2013基因组学试题

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2013基因组学试题

1. 什么是基因组(5分)?真核生物基因组有什么特点(15分)?

基因组是指一种微生物(包括细菌和病毒)或其它生物体细胞中的总DNA或RNA(是指逆转录病毒),包括核DNA,细胞器DNA(动植物线粒体DNA和植物叶绿体DNA)和染色体外遗传成分(如细菌的质粒DNA)。

结构:真核生物基因组结构特点:

真核基因组远远大于原核生物的基因组。

真核基因具有许多复制起点,每个复制子大小不一。每一种真核生物都有一定的染色体数目,除了配子为单倍体外,体细胞一般为双倍体,即含两份同源的基因组。

真核基因都出一个结构基因与相关的调控区组成,转录产物的单顺反子,即一分子mRNA只能翻译成一种蛋白质。

真核生物基因组中含有大量重复顺序。

真核生物基因组内非编码的顺序(NCS)占90%以上。编码序列占5%。

真核基因产断列基因,即编码序列被非编码序列分隔开来,基因与基因内非编码序列为间隔DNA,基因内非编码序列为内含子,被内含子隔开的编码序列则为外显子。

真核生物基因组功能相关的基因构成各种基因家族,它们可串联在一起,亦可相距很远,但即使串联在一起成族的基因也是分别转录的。

真核生物基因组中也存在一些可移动的遗传因素,这些DNA顺序并无明显生物学功能,似科为自己的目的而级织,故有自私DNA之称,其移动多被RNA介导,也有被DNA介导的。

功能:

(一)真核基因表达调控的环节更多

基因表达是基因经过转录、翻译、产生有生物活性的蛋白质的整个过程。同原核生物一样,转录依然是真核生物基因表达调控的主要环节。但真核基因转录发生在细胞核(线粒体基因的转录在线粒体内),翻译则多在胞浆,两个过程是分开的,因此其调控增加了更多的环节和复杂性,转录后的调控占有了更多的分量。此外,真核细胞中还会发生基因扩增(gene amplification),基因的扩增无疑能够大幅度提高基因表达产物的量,但这种调控机理至今还不清楚。

(二)真核基因的转录与染色质的结构变化相关

真核基因组DNA绝大部分都在细胞核内与组蛋白等结合成染色质,染色质的结构、染色质中NA和组蛋白的结构状态都影响转录,至少有以下现象:1.染色质结构影响基因转录2.组蛋白的作用 3.转录活跃区域对核酸酶作用敏感度增加 4.DNA拓扑结构变化

5.DNA碱基修饰变化

(三)真核基因表达以正性调控为主

真核RNA聚合酶对启动子的亲和力很低,要依赖多种激活蛋白的协同作用。真核基因调控中有负性调控元件,但并不普遍;真核基因转录表达的调控蛋白是以激活蛋白的作用为主。真核基因组蛋白质编码的基因绝大多数是不连续的,采取逐个基因调控表达的形式。真核基因表达调控的环节多,录后调控的方式也很多

1.真核生物基因组DNA与蛋白质结合形成染色体,储存于细胞核内,除配子细胞外,体细胞内的基因的基因组是双份的(即双倍体,diploid),即有两份同源的基因组。

2.真核细胞基因转录产物为单顺反子。一个结构基因经过转录和翻译生成一个mRNA分子和一条多肽链。

3.存在重复序列,重复次数可达百万次以上。

4.基因组中不编码的区域多于编码区域。

5.大部分基因含有内含子,因此,基因是不连续的。

6.基因组远远大于原核生物的基因组,具有许多复制起点,而每个复制子的长度较小。

2. 转录组和蛋白质组有何异同之处(10分)?

转录组和基因组水平不同,转录组是高度动态的,当细胞受到侵犯时,甚至当细胞处于正常的生理活动如复制,分裂时,基因的转录情况也会变化很大,产生不同的转录组。mRNA是信使RNA,携带着从基因组转录下来的遗传信息,但并不是所有的基因都同时转录,是受转录因子控制的,而且并非所有基因组序列都能转录。原核生物中非转录成分较少,基因组序列利用效率较高,真核生物染色体存在大量非转录成分,一个基因转录形成的mRNA稳定性较差,转录的RNA原始产物要经过切割、修剪、添加、修饰和异构化形成成熟mRNA,tRNA和rRNA,其中内含子在mRNA拼接时被切除掉。通过选择性拼接,一个基因可以编码多条多肽链。正常的mRNA拼接发生mRNA内部,而在一些低等生物中还存在着奇怪的反转录(trans-splicng)现象,拼接发生在两条mRNA 之间,即两条mRNA在剪接因子作用下,第一条剪接下来的外显子与另外一条剪接下来的外显子拼接在一起,编码一个新的多肽。转录组只研究mRNA

转录组学研究的是某个时间点的mRNA总和,可以用芯片,也可以用测序。芯片是用已知的基因探针,测序则有可能发现新的mRNA,

蛋白组学针对的是全体蛋白,组要以2D-Gel和质谱为主,分为top-down和bottom-up分析方法。理念和基因组类似,将蛋白用特定的物料化学手段分解成小肽段,在通过质量反推蛋白序列,最后进行搜索,标识已知未知的蛋白序列。

3. 简述遗传图谱的构建方法(5分),说明遗传图谱在基因组研究中的意义(10分)。

答:遗传图谱:某一物种的染色体图谱(也就是我们所知的连锁图谱),显示所知的基因和/或遗传标记的相对位置,而不是在每条染色体上特殊的物理位置。采用遗传学分析方法将基因或其它DNA标记按一定的顺序排列在染色体上,这一方法包括杂交实验,家系分析。标记间的距离(遗传图距)用减数分裂中的交换频率来表示,单位为厘摩(Centi-Morgan, cM), 每单位厘摩定义为1%交换率。遗传学图谱的解像度(分辨率)低,大约只能达到100万碱基对(1Mb)的水平。

构建:

采用遗传学分析方法将基因或其它DNA标记按一定的顺序排列在染色体上,这一方法包括杂交实验,家系分析。标记间的距离(遗传图距)用减数分裂中的交换频率来表示,单位为厘摩(Centi-Morgan, cM), 每单位厘摩定义为1%交换率。

作图群体的建立、分子标记的选择、结果统计与数据处理、绘制图谱

通过遗传图谱,我们可以大致了解各个基因或DNA片断之间的相对距离与方向,如哪

个基因更靠近着丝粒,那个更靠近端粒等。遗传图谱不仅是现阶段定位基因的重要手段,即使在人类基因组全物理图谱建立起来之后,它依然是研究人类基因组遗传与变异的重要手段。初步的连锁图谱是任何物种深入开展遗传学研究的基础,高密度连锁图谱可用于数量性状位点(quantitative trait loci, QTL) 的定位,分子标记辅助选择(marker assisted selection, MAS)和比较基因组作图。

分子生物学方法帮助我们寻找DNA编码信息,但我们首先要知道,在哪里才能找到与目的性状相关的那段DNA.

基因具有多效性,有些表型可能很难直接寻找其相关的DNA序列,遗传分析给我们提供了一个独立的、确定与遗传性状相关联基因的位置的方法。

当关于一个基因的功能还处于假设阶段时,或者当某一特定表型与DNA的关联还处于推断状态时,遗传分析是唯一的手段

4. 什么是物理图谱(5分)?简述大片段文库的物理图谱如何构建(15分)?

物理图谱(physical map)物理图谱是指有关构成基因组的全部基因的排列和间距的信息.它是通过对构成基因组的DNA分子进行测定而绘制的.绘制物理图谱的目的是把有关基因的遗传信息及其在每条染色体上的相对位置线性而系统地排列出来.DNA物理图谱是指DNA链的限制性酶切片段的排列顺序.即酶切片段在DNA链上的定位.DNA是很大的分子.由限制酶产生的用于测序反应的DNA片段只是其中的极小部分.这些片段在DNA链中所处的位置关系是应该首先解决的问题.故DNA物理图谱是顺序测定的基础.也可理解为指导DNA测序的蓝图.广义地说.DNA测序从物理图谱制作开始.它是测序工作的第一步.制作DNA物理图谱的方法有多种.构建物理图谱有哪些方法?遗传图谱与物理图谱的异同点?(20分)

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