实验一花粉母细胞减数分裂

察
果蝇的三点测验及伴性遗 教学片，收亲蝇，杂交
传
（上课前8小时放飞成蝇，
期间孵化的果蝇用于杂交）
粗糙链孢霉顺序四分子分析 理论讲解，学生操作
果蝇的三点测验及伴性遗 教学片，（F1代果蝇转新
传
瓶）
多倍体的诱发与鉴定
理论讲解，学生操作
果蝇的三点测验及伴性遗传 教学片，（F2代果蝇统计）
实验规范：
请每组组长课前课后务必清点工具盒里的镊子、解 剖针数目（每大组各12把），不能损坏或丢失。
片子的分裂相(5个以上时期），说明其时期和特点。 3. 分析自己制片操作过程中出现的问题及可能原因。
双线期
粗线期
终变期
中期Ⅰ
后期Ⅰ
末期Ⅰ
前期Ⅱ
中期Ⅱ
后期Ⅱ
末期Ⅱ
四分体
区分几种细胞类型的形态
4. 利用玉米花粉母细胞的减数分裂永久制片 和照片，在显微镜下观察，并与自己的制片 比较，掌握各个时期的特点。
注意： 怎样区分各个时期？ 如中I 、中I I，后I I、后I ？
减数分裂前期 I
细线期
偶线期
偶线期
粗线期
双线期
终变期
中期
后期
后期
前期II
中期II
后期II
末期II
四分体
小孢子
附：显微镜操作和使用
开关显微镜，移动显微镜。 调节目镜间距和目镜微调，使两个眼睛视野相同和 清晰，防止眼睛疲劳。 先低倍镜，后高倍镜观察，高倍镜下不准用粗调。 高倍镜下不得取放载玻片。 使用结束：电压或光亮度调至最小，关闭并拔下电 源，降低载物台，最低倍物镜或无目镜的镜筒居中， 防尘罩，请老师验收方可离开。
调节目镜间 距和目镜微调
三、材料用品
实验材料：玉米雄花序（玉米2n=20） 玉米PMC减数分裂永久制片和照片
仪器物品：显微镜、镊子、解剖针、载玻片、盖玻片 实验药品：无水乙醇、冰醋酸、卡宝品红染色液
四、实验方法与步骤
取材 固定 染色压片及镜检 结果分析
1.取材：
选取适当大小的花蕾，是观察花粉母细胞减数分裂 的关键性步骤。不同植物取材时期不同。 玉米：抽雄前两周（大喇叭口期），雄花序所在部 位用刀片纵向划一切口，用镊子取出花序分枝。此 时雄花序先端小穗颖长4mm左右，花药长2～3mm。 小麦：挑旗以后，旗叶抽出1-2cm，取出穗子。 时间一般在上午9时～10时，不同材料间稍有差异。
周次 第3周
第7周
序号 实验一
实验二
实验三
第9周 实验四
第11周 实验五 第13周 实验六
内容
玉米减数分裂的过程观察 理论讲解，教学片，学生
操作
果蝇的唾液腺染色体制片 理论讲解பைடு நூலகம்教学片，学生
操作
果蝇的三点测验及伴性遗传 理论讲解，教学片，发果
蝇原种4人一组，红眼白
眼各1瓶
小麦单体的染色体制片与观 理论讲解，学生操作
每次实验课后，请做好实验室的清洁卫生（包括关 窗、关排气扇、关空调、擦拭整理试验台、扫地、 拖地及倒垃圾）。
显微镜用完要放回柜子，解剖镜用好后要盖好防尘 布（310，312各18台新解剖镜，2人共用1台）。
实验一 植物花粉母细胞减数分 裂制片技术和染色体观察
杨细燕 华中农业大学 遗传教研室
一、实验目的
1. 了解植物花粉母细胞减数分裂全过程及各个 时期染色体的行为变化特征。
2. 从遗传学角度，熟悉减数分裂各个时期的细 胞学特点，加深对减数分裂的认识。
3. 掌握植物花粉母细胞减数分裂的取材、固定 染色及制片方法
二、实验原理
减数分裂是性母细胞在分裂形成配子过程中 一种特殊的细胞分裂方式。
高等植物花粉母细胞经减数分裂产生四个小 孢子，染色体数目已减半为n。小孢子进一步发 育为花粉粒。
注意事项
一次取材不要太多。 取完载玻片，盖上染色缸盖子，以免酒精挥发。 用过的载玻片必须刷洗干净再放回染色缸，用过 的盖玻片丢弃。 使用过的纱布、滤纸、盖玻片放到废品杯或垃圾 桶，不得直接冲入水池。
值日生打扫卫生、检查仪器及门窗。
五、实验结果
1．写出制片步骤流程图。 2．制作两张质量较好的临时片，并绘出自己所制作
玉米大喇叭口期
玉米雄花序
玉米小穗
实验中注意观察：每一分枝是中上部 还是下部小穗发育最早？
2．固定：
取下的材料应立即放入固定液中杀死固定。
采用卡诺氏固定液（现配现用），无水酒精： 冰醋酸＝3:1
如需长期保存，可先用70%酒精冲洗2次然 后转入70%酒精中保存。
3.染色、压片及镜检：
1. 取幼小花蕾置载玻片上，用解剖针剥取长大约1-2mm的花 药2-3枚。
前期I 中期I 后期I 末期I
(一)、间期(前间期)
(二)、减数第一分裂
(三)、中间期
前期II 中期II 后期II 末期II
(四)、减数第二分裂
减数分裂过程
在适宜的时期采集植物的花蕾，经固 定液固定，使细胞保持活体时形态。然后 进行压片染色等处理，在显微镜下进行观 察，可以看到小孢子母细胞的减数分裂过 程，研究染色体在形态和数量上的动态变 化特点。
2. 加1滴卡宝品红染色剂后，用镊子充分挤压花药，使其内的 花粉母细胞释放出来。
3. 将大片的残渣去掉后，加盖玻片。
4. 染色约5-10分钟。
5. 用吸水纸包住载玻片，用大拇指垂直向下压片。
6. 显微镜下观察，先在10×物镜下观察概况，找到合适的目 标后再换40×物镜观察并绘图。（注意区分体细胞、花粉 母细胞、幼小花粉粒及成熟花粉粒的形态）