method for determiningthe amino acids in teaNI Jun,X U Hairong(Department of Tea Science ,Z h ej iang Univ ersity ,Hangzh ou 310029)Abstract Amino acid is the impo rta nt component of tea taste .So how to get the precise m ethod for determining it in tea is im por tant .As the metho ds are im prov ed unceasing ly in recent y ea rs,this article giv es a summa ry o f them.Key words tea;amino acid;the method for determining1 前 言茶叶中含有丰富的氨基酸,其中必需氨基酸达到16种。
氨基酸是构成茶叶滋味的重要组成部分。
其含量的多少,成分的组合直接影响茶汤的品质。
这就需要准确快速的氨基酸的检测技术。
茶氨酸的制备及应用研究进展)
茶氨酸的制备及应用研究进展江春柳“2孙云1岳鹏翔2(1福建农林大学园艺学院茶学系福建福州3500022大闽食品(漳州)有限公司博士后科研工作站福建漳州 363000) 茶叶含有多种活性成分，其中有三大茶叶提取物已得到公认，即茶多酚(儿茶素)、茶多糖和茶氨酸。
被称为“天然镇静剂”的茶氨酸已成为近几年国际市场上最热销的天然保健产品“新宠”之一。
茶氨酸(L．Theanine)系统命名为：N．乙基吖一L一谷氨酰胺Ⅲ一ethyl—L—glutamine)，是1950年日本学者酒户弥--fig在研究玉露茶鲜爽滋味成分的过程中，从新梢中分离鉴定出的非蛋白特征氨基酸?。
迄今为止，除在茶梅、山茶、油茶、蕈等四种天然植物中检测出其微量存在外，其他植物中尚未发现茶氨酸删。
茶氨酸占干茶总重的l％～2％，占茶树体内游离氨基酸总量的50％以上口1。
自然界存在的茶氨酸均为L型，纯品为白色针状结晶，熔点217～218℃，比旋光度【Q】％=o．70，极易溶于水，其味阈值为0．06％，具有焦糖香和类似味精的鲜爽味，能消减咖啡碱和儿茶素引起的苦涩味，是茶叶中的重要呈味物质，还可以缓解其它食品的苦味和辣味，达到改善食品风味的目的u’2。
1。
1茶氨酸的制各方法自然界中L．茶氨酸含量极少，近20年来对茶氨酸的制备开发得到了茶学、食品、精细化工及制药等领域众多研究者的关注，并通过各种途径制备和生产茶氨酸。
茶氨酸的主要制备途径有：化学合成法、微生物发酵制备法、植物组织培养法和天然茶氨酸的提取分离法。
1．1化学合成法化学方法合成茶氨酸，已有大量的研究报道和专利发表，比较成熟的主要有以下三种：(1)L．谷氨酸加热脱水生成L一吡咯烷酮酸，加铜盐后，与无水乙胺反应，最后进行脱铜反应生产L-茶氨酸。
谷氨酸的吡咯烷酮化法采用无水乙胺(沸点为17℃)为原料，在高压条件下合成茶氨酸，对生产设备、安全性都提出很高要求，且反应时间长。
(2)用N．取代的L．谷氨酸酯的乙胺解反应产生N．取代L．茶氨酸，再脱除保护基获得L一茶氨酸。
大叶种茶叶中游离氨基酸的提取条件研究
大叶种茶叶中游离氨基酸的提取条件研究佚名【摘要】茶汤游离氨基酸分布特征与茶叶风味、品质口感呈正相关.研究采用氨基酸分析仪作为测定仪器,选取有代表性的滇产大叶种茶叶,对其游离氨基酸的水浸提条件进行初步的方法学研究.结果表明,大叶种茶中游离氨基酸最佳提取方案为:茶叶粉碎至100目,取5.000 g茶叶样品用45.0 mL沸水冲泡5 min,第2次冲泡液稀释过滤后直接检测.此外,发酵茶稀释倍数相应减少.在该条件下,茶汤游离氨基酸组分出峰时间稳定,峰型良好,适用于定量分析.【期刊名称】《昆明学院学报》【年(卷),期】2018(040)006【总页数】6页(P38-42,71)【关键词】大叶种茶;游离氨基酸;提取条件;氨基酸分析仪【正文语种】中文【中图分类】TS272.7茶是山茶属(Camellia sinensis L.)茶树的新梢芽叶经不同特殊工艺[1]加工而制作的冲泡型饮品．云南省是茶叶的原产地，产茶区水热条件良好，土壤pH偏酸性，富含多种矿物质及有机质，特别适合茶树生长．云南茶园主产大叶种茶，其成品叶展大、芽头粗壮、香高味浓、口感鲜爽，具有显著的风味特征[2-3]．茶叶中富含多种物质，主要以冲泡的方式进入茶汤，呈现其风味．其中游离氨基酸总量(Total Free amino acids, TFAA)、茶多酚、咖啡碱等生化成分[4]是茶汤风味和功效的主要贡献因子[5]．目前，茶汤中已分离鉴定出26种游离氨基酸(Free amino acids, FAA)，包括：天冬氨酸、丝氨酸、苏氨酸、谷氨酸、茶氨酸、甘氨酸、丙氨酸、α-氨基丁酸、蛋氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、脯氨酸、酪氨酸、β-丙氨酸、苯丙氨酸、β-氨基异丁酸、γ-氨基丁酸、赖氨酸、色氨酸、组氨酸、精氨酸、半胱氨酸、缬氨酸等[6-7]．其中游离氨基酸含量约占茶叶干质量的2%～5%，而代表性氨基酸-茶氨酸占干物质的1%～2%[8]．茶叶中氨基酸含量与感官品质正相关[9]．游离氨基酸不仅是茶叶中有效氨基酸摄入的主要来源，还可抑制由咖啡碱引起的人体过度兴奋，促进多巴胺的释放，使饮茶者心情愉悦、情绪稳定，也是茶汤鲜爽口感、独特香气的主要贡献因子[10]，更是茶叶重要的质控指标[11]．目前茶叶FAA的提取一般采用3 g左右的茶样，更换萃取剂，改变冲泡时间和次数进行前处理；其后采用平面色谱法[12]、比色法[11-14]、近红外光谱法[15]测定其TFAA．或衍生化法处理目标样品，并采用氨基酸分析仪[16]配合柱后衍生、柱前衍生配合高效液相色谱法[3]或毛细管电泳法[17]对氨基酸各组分进行分离，光谱特征吸收波长采取定性，峰面积进行定量．水浸提法能模拟泡茶过程，操作简单，成本低，应用范围广，但是浸提液能否充分提取茶汤中FAA，对研究茶叶氨基酸分布特征，判定其品质格外重要．实验拟以氨基酸分析仪作为分析手段，对不同浸提条件下的典型云南大叶种茶样中FAA的提取情况进行探索，从而探讨不同提取方法对茶种氨基酸的可能影响，以确定适宜的水浸提法提取方案，结果可为茶产业研究提供参考，亦能为进一步研究滇产茶叶风味特征奠定基础．1 材料与方法1.1 样品茶氨酸(99.9%)，BR级，100 mg/瓶(上海融禾医药科技有限公司)；游离氨基酸混合标样(100 mmol/L，塞卡姆(北京)科学仪器有限公司)．以市场采购的方式收集云南各茶区茶叶，并参考课题组前期TFAA测定结果[13-14]，自绿茶、普洱熟茶中选择TFAA较高和较低的10个组分进行分析．茶样粉碎过100目筛后封袋编号．分类为：绿茶G、红茶B、普洱生茶PE、普洱熟茶PU．真空包装后避光冷藏．其详细信息见表1．表1 茶样详细信息茶叶种类采样号序号芽叶数绿茶B-LAC-G-6G1一叶、杆A-XM-G-1G2一芽二叶～三叶B-YD-G-1G3一芽两叶B-LH-G-1G4一芽两叶B-LC-G-2G5一芽两叶B-BN-G-3G6一芽一叶B-LC-G-4G7一芽两叶B-YY-G-1G8一芽一叶普洱熟茶C-DL-PU-2PU1一芽两叶B-LH-PU-2PU2一芽两叶1.2 试剂实验所需提取剂、缓冲溶液及显色剂均按赛卡姆公司标准配置和使用．所涉及到的试剂见表2．表2 实验试剂简况试剂级别规格厂家苯酚98%500 g/瓶广东光华茚三酮光学纯20 g/瓶德国塞卡姆还原剂1 mL/支德国塞卡姆甲醇色谱纯4 L/瓶德国Merck硼酸AR500 g/瓶广东光华氯化锂AR500 g/瓶广东光华一水合氢氧化锂AR500 g/瓶广东光华一水合柠檬酸钠AR500 g/瓶广东光华乙酸钾AR500 g/瓶国药三水合乙酸钠AR500 g/瓶国药盐酸AR500 mL/瓶成都科龙无水乙醇AR500 mL/瓶天津风船冰乙酸AR500 mL/瓶天津风船5-磺基水杨酸AR广东光华EDTA优级纯500 g/瓶东京化成茶氨酸BR100 mg/瓶上海融禾氨基酸标样(100 mmol/L)2 mL德国赛卡姆水超纯水1.3 仪器及条件全自动氨基酸分析仪：S-433D德国塞卡姆公司；色谱柱：LCA K07/Li；流动相：柠檬酸锂A=pH2.90；B=pH4.20；C≈pH8.00；采用自动梯度洗脱(程序从略)；流速：洗脱泵0.45 mL/min+衍生泵0.25 mL/min；检测器：DAD，570nm+440 nm；柱温：38～74℃梯度升温(从略)．酸度计：梅特勒-托利多集团(瑞士)；电子天平：赛多利斯科学仪器(北京)有限公司．1.4 样品制备1.4.1 标准溶液的配置1)茶氨酸标准溶液：称取0.087 g茶氨酸，样品稀释液定容至5 mL，临测时取其中0.5 mL稀释1 000倍，即为100 nmol/L茶氨酸标液．样品制备后4℃保存，3 d内使用．2)系统混标：量取0.5 mL上述茶氨酸溶液加入0.5 mL 002号溶液，用样品稀释液稀释至5 mL备用．3)茶氨酸混标：准确量取200 μL 002号溶液+ 1 800 μL样品稀释液混匀，临用现配．1.4.2 茶样制备称取5 g精确至0.001 g已研磨好的茶叶样品(约100目)放入50 mL具塞比色管中，准确加入45 mL沸水，冲泡3次，每次5 min，过滤．然后取2.0 mL滤液，加入样品稀释液定比稀释，过0.45 μm微孔滤膜过滤后备用．样品制备后12 h内完成分析．2 结果与讨论2.1 标样分离情况茶氨酸为茶汤氨基酸主体成分，其质量分数约占FAA总量50%左右．但茶氨酸较易变质，常规系统混标中无此成分．为合理配制茶氨酸混标，对混标各调整样品的出峰顺序、分离度、响应面积进行观察，确定其添加最适比例．图1～图3为系统混标、茶氨酸单标及自配混标谱图．对比图1～图3可知，使用前期优化的分离条件，得到的系统混标基线平稳，所有峰达到完全分离，仪器条件稳定良好．茶氨酸单标略有杂质(37 min左右)，但其保留时间与系统混标各组分未见重叠，不影响定量结果．加入茶氨酸后的混标溶液，基线平稳，噪音较低，所有峰均可分离，满足定量要求．2.2 不同提取方式对茶叶中游离氨基酸含量的影响根据课题组前期研究结果[13-14]，选择前期实验中，总游离氨基酸含量最高的绿茶样品(编号B-LAC-G-6)为研究对象，采用两种提取方式(下述A和B)提取FAA 后，进行进样分析．2.2.1 A法称取5.000 g样品于比色管中，加入适量水至匀浆，加入沸水45 mL，在沸水浴中提取45 min，浸提完毕后立即趁热减压过滤，残渣用少量沸水洗涤2～3次，滤液定容至50 mL，吸取2.0 mL滤液于比色管中加入0.4 mL 4%磺基水杨酸溶液，摇匀，过0.45 μm微孔滤膜，滤液进氨基酸分析仪分析(见图4)．2.2.2 B法称取5 g精确至0.1 mg已研磨好的茶叶样品(约100目)放入50 mL具塞比色管中，准确加入45 mL沸水，冲泡5 min，取首次冲泡液过滤，取2.0 mL滤液，加入一定量的样品稀释液稀释，0.45 μm微孔滤膜过滤，滤液直接进样测定(见图5)．对比图4和图5可知，两图基线都比较平稳，说明仪器和试剂工作状态良好．图4中的鬼峰、噪音较图5显著增加，说明其提取过程中杂质较多，这可能是由于长时间高温提取下，部分含氨基化合物也进入提取液，而原有提取液中不稳定氨基酸发生了变质导致的．图5较图4峰型和分离度明显提高，特别是在后期精氨酸的显著拖尾得到了改善，有利于准确定量．综合考虑各种因素，由于B法提取成本低，更能模拟日常冲泡过程，因此选择法B作为浸提方法．2.3 茶样不同提取次数FAA分离情况采用B法条件，对TFAA最高的绿茶(B-LAC-G-6)，最低的普洱熟茶(C-DL-PU-2)进行提取分离，每茶样提取3次，其结果见图6～图11．从以上谱图比较可以看出，同一品种茶叶冲泡过程中，首次冲泡和第2次冲泡，氨基酸响应信号大致相当；第2次冲泡过程较第1次出现更多微量氨基酸，各微量氨基酸含量亦有一定程度增加；第3次冲泡茶汤中各氨基酸含量显著减少；首次和第2次冲泡图谱出峰最多，峰面积响应较高，信噪比低，各峰之间分离度较好．由此可知，首次、第2次冲泡均能完整体现未知样品的氨基酸含量特征，但第2次冲泡信息含量更为丰富．样品FAA均以茶氨酸为主流氨基酸．而绿茶与普洱熟茶相比，FAA无论从种类还是含量均显著增高，这与茶叶风味品评中绿茶鲜爽而普洱熟茶温和的结论吻合，也与已有文献[18-19]测定结果相符．其原因是普洱熟茶在发酵后期堆渥过程[20]引入多重酶和细菌作用，氨基酸大量代谢导致的．综上所述，在后续研究工作中，宜以首次浸提液为茶样FAA代表．此外，对于发酵茶(红茶、普洱熟茶)等FAA含量较低的茶种，可适当减少稀释倍数，以保证响应信号定量的准确性．3 结论1)通过对大叶种茶中游离氨基酸最佳提取方案进行研究，优选的方案为：茶叶粉碎过100目筛，5.000 g茶叶样品使用45.0 mL沸水冲泡5 min，取第2次冲泡液直接稀释过滤后进样检测．2)发酵茶种受生产工艺影响，FAA含量急剧减少，其首次水提物稀释倍数应相应减少．[参考文献]【相关文献】[1]陈然，孟庆佳，刘海新，等．不同种类茶叶游离氨基酸组分差异分析[J]．2017，42(6)：258-263．[2]曾敏．古树普洱生茶特征风味的化学基础研究[D]．重庆：西南大学，2015.[3]杨志坚，李金辉，袁弟顺，等．OPA柱前衍生HPLC测定白茶游离氨基酸[J]．福建茶叶，2013(1)：19-21．[4]王淑慧，龙立梅，宋沙沙，等．3种名优绿茶的特征滋味成分研究及种类判别[J]．食品科学，2016，37(2)：128-131．[5]范培珍，薄晓培，王梦馨，等．4个等级内山六安瓜片茶叶氨基酸的组成及差异[J]．安徽农业大学学报，2017，44(1)：14-21．[6]王昕，李新生，陈小玲，等．汉中工夫红茶氨基酸种类和含量的分析与评价研究[J]．食品研究与开发，2017，38(5)：162-168.[7]宛晓春．茶叶生物化学[M]．北京：中国农业出版社，2003.[8]CAVA-MONTESINOS P，CERVERA M L，PASTOR A，et al．Determination of arsenic and antimony in milk by hydride generation atomic fluorescence spectrometry[J]．Talanta，2003，60(4)：787-789．[9]赵明明，金钰，胡筱波，等．基于氨基酸特征分析的西湖龙井茶鉴别方法研究[J]．湖北农业科学，2015，54(24)：6369-6371．[10]张丹丹，叶小辉，赵峰，等．基于游离氨基酸组分的白茶滋味品质研究[J]．福建农业学报，2016，31(5) ：515-520.[11]中华全国供销合作总社杭州茶叶研究院，国家茶叶质量监督检测中心．茶游离氨基酸总量测定：GB/T 8314—2013[S]．北京：中国标准出版社，2013.[12]SASAOKA K，KILO M．Studies on the biosynthesis of theanine in tea seedlings synthesis of theanine by the homogenate of tea 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茶叶中茶多酚、氨基酸的测定
测定方法：
高锰酸钾直接滴定法 酒石酸铁比色法
酒石酸铁比色法原理：
酒石酸亚铁能与茶多酚生成蓝紫色络合物，络合物溶 液颜色的深浅与茶多酚的含量成正比。因此可以用比色 方法测定。
仪器：分光光度计 水浴锅，锥形瓶，容量瓶（100mL,25ml) 试剂： （1）酒石酸亚铁溶液：称取 FeSO4· 7H2O 1.000g，含 4个结晶水的 酒石酸钾钠5.000g，加蒸馏水溶解后，用蒸馏水稀释至1000mL （2）PH7.5的磷酸缓冲液
准确称取茶叶磨碎样品3g于500ml烧杯中加入沸水350ml在沸水浴中浸提45min每隔10min摇动11次趁热抽滤残渣用少量热蒸馏水洗涤2233次滤液倒入500ml容量瓶中冷却至室温用蒸馏水定容至刻度摇匀备用
茶叶中茶多酚的测定
茶多酚
茶叶中多酚类物质占茶嫩梢干重的20％～35％，由约30 种以上的酚类物质所组成，通称茶多酚。 茶多酚的性质： 能溶于水、乙醇、甲醇、丙酮、乙酸乙酯，微溶于油脂。 对热、酸较稳定，2%的溶液加热至120 ℃并保持30min， 无明显变化。在碱性条件下易氧化变质。
茶多酚的功效：
1）茶多酚能清除活性氧自由基，且能有效消除脂 质过氧化产物丙二醛，具有降血脂的显著功效。 2）茶多酚还具有抑制痢疾、伤寒、霍乱、金黄色 葡萄球菌等有害菌的作用。 3）具有较强的抗放射性作用，以及在抗衰老，抑 制瘤细胞，预防心脑血管疾病等方面都显示出很 好的效应。
是一种有开发前景的天然抗氧化剂。
实验步骤
（l）样品溶液的制备方法：准确称取茶叶磨碎样品3g于 500mL烧杯中，加入沸水350mL，在沸水浴中浸提45min， 每隔10min摇动1次，趁热抽滤，残渣用少量热蒸馏水洗涤 2-3次，滤液倒入500mL容量瓶中，冷却至室温，用蒸馏水 定容至刻度，摇匀，备用。
茶叶氨基酸含量的测定方法研究
茶叶氨基酸含量的测定方法研究茶叶作为世界第二大饮品，具有悠久的历史和广泛的消费群体。
茶叶的品质与口感与其成分有着密切的关系，而茶叶中氨基酸的含量往往被认为是评价茶叶品质的重要指标之一。
因此，对茶叶中氨基酸含量的测定方法进行研究，并提高测定的准确度和效率，对于茶叶行业和茶叶消费者来说，具有重要的意义。
目前，对于茶叶中氨基酸含量的测定方法主要有高效液相色谱法（HPLC）、气相色谱法（GC）以及红外光谱法（IR）等。
下面将分别介绍这几种方法的原理及其特点。
HPLC方法是目前最常用的茶叶中氨基酸含量测定方法之一。
其基本原理是利用色谱柱对样品中的氨基酸进行分离和定量。
具体来说，通过样品的前处理，将茶叶中的氨基酸提取出来，然后通过色谱柱进行分离，最后根据不同氨基酸的峰面积或峰高来计算其含量。
这种方法具有灵敏度高、准确度好、选择性好的特点，可以有效地测定茶叶中微量的氨基酸。
但是，该方法的操作较为复杂，需要使用昂贵的高效液相色谱仪设备，且对于初学者而言，掌握该方法的技术难度较大。
气相色谱法（GC）是另一种常用的茶叶中氨基酸含量测定方法。
其基本原理是利用样品中的氨基酸与特定的试剂反应生成相应的衍生物，然后通过气相色谱柱进行分离和定量。
这种方法具有灵敏度高、分离度好、重复性稳定的特点，可以测定茶叶中不同种类的氨基酸含量。
然而，该方法操作较为繁琐，需要进行样品的前处理，且存在某些氨基酸无法得到较好的衍生物的问题。
红外光谱法（IR）是近年来新兴的茶叶中氨基酸含量测定方法。
该方法基于不同氨基酸分子结构和特性不同，对红外光的吸收不同的原理。
通过将茶叶样品进行红外光谱检测，可以得到茶叶样品在不同波长下的光谱图像，从而推断茶叶中氨基酸的含量。
相比于HPLC和GC方法，红外光谱法操作简单、快速，且不需要生成衍生物，可以减少前处理的步骤。
然而，该方法的准确度和灵敏度相对较低，对于茶叶中微量的氨基酸测定有一定的局限性。
综上所述，对于茶叶氨基酸含量的测定方法研究，目前主要有HPLC、GC和IR等方法。
茶叶中游离氨基酸总量的测定实验报告
茶叶中游离氨基酸总量的测定实验报告一、实验目的测定茶叶中游离氨基酸总量，了解茶叶的品质和营养价值，为茶叶的生产、加工和质量控制提供科学依据。
二、实验原理茶叶中的游离氨基酸在一定的条件下与茚三酮反应，生成紫红色的络合物。
该络合物在 570nm 波长处有最大吸收峰，其吸光度与游离氨基酸的含量成正比。
通过测定吸光度，并与标准曲线比较，可以计算出茶叶中游离氨基酸的总量。
三、实验材料与仪器1、实验材料茶叶样品：选取不同种类、不同产地的茶叶。
茚三酮试剂：称取茚三酮 05g，溶于 100mL 乙醇中，摇匀，冷藏备用。
磷酸盐缓冲液（pH 80）：称取磷酸二氢钾 05g，磷酸氢二钠 23g，加水溶解并定容至 1000mL。
标准氨基酸溶液：准确称取一定量的谷氨酸，用蒸馏水溶解并定容，配制成浓度为200μg/mL 的标准溶液。
2、实验仪器分光光度计分析天平容量瓶（100mL、50mL、25mL）移液管（1mL、2mL、5mL）具塞刻度试管（25mL）恒温水浴锅离心机四、实验步骤1、标准曲线的绘制分别吸取 00mL、05mL、10mL、15mL、20mL、25mL 标准氨基酸溶液于 25mL 具塞刻度试管中，各加入 10mL 磷酸盐缓冲液（pH 80）和 10mL 茚三酮试剂，摇匀，在沸水浴中加热 15min，取出后迅速冷却至室温，用蒸馏水定容至 25mL，摇匀。
以空白溶液（00mL 标准氨基酸溶液）为参比，在 570nm 波长处测定各溶液的吸光度。
以游离氨基酸的浓度（μg/mL）为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。
2、样品处理称取茶叶样品 20g 于研钵中，加入 80%乙醇 50mL，研磨成匀浆，转移至离心管中，在 4000r/min 下离心 10min，取上清液。
将上清液用 80%乙醇定容至 100mL，摇匀。
3、样品测定吸取 10mL 样品溶液于 25mL 具塞刻度试管中，按照标准曲线绘制的步骤进行操作，测定吸光度。
茶叶中氨基酸含量的测定
实验三茶叶中氨基酸含量的测定一、分析意义氨基酸，是生物合成蛋白质的基本单位又是蛋白质分解的产物，在生物体内是重要的生物活性物质。
氨基酸是可溶于水的含氮化合物，对茶叶品质有重要的影响，是公认的茶叶呈味物质，也是构成茶叶色香味的重要化学因子。
二、方法原理氨基酸在pH8.04条件下与茚三酮共热，α－氨基酸能与茚三酮反应产生兰紫色缩合物，其反应过程按如下步骤进行：三、样品、试剂与仪器设备1、样品：不同等级绿茶。
2、pH8.04磷酸缓冲液：先配制1/15M磷酸氢二钠和1/15磷酸二氢钾溶液(配制方法同实验二)。
用时取1/15M的KH2PO4溶液5ml、1/15M的Na2HPO4溶液95ml混匀，即为pH8.04磷酸缓冲液。
3、2％茚三酮溶液：称取2g水合茚三酮加50毫升蒸馏水，加氯化亚锡80毫克(SnCl2·2H2O)(AR级)，搅拌均匀后，逐渐加水溶解，分次过滤，滤液在暗处放置一昼夜，加水定容至100ml。
4、主要仪器：分光光度计四、测定步骤1、供试液制备(同实验二)2、定量吸取供试液1ml，注入25ml容量瓶中，加0.5mlpH8.04的磷酸缓冲液，和0.5ml的2％茚三酮溶液，置于沸水浴中加热15min，待冷却后加水定容至25ml，10min后于570nm波长处，0.5cm比色杯测定吸光度A值。
3、计算：注：“0.57”——用已知的不同浓度配制的茶氨酸，按上述操作程序测定吸光度，作标准曲线，当吸光度等于1.00时，每1ml供试液中含茶氨酸0.57mg。
注意事项1、比色液在1小时内吸光度较稳定，比色须在该时间内完成，不及放置过久；2、沸水浴中加热15min时容量瓶一定要浸没浴沸水浴中，且打开瓶塞。
高效液相色谱法测定茶叶中茶氨酸的研究
郭升平
（ 福建省测试 技术 研究所 福州 ３００） ５０３ 提要 研究了 用高效液相色谱法分析茶叶中 茶氨酸的方法。 异硫氰酸苯酯（ Ｉ ） 衍生 醋酸钠缓冲液与 以 ＰＴ 作 Ｃ 剂、 乙腈梯度洗 Ｃ８ 脱、１ 柱分离、 紫外２３ ４ｎ ｍ检测 探讨了茶 ， 氨酸的 提取方法。 较了 比 不同茶叶中茶 氨酸的 含量。 方法
具有快速 、 精确 、 灵敏等特 点。 关键词 高效液相色谱法 茶叶中 的茶氨酸 柱前衍生化
１ 前言
茶氨酸（ ｅｎ ｅ Ｎ－ ｔ ａｉ ， 乙基－ － ｈ ｎ 谷酰胺或 － 谷酰 基乙酰胺） 为茶叶中特有的一种氨基酸， 其含量直接 影响到茶叶的品质［］通常认为茶氨酸是茶叶的滋 １ ， ２ 味（ 甜味） 成分［ 茶氨酸可分解为Ｌ谷氨酸和乙胺， － 乙胺可氧化， 进而形成乙酸乙酯， 使茶汤具有味精的
燥 、 剂 稀 液 制 ｉ－ａ规 １ 液 衍生 、 释 配 见Ｐｏ ｇ 程［ ｃＴ ］
表 １ 度洗脱程序 梯
量最大［的Ｂ物质（ ５ ］ 液相色谱法中ｔ＝１．ｍｉ 即 Ｒ ００ ｎ）
是 茶氨 酸
本文收 日 ：９５ ７ ５ ， 稿 期 １９ 年 月１ 日 修回日 １ ５ １ 月２ 日 期：９ 年 ２ ６ ９
２２ 色谱条件 Ｐｃ－ａＴＨ Ａ柱（ ｔｒ ， ｉ Ｔｇ Ａ ｏ ｍ Ｗａ ｓ 检测波长２３ｍ ｅ） ４ｎ ， 柱温４ ， ３ 梯度洗脱程序见表１流动相Ａ：．４ ｏ ０１ｍ ｌ ／ Ｌ醋酸钠， ．ｍ ／ 三乙胺， ０５ Ｌ 以冰醋酸调节 ｐ Ｈ为 ６４流动相Ｂ 乙腈：水＝６：４（ ／ ．； ： ０ ０ Ｖ Ｖ）样品再干
Ａ ｕ ｙ ｔｅ ｔｒ ｉ ｔ ｎ Ｔ ｅｎｎ ｉ Ｔ ａ Ｒｅｅｓｄ Ｓ ｄ ｏ ｈ Ｄ ｅｍ ｉ ｏ ｈ ａ ｉｅ ｅ ｂ ｔ ｎ ｅ ｎ ｏ ｆ ａ ｎ ｖｒｅ － Ｐ ａ ｅ ｇ Ｐ ｒｏｍａ ｃ Ｌｉｕｄ ｒｍａｏ ｒｐ ｙ Ｒ － Ｌ ） ｈ ｓ Ｈｉ ｅｆｒ ｎ ｅ ｉ Ｃ ｏ ｔｇａ ｈ （ Ｐ ＨＰ Ｃ ｈ ｑ ｈ
茚三酮比色法测定茶叶中游离氨基酸总量方法存在问题的探讨
茚三酮比色法测定茶叶中游离氨基酸总量方法存在问题的探讨周国兰 何 萍 郑文莉(贵州省茶叶研究所,湄潭 564100) 氨基酸是茶叶中的主要成分,茶叶中氨基酸与茶叶嫩度有密切关系,它对茶汤的滋味、色泽也有较明显的影响,是形成茶叶香气和鲜爽度的重要成分。
茶叶中有20多种游离氨基酸,其中茶氨酸占氨基酸总量的50%以上。
目前,国家标准规定测定茶游离氨基酸总量采用G B/T8314《茶 游离氨酸总量测定》,即茚三酮比色法。
由于该标准存在较多问题,导致各分析室对同一样品的测定结果有很大差异,为此笔者查找相关文献资料,咨询同行专家,对该标准中的疑点进行了反复的试验研究,并对疑点进行了修正,旨在使各分析室测定数据可比性强,达到方法统一、数据一致的目的。
1 G B/T8314标准的引用1.1 游离氨基酸定义 游离氨基酸:茶叶水浸出物中呈游离状态存在的α-氨基的有机酸。
1.2 测定原理 α2氨基酸在pH8.0的条件下与茚三酮共热,形成紫色络合物,用分光光度计在特定的波长下测定其含量。
1.3 仪器和用具 实验室常规仪器及TG-328A分析天平(感量0.0001g)、TU1901紫外分光光度计、PHS-2C型精密酸度计1.4 试剂和溶液 (1)磷酸盐缓冲溶液(pH8.0)的配制 1/15mol/L磷酸氢二钠溶液:称取23.877g磷酸氢二钠,加水溶解后定容至1L,得a溶液。
1/15mol/L磷酸二氢钾:称取9.073g磷酸二氢钾,加水溶解后定容至1L,得b溶液。
取a溶液95mL和b溶液5mL,混合均匀。
(2)茚三酮溶液:2%,称取茚三酮(纯度不低于99%)2g,加50mL水和80m g氯化亚锡搅拌均匀。
分次加少量水溶解,放在暗处,静置,过滤后加水定容至L。
2 使用国家标准方法时存在的问题2.1 不同实验室采用同一方法测定结果存在很大差异 表1为不同实验室采用G B/T8314方法测定的结果。
表1 不同实验室采用标准方法对茶样的分析结果样品编号游离氨基酸总量测定结果/%实验室1实验室2相对误差3/% 113.87.88029.5 4.810039.0 5.09048.4 4.59059.2 5.370 3注:相对误差以实验室2的测定结果为参比。
茶叶中化学成分的提取与测定
优点：操作简便、准确度高、重现性好。
应用：在茶叶中化学成分的测定中，紫外可见分光光度法常用于测定茶叶中黄酮类化合 物、茶多酚等物质的含量。
原理：基于原子能级跃迁的吸收光 谱法
应用范围：测定茶叶中金属元素含 量
义。
近红外光谱技 术：具有快速、 无损的优点， 可用于茶叶产 地溯源、品质 分级等方面。
茶叶中化学成分的多样性 未知成分的发现与鉴定 探索未知成分的方法与技术 未知成分的生理活性与健康功效
茶叶中茶多酚的抗氧化活 性研究
茶叶中咖啡因的提神醒脑 功能研究
茶叶中儿茶素的抗癌作用 研究
茶叶中黄酮类化合物的抗 炎作用研究
茶叶中化学成 分的提取与测 定是茶叶品质 评价的重要手
段
通过测定茶叶 中的营养成分 和有害物质， 可以全面了解
茶叶的品质
茶叶品质评价 对于茶叶生产、 加工、销售和 消费都具有重
要意义
茶叶品质评价 的方法包括感 官评价和理化
分析等
不同茶叶产地因地理环境、气候条件等因素，茶叶中化学成分存在差异 通过提取和测定茶叶中的化学成分，可以鉴别茶叶的产地 对于茶叶品质和真伪的鉴定具有重要意义 在茶叶生产和销售中具有实际应用价值
原理：利用超声波的振动和空 化作用，使茶叶中的化学成分 释放出来
优点：提取效率高，操作简便， 对成分的破坏小
缺点：提取时间较长，需要使 用大量溶剂
应用：适用于茶叶中多种化学 成分的提取
原理：利用微波能加速细胞破裂，促进有效成分的释放 优点：高效、快速、节能环保 步骤：选择合适的溶剂，将茶叶浸泡在溶剂中，通过微波辅助提取茶叶中的化学成分 应用：广泛应用于茶叶、中草药等天然产物的提取
实验二茶叶氨基酸含量测定（3学时）
实验⼆茶叶氨基酸含量测定（3学时）实验⼆茶叶氨基酸含量测定（3学时）⼀、⽬的要求学习氨基酸总量测定⽅法，了解氨基酸含量与茶叶品质的关系。
⼆、基本原理茶叶中的氨基酸既是蛋⽩质的基本单位，⼜是合成许多⽣理活性物质的先质，且与茶叶⽪质有显著关系。
氨基酸与茶叶嫩度和⾹⽓的形成有密切关系，对茶汤的滋味、⾊泽也有较明显的影响。
茚三酮⽐⾊法是茶叶经浸提后，氨基酸溶于⽔。
α-氨基酸在pH8.04的条件下与茚三酮共同加热，形成紫⾊络合物，⽤分光光度法在特定的波长下测定其含量，根据吸光度⼤⼩折算成氨基酸的含量。
三、仪器与材料1、仪器：分析天平（感量0.001g）；分光光度仪；⽔浴锅；玻璃器⽫。
2、材料和试剂：（1）pH8.04磷酸盐缓冲液：A：1/15M磷酸氢⼆钠溶液：称含两个结晶⽔的磷酸氢⼆钠11.878g，或⽆⽔磷酸氢⼆钠9.467g 溶于1000ml⽔中。
B：1/15M磷酸⼆氢钾溶液：称取磷酸⼆氢钾9.073g溶于1000ml蒸馏⽔中。
取1/15M的磷酸氢⼆钠溶液95mL和1/15M磷酸⼆氢钾溶液5mL，混匀，配成pH8.04磷酸盐缓冲液。
（2）2%茚三酮溶液：称取⽔合茚三酮(纯度不低于99%)1g，加25mL⽔和40mg 氯化亚锡(SnCl2·2H2O)搅拌均匀。
分次加少量⽔溶解，放在暗处，静置⼀昼夜，过滤后加⽔定容⾄50mL。
（3）茶氨酸或⾕氨酸标准液：称取174mg茶氨酸或147mg⾕氨酸(纯度均不低于99%)溶于100mL⽔中，作为母液。
准确吸取5mL母液，加⽔定容⾄50mL作为⼯作液。
四、操作步骤1、试样制备称取茶样1.5g，加沸⽔225ml,在沸⽔浴中浸提45min，每隔⼗分钟摇⼀次，⽔浴完后，趁热抽滤，残渣要⽤热蒸馏⽔洗2—3次，滤液冷却后定容到250ml容量瓶中。
2、测定步骤准确吸取试液1mL，注⼊25mL的容量瓶中，加0.5mL pH8.04磷酸盐缓冲液和0.5mL 2%茚三酮溶液，在沸⽔浴中加热15min。
普洱茶茶氨酸的含量测定及其抗氧化活性的研究
普洱茶茶氨酸的含量测定及其抗氧化活性的研究肖作为;郑楠楠;陆广琴;张智敏;黄建华【摘要】Objective To study the contents of L-Theanine in Pu-erh teas and its antioxidant activity. Methods The content of L-Theanine was determined by HPLC which performed on an Agligent TC-C18 (4.6 mm×250 mm,5 μm) with a mobile phase of 0.1% phosphoric and methanol at a flow rate of 1.0 mL/min, a column temprature of 25℃, and a detection wavelength of 203nm, and weighing the antioxidant activity of the Pu-erh tea by 1,1-diphenyl-2-picryhydrazyl (DPPH). Results The content of L-Theanine in 30 batces of Pu-erh tea was 7.350 1-14.235 3 mg/g, and the average value was 9.638 3 mg/g. The antioxidant activity was between 29.06%-72.28%. Conclusion The content of L-Theanine was determined accurately by HPLC. The antioxidant activity of Pu-erh tea will promote the dentify and enhance of its health care effect.%目的研究普洱茶中茶氨酸的含量及其抗氧化活性. 方法采用高效液相色谱方法对普洱茶中茶氨酸含量进行测定,分析条件为:Aglient TC-C18(4.6 mm×250 mm,5 μm);流动相:(A) 0.1%磷酸水溶液(B)甲醇;流速:1.000 0 mL/min;进样体积:10 μL;柱温:25 ℃;检测波长:203 nm. 对分析条件进行优化和验证,构建了茶氨酸含量精确分析方法,进而通过清除1,1-二苯基-2-苦基肼基自由基(DPPH)法来测定其抗氧化活性.结果:30个普洱茶氨酸含量范围为7.350 1~14.235 3 mg/g,平均值为9.638 3 mg/g,抗氧化性在29.06%~72.28%之间.结论高效液相色谱法能够准确测定普洱茶中茶氨酸含量,对普洱茶抗氧化活性研究有利于对普洱茶保健疗效的进一步鉴定和提高.【期刊名称】《湖南中医药大学学报》【年(卷),期】2015(035)012【总页数】3页(P46-48)【关键词】高效液相色谱法;茶氨酸;1,1-二苯基-2-苦基肼基自由基;抗氧化性【作者】肖作为;郑楠楠;陆广琴;张智敏;黄建华【作者单位】湖南中医药大学,湖南长沙 410208;湖南中医药大学,湖南长沙410208;湖南中医药大学,湖南长沙 410208;湖南中医药大学,湖南长沙 410208;湖南中医药大学,湖南长沙 410208【正文语种】中文【中图分类】TS272;R284普洱茶是以中国云南特有的大叶种晒青茶(Camellia sinensis var.assamica)为原料经过特殊发酵工艺制成的黑茶[1]。
茶叶中有效成分的提取
实验二十茶叶中有效成分的提取一、实验目的1.通过茶叶和咖啡中有效成分的提取了解固、液相分离方法；2．掌握吸滤、萃取、分液、升华等实验操作。
二、实验原理咖啡因( caffeinum )化学式为C8H10N402 - H20(1，3，7-三甲基-2，6-氧嘌呤)，是具有绢丝光泽的一种白色针状晶体。
其结构式为100℃时晶体失去结晶水后开始升华，120℃时升华显着，至178℃时升华很快。
无结晶水物的熔点为235℃，能溶于水(2%)、乙醇(2%)、苯(1%)、氯仿(12.5%)等。
由于其在氯仿中溶解度较大，可通过萃取茶叶的水浸渍液提取咖啡因。
根据其易升华的性质，可用升华法进一步提纯咖啡因。
茶多酚是由30种以上的酚类物质组成的混合物。
其中儿茶素（又名儿茶酚）含量最高，在茶多酚总量中占60%—80%。
其结构式为茶多酚在乙酸乙酯中溶解度较大，并且能与重金属作用产生沉淀，故可用沉淀、萃取等方法来提取茶多酚。
也可用此方法从细、粗咖啡中提纯咖啡因作为对照实验。
三、实验用品仪器和材料烧杯(50、100、200mL)、50rnL量筒、150mL分液漏斗、布氏漏斗、吸滤瓶、酒精灯、点滴板，真空泵（或水流吸气泵）、托盘天平、剪刀、铁架台、滤纸。
药品饱和石灰水、5%氢氧化钠溶液、氨水、2mol．L-1硫酸、盐酸、氯仿、乙酸乙酯，茶叶（当年新茶，隔年陈茶）、咖啡（粗，细）、氢氧化钙固体、氯酸钾固体，酸性碘一碘化钾试剂。
四、实验内容及操作1．方法I-热水浸渍法(1)称取5.0g茶叶，剪碎，浸渍于盛有200mL蒸馏水的烧杯中；(2)加热煮沸约半小时；(3)过滤；(4)用30mL氯仿分三次(15、8、7mL)萃取滤液，合并氯仿相，先用5%氢氧化钠溶液，再用适量水洗涤；(5)挥发掉有机溶剂[4]，得粗咖啡因；(6)用30mL乙酸乙酯分三次(15、8、7mL)萃取氯仿萃取过的水相；(7)用适量水洗涤萃取液；(8)挥发有机溶剂，即得茶多酚。
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下 ， 氢 氧化 钠 溶 液 调 节 ｐ 值 ７ ８ 用 ０ ４ Ｌ 用 Ｈ ～ ， ． ５ｔ ｍ 水 相滤 膜过滤 ， 待测 。 ２ 结 果 与 分析
２ １ 不 同溶 剂提 取 氨 基 酸 的效 果 ． 从 表 １的结 果 可 以看 出 ： 用不 同的 溶剂 提 取 氨
用设 备 ， 因此科 研 工作 者研究 了电磁水 解法 、 超声 波
法 和微 波消解 法 等多种 替 代 方法 ｑ］ 。本 实 验研 究
了用不 同溶剂 提 取茶 叶 中氨 基 酸 的效 果 ， 比较 了 并 电磁 水解 法和超 声 波法 处 理 提取 氨基 酸 的 效果 ， 试 图找 到提 取硒 代氨 基酸 的最 佳方法 。 １ 材 料 与方 法
基酸 未被检 测 出来 ； 由沸 水 一 次性 浸 出 的 氨基 酸 低 于用 ６ 乙醇 浸提 的 １ ２ 含硫 氨 基酸 的浸 出量 较 Ｏ ／，
收稿 日期 ：２ １ ＿６２ ０ ｌＯ ７ 作者简介 ： 陈永 波 ， （９ ７）， 男 １６ 一 高级 农 艺 师 。
１ ３ 检 验 方 法 ．
基 酸 ， 出氨 基 酸 总 量 的溶 剂 顺 序 为 ： Ｏ 乙醇 ＞ 浸 ６
１ ０／ ０ 甲醇＞ 沸水 ＞ ８ 乙 醇 ＞ ０ １ｔｏ・ 盐 酸 ９ ６ ５／ ９ ６ ． ｌＬ ｏ
ＡｃＱ． ｇ法［ ｃ Ｔａ 。
＞无水 乙醇 ， 无水 乙醇 提取 的氨基 酸很 少 ， 大多数 氨
恩施 玉露 茶 ， 自恩施 州清 江茶 叶有 限公 司 。 取
１２ 主要 仪 器设 备 ．
Ｗａｅｓ ６ ５分 离 单 元 ， ２ ９ ｔｒ ９ ２ 带 ９ ６二 极 管矩 阵 检 测器 和 ２ ７ ４ ５荧 光检 测 器 ， 色谱 柱 ； 磁 炉 ； 声 Ｃ 电 超 波 清洗 器 。
有 机硒 的形 态分析 是一 直 以来 富硒 农产 品开 发
面 临的 重大难 题 ， 机硒 在 植 物 体 内 多 以硒 蛋 白和 有 硒代 氨基 酸 的形态 存在 ， 因此 ， 采用 氨基 酸 的检测 方
法来 检 测硒代 氨基 酸应 该 是 一 条 可行 的途 径 ， 而 然
１ ４ 氨 基 酸 的提 取 方 法 ．
摘 要 ：比 较 了 沸 水 、． ｏ・ 盐 酸 、 ０ １ｍ ｌＩ ห้องสมุดไป่ตู้ 甲醇 、 无水 乙 醇 、５ 乙 醇 、Ｏ 乙醇 等 不 同溶 剂 提 取 茶 叶 中氨 基 酸 的 效 果 ， 果 以 ８ ６ 结
６ 乙醇 超 声 波 法 提 取 ６ ｎ最好 ； Ｏ ０ｍｉ 比较 了用 ６ｍ ｌＬ 盐 酸 采用 电磁 水解 法 和 超声 波 法 提 取 茶 叶 中氨 基 酸 的 效 果 ， 磁 水 ｏ・ 电
氨基酸和生物资源
２ １ ，３ ４ ：２ ４ ０ １３ （） ４ ￣ ４
ＡｍｉｏＡｃｄ ＢｉｔｃＲｅｏ ｒｅ ｎ ｉ ｓ８ ０ｉ ｓＭ ｃＳ
茶 叶中氨基 酸的提取方法研 究
陈永 波 ， 作 江 ，李卫 东 ，王 尔惠 ，石 月 明 马
（ 施州农 科 院 ，湖北 恩施 ４ ５ ０ ） 恩 ４ ０ ０
由于硒 是一种 微 量元 素 ， 代 氨 基 酸 的质 量 分 数 往 硒 往 在 ｌ ・ ｇ 以下 ， 是 常 见 氨 基 酸 的 千 分 之 几 ｍｇ ｋ 只 甚 至万 分之几 ， 因此 ， 然茶 叶 中氨基 酸 的提 取 和检 虽
调 节 ｐ 值 ７ ， ０ ４ Ｌ 水 相滤膜 过滤 ， Ｈ ～８ 用 ． ５ｔ ｍ 测定 。
１ ０Ｃ下 水解 ２ １ ｏ ４ｈ的方 法 ， 该 法 操 作 复 杂 且 需 专 但
称取 ３ 试 样 （ 确 至 ０ ０ １ｇ 于 小 烧 杯 中 ， 份 精 ． ０ ） 每 份 ０ １ｇ 均 加入 ６ｍｏ ・ 盐 酸 溶 液 １ ． ， ｌＬ Ｏ ｍＬ， 置 于 电磁 炉上专 用锅 中 ， 节 电磁炉 的功率 ， 调 使锅 中水 保持 沸腾 ， 别 水解 ３ 、 ０ ９ ｎ 取下 ， 氢 氧化 分 Ｏ ６ 、 ０ｍｉ ， 用 钠溶 液 调节 ｐ 值 ７ ８ 用 ０ ４ ｍ 水 相 滤 膜 过 Ｈ ～ ， ．５ 滤， 待测 。 １ ４ ３ 超声 波提 取法 ．． 称 取 ３份 试 样 （ 确 至 ０ ０ ｌｇ 于 小 烧 杯 中 ， 精 ． ０ ） 每份 ０ １ｇ 均 加入 ６ｍｏ ・ 盐 酸 溶 液 １ ． ， ｌＬ ＯｍＬ， 置 于超 声 波清洗 器 中分别 超 声 提取 ３ 、 ０ ９ ｎ 取 Ｏ ６ 、 ０ｍｉ ，
１４ ２ 电磁水 解 法 ．．
测 方 法报 道 很 多 ＿ ， 均 不 适 合 硒代 氨基 酸 的提 ｌ 但 ］
取； 同时 由于硒 和 硫 是 同族 元 素 ， 相 似 的 性 质 ， 有 在 传统 的酸 水解 中容 易降 解 ， 增加 了提 取 的难度 。 更 传统 测 定 氨 基 酸 均 采 用 ６ ｍｏ ・ 盐 酸 在 ｌＬ
１ ４ １ 不 同溶 剂 提取氨 基酸 ．．
称取 ６ 试 样 （ 确 至 ０ ０ １ｇ 于小 烧 杯 中 ， 份 精 ． ０ ）
每 份 ０ １ｇ 分 ￣ Ｊ 入沸 水 、 ． ｌＬ 盐酸 、 ． ， ｌ Ｉ Ｊ ０ １ｍｏ・ 甲醇 、
无 水 乙醇 、 ５ 乙醇 、 ０ 乙醇 １ ８ ６ ＯｍＬ， 置于 超声 波 清洗 器 中超 声 提 取 ６ ｎ 取 下 ， 氢 氧 化钠 溶 液 ０ｍｉ ， 用
解 法 优 于超 声 波法 ， 电 磁 水 解 法 对 含 硫 氨 基 酸 破 坏 较 大 。 但
关键 词 ：茶 叶 ； 基 酸 ； 溶 剂 ；电磁 水 解 ；超 声 波 法 氨 中 图分 类 号 ： ５ ７ Ｑ １ 文献标识码 ： Ａ 文 章 编 号 ：Ｏ ６８ ７ （Ｏ １ ０—０ ２０ ｌＯ —３ ６ ２ ｌ ）４０４ —３