高效液相色谱仪分析应用实例
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高效液相色谱仪分析应用实例
《高效液相色谱仪分析应用实例》由南京科捷为您收集提供,液相色谱应用实例包括环境气体分析、药物分析、食品分析、生物制药等方面的液相色谱应用实例。
例1.稠环芳烃分析(环境气体分析)
样品:含六苯并苯等8种稠环芳烃的混合物
色谱仪:“南京科捷LC600”液相色谱仪,配有色谱工作站
检测器:UV紫外检测器,340nm
色谱柱:C18键合相(ODS-224),5μm,柱长25cm,柱径4.6mm
流动相:甲醇-二氯甲烷(8:2)混合溶剂
流速:1mL/min
进样:20μL
结果:所有组分在25min之内全部流出,各组分完全分离,组分出峰顺序为:六苯并苯,二苯二萘嵌苯,三苯二萘嵌苯,苯萘并二萘嵌苯,四苯二萘嵌苯,萘六苯并苯,二苯萘并二萘嵌苯,苯菲并五苯。例2.磺胺分析(药物分析)
样品:磺胺、磺胺嘧啶、磺胺甲基异噁唑和甲氧苄氨嘧啶的混合物
色谱仪:“南京科捷LC600”液相色谱仪,740色谱数据处理机
检测器:UV 481型紫外检测器,波长240nm
色谱柱:μ-Bondapak C18 , 5μm,柱长25 cm,柱径4.6 mm
流动相:由KH2PO4(0.05mol/L)和Na2HPO4(0.05 mol/L)以及MeOH所组成,其用量比例为200:10:165,流速:1mL/min
进样:10μL
结果:所有组分在6min之内全部流出,各组分完全分离,组分出峰顺序为:磺胺保留时间为2.60 min, 磺胺嘧啶保留时间为3.18 min、磺胺甲基异噁唑保留时间为4.33 min,甲氧苄氨嘧啶保留时间为5.19min。例3.银杏内酯分析(药物分析)
样品:含银杏苦内酯等4种物质的混合物
色谱仪:“南京科捷LC600”液相色谱仪
配有570自动进样器,Rheadyane 77251进样阀,HP化学工作站
检测器:500型ELSD Alltech 蒸发光散射检测器
漂移管温度为91℃,氮气流速为2.75L/min
色谱柱:Platinum OPS,5μm,柱长25cm,柱径4.6mm
流动相:水:甲醇:四氢呋喃 = 75:20:10
流速:1mL/min
进样:10μL
结果:所有组分在15min之内全部流出,各组分完全分离,组分流出顺序为:峰1为银杏苦内酯C, 峰2为白果内酯, 峰3银杏苦内酯A, 峰4为银杏苦内酯B。
例4.脂肪酸甲酯分析(药物分析)
样品:含5种脂肪酸甲酯的混合物
色谱仪:“南京科捷LC600”液相色谱仪,配有色谱工作站
检测器:500型ELSD Alltech 蒸发光散射检测器
漂移管温度为45℃,氮气流速为1.5L/min
色谱柱:Silver Impregnated Ion-Exchange ,柱长25cm,柱径4.6mm
流动相:乙腈:甲醇 = 2:98
流速:0.75mL/min
进样:10μL
结果:所有组分在10min之内全部流出,各组分完全分离,组分流出顺序为:峰1为C18:0脂肪酸甲酯,峰为C18:1脂肪酸甲酯,峰3为C18:2脂肪酸甲酯,峰4为C18:3脂肪酸甲酯,峰1为C20:4脂肪酸甲酯。例5.茶碱分析(茶叶)
样品:含茶碱等三种物质的混合物
色谱仪:“南京科捷LC600”液相色谱仪,配有色谱工作站
检测器:UV紫外检测器,280nm
色谱柱:Micro μBondapak C18,8μm,柱长25 cm,柱径4.6 mm
流动相:二甲基二酰胺:甲醇:醋酸:水 = 23.5:1:0.5:75(v/v)
流速:1mL/min
进样:10μL
结果:所有组分8min之内全部流出,各组分完全分离,组分流出顺序为:峰1为可可碱,峰2为茶碱,峰3为咖啡碱。
例6.脂肪酸直接分析
样品:未经衍生处理的亚麻酸等6组分的混合物
色谱仪:“南京科捷LC600”液相色谱仪,四元梯度泵,色谱工作站
检测器:500型ELSD Alltech 蒸发光散射检测器
漂移管温度为65℃,氮气流速为2.0L/min
色谱柱:Alltima TM C18,5μm,柱长25cm,柱径2.1mm
流动相:A为水,B为乙腈
梯度时间 0min 10min 15min 20min
A 13% 20% 20% 5%
B 77% 80% 80% 95%
流速:0.4mL/min
进样:20μL
结果:所有组分20min之内全部流出,各组分完全分离,组分流出顺序为:峰1为亚麻酸,峰2为肉豆蔻酸,峰3为亚油酸,峰4为棕榈酸,峰5为油酸,峰6为硬脂酸。
例7:氨基酸衍生物分析(食品分析)
样品:22种氨基酸的苯基乙酰硫脲混合物
色谱仪:“南京科捷LC600”液相色谱仪,梯度洗脱装置,色谱工作站
检测器:UV紫外检测器,波长254nm
色谱柱:柱长25cm,柱径0.46cm Zorbax ODS柱(Dupont)
流动相:A液为0.01mol/L的NaAc, pH =4.5
B液为CH3CN
梯度:0min~6min B/A = 24/76~42/58(v/v)
6min~14min B/A = 42/58(v/v)
14min~20min B/A = 24/76(v/v)
流速:1mL/min
进样:自动进样器进样10μL
结果:所有组分在20min之内全部流出,各组分完全分离,组分出峰顺序为:峰1为ASP,峰2为GLU,峰3为ASN,峰4为SER,峰5为GLN,峰6为THR,峰7为GLY,峰8为MET·SO2 ,峰9为HYP, 峰10为ALA,峰11为TYR,峰12为HIS,峰13为CYS(CH2),峰14为VAL,峰15为MET,峰16为PRO,峰17为TRP,峰18为LYS,峰19为PHE,峰20为ILE,峰21为LEU,峰22为ARG。
例8.氨基酸直接分析