凝聚胺交叉配血标准操作规程

凝聚胺交叉配血标准操作规程

一、目的：为规范交叉配血试验的技术操作，保证临床输血安全有效，特制定本规程。

二、适用范围

适用于输血科进行交叉配血试验

三、职责

输血科技术人员负责交叉配血试验。

四、测定原理：

红细胞表面带有大量的负电荷，凝聚胺是一种高效价阳离子季胺盐多聚物，溶解后产生较多正电荷，可以中和红细胞表面的唾液酸带有的负电荷，使红细胞之间的距离减少。若是未被抗体致敏的红细胞，加入悬浮液它具有中和凝聚胺的作用，使正常的红细胞非特异性凝集散开，试验结果为阴性；但如果红细胞被相应的抗体所致敏，则会被凝聚胺凝集，凝块就不会散开，试验结果为阳性。

五、试剂及材料

（一）聚凝胺试剂盒（合肥天一生物技术研究所）成分：低离子介质溶液、聚凝胺溶液、重悬液、阴性及阳性对照液；

保存条件：2~8C贮存2年，试剂盒打开使用后可置于室温

（二）材料：玻璃试管、微量移液器、离心机、载玻片、显微镜等

六、标本要求：

（一）抽取受血者抗凝（抗凝剂为EDTA.K2静脉血2-3ml （注意核对病人信息）,在

3000r/min 条件下离心5 分钟备用。

（二）标本保存：血液样本必须密封，2~8C保存7天。

（三）用于交叉配血必须是2~8C保存3天以内的标本。

七、操作程序：

（一）将受血者红细胞配成3册水悬液，鉴定ABC血型及Rh血型。

（二）将供血者血样配制3%!细胞悬液，鉴定ABC血型及Rh血型。

（三）取洁净小试管2支，1支标明受血者血清（PS）+供血者细胞（DC或“主侧”；另1 支标明供血者血清（DS +受血者细胞（PC）或“次侧”。

（四）主侧管：受血者血清100ul+供血者红细胞悬液50ul。

次侧管：供血者血清100ul+受血者红细胞悬液50ul 。

各加低离子介质溶液0.6 ml ，混匀后静置1分钟，再各加聚凝胺溶液2 滴，静置15s

（五）混合均匀后，在1000g条件下离心15s,然后倒掉上清液。

（六）轻轻侧动试管里的细胞扣，目测红细胞有无凝集，如无凝集，则必须重做。

（七）最后加入重悬液2 滴，轻轻转动试管混合，并同时观察结果，必要时在显微镜下观察结果。

八、结果判定：

（一）阴性：60 秒内凝块散开，代表由聚凝胺溶液引起的非特异性凝集，配血结果相合。

（二）阳性：60 秒内凝块不散开，代表红细胞抗原抗体结合的特异性反应，配血结果不相合。

（三）如反应可疑，可进一步倒在玻片上用显微镜观察。

九、注意事项：

（一）若病人血浆（血清）含肝素，须多加双倍量的聚凝胺溶液以中和肝素。

（二）冬季室温较低，应将试管保温，以防冷凝集素引起的凝集反应，影响结果判断。

（三）加入血清量应严格按照操作方法，多加血清会提高离子强度，降低致敏效果。

（四）抗原抗体比例适当。