硫酸庆大霉素生产工艺设计流程图

硫酸庆大霉素生产工艺

一、硫酸庆大霉素产品说明 1、产品名称及化学结构

1.1产品名称：硫酸庆大霉素（Gentamycin sulfate ） 1.2化学结构： 1.

2.1结构式：

·2H 2SO 4

C 1: R 1=R 2=CH 3

C 2: R 1=CH 3 R 2=H C 1a : R 1=R 2=H 1.2.2分子式：

C 1: C 21H 43N 5O 7=477.61 C 2: C 20H 41N 5O 7=463.58 C 3: C 19H 39N 5O 7=449.55 1.2.3分子量： C 1: 477.61 C 2: 463.58 C 3: 449.55

C 1、C 2、C 1a 为硫酸庆大霉素的三个组分，各组分与2个分子的硫酸相结合，其成分折干效价为590µ/ml 以上。 2、理化性质

2.1性状：白色或类白色粉末，吸水性强，稳定性高，易溶于水，不溶于乙醇、丙酮、氯仿等有机溶剂。

2.2比旋度：+1070～ +1210

3、产品质量标准 (查药典)

二、原材料、包装材料质量标准及规格

1、发酵部分 O

O N H

R

1R

2N

H 2

O

O

O H

N H

O

H C

H 3N H 2

O

H N H 3

三、生产方法及原理简介

硫酸庆大霉素的生产是以绛红色小单孢菌（）2号作为庆大霉素生产用菌种，在蒸汽消毒的培养基中不断扩大培养、发酵，通过菌种的次级代谢分泌出具有抑菌活性的庆大霉素。用离子交换树脂提取出菌分泌的活性物质，经精制、转盐生产出硫酸庆大霉素原料药。用以制成各种硫酸庆大霉素制剂，应用于临床治疗。

四、硫酸庆大霉素生产工艺流程图及操作条件

硫酸庆大霉素的生产过程主要包括以下四个部分：发酵生产、提取、精制、无菌压缩空气、无菌喷雾干燥。

1、硫酸庆大霉素生产工艺流程图：

35℃23hr 35℃35℃35℃种子瓶一级种子罐二级种子罐发酵罐

250rpm 38hr 22hr 96hr

酸化 6 hr

放罐732树脂静态吸附过筛饱和树脂漂洗中和

漂去酸洗 4.5％氨水无NH4+ 效价

装柱解吸浓缩浓缩液浓缩液杂质无盐水洗串711柱15万μ/ml

收率95％收率93％

H2SO4活性炭

转盐液脱色液过滤精滤无菌喷粉PH=4.0-6.0 脱色

收率89％收率85％

2、生产工艺过程：

2.1菌种部分

接种接种35℃23hr

砂土管种子斜面种子瓶生产用菌种

50rpm

2.1.1种子瓶配方（％）：

淀粉 1.0 碳酸钙0.3 硝酸钾0.05 玉米粉 1.5

黄豆饼粉 1.5 氯化钴1r/ml 鱼粉葡萄糖0.1

蛋白胨0.2

自来水配制，消前PH调至7.5

2.1.2种子瓶的制备

按种子瓶配方配制好培养基，装入500ml摇瓶中，装量50ml，用1kg/cm2饱和蒸汽120℃灭菌30分钟，冷却备用。

2.1.3接种子瓶

在超净工作台上，火焰保护下，用蒸汽消过毒的无菌接种铲挖取斜面孢子0.5cm2于种子瓶中，放于摇床上，35℃±0.5℃培养40小时左右，涂片观察菌丝形态，形态为大菊花团边缘已经散开，即可下瓶作为生产用种。

2.2发酵部分：

【注】补料配方同发酵罐。

2.2.2一级种子罐（消后体积250L）

空罐消毒：压力 1.5～2.0kg/cm2

温度125～130℃保温保压40分钟

实罐消毒：压力 1.0 kg/cm2±0.1kg/cm2预热时间30分钟为宜

温度119～122℃保温保压30分钟

分过滤器消毒：压力 1.2～1.4kg/cm2保温、保压30分钟

按一级种子罐配方配好培养基，移入一级种子罐内搅拌后，直接进蒸汽进行实罐消毒，消后体积250L，降温至35℃后，在火焰的保护下，利用压差法将种子接入一级种子罐内，接种量5～6瓶，进行培养。

培养温度：35℃罐压：0.4 kg/cm2

培养时间：38小时通气量：1：0.5 V/V/分以上

搅拌转速：200～220转/分

移种标准：菌丝形态呈菊花团边缘全部散开或呈网状，无杂菌。

2.2.3二级种子罐：（消后体积1.5T）

空罐消毒、实罐消毒及分过滤器消毒均同一级种子罐。移种管道消毒为2～3 kg/cm2 保压2小时。

按二级种子罐配方配好培养基，移入二级种子罐内搅拌后，直接进蒸汽进行实罐消毒，消后体积1.5L，降温至35℃后，通过移种管道将一级种子罐的成熟种子移入，进行培养。

培养温度：35℃罐压：0.3 kg/cm2

培养时间：22小时通气量：1：0.8 V/V/分以上

搅拌转速：200～220转/分

移种标准：菌丝形态呈网状，量多无杂菌。

2.2.4发酵罐：（消后体积10T）

空罐消毒：压力 1.5～2.0kg/cm2

温度125～130℃保温、保压30分钟

实罐消毒：压力 1.0 kg/cm2±0.1kg/cm2预热时间30～45分钟为宜

温度119～122℃保温、保压30分钟

分过滤器消毒：压力 1.2～1.4kg/cm2保温、保压35分钟

移种管道消毒：2～3 kg/cm2 保压2小时。

按发酵罐配方配好培养基，移入罐内搅拌后，直接进蒸汽进行实罐消毒，消后体积10T，降温至35℃后，通过移种管道接入二级种子罐内的种子，进行发酵培养。

培养温度：35℃罐压：24小时前0.2 kg/cm2，24小时后0.1 kg/cm2

通气量：1：1.2 V/V/分以上

搅拌转速：不少于170转/分。

发酵罐补料：（总补料量26T）

第一个补料很关键，必须在发酵液泡沫下去后（大约18小时）菌丝生长良好，无杂菌，可补3T。

第二个补料：23～25小时补料4T

第三个补料：28～30小时补料5T

第四个补料：35～40小时补料5T

第五个补料：41～45小时补料6T

第六个补料：52～55小时补料6T或酌情补入。

如果以上菌丝浓度偏高，第六个补料可考虑补稀方（即原方的1/2）

放罐标准：

发酵周期：96小时左右

发酵单位上升迟缓或不在上升

PH有回升趋势

2.3提取部分

2.3.1酸化中和

将放罐发酵液放入发酵罐，加盐酸酸化至PH1.5～2.0，然后加工业用NaOH中和至PH6.4～6.8，酸化可使庆大霉素由菌丝中充分溶出，中和有利于732树脂的吸附。

2.3.2 732树脂静态吸附

中和后的发酵液按6万μ/ml树脂的交换容量，投人铵型732树脂搅拌吸附6～7小时，测废液单位在20μ/m1以下，过60目振荡筛分离树脂，树脂抽入漂洗柱，反冲漂洗干净。2.3.3饱和树脂的洗涤，解吸及脱色：

饱和树脂装人树脂柱，先用自来水反冲洗至无悬浮物，然后用0.4N HCl正向冲洗，流速1/20V/分钟（每分钟流树脂体积的1/20），约洗树脂体积的20－30倍量，洗至无Ca2+、Mg2+后（以NaOH检查），再用无盐水冲至无Cl－。再通人4.5％的氨水进行解吸，流速上1/100V/分钟，至流出液PH＝7.0时与711树脂柱串联，收集树脂体积的8倍量，流出单位在

300μ/ml以下之后，9～10倍量作下次解吸氨水套用。

2.3.4薄膜浓缩

解吸流出液约半倍量后，开始浓缩，浓缩过程中蒸汽压力。不超过0.5kg/cm2，真空度在600mmHg以上，浓缩2－3遍后，用萘氏试剂检查浓缩液应无NH4＋，浓度达到6Be(波美度)，化学效价15万μ/ml左右，以备转盐、碳脱, 压入炭脱罐。

2.4 精制部分（转盐、炭脱、过滤）