常见化学发光体系简述
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化学发光免疫分析基本原理
常见的化学发光体系
化学发光免疫分析法分类
常用进口发光免疫分析产品
化学发光免疫分析基本原理
化学发光免疫分析含有免疫分析 和化学发光分析2个系统
免疫分析系统是将化学发光物质或酶作为标记物,直接 标记在抗原或抗体上,经过抗原与抗体反应形成抗原-抗 体免疫复合物。 化学发光分析系统是在免疫反应结束后,加入氧化剂或酶 的发光底物,化学发光物质经氧化剂的氧化后,形成一个 处于激发态的中间体,会发射光子释放能量以回到稳定基 态,发光强度可以利用发光信号测量仪器进行检测,根据 化学发光标记物与发光强度的关系,可利用标准曲线计算 出被测物的含量。
常见的化学发光体系
鲁米诺化学发光体系
☆ 鲁米诺( luminol )、异鲁米诺( isoluminol )及 welcome to use these PowerPoint templates, New 其衍生物的发光为氧化反应发光,它们在碱性条件 Content design, 10 years experience 下通过辣根过氧化物酶( HRP)催化,被H2O2氧化 生成3-氨基邻苯二酸的激发态中间体,当其回到基 态时发出光子。
☆ 该体系中溶液的pH增高会增强发光强度,实验 证明最佳pH为9.0,在该体系中加入水溶性的大分 子物质牛血清白蛋白(BSA)或十四烷酰氨基荧光 素与十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)构成的水溶性 胶粒,可使发光强度增强400倍。
常见的化学发光体系
AMPPD化学发光体系
☆ 3-(2-螺旋金刚烷)-4-(3-磷氧酰)苯基-1,2welcome to use these PowerPoint templates, New 二氧环乙烷( AMPPD )。 Content design, 10 years experience ☆ AMPPD是一种超敏感的AP底物,它首先在AP 的特异催化下迅速脱磷酸基生成AMPD-阴离子中 间体(半衰期2~30 min), 此不稳定的中间体经分子 内电子转移裂解为一分子的金钢烷酮和一分子处 于激发态的间氧苯甲酸甲酯阴离子,当回到基态 时发出发出λ max为477 nm的光,并可持续几十分 钟。
☆ 高锰酸钾发光反应分为两类:(1)直接与高 锰酸钾反应产生化学发光;(2)利用增敏剂增强 高锰酸钾化学发光。
☆ 目前提出的高锰酸钾化学发光机理中发光体主
要有两类:激发态的锰或锰的配合物;单线态氧 的二分子复合物。
常见的化学发光体系
生物发光体系 welcome to use these PowerPoint templates, New ☆ 北美荧火虫体内的荧光素 /荧光素酶是著名的 生物化学发光体系 ,它由虫荧光素酶、虫荧光素 Content design, 10 years experience [D-(-)-2-6’-羧基-2’苯并噻唑-△2-噻唑啉-4-羧酸]、 ATP、Mg2+及O2所组成。
常见的化学发光体系
AMPPD化学发光体系 welcome to use these PowerPoint templates, New Content design, 10 years experience
AMPPD及其衍生物化学发光机制
常见的化学发光体系
电化学发光体系
☆ 电化学发光的反应在电极表面进行 ,发光底物为三 welcome to use these PowerPoint templates, New 2+ 联吡啶钌[Ru(byp) 3 ],三丙胺(TPA)用来激发光反应 Content design, 10 years experience ☆ 在阳极表面,两种物质同时失去电子。在电极板上 Ru(byp)32+被氧化成Ru(byp)33+ TPA也被氧化成阳离 子自由(TPA+*), TPA+*自发地释放一个质子而变成 非稳定分子(TPA*), 将一个电子递Ru(byp)33+, 形成激 发态的Ru(byp)32+ *。 Ru(byp)32+在衰减的同时发射一 个波长为620 nm的光子,重新回到基态Ru(byp)32+
常见的化学发光体系
鲁米诺化学发光体系 welcome to use these PowerPoint templates, New Content design, 10 years experience
ห้องสมุดไป่ตู้
鲁米诺及其衍生物的增敏化学发光机制
常见的化学发光体系
吖啶酯化学发光体系
☆ 光泽精是第一个被发现有化学发光性质的吖啶 welcome to use these PowerPoint templates, New 类化合物,也是应用最广泛的一种吖啶酯类发光 Content design, 10 years experience 试剂。 ☆ 吖啶类化合物的发光效率高,量子产率可达 0.05,作为标记物用于免疫分析,其发光体系简 单、快速,不需要加入催化剂,也不需要增强剂, 从而降低了背景发光,提高了信噪比,干扰作用 少。
常见的化学发光体系
吖啶酯化学发光体系 welcome to use these PowerPoint templates, New Content design, 10 years experience
吖啶酯化学发光机制
常见的化学发光体系
AMPPD化学发光体系 welcome to use-1,2these PowerPoint templates, New ☆ (金刚烷) 二氧环乙烷及其衍生物的发光 体系是目前最重要、最灵敏的一类发光体系,主 Content design, 10 years experience 要代表:ALP-AMPPD发光体系。
常见的化学发光体系
电化学发光体系 welcome to use these PowerPoint templates, New Content design, 10 years experience
常见的化学发光体系
高锰酸钾化学发光体系 welcome to use these PowerPoint templates, New ☆ 反应机理:化学反应诱导的激发态 Mn(Ⅱ )的磷 4T →6A 的转换。 光,类似于固态 Mn ( Ⅱ ) 1 1 Content design, 10 years experience
化学发光免疫分析基本原理
常见的化学发光体系
化学发光免疫分析法分类
常用进口发光免疫分析产品
化学发光免疫分析基本原理
化学发光免疫分析含有免疫分析 和化学发光分析2个系统
免疫分析系统是将化学发光物质或酶作为标记物,直接 标记在抗原或抗体上,经过抗原与抗体反应形成抗原-抗 体免疫复合物。 化学发光分析系统是在免疫反应结束后,加入氧化剂或酶 的发光底物,化学发光物质经氧化剂的氧化后,形成一个 处于激发态的中间体,会发射光子释放能量以回到稳定基 态,发光强度可以利用发光信号测量仪器进行检测,根据 化学发光标记物与发光强度的关系,可利用标准曲线计算 出被测物的含量。
常见的化学发光体系
鲁米诺化学发光体系
☆ 鲁米诺( luminol )、异鲁米诺( isoluminol )及 welcome to use these PowerPoint templates, New 其衍生物的发光为氧化反应发光,它们在碱性条件 Content design, 10 years experience 下通过辣根过氧化物酶( HRP)催化,被H2O2氧化 生成3-氨基邻苯二酸的激发态中间体,当其回到基 态时发出光子。
☆ 该体系中溶液的pH增高会增强发光强度,实验 证明最佳pH为9.0,在该体系中加入水溶性的大分 子物质牛血清白蛋白(BSA)或十四烷酰氨基荧光 素与十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)构成的水溶性 胶粒,可使发光强度增强400倍。
常见的化学发光体系
AMPPD化学发光体系
☆ 3-(2-螺旋金刚烷)-4-(3-磷氧酰)苯基-1,2welcome to use these PowerPoint templates, New 二氧环乙烷( AMPPD )。 Content design, 10 years experience ☆ AMPPD是一种超敏感的AP底物,它首先在AP 的特异催化下迅速脱磷酸基生成AMPD-阴离子中 间体(半衰期2~30 min), 此不稳定的中间体经分子 内电子转移裂解为一分子的金钢烷酮和一分子处 于激发态的间氧苯甲酸甲酯阴离子,当回到基态 时发出发出λ max为477 nm的光,并可持续几十分 钟。
☆ 高锰酸钾发光反应分为两类:(1)直接与高 锰酸钾反应产生化学发光;(2)利用增敏剂增强 高锰酸钾化学发光。
☆ 目前提出的高锰酸钾化学发光机理中发光体主
要有两类:激发态的锰或锰的配合物;单线态氧 的二分子复合物。
常见的化学发光体系
生物发光体系 welcome to use these PowerPoint templates, New ☆ 北美荧火虫体内的荧光素 /荧光素酶是著名的 生物化学发光体系 ,它由虫荧光素酶、虫荧光素 Content design, 10 years experience [D-(-)-2-6’-羧基-2’苯并噻唑-△2-噻唑啉-4-羧酸]、 ATP、Mg2+及O2所组成。
常见的化学发光体系
AMPPD化学发光体系 welcome to use these PowerPoint templates, New Content design, 10 years experience
AMPPD及其衍生物化学发光机制
常见的化学发光体系
电化学发光体系
☆ 电化学发光的反应在电极表面进行 ,发光底物为三 welcome to use these PowerPoint templates, New 2+ 联吡啶钌[Ru(byp) 3 ],三丙胺(TPA)用来激发光反应 Content design, 10 years experience ☆ 在阳极表面,两种物质同时失去电子。在电极板上 Ru(byp)32+被氧化成Ru(byp)33+ TPA也被氧化成阳离 子自由(TPA+*), TPA+*自发地释放一个质子而变成 非稳定分子(TPA*), 将一个电子递Ru(byp)33+, 形成激 发态的Ru(byp)32+ *。 Ru(byp)32+在衰减的同时发射一 个波长为620 nm的光子,重新回到基态Ru(byp)32+
常见的化学发光体系
鲁米诺化学发光体系 welcome to use these PowerPoint templates, New Content design, 10 years experience
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鲁米诺及其衍生物的增敏化学发光机制
常见的化学发光体系
吖啶酯化学发光体系
☆ 光泽精是第一个被发现有化学发光性质的吖啶 welcome to use these PowerPoint templates, New 类化合物,也是应用最广泛的一种吖啶酯类发光 Content design, 10 years experience 试剂。 ☆ 吖啶类化合物的发光效率高,量子产率可达 0.05,作为标记物用于免疫分析,其发光体系简 单、快速,不需要加入催化剂,也不需要增强剂, 从而降低了背景发光,提高了信噪比,干扰作用 少。
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吖啶酯化学发光体系 welcome to use these PowerPoint templates, New Content design, 10 years experience
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常见的化学发光体系
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常见的化学发光体系
电化学发光体系 welcome to use these PowerPoint templates, New Content design, 10 years experience
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高锰酸钾化学发光体系 welcome to use these PowerPoint templates, New ☆ 反应机理:化学反应诱导的激发态 Mn(Ⅱ )的磷 4T →6A 的转换。 光,类似于固态 Mn ( Ⅱ ) 1 1 Content design, 10 years experience