水解酪蛋白琼脂培养基配方
琼脂培养基配制方法
琼脂培养基配制方法琼脂培养基是一种广泛应用于微生物学实验中的寒假料,简单易得,易于制备,价格也非常实惠。
在细菌、真菌等微生物的培养过程中,琼脂培养基可以提供细胞生长所需的营养物质,并且可以形成胶状物质,让微生物在其中生长繁殖。
配制方法:1. 准备琼脂首先,我们需要准备琼脂。
通常,琼脂可以在实验室和化学品供应商处购买到。
将适量的琼脂加入适量的去离子水中,使其充分溶解,然后稍微加热,搅拌均匀,使其变成均质的液体。
2. 加入营养物质接下来,我们需要向琼脂中加入适量的营养物质,以促进微生物的生长。
常见的营养物质包括葡萄糖、氨基酸、钾盐、磷酸盐等。
具体需要添加哪些营养物质,可以根据实验需要和研究对象来定制。
3. 调整pH值在加入营养物质之后,我们还需要调整琼脂的pH值,以使其更加适合微生物的生长。
通常,微生物的适宜生长pH值在6.0-8.0之间。
因此,我们需要在此范围内调整琼脂的pH值。
4. 灭菌处理最后,将琼脂培养基倒入可反复加热的试管或烧杯中,用高温的方法灭菌处理。
通常,我们可以将其放置在高温高压灭菌器中进行灭菌处理。
处理时间视试管大小而定,一般在15-20分钟左右。
总结:以上就是琼脂培养基的配制方法。
需要注意的是,琼脂培养基的配制过程中,除了添加适量的营养物质和调整pH值外,不要添加任何其他物质,以免对实验结果产生干扰。
另外,为保证实验结果的准确性,灭菌处理也是非常重要的一步,必须把握好灭菌时间和温度。
最后,希望我们在科学研究中,能够更好地运用琼脂培养基,为科学事业做出更大的贡献。
培养基配方
一、LB培养基:Yeast extract 5 g/LTryptone 10 g/LNacl 10 g/LPH为7.0 若配制固体培养基加入1.5%的琼脂。
二、YEB培养基:Yeast extract 1 g/LPeptone(或Tryptone) 5 g/LBeef extract 5 g/LSucrose 5 g/LMgSO4 2 mmol/LPH为7.0 若配制固体培养基加入1.5%的琼脂。
三、N6D2培养基(2,4D浓度2mg/L):① N6大量母液1:20×大量元素(1L) 50mlKNO356.6g(NH4)2SO49.26gKH2PO48g② N6大量母液2:40×大量元素(500ml) 25mlCaCl2·2H2O 3.32g③ N6大量母液3:40×大量元素(500ml) 25mlMgSO4∙7H2O 3.7g④ B5微量元素I:100×微量元素(1L) 10ml溶液A:MnSO4∙H2O 781mgZnSO4∙7H2O 200mg溶于400ml无菌水溶液B:H 3BO3300mgKI 75mg溶于400ml无菌水然后缓慢将溶液A和溶液B混合,定容至1L⑤ B5微量元素II:1000×微量元素(500ml) 1mlNa2MoO4·2H2O 125mgCuSO4·5H2O 12.5mgCoCl2·6H2O 12.5mg⑥ B5维生素I:100×维生素(500ml) 10ml盐酸硫胺素 500mg盐酸吡哆醇 50mg烟酸 50mg⑦ B5维生素II:100×维生素(500ml) 10ml甘氨酸 100mg⑧200×铁盐(500ml) 5mlNa2-EDTA 3730mgFeSO4·7H2O 2780mg⑨ 2,4 D:100×2,4 D 10ml200mg 2,4 D,先溶于1ml 无水乙醇中,再定容到1L。
MH琼脂平板产品技术要求赛默飞
MH琼脂平板
适用范围:用于进行纸片扩散法抗生素药物敏感试验。
1.1规格
10×90mm/包;
5×140mm/包。
1.2 主要组成成分
产品由塑料平皿和培养基组成。
每升培养基含有以下成分:
牛肉浸出物 2.0g
淀粉 1.5g
酪蛋白水解物 17.5g
琼脂粉17.0g
纯化水 1000ml
2.1 理化要求
2.1.1 外观
平皿无破碎,无明显气泡,琼脂层颜色呈均匀的麦秆黄色。
2.1.2 透明度
透明。
2.1.3 pH值
灭菌后,20℃~25℃时,该培养基pH值应为7.1-7.5。
2.1.4 装量
10X90mm/包规格的MH琼脂平板每片平板装量:23±3g;
5X140mm/包规格的MH琼脂平板每片平板装量:60±7g。
2.2 微生物限度测试
培养平板数量小于20块时,所有平板均应无菌生长;
培养平板数量大于等于20块时,检出长菌平板不得多于1块。
2.3药敏实验
2.4 稳定性
产品在2~10 ℃避光贮存条件下,有效期为63天,在有效期内质量是稳定的。
几种培养基的配方
几种培养基的配方培养基是用于培养和繁殖微生物的营养物质的混合物。
根据微生物的特性和应用需求,可以设计出不同成分和配方的培养基。
以下是几种常见的培养基配方:1. 营养琼脂培养基(Nutrient Agar)的配方:-牛肉膏:5g-蛋白胨:5g-水解酵母膏:1.5g-纯化琼脂:15g-蒸馏水:1000mL将牛肉膏、蛋白胨和水解酵母膏溶解在蒸馏水中,添加纯化琼脂,混合并加热直至溶解,然后倒入培养皿中。
2. EMB(Eosin Methylene Blue)培养基的配方:-蛋白胨:17g-明胶胨:3g-乳糖:10g-酵母提取物:3g-果糖:1g- Eosin Y:0.4g-亚甲蓝:0.065g-纯化琼脂:15g-蒸馏水:1000mL将蛋白胨、明胶胨、乳糖、酵母提取物和果糖溶解在蒸馏水中,加热并搅拌至溶解,然后添加Eosin Y和亚甲蓝,最后加入纯化琼脂,混合并倒入培养皿中。
3. 铡锰培养基(Sabouraud Agar)的配方:-葡萄糖:40g-酵母膏粉:5g-水解麦粉:15g-纯化琼脂:15g-蒸馏水:1000mL将葡萄糖、酵母膏粉和水解麦粉溶解在蒸馏水中,加热并搅拌至溶解,然后添加纯化琼脂,混合并倒入培养皿中。
4.胰蛋白酶-大豆酪蛋白肉汤培养基(TRYPTICASE™SOYBROTH)的配方:-胰蛋白酶胨:15g-大豆酪蛋白胨:5g-食盐:5g-葡萄糖:20g-蒸馏水:1000mL将胰蛋白酶胨、大豆酪蛋白胨、食盐和葡萄糖溶解在蒸馏水中,混合并加热至溶解,然后冷却至室温。
5. M9盐碱培养基(M9 minimal medium)的配方:-磷酸一氢二钾:3g-硫酸镁:0.5g-氯化钠:0.5g- 氨氯化铁:7.5mg-葡萄糖:4g-去离子水:1000mL将磷酸一氢二钾、硫酸镁、氯化钠和氨氯化铁溶解在去离子水中,混合并加热至溶解,然后冷却至室温后添加葡萄糖。
这只是几种常见的培养基配方,实际上还有很多不同成分和配方的培养基。
146种培养基配方
146种培养基配方在微生物学研究中,培养基是非常重要的工具,用于维持和培养各类微生物的生长。
不同的微生物对培养基成分有着不同的需求,因此,有很多种不同的培养基配方被设计出来以满足微生物的需求。
下面是一些常用的微生物培养基配方。
1. 素琼脂葡萄糖培养基(Tryptone glucose yeast extract agar):- 牛肉提取物(Tryptone) 10g- 酵母提取物(Yeast extract) 5g- 葡萄糖(Glucose) 10g- Agar 15g-pH7.22. 红色半固体培养基(Red semi-solid medium):- 蛋白胨(Peptone) 10g- 水解酵母(Yeast extract) 5g- Agar 7.5g- 酚红(Phenol red) 0.02g-pH7.23. 马铃薯葡萄糖琼脂培养基(Potato glucose agar):- 马铃薯提取物(Potato extract) 4g- 葡萄糖(Glucose) 20g- Agar 20g-pH7.04. 大肠杆菌营养琼脂培养基(Escherichia coli nutrient agar): - 羊肉肉脏提取物(Peptone from meat infusion) 5g- 水解酵母(Yeast extract) 3g-NaCl5g- Agar 15g-pH7.05. 硫磺琼脂培养基(Sulfur agar):- 素蛋白(Casein peptone) 10g- 水解酵母(Yeast extract) 5g- 硫磺粉末(Sulfur powder) 0.1g- Agar 15g-pH7.56. 罗氏琼脂培养基(Rogosa agar):- 葡萄糖(Dextrose) 20g- 麦粉汁(Malt extract) 10g- 柠檬酸(Citric acid) 5g- Agar 15g-pH5.27. 环境样品微生物菌落计数菌落计数琼脂培养基(Microbial Colony Count Agar):- 水解酵母(Yeast extract) 5g- 蛋白胨(Peptone) 5g-NaCl9g- Agar 15g-pH7.28. 活性炭琼脂培养基(Activated charcoal agar):- 木质纤维素(Cellulose) 5g- 活性炭(Activated charcoal) 1g- Agar 10g-pH7.29. 高盐基琼脂培养基(High salt base agar):- 兰氏海盐(Sea salt) 20g- 水解酵母(Yeast extract) 5g- 蛋白胨(Peptone) 5g- Agar 15g-pH7.510. 大豆酪蛋白琼脂培养基(Soy peptone agar):- 大豆酪蛋白(Soy peptone) 5g- 水解酵母(Yeast extract) 5g- Agar 15g-pH7.0这只是一小部分微生物培养基的配方,实际上有很多种不同的培养基适用于不同类型的微生物。
各种培养基成分
1.营养肉汤成分:蛋白胨10g,牛肉膏3g,氯化钠5g,蒸馏水1000mL,pH7.4。
制法:按上述成分混合,溶解后校正pH,121℃高压灭菌15min。
2.营养琼脂培养基成分:蛋白胨10g,牛肉膏3g,氯化钠5g,琼脂17g,蒸馏水1000mL,pH7.2。
制法:将除琼脂外的各成分溶解于蒸馏水中,校正pH,加入琼脂,分装于烧瓶内,121℃,15min高压灭菌备用。
3.MRS培养基成分:蛋白胨10g,牛肉膏10g,酵母粉5g,K2HPO4 2g,柠檬酸二铵2g,乙酸钠5g,葡萄(琼脂15~20g),蒸馏水1000mL。
糖20g,吐温80 1mL,MgSO4 .7H2O 0.58g,MnSO4 4H2O 0.25g,制法:将以上成分加入到蒸馏水中,加热使完全溶解,调pH至6.2~6.4,分装于三角瓶中,121℃,灭菌15min。
4.脱脂乳培养基成分:牛奶,蒸馏水。
制法:将适量的牛奶加热煮沸20~30min,过夜冷却,脂肪即可上浮。
除去上层乳脂即得脱脂乳。
将脱脂乳盛在试管及三角瓶中,封口后置于灭菌锅中在108℃条件下蒸汽灭菌10~15min,即得脱脂乳培养基。
5.培养基A成分:蛋白胨10.0g,酵母提取物1.0g,葡萄糖10.0g,NaCL5.0g,琼脂15.0g,水1000mL。
制法:将以上成分加入到蒸馏水中,加热使完全溶解,调pH至7.0~7.2,分装于三角瓶中,121℃,灭菌15min。
6.PTYG培养基成分:胰胨Tryptone(Oxoid)5g,大豆蛋白胨5g,酵母粉(Oxoid)10g,葡萄糖10g,吐温80 0 1mL,琼脂15~20g,L-半胱氨酸盐酸盐0.05g,盐溶液4mL。
制法:将以上成分加入到蒸馏水中,加热使完全溶解,调pH至6.8~7.0,分装于三角瓶中,115℃灭菌30min。
盐溶液制备:无水氯化钙0.2g,K2HPO4 1.0g,KH2PO4 1.0g,MgSO4 。
7H2O 0.48g,NaCO310g,NaCL 2g,蒸馏水1000mL,溶解后备用。
培养基配置记录范文
培养基配置记录范文培养基配置是一种常见的实验室操作,用于满足细胞和微生物的生长和繁殖需求。
在细胞培养和微生物学研究中,合适的培养基配置可以提供细胞所需的营养物质和环境条件,促进其生长和增殖。
以下是一份培养基配置记录,供参考。
培养基名称:LB平板培养基成分:-蛋白消化物:10g-酵母提取物:5g-硫酸镁:0.5g-氯化钠:168g-磷酸二氢钠:2.5g-酪蛋白水解物:10g-琼脂:15g- 蒸馏水:1000ml操作步骤:1.将蛋白消化物、酵母提取物、硫酸镁、氯化钠、磷酸二氢钠和酪蛋白水解物称量并加入烧杯中。
2.加入适量的蒸馏水,搅拌溶解。
3.将琼脂加入另一个烧杯中,加入适量的蒸馏水,搅拌均匀。
4.将第2步中的溶液倒入琼脂烧杯中,用火煮沸,搅拌均匀。
5.倒入培养皿中,待凝固后即可使用。
注意事项:-在配置过程中,应严格按照指定的成分和比例称量,避免误差。
-配置过程中使用的烧杯、烧瓶等器材应事先清洗和消毒,以防止污染。
-在使用琼脂烧杯煮沸时,应掌握好火候和时间,避免溢出或糊底。
-配制后的培养基可以在121℃高压灭菌器中高压灭菌,以确保培养基的无菌性。
培养基名称:DMEM细胞培养基成分:- 葡萄糖:4500mg-盐酸NaH2PO4·H2O:1.19g- L-谷氨酸:584mg- L-天冬酰胺:14.9mg- 苯甲酸钠:870mg- 脱脂乳粉:50mg- 丙氨酰胺:44.2mg- 去甲肾上腺素:1.51mg- 蒸馏水:1000ml操作步骤:1.将葡萄糖、盐酸NaH2PO4·H2O、L-谷氨酸、L-天冬酰胺、苯甲酸钠、脱脂乳粉、丙氨酰胺和去甲肾上腺素称量并加入烧杯中。
2.加入适量的蒸馏水,搅拌溶解。
3.调整pH值至7.4左右。
4.倒入培养瓶中,待使用前过滤灭菌。
注意事项:-在配置过程中,应避免将成分称量过多或不足,以保证培养基的质量。
-调整pH值时,可以使用NaOH或盐酸进行调节。
-配制后的培养基应使用0.22μm滤膜进行过滤灭菌,以确保无菌性。
各种培养基配方
1.营养肉汤成分:蛋白胨10g,牛肉膏3g,氯化钠5g,蒸馏水1000mL,pH7.4。
制法:按上述成分混合,溶解后校正pH,121℃高压灭菌15min。
2.营养琼脂培养基成分:蛋白胨10g,牛肉膏3g,氯化钠5g,琼脂17g,蒸馏水1000mL,pH7.2。
制法:将除琼脂外的各成分溶解于蒸馏水中,校正pH,加入琼脂,分装于烧瓶内,121℃,15min高压灭菌备用。
3.MRS培养基成分:蛋白胨10g,牛肉膏10g,酵母粉5g,K2HPO4 2g,柠檬酸二铵2g,乙酸钠5g,葡萄糖20g,吐温80 1mL,MgSO4 .7H2O 0.58g,MnSO4 4H2O 0.25g,(琼脂15~20g),蒸馏水1000mL。
制法:将以上成分加入到蒸馏水中,加热使完全溶解,调pH至6.2~6.4,分装于三角瓶中,121℃,灭菌15min。
4.脱脂乳培养基成分:牛奶,蒸馏水。
制法:将适量的牛奶加热煮沸20~30min,过夜冷却,脂肪即可上浮。
除去上层乳脂即得脱脂乳。
将脱脂乳盛在试管及三角瓶中,封口后置于灭菌锅中在108℃条件下蒸汽灭菌10~15min,即得脱脂乳培养基。
5.培养基A成分:蛋白胨10.0g,酵母提取物1.0g,葡萄糖10.0g,NaCL5.0g,琼脂15.0g,水1000mL。
制法:将以上成分加入到蒸馏水中,加热使完全溶解,调pH至7.0~7.2,分装于三角瓶中,121℃,灭菌15min。
6.PTYG培养基成分:胰胨Tryptone(Oxoid)5g,大豆蛋白胨5g,酵母粉(Oxoid)10g,葡萄糖10g,吐温80 0 1mL,琼脂15~20g,L-半胱氨酸盐酸盐0.05g,盐溶液4mL。
制法:将以上成分加入到蒸馏水中,加热使完全溶解,调pH至6.8~7.0,分装于三角瓶中,115℃灭菌30min。
盐溶液制备:无水氯化钙0.2g,K2HPO4 1.0g,KH2PO4 1.0g,MgSO4 。
7H2O 0.48g,NaCO3 10g,NaCL 2g,蒸馏水1000mL,溶解后备用。
MH培养基配制标准操作规程
MH培养基配制标准操作规程1.目的规范M-H培养基配制标准操作规程,保证培养基质量。
2.原理M-H培养基用Mueller-Hinton琼脂(水解酪蛋白琼脂)配制,淀粉为保护性胶体,能对抗细菌中的毒性物质,水解酪蛋白含多种氨基酸,牛肉浸膏能提供细菌氮源的主要营养物质。
药敏试验中,为保证结果重复性及抑菌环的大小、清晰,因此培养基不含对抗生素及磺胺药物的拮抗剂。
3.用途用于普通细菌的抗菌药物敏感试验。
4.配方成品OXOID M-H干粉38g、蒸馏水1000ml,pH7.1~7.5。
5.操作步骤将上述成分混合,校正pH。
121℃高压灭菌15分钟。
冷至50℃左右,无菌定量吸取25ml于直径9cm的无菌平板内,凝固后冷藏备用。
琼脂层厚4mm.6.储存条件2~8℃冰箱。
7.有效期实验室自行规定,确保培养基质量。
8. 质量控制8.1 质控频度每次新配制时做质控8.2 质控方法及结果见表5-20.表5-18 配制M-H培养基质量控制方法及结果试验方法结果无菌试验质量检测平行试验<100块抽检5%,>100块随机取10块,35℃,CO2培养24小时在M-H培养基上涂布粪肠球菌ATCC29212,用甲氧苄啶∕磺胺甲噁纸片进行药敏试验,35℃培养24小无细菌生长出现一个边缘清楚的抑菌圈,直径应≧20mm时做质控时,取新旧批号的培养基同时做9.注意事项9.1 倾注琼脂量为25ml,平板深度4mm。
若太薄,易产生假敏感。
若太厚,平皿中的抗生素往下扩散而使抑菌环变狭窄,产生假耐药性。
9.2 pH会影响某些抗生素的活性。
实验时不可将平板培养在CO2培养箱中,否则会在琼脂的潮湿表面产生碳酸而降低pH值,将影响各种抗生素的扩散速度、抑菌环大小。
参考文献[1] 周庭银编著.临床微生物学诊断与图解.第二版.上海:上海科学技术出版社,2007[2] 王钦升,周正明,高屹主编.实用医学培养基手册.北京:人民军医出版社,1999(周庭银)编写人:AAA、BBB 操作人:本室操作人员批准人:。
生化试验方法
酪素水解试验(酪蛋白水解)微生物生化反应是指用化学反应来测定微生物的代谢产物,生化反应常用来鉴别一些在形态和其它方面不易区别的微生物。
因此微生物生化反应是微生物分类鉴定中的重要依据之一。
酪素水解试验(酪蛋白水解)牛奶平板的制备:取5g脱脂奶粉加入50mL蒸馏水中(或用50mL脱脂牛奶),另称1.5g琼脂溶于50mL 蒸馏水中,将两液分开灭菌。
待冷至45-50℃时,将两液混匀倒平板,即成牛奶平板。
将平板倒置过夜,使表面水分干燥,然后将菌种点接在平板上,每皿可点接3-5株菌。
适温培养1、3、5天,记录菌落周围和下面酪素是否已被分解而呈透明。
配制该培养基时,切勿将牛奶和琼脂混合灭菌,以防牛奶凝固。
七叶灵水解试验试验在七叶灵缓冲液中进行。
该缓冲液的组成是,七叶灵5.0克、枸椽酸铁铵0.5克,氯化钠8.0克、磷酸氢二钾0.4克、磷酸二氢钾0.1克及蒸馏水1000 ml。
校正pH至5.6±2,分装备用。
试验时,取4~6个菌落接种在0.5ml七叶灵缓冲液中,使其浊度与Mc-Farland第三管相近,放37℃水浴。
每隔30分钟、60分钟和2小时观察结果。
溶液变黑为阳性反应。
分解纤维素试验就用以纤维素为唯一C源(1%)的无机盐培养基就可以了,1L培养基加0.2-0.4g 的刚果红,产透明圈的菌就是纤维素分解菌。
接种后30度培养。
纤维素刚果红培养基(初筛) : KH2 PO4 0. 5 g、MgSO4 0. 25 g、纤维素粉1. 88 g、刚果红0. 2 g、琼脂14. 00 g、明胶2. 00 g、水1 000 mL, pH值7. 0。
酪氨酸水解酪氨酸水解微生物生化反应是指用化学反应来测定微生物的代谢产物,生化反应常用来鉴别一些在形态和其它方面不易区别的微生物。
因此微生物生化反应是微生物分类鉴定中的重要依据之一。
将L-酪氨酸0.5g悬浮于10mL蒸馏水中,8磅20分钟灭菌,然后于100mL无菌的营养肉汤琼脂混合,倾倒平板,待凝固后,将测试菌接种于平皿上,培养7到14d,记录酪氨酸结晶是否被水解而变透明。
实验室常用培养基配方
实验室常用培养基配方1. 营养琼脂培养基(Nutrient Agar)营养琼脂培养基是最为常用的一种培养基,用于微生物的一般培养、分离和鉴定,其配方如下:-水:1000mL-肉浸膏或胨:三到五克-水解酪蛋白:五克-氯化钠:五克-琼脂:十五克2. 培养基ONE(BHI Agar)培养基ONE用于灭菌后的微生物收集、保存和复苏,配方如下:-砂糖:十五克-胨:二十克-水:1000mL-酵母膏:二十克-酵母蛋白胨:十克-溶血素:十克-十%NaCl:五百毫升-甘油:百毫升3. 霍乱弧菌选择性琼脂培养基(TCBS Agar)TCBS Agar用于霍乱弧菌的分离和检测,配方如下:-水:1000mL-TCBS粉:一百克4. MacConkey琼脂培养基(MacConkey Agar)MacConkey琼脂培养基是一种选择性琼脂培养基,用于大肠杆菌的分离和检测,配方如下:-水:1000mL-肉浸膏:十七克-水解酪蛋白:十五克-氯化钠:五克-紫蘑菇素:六十毫克-琼脂:十五克5. Sabouraud琼脂培养基(Sabouraud Agar)Sabouraud琼脂培养基用于真菌的分离和培养-水:1000mL-葡萄糖:四十克-琼脂:十五克-氯化钠:五克-氯已二维硫酸钾:二十克这些仅仅是一些常见的培养基配方,实验室常根据不同微生物的要求而有所调整。
此外,还有许多特殊的培养基用于特殊微生物的培养和分离,如MRS培养基用于乳酸菌、EC培养基用于大肠杆菌O157:H7等。
在使用培养基时,需要注意权威的文献和生产厂家的指导。
[复习]大豆酪蛋白琼脂培养基
1、配比方法称取营养肉汤培养基18g,加水1000ml,加热溶解,分装,经121℃20分钟灭菌后贴签放入冰箱备用。
2、配制记录2.1 配制营养肉汤培养基:生产单位:批号:EXP:天平:编号:营养肉汤培养基的实际称样量:g,加入水ml。
实际分装:瓶,均用硅胶塞塞口,牛皮纸扎口。
2.2 灭菌灭菌锅:编号:实际灭菌温度:℃,实际灭菌时间~。
灭菌后包装完好的培养基:瓶有效期至:将培养基贴签,放入冰箱。
冰箱编号:操作人/日期:复核人/日期:3、促生长试验(新批号需做)□ 需做促生产试验:该批培养基未做过促生试验□ 不需做促生产试验:该批培养基已做过促生试验,且合格。
已做促生产试验的批号:3.1 制备菌悬液刮取金黄色葡萄球菌菌种斜面培养物,用无菌0.9%NaCl溶液调配成与标准细菌比浊管浓度一致的菌液,确定菌液的含菌量。
用无菌0.9%NaCl溶液作10递增稀释菌液,直到菌种含量为10~100个/ml。
菌种批号:EXP:无菌0.9%NaCl溶液配制日期:EXP:细菌比浊管批号:EXP:菌悬液含量:个/ml3.2 促生长试验吸取菌悬液1ml注入无菌平皿中,倾注已冷至约45℃的营养肉汤培养基约20ml,另做空白作为阴性对照。
将所有平皿,于培养箱30~35℃条件下培养48小时,平行测定两份。
培养开始时间:培养结束时间:培养箱编号:3.3 点计菌落数阴性对照应无菌生长,促生长试验每皿应为10~100个/ml。
阴性对照:皿1:个/皿;皿2:个/皿;促生长试验:皿1:个/皿;皿2:个/皿;结果判断:促生产试验:□ 符合规定□ 不符合规定操作人/日期:复核人/日期:。
酪氨酸琼脂培养基成分
酪氨酸琼脂培养基成分
酪氨酸琼脂培养基的成分包括:
1. 酪氨酸:作为碳源供养细菌生长。
2. 琼脂:作为固体化剂,提供培养基的凝胶状结构。
3. 碳酸氢钠:用于调节培养基的酸碱度。
4. 氯化钠:提供细菌所需的氯离子。
5. 磷酸二氢钾和磷酸二氢二钠:提供细菌所需的磷酸盐。
6. 硫酸镁:提供细菌所需的镁离子。
7. 氯化钾:提供细菌所需的钾离子。
8. 维生素和氨基酸等营养物质:提供细菌所需的生长因子。
9. 染色剂:如酚红等,用于观察细菌生长的变化。
10. 蒸馏水:用于配置培养基。
这些成分在酪氨酸琼脂培养基中提供了细菌生长所需的基本营养物质和环境条件,使得细菌可以在琼脂培养基上形成可见的菌落。
在酪氨酸琼脂培养基上,酪氨酸降解产生的酪氨酸酶可以被细菌产生,使培养基上的细菌菌落呈现出金黄色(阳性)或者无色(阴性)的特征。
这种特性可以用于检测某些细菌的酪氨酸酶产生能力。
常用25种培养基详细配方
一、牛肉膏蛋白胨培养基(培养细菌用)牛肉膏3g蛋白胨10gNaCl 5g琼脂15—20g水1000mlpH 7.0—7.21.05kg/cm2,121.3℃灭菌20分钟。
二、淀粉琼脂培养基(高氏1号培养基,培养放线菌用)可溶性淀粉20gKNO31gNaCl 0.5gK2HPO40.5gMgSO40.5gFeSO40.01g琼脂20g水1000mlpH 7.2—7.4配制时,先用少量冷水,将淀粉调成糊状,在火上加热,边搅拌边加水及其他成分,溶化后,补足水分至1000ml。
1.05kg/cm2,121.3℃灭菌20分钟。
三、查氏培养基(培养霉菌用,实验16)NaNO32gK2HPO41gKCl 0.5gMgSO40.5gFeSO40.01g蔗糖30g琼脂15—20g水1000mlpH 自然1.05kg/cm2,121.3℃灭菌20分钟。
四、马丁氏(Martin)琼脂培养基(分离真菌用)葡萄糖10g蛋白胨5gKH2PO41gMgSO4·7H2O 0.5g1/3000孟加拉红(rose bengal,玫瑰红水溶液)100ml琼脂15—20gpH 自然蒸馏水800ml0.56kg/cm2(8磅/英寸2),112.6℃灭菌30分钟。
临用前加入0.03%链霉素稀释液100ml,使每毫升培养基中含链霉素30μg。
五、马铃薯培养基(实验16)马铃薯200g蔗糖(或葡萄糖) 20g琼脂15—20g水1000mlpH 自然马铃薯去皮,切成块煮沸半小时,然后用纱布过滤,再加糖及琼脂,溶化后补足水至1000ml。
1.05kg/cm2,121.3℃灭菌20分钟。
六、麦芽汁琼脂培养基(实验15)1.取大麦或小麦若干,用水洗净,浸水6—12小时,置15℃阴暗处发芽,上盖纱布一块,每日早、中、晚淋水一次,麦根伸长至麦粒的两倍时,即停止发芽,摊开晒干或烘干,贮存备用。
2.将干麦芽磨碎,一份麦芽加四份水,在65℃水浴锅中糖化3—4小时,糖化程度可用碘滴定之。
琼脂培养基的配制步骤
琼脂培养基的配制步骤
琼脂培养基是一种基础培养基,可用于菌落计数、微生物鉴定等实验。
下面是琼脂培养基的配制步骤:
(1)准备琼脂:将琼脂片(或琼脂粉)加入去离子水中,用锅煮沸,搅拌使琼脂完全溶解,再用自然冷却至50℃左右。
(2)添加培养基成分:将适量牛肉精粉、酵母提取物、蛋白胨、葡萄糖等加入琼脂中,充分搅拌混合。
(3)调节pH值:使用氢氧化钠或氢氧化钾调节pH值至7.0,再用酚红指示剂检测pH值,调节至理想值。
(4)加入去离子水:将琼脂培养基加入适量去离子水中,使总成分达到预设量,再充分搅拌混合。
(5)灭菌:将配制好的琼脂培养基装入试管或烧瓶,放入高压灭菌锅中进行高温、高压灭菌。
琼脂培养基的配制需要掌握以下技巧:
1. 使用高质量的琼脂:琼脂的质量对实验结果有很大影响,应选用纯度高、溶解快、凝固均匀的琼脂片或琼脂粉。
2. 注意搅拌均匀:配制时要充分搅拌混合,防止成分不均匀,影响实验结果。
3. 严格控制pH值:pH值对培养基的影响很大,应根据实验要求控制pH值至理想值。
4. 要用去离子水:去离子水可以减少微生物培养基中的有害物质含量,为微生物的生长提供更好的环境。
总之,琼脂培养基的配制需要细心、小心,严格控制每个步骤,保证琼脂培养基的质量和稳定性,以获得满意的实验结果。
麦康凯琼脂培养基成分
麦康凯琼脂培养基成分
一、介绍
麦康凯琼脂培养基是一种常用的微生物培养基,广泛应用于细菌、真
菌等微生物的培养和检测。
其成分复杂,包括多种营养成分和添加剂,能够提供微生物所需的各种营养物质和环境条件,促进其生长繁殖。
二、主要成分
1. 蛋白胨:是麦康凯琼脂培养基中最主要的营养成分之一,含有大量
氨基酸和肽类化合物,能够为微生物提供必需的氮源和碳源。
2. 水解酪蛋白:含有大量氨基酸和肽类化合物,也是一种重要的氮源
和碳源。
3. 酵母提取物:富含多种维生素、核酸、核苷酸等营养成分,能够促
进微生物的生长繁殖。
4. 葡萄糖:为微生物提供必需的碳源,并且还能够调节培养基pH值。
5. 麦芽糊精:是一种复杂多糖,能够为微生物提供能量和营养物质。
6. 氯化钠:是一种重要的电解质,能够维持细胞内外的渗透压平衡。
7. 磷酸二氢钾:能够缓冲培养基pH值,使其保持在适宜范围内。
8. 麦康凯琼脂:是一种富含多糖的天然胶体,具有较好的凝胶性和稳
定性,可以使培养基成为半固体状态,便于微生物生长。
三、其他添加剂
1. 镁硫酸:是一种重要的电解质,能够促进微生物的生长和代谢活动。
2. 硫酸铁:含有丰富的铁元素,对某些微生物具有特殊的营养作用。
3. 青霉素:是一种广谱抗菌素,在麦康凯琼脂培养基中加入可以抑制
细菌污染。
4. 氯霉素:也是一种广谱抗菌素,在麦康凯琼脂培养基中加入可以抑
制细菌污染。
四、制备方法
1. 将蛋白胨、水解酪蛋白、酵母提取物、。
酪蛋白琼脂培养基的原理
酪蛋白琼脂培养基的原理
酪蛋白琼脂培养基是一种常见的微生物培养基,其原理是利用琼脂的凝胶性质,将培养基固化成为一种半固体状,从而提供微生物生长所需的基础营养物质和环境条件。
酪蛋白琼脂培养基的主要成分包括酪蛋白、琼脂、蛋白胨、钠氯等,其中酪蛋白是一种优质的碳源和氮源,可以提供微生物所需的能量和营养物质,而琼脂的凝胶性质可以使培养基成为半固态,便于微生物的生长和观察。
酪蛋白琼脂培养基的制备方法较为简单,一般包括以下步骤:先将琼脂溶解于蒸馏水中,再加入酪蛋白、蛋白胨、钠氯等物质,混合均匀后灭菌即可。
在使用时,将制备好的琼脂培养基倒入培养皿中,待冷却凝固后,将微生物接种于表面,放于恰当的培养条件下,观察其生长情况。
酪蛋白琼脂培养基的应用范围较为广泛,可用于培养和分离多种微生物,如细菌、酵母、真菌等,常用于食品、医药、环境等领域的微生物检测和研究。
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最新110种培养基配方
110种培养基配方110种培养基配方THE COMPOSITION OF MEDIA培养基及成分1. Acetobacter Medium (醋酸菌培养基)Glucose (葡萄糖) 100g Yeasst extract (酵母膏) 10gCaCO3 20g Agar (琼脂) 15gDistilled water (蒸馏水) 1000ml Adjust (调) pH to 6.8适用范围:恶臭醋酸杆菌混浊变种2. Nutrient Agar (营养肉汁琼脂)Pepton (蛋白胨) 5g Beef extract (牛肉膏) 30gNaCl 5g Agar (琼脂) 15gDistilled water (蒸馏水) Adjust (调) pH to 7.0-7.2[Note]:When cultivation of Bacillus,5mg of to MnSO4.H2O may be added .It is favorable to promote spore formation .适用范围:产气气杆菌、粪产碱杆菌、蜡状芽孢杆菌、蜡状芽孢杆菌蕈状变种、地衣形芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌、多粘芽孢杆菌、尘埃芽孢杆菌、短小芽孢杆菌、嗜热脂肪芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌深黑变种、苏云金芽孢杆菌、苏云金芽孢杆菌蜡螟亚种(青虫菌)、苏云金芽孢杆菌戈尔斯德变种、苏云金芽孢杆菌猝倒亚种、产氨短杆菌、黄色短杆菌、谷氨酸棒状杆菌、北京棒杆菌、大肠埃希氏菌(大肠杆菌)、铜绿假单胞菌(绿脓杆菌)、凸形假单胞杆菌、荧光假单胞菌、弯曲假单胞菌、恶臭假单胞菌、假单胞杆菌、藤黄八叠球菌、亚黄八叠球菌、尿素八叠球菌、金黄色葡萄球菌、运动发酵单孢菌3. Azotobacter Medium (固氮菌培养基)KH2PO4 0.2g K2HPO4 0.8gMgSO4.7H2O 0.2g CaSO4.2H2O 0.1gNa2MoO4.2H2O Trace(微量) Yeast axtract(酵母膏) 0.5gMannitol(甘露醇) 20g FeCl3 Tract(微量)Distilled water (蒸馏水) 1000ml Agar (琼脂) 15gAdjust (调) pH to 7.2适用范围:固氮菌、胶质芽孢杆菌4. Corn Meal Medium (玉米粉培养基)Maize flour (玉米粉) 5g Peptone (蛋白胨) 0.1gGlucose (葡萄糖) 1g Tap water (自来水) 1000ml[Note]:Boil the mixture in autoclave at 121℃ for 1 hr. distribute the medium into 18ⅹ18 mm tubes , each contains 10 ml of the liquid , then autoclave at 121℃ for 1 hr . again (15磅蒸煮1小时,分装入18ⅹ18毫米试管,每管深度达6厘米。
真菌常用培养基配方
[沙氏葡萄糖蛋白胨琼脂,沙堡弱培养基,SDA](一)组成葡萄糖 40.0g蛋白胨 10.0g琼脂12.0~15.0g蒸馏水 1000ml(二)制法上述混合后加入200mg氯霉素,121摄氏度10分钟灭菌后备用。
(三)目的是常用的分离或保存菌种的培养基。
[沙氏液基,SDB](一)组成葡萄糖 40.0g蛋白胨 10.0g蒸馏水 1000ml(二)制法上述混合后加入200mg氯霉素,121摄氏度10分钟灭菌后备用。
[加抗生素沙氏葡萄糖蛋白胨琼脂基,SDA with antibiotic](一)组成葡萄糖 40.0g蛋白胨 10.0g琼脂12.0~15.0g蒸馏水 1000ml(二)制法上述混合后加入200mg氯霉素。
250mg放线菌酮,121摄氏度10分钟灭菌后备用。
[改良沙氏葡萄糖蛋白胨琼脂基,modified SDA](一)组成葡萄糖 20.0g蛋白胨 10.0g琼脂12.0~15.0g蒸馏水 1000ml(二)制法上述混合后121摄氏度10分钟灭菌后备用。
(三)目的保存菌种培养基。
[马铃薯葡萄糖琼脂,PDA](一)组成马铃薯 200.0g葡萄糖 20.0g琼脂12.0~15.0g蒸馏水 1000ml(二)制法先将马铃薯洗净去皮切片,加水180ml,煮沸30分钟后过滤,再加葡萄糖、琼脂,将过滤液补足到1000ml,121摄氏度灭菌后备用。
(三)用途此培养基是培养真菌较好的培养基,同时也是鉴定真菌较好的培养基之一。
鉴定皮肤癣菌一般不用此培养基。
[玉米吐温80琼脂,CMA with Tw80](一)组成玉米粉 40.0g琼脂15.0g蒸馏水 1000ml吐温80 10ml(二)制法先将玉米粉混于水中,65摄氏度水浴一小时,过滤,再补足水量,然后加入琼脂和吐温80,121摄氏度10分钟灭菌后备用。
(三)用途用于观察白念珠菌厚壁孢子及假菌丝;红色毛癣菌在此培养基产色素较好。
[米饭培养基rice grain medium](一) 组成大米 300.0g蒸馏水 1000ml(二)制法将3g大米放入试管中,加入10ml蒸馏水,高压121摄氏度10分钟灭菌后备用。
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水解酪蛋白琼脂培养基,MHAmedium 水解酪蛋白琼脂培养基
用途:用于抗生素敏感试验
水解酪蛋白琼脂培养基
配方(每升):
琼脂 17g
牛肉 300g(从中提取浸出粉)
可溶性淀粉 1.5g
酪蛋白水解物 17.5g
最终pH7.3±0.2
水解酪蛋白琼脂培养基使用方法:
1、 称取本品38g,加入蒸馏水或去离子水1 L,搅拌加热煮沸至完全溶解,分装三角瓶,121℃高压灭菌15min,备用.
2、 试验菌液的制备:从TSA 平皿上挑取3-5个形态相似的菌落顶端部分接种MHB 或TSB 培养基.经36±1℃培养4-6小时后,比浊至0.5麦氏单位.
3、 接种:用无菌棉拭浸取比浊好的菌液,在管壁内轻轻转压除去过多菌液,然后再轻轻涂抹培养基,每一平皿涂抹三次.每次涂抹后均需将平皿转动60度,再行下一次涂抹.每一质控菌株涂抹三个平皿.
4、 贴片:接种后的平皿置室温片刻,待稍干后,用无菌镊子将抗生素纸片均匀贴布于平皿琼脂表面.各纸片间中心间距不得小于24mm,纸片距平皿边不得小于15mm.一旦纸片接触琼脂表面,即不可再移动,因此时药物已开始扩散.
5、 培养:纸片贴妥后,在15-30分钟内,将平皿翻过来置于36±1℃培养16—24h 后,观察结果.平皿培养时不宜堆放,以二个相叠为宜.
水解酪蛋白琼脂培养基
原理:牛肉粉和酸水解酪蛋白提供氮源、维生素和氨基酸;可溶性淀粉吸收有毒的代谢产物;琼脂是培养基的凝固剂。
用法: 称取本品 42.0g,加热溶解于1000ml 蒸馏水中,121℃高压灭菌 15 分钟,待冷至 50℃, 倾入无菌平皿,备用。
质量控制:
在36±1℃培养18-24小时。
水解酪蛋白琼脂培养基用途:用于培养基原材料,提供细菌生长所需的生长因子。
技术指标
总氮 (8)
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水份 (5)
灰份 (30)
氨基氮 (5)
说明
水解酪蛋白琼脂培养基本品系由酪蛋白经酸水解后精制而成,色泽呈微黄或类白色粉末。