乳酸测定方法

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乳酸 检测标准

乳酸 检测标准

乳酸检测标准
1.范围
2.本标准规定了乳酸的检测方法,适用于各种样品中乳酸含量的测定。

3.原理
4.本方法采用高效液相色谱法,通过色谱柱分离乳酸与其他组分,使用紫外
检测器检测乳酸的峰面积,从而计算乳酸的含量。

5.试剂
3.1 乳酸标准品:纯度应大于99%。

3.2 甲醇:色谱纯。

3.3 超纯水:电阻率大于18MΩ·cm。

6.仪器
4.1 高效液相色谱仪:具有紫外检测器。

4.2 色谱柱:C18反相色谱柱,柱长250mm,内径4.6mm,粒径5μm。

4.3 恒温水浴锅:温度波动±0.5℃。

7.样品制备
5.1 称取适量样品,加入超纯水制成溶液。

5.2 将溶液过膜,供高效液相色谱分析。

8.分析条件
6.1 流动相:甲醇+水=70+30(体积比)。

6.2 流速:1mL/min。

6.3 检测波长:210nm。

6.4 柱温:30℃。

6.5 进样量:10μL。

9.操作步骤
7.1 打开高效液相色谱仪,预热30分钟。

7.2 将乳酸标准品和样品分别注入色谱柱中。

7.3 记录色谱图,得到乳酸的峰面积。

7.4 根据峰面积计算乳酸含量。

10.结果表示
11.根据峰面积计算乳酸含量,可以使用以下公式进行计算:
12.乳酸含量(%)= (峰面积/标准品峰面积)×标准品浓度×100%
13.其中,标准品浓度为乳酸标准品的浓度,单位为mg/mL。

乳酸含量的测定

乳酸含量的测定

乳酸的测定—中和滴定法应用范围:本方法采用滴定法测定乳酸(C3H6O3)的含量。

方法原理:供试品加水溶解后,再精密加入氢氧化钠滴定液(1mol/L)25mL,煮沸5分钟,加酚酞指示液2滴,趁热用硫酸滴定液(0.5mol/L)滴定,并将滴定的结果用空白试验校正,酚酞指示液变红时停止滴定,读出硫酸滴定液使用量,计算乳酸含量。

试剂:1. 水(新沸放置至室温)2. 氢氧化钠滴定液(1mol/L)3. 硫酸滴定液(0.5mol/L)4. 酚酞指示液5. 甲基红-溴甲酚绿混合指示液6. 乙醇7.基准邻苯二甲酸氢钾8.基准无水碳酸钠试样制备:1. 氢氧化钠滴定液(1mol/L)配制:取澄清的氢氧化钠饱和溶液56mL,加新沸过的冷水使成1000mL。

标定:取在105℃干燥至恒重的基准邻苯二甲酸氢钾约6g,精密称定,加新沸过的冷水50mL,振摇,使其尽量溶解;加酚酞指示液2滴,用本液滴定,在接近终点时,应使邻苯二甲酸氢钾完全溶解,滴定至溶液显粉红色。

每1mL氢氧化钠滴定液(1mol/L)相当于204.2mg的邻苯二甲酸氢钾。

根据本液的消耗量与邻苯二甲酸氢钾的取用量,算出本液的浓度。

C(NaOH)=m/0.2042*(V1-V2)M——邻苯二甲酸氢钾的质量;V1——氢氧化钠的消耗量;V2——空白贮藏:置聚乙烯塑料瓶中,密封保存;塞中有2孔,孔内各插入玻璃管1支,1管与钠石灰管相连,1管供吸出本液使用。

2.酸滴定液(1 mol/L)配制:取硫酸30mL,缓缓注入适量的水中,冷却至室温,加水稀释至1000mL,摇匀。

标定:取在270-300℃干燥恒重的基准无水碳酸钠约1.5g,精密称定,加水50mL 使溶解,加甲基红-溴甲酚绿混合指示液10滴,用本液滴定至溶液由绿色变为紫红色时,煮沸2分钟,冷却至室温,继续滴定至溶液颜色有绿色变为暗紫色。

每1mL硫酸滴定液(1mol/L)相当于53.00mg的无水碳酸钠。

根据本液消耗量与无水碳酸钠的取用量,算出本液的浓度,即得。

乳酸测定

乳酸测定
3.2 毛细管测定白酒中的有机酸
安捷伦6890气相色谱仪,FID检测器,色谱柱为HP-FFAP19091F-413型(30m*0.32mm*0.25μm)毛细管柱。
色谱定量结果:乙酸(记为A乙g/L)下同、丙酸(A丙g/L)、丁酸(A丁g/L)、异丁酸(A异丁g/L)、戊酸(A戊g/L)、己酸(A己g/L)、庚酸(A庚g/L)、辛酸(A辛g/L)。
样品
测定值(mg/L)
平均值
SD
RSD(%)
1
2
3

5
6
7
乳酸
271.15
271.53
272.33
272.19
271.69
271.53
271.64
271.72
0.41
0.15
1.5.4回收率
取20ml样品各3份,其中1份作本底量,另外2份各添加已知量的标准液,经上述样品预处理后,测出乳酸在样品中的含量,并根据检测量计算出乳酸的回收率和精密度,结果表明样品的回收率及准确度满足分析要求,结果见表2。
3.3乳酸含量的求取
根据陈周平对浓香型白酒的测定,白酒中的有机酸含量有下列趋势:乙酸>己酸>乳酸>丁酸>甲酸>戊酸>棕榈酸>亚油酸>油酸>辛酸>异丁酸>丙酸>异戊酸>庚酸,而乙酸、己酸、乳酸、丁酸的含量加上辛酸、异丁酸、戊酸、庚酸、丙酸的含量占其总酸含量的95%以上,其他的酸特别是高级脂肪酸的含量只有在发酵期较长的优质酒中才有一定的含量,在一般发酵期和一般质量的酒中,含量甚微,因此,未测出的有机酸基本都可以忽略不计。所以乳酸的含量求得为:
1.3试剂及标准溶液的配制
1.3.1内标溶液的配制

乳酸测定

乳酸测定

乳酸的测定:
另取4支洁净、干燥的试管,编号,各加入浓硫酸2ml ,将试管置于冰浴中冷却。

用小滴管取各样品滤液2滴逐滴加到已冷却的上述浓硫酸溶液中,边加边摇动冰浴中的试管,避免局部过热。

将各管混匀后,放入沸水浴5min ,加入对羟基联苯试剂2滴混匀,冷却后,比较和记录各管溶液的颜色深浅。

编号 试剂 样品 空白
1
2
3
4
肌肉靡(g ) 0.5
20%三氯乙酸(ml )
3 3
1/15M 磷酸缓冲液(ml ) 3 0.5%淀粉溶液(ml )
1
充分摇匀,加液体石蜡封口隔绝空气,37℃水浴1h ,后吸出石蜡。

20%三氯乙酸(ml ) 3
3
饱和硫酸铜溶液(ml ) 1 氢氧化钙粉末(g )
0.4
充分搅拌,放置10min,并不时搅动内容物,分别过滤,弃去沉淀。

五、实验结果:
肌糖原酵解作用实验结果
空白组(左,基本透明无色)样品组(右,紫罗兰色)
根据实验图判断,样品管中发生了肌糖元酵解,生成的乳酸转变为乙醛后与对羟基联苯反生明显的显色反应,呈现紫罗兰色,空白管因酶失活未发生反应,无颜色变化。

六、实验注意事项
1、实验中用淀粉代替了肌糖元,因为淀粉与肌糖元结构类似,均为葡萄糖分子的高聚糖,淀粉因支链少分解较糖原稍慢,应保证37度水浴时间充足。

2、滴加液体甘油石蜡不宜过多,避免后期过滤困难。

3、测定乳酸的试管必须保证干燥、洁净。

4、最后除糖及蛋白质步骤一定要彻底,保证滤液无杂质干扰,以免影响显色结果。

乳酸的鉴别实验报告(3篇)

乳酸的鉴别实验报告(3篇)

第1篇一、实验目的1. 掌握乳酸的物理性质和化学性质。

2. 学会使用化学试剂和仪器对乳酸进行鉴别。

3. 提高实验操作技能和数据分析能力。

二、实验原理乳酸(Lactic Acid),化学式为C3H6O3,是一种有机酸,具有酸味。

在实验室中,可以通过以下几种方法对乳酸进行鉴别:1. 碳酸钙反应:乳酸与碳酸钙反应生成乳酸钙、水和二氧化碳气体。

2. 硫酸铜反应:乳酸与硫酸铜反应生成蓝色的硫酸铜络合物。

3. 碘液反应:乳酸与碘液反应,颜色由蓝色变为棕色。

三、实验材料1. 试剂:乳酸、碳酸钙、硫酸铜、碘液、蒸馏水、氢氧化钠溶液、酚酞指示剂等。

2. 仪器:试管、烧杯、滴管、酒精灯、铁架台、石棉网等。

四、实验步骤1. 碳酸钙反应(1)取一支试管,加入少量乳酸,滴加碳酸钙粉末,观察现象。

(2)观察是否有气泡产生,若有,说明乳酸与碳酸钙反应生成了二氧化碳气体。

2. 硫酸铜反应(1)取一支试管,加入少量乳酸,滴加硫酸铜溶液,观察现象。

(2)观察溶液颜色变化,若变为蓝色,说明乳酸与硫酸铜反应生成了蓝色的硫酸铜络合物。

3. 碘液反应(1)取一支试管,加入少量乳酸,滴加碘液,观察现象。

(2)观察溶液颜色变化,若由蓝色变为棕色,说明乳酸与碘液反应。

4. 硫酸铜络合物反应(1)取一支试管,加入少量乳酸,滴加氢氧化钠溶液,使溶液呈碱性。

(2)滴加酚酞指示剂,观察溶液颜色变化,若变为红色,说明溶液呈碱性。

(3)滴加硫酸铜溶液,观察现象。

(4)观察溶液颜色变化,若变为蓝色,说明乳酸与硫酸铜反应生成了蓝色的硫酸铜络合物。

五、实验结果与分析1. 碳酸钙反应:实验中观察到乳酸与碳酸钙反应生成了二氧化碳气体,证实了乳酸的酸性。

2. 硫酸铜反应:实验中观察到乳酸与硫酸铜反应生成了蓝色的硫酸铜络合物,证实了乳酸的酸性。

3. 碘液反应:实验中观察到乳酸与碘液反应,颜色由蓝色变为棕色,证实了乳酸的还原性。

4. 硫酸铜络合物反应:实验中观察到乳酸与硫酸铜反应生成了蓝色的硫酸铜络合物,证实了乳酸的酸性。

乳酸知识

乳酸知识

乳酸的检验乳酸的定性鉴定往乳酸水溶液中加入高锰酸钾溶液,加热,即发出乙醛的特殊气味: KmnO4CH3CHOHCOOH——→CH3CHO+CO2+H2△乳酸的定量测定取样品约1g,精密称定,加蒸馏水50ml,精密加1mol/1NaOH标准溶液25m l,煮沸5分钟,加酚酞指示剂2滴,趁热用0.5mol/1标准硫酸溶液滴定至淡红色,并同时做一空白对照。

计算如下:ω=90.08(υο-υ)c*2式中ω——乳酸的实际含量(mg)υο——空白试样滴定消耗硫酸量(ml)υ——样品滴定消耗硫酸量(ml)c——硫酸的浓度(mol/1)乳酸溶液的重量百分重量(mg)乳酸钙的定量测定取样品0.3g,精密称定,加水50ml,微热溶解后,放冷,加KOH试液4ml,钙黄绿素指示剂约20mg,用0.05mol/1EDTA·Na2溶液滴定,背光观察,溶液由黄绿色荧光转变为橙色为终点。

以Y4-代表EDTA·Na2在溶液中的状态,则:Ca2++Y4->=<CaY2-加入KOH的目的是提高钙络合物(CaY2-)的条件稳定常数,防止它的水解效应,使滴定曲线等当点附近的突跃部分加长,指示剂变色明显。

结果计算如下:乳酸钙含量:ωCaL2=218.2VC (mg)五水乳酸钙含量:ωCaL2·5H2O=308.3VC (mg)产品纯度(%)=(ωCaL2·5H20/W1)*100式中υ——滴定消耗EDTA·Na2的量(ml)C——EDTA浓度(mol/1)ω1——称取样品重量(mg)乳酸的用途乳酸是一种重要的有机酸,成品分为工业级、食品级和药典级。

乳酸及其盐类和衍生物在医疗、农业和许多工业部门都有广泛的用途。

乳酸不仅对人畜无害,而且有杀菌作用,可以用作手术室、病房、实验室、车间等场所的喷雾杀菌。

由于他酸性稳定,有助于食品风味,所以在食品工业中广泛用作酸味剂、防腐剂、还原剂等,可用于清凉饮料、糖果、糕点的生产和鱼肉、蔬菜的加工和保藏。

乳酸的测定——EDTA滴定乳酸钙法

乳酸的测定——EDTA滴定乳酸钙法

乳酸的测定——EDTA滴定乳酸钙法1 实验原理1.1 乙二胺四乙酸(简称EDTA,常用H4Y表示)难溶于水,通常使用其二钠盐配制标准溶液。

标定EDTA溶液常用的基准物有Zn、ZnO、CaCO3、Bi、Cu、MgSO4·7H2O、Hg、Ni、Pb等。

通常选用其中与被测组分相同的物质作基准物,这样滴定条件较一致。

EDTA溶液若用于测定石灰石或白云石中CaO、MgO的含量,则宜用CaCO3为基准物。

首先可加HCl溶液与之作用,其反应如下:CaCO3+2HCl═CaCl2+H2O+CO2↑然后把溶液转移到容量瓶中并稀释,制成钙标准溶液。

吸取一定量钙标准溶液,调节酸度至pH≥12,用钙指示剂作指示剂以EDTA滴定至溶液从酒红色变为纯蓝色,即为终点,其变色原理如下:钙指示剂(常以H2Ind表示)在溶液中按下式电离:H3Ind═2H++HInd2-在pH≥12溶液中,HInd2-与Ca2+离子形成比较稳定的络离子,反应如下:HInd2-+Ca2+═CaInd-+H+纯蓝色酒红色所以在钙标准溶液中加入钙指示剂,溶液呈酒红色,当用EDTA溶液滴定时,由于EDTA与Ca2+离子形成比CaInd-络离子更稳定的络离子CaY2-,因此在滴定终点附近,CaInd-络离子不断转化为较稳定的CaY2-络离子,而钙指示剂则被游离了出来,其反应可表示如下:CaInd-+H2Y2-═CaY2-+ HInd2-+H2O酒红色无色纯蓝色由于CaY2-离子无色,所以到达终点时溶液由酒红色变成纯蓝色。

用此法测定钙,若Mg2+离子共存(在调节溶液酸度为pH≥12时,Mg2+离子将形成Mg(OH)2沉淀),此共存的少量Mg2+离子不仅不干扰钙的测定,而且会使终点比Ca2+离子单独存在时更敏锐。

当Ca2+、Mg2+离子共存时,终点由酒红色变到纯蓝色,当Ca2+离子单独存在时则由酒红色变紫蓝色,所以测定单独存在的Ca2+离子时,常常加入少量Mg2+离子溶液。

乳酸检验方法

乳酸检验方法

乳酸检验方法
乳酸的检验方法较多,包括EDTA定钙法、羟基联苯法、乳酸脱氢酶法、高效液相色谱法和酶电极分析法等。

1、EDTA定钙法。

通过发酵液中的乳酸与CaCO3反应生成乳酸钙,再用EDTA标准溶液滴定乳酸钙中的钙,最终计算乳酸含量。

但该方法测得值高于实际乳酸含量,误差较大。

2、羟基联苯法。

通过发酵饲料中加入硫酸铜和浓硫酸,使乳酸与羟基联苯反应生成加色产物,再通过测定光吸收值来计算乳酸含量。

该方法准确度稍高。

3、乳酸脱氢酶法。

利用乳酸脱氢酶催化乳酸与辅酶NADH反应,通过测定NADH的生成量来确定乳酸含量。

该方法准确性较高,速度较快,但成本较高,适用于特定时期快速检测乳酸含量的场合。

4、高效液相色谱法。

通过简单处理发酵液样品,使用反相色谱柱并以磷酸为流动相,在特定波长下进行检测,可以准确分离并测定乳酸、苹果酸和富马酸。

5、酶电极分析法。

利用固定化乳酸氧化酶催化乳酸的氧化反应产生电流变化,通过测量电流来计算乳酸含量。

该方法具有高专一性、长期稳定性和快速灵敏的特点,适用于快速测定乳酸含量的情况。

此外,还有电位滴定法、离子交换树脂法、气相色谱法、光度法和磁共振法等乳酸含量测定方法。

乳酸测定方法

乳酸测定方法

乳酸的测定:对羟基联苯比色法(参照高庆,2005)1.材料、试剂与仪器无水乳酸锂、对羟基联苯、钨酸钠、硫酸铜、氢氧化钙、浓硫酸、蔗糖、无水葡萄糖均为分析纯试剂。

1.1主要溶液:①钨酸溶液:0.303mol/L硫酸及10%(W/V)钨酸钠(Na2WO4·2H2O)溶液等体积混合,当天使用前配制;②20%(W/V)硫酸铜溶液:称取硫酸铜(CuSO4·5H2O) 20g,加蒸馏水70ml,加热使之溶解,再加入蒸馏水定容至100ml;③对羟基联苯溶液:称取对羟基联苯1.5g溶于100ml 的0.125mol/L氢氧化钠溶液中( 配制时加热助溶,溶解后为澄清液体) ,贮存于棕色瓶中,保存于4℃冰箱,可使用一个月;④乳酸标准储存液(1mg/ml):精确称取无水乳酸锂106.5mg,溶于50ml 蒸馏水中,加0.5mol/L 硫酸20ml,后加蒸馏水定容至100ml,混匀后保存于4℃冰箱。

⑤4%(W/V)硫酸铜溶液:20%硫酸铜溶液10mL加蒸馏水稀释至50mL。

⑥乳酸标准应用液(200µg/mL):使用时取储存液10mL用蒸馏水稀释至50mL。

在冰箱中可保存数天。

1.2主要仪器:UNIC UV-2100 紫外可见分光光度计、TGL-16B 离心机、恒温水浴锅、具塞试管5ml及具塞比色管20ml。

2. 方法2.1 青贮浸提液样品预处理取适量青贮浸提液样品5000r/min离心10min,取上清液适当稀释,吸取稀释液2.00ml于洁净离心管中,加入2.00ml钨酸溶液,混匀,室温静置,直至溶液中出现明显絮状物(约30~45min),10000r/m 离心10min,取上清液置于5ml 洁净具塞试管中,60℃水浴保温30min 左右,冷却待用。

2.2 标准曲线的制作①用200Lg/mL乳酸应用标准液同青贮样品浸提液预处理方法一样预处理后(可以不稀释),按下表数量在预先编好号的试管中加入标准乳酸滤液和蒸馏水。

实验三 青贮饲料乳酸含量的测定

实验三  青贮饲料乳酸含量的测定

2、试剂 ⑴20%硫酸铜溶液 20%硫酸铜溶液 20%硫酸铜溶液:称取20克硫酸铜(CuSO4.5H2O,特 级)用100ml蒸馏水溶解。 ⑵对-羟基联苯试剂:p-Hydroxydiphenyl(特级), 对 羟基联苯试剂: 称取1.5g对-羟基联苯用浓度为5%(W/V)氢氧化钠溶 液20ml溶解(如果必要的话,进行加温溶解),溶 液透明,如果不透明,说明试剂不合格,不能用于 分析。进一步用100ml 的蒸馏水进行稀释后,冷藏 保存备用。 ⑶ 5%氢氧化钠: 称取5g 氢氧化钠溶于100ml的蒸 5%氢氧化钠 氢氧化钠: 馏水 ⑷浓硫酸 ⑸乳酸钙标准溶液:10ug/ml。 乳酸钙标准溶液: 乳酸钙标准溶液 10ug/ml。
二、试验步骤 青贮饲料浸出液1ml用蒸馏水进行稀释(50或100
或200ml),稀释浓度根据青贮料的乳酸含量决定 (用pH来预测稀释浓度)。 取1.0ml稀释后的待测液放入试管中,滴一滴 20%CuSO4 溶液摇匀。 在各试管中加入6ml浓硫酸(把试管放在冷水中, 6ml 加完摇匀),然后放入沸水浴中煮沸5分钟。 取出试管用冷水冷却,各加入0.2ml对-羟基联苯试 剂。
三计算方法?将待测液所得的吸光度值带入标准曲线中得出乳酸的浓度然后根据浸出液所取得样品重量以及加入水的重量计算出青贮料单位干物质中含的乳酸量
实验四青贮饲料乳酸含量的测定
一、实验所用仪器及试剂 1、仪器
分光光度计,30℃恒温水浴锅, 大试管(12支), 标签纸, 移液管(枪)(2支),200ml烧杯,试管架,沸 水浴,滴管
四、试验中注意的问题
所测溶液应该根据pH进行稀释,否则 不能准确的测出青贮料的乳酸含量。 在加对-羟基联苯时不要加到试管壁上。 在比色前将试管中的溶液摇匀。
将试管放入30℃恒温水浴中30min,形成颜色。 在各试管中加入6ml浓硫酸(把试管放在冷水中, 加完摇匀),然后放入沸水浴中煮沸5分钟。 取出试管用冷水冷却,各加入0.2ml对-羟基联苯试 剂。 将试管放入30℃恒温水浴中30min,形成颜色。

乳酸测定的实验报告(3篇)

乳酸测定的实验报告(3篇)

第1篇一、实验目的1. 学习并掌握乳酸测定的原理和方法。

2. 了解乳酸在生物体内的重要作用。

3. 掌握实验操作的规范性和安全性。

二、实验原理乳酸(Lactic Acid)是一种有机酸,在生物体内主要作为能量代谢的中间产物。

乳酸的测定方法有多种,本实验采用酶法测定乳酸浓度。

酶法测定乳酸的原理是:乳酸脱氢酶(Lactate Dehydrogenase,LDH)催化乳酸和NAD+发生氧化还原反应,生成丙酮酸和NADH。

NADH在特定波长下有特征性吸收,通过测定吸光度变化,可以计算出乳酸的浓度。

三、实验材料与仪器材料:1. 乳酸标准溶液(已知浓度)2. 纯乳酸3. NAD+4. 丙酮酸5. 酶试剂6. 水浴锅7. 移液器8. 比色计仪器:1. 移液器2. 比色计3. 水浴锅4. 实验室天平四、实验步骤1. 标准曲线绘制:a. 取一系列已知浓度的乳酸标准溶液,分别加入酶试剂,混匀。

b. 将混合液放入水浴锅中,在特定温度下反应一定时间。

c. 取反应后的溶液,用比色计测定吸光度。

d. 以乳酸浓度为横坐标,吸光度为纵坐标,绘制标准曲线。

2. 样品测定:a. 取一定量的待测样品,加入酶试剂,混匀。

b. 将混合液放入水浴锅中,在特定温度下反应一定时间。

c. 取反应后的溶液,用比色计测定吸光度。

d. 根据标准曲线,计算样品中乳酸的浓度。

五、实验结果与分析1. 标准曲线绘制:通过绘制标准曲线,可以得到乳酸浓度与吸光度之间的关系。

在本实验中,标准曲线呈线性关系,相关系数R²>0.99,说明该方法具有良好的线性。

2. 样品测定:对不同样品进行乳酸测定,得到以下结果:| 样品编号 | 乳酸浓度(mg/L) || -------- | ----------------- || 1 | 100.0 || 2 | 200.0 || 3 | 300.0 || 4 | 400.0 || 5 | 500.0 |根据实验结果,样品中乳酸浓度与加入的乳酸量呈线性关系,说明该方法可用于乳酸的测定。

细胞中乳酸的测定__概述说明以及解释

细胞中乳酸的测定__概述说明以及解释

细胞中乳酸的测定概述说明以及解释1. 引言在生物学研究中,对细胞的代谢产物进行测定是十分重要的,乳酸作为一种常见的代谢产物,在细胞中具有重要的作用。

乳酸能够通过乳酸脱氢酶催化反应将其转化为丙酮酸,从而参与细胞内能量代谢过程。

然而,过多的乳酸积累可能会导致细胞功能异常,并在某些疾病状态下出现。

本文旨在概述并解释细胞中乳酸的测定方法与技术,并探讨其在生物学研究中的重要性和应用。

文章将从以下几个方面展开:首先介绍乳酸在细胞中的作用,包括其参与能量代谢以及与其他代谢产物之间的相互关系;接着详细介绍乳酸测定方法的种类,涵盖传统的生化分析方法以及近年来发展起来的新型技术;最后对乳酸测定结果进行分析,并回顾相关研究发现和比较分析。

文章内容将包括实验方法与技术部分,介绍了采集细胞样本的方法、乳酸测定的实验步骤以及常用的乳酸测定技术。

进一步地,文章将提供实验结果与分析部分,对细胞样本中乳酸含量的分析结果进行阐述,并对结果进行解释和讨论。

此外,文章还将从已有研究成果出发,探讨与比较不同研究之间的关联性。

最后,在结论与展望部分,笔者将对实验结果进行总结和归纳,并给出进一步研究方向的展望和建议。

通过这篇长文的撰写,希望能加深对细胞中乳酸测定方法与技术的理解,并为相关领域的研究提供参考和指导。

2. 细胞中乳酸的测定2.1 乳酸在细胞中的作用乳酸是一种重要的代谢产物,在细胞内发挥着关键作用。

它是糖酵解过程中生成的主要产物之一,尤其在无氧代谢情况下积累较多。

乳酸可被肌肉细胞转化为能量并参与体内能量供应。

此外,乳酸还在心肌等组织中起到了调节pH值和血液循环、增加脑功能等方面的作用。

2.2 乳酸测定方法的种类目前常见的测定细胞中乳酸含量的方法有多种,其中包括生化分析方法、色谱法、光谱法等。

生化分析方法通常利用相关试剂对乳酸进行反应,并通过检测反应产物来间接确定乳酸含量。

色谱法则采用气相或液相色谱技术,将混合物中存在的乳酸分离并测定其峰面积或峰高度来计算含量。

酸奶测定实验报告结果

酸奶测定实验报告结果

酸奶测定实验报告结果1.测定酸奶中乳酸含量。

2.测定酸奶中蛋白质含量。

实验原理:1.酸奶中乳酸的测定。

乳酸是酸奶中的主要有机酸,可以通过化学方法测定其含量。

首先将酸奶样品溶解并加入酸性溶液,使乳酸生成乳酸根离子。

然后使用酸碱滴定法,用硫酸标准溶液滴定至草酸终点,计算出乳酸的含量。

2.酸奶中蛋白质的测定。

蛋白质是酸奶中的重要营养成分,可以通过比色法测定其含量。

首先将酸奶样品进行水解,生成氨基酸。

然后使用低瓦伦汀方法,将氨基酸与特定试剂反应生成染色化合物,根据染色化合物的吸光度,计算出蛋白质的含量。

实验步骤:1.酸奶样品的制备。

从市场购买不同品牌的酸奶,并保持冷藏。

2.乳酸含量的测定。

取一定量的酸奶样品,加入酸性溶液,使乳酸生成乳酸根离子。

使用酸碱滴定法,将硫酸标准溶液滴定至草酸终点。

3.蛋白质含量的测定。

取一定量的酸奶样品,进行水解。

然后使用比色法,根据染色化合物的吸光度,计算出蛋白质的含量。

实验结果:1.酸奶样品中乳酸含量的测定结果如下:样品1:乳酸含量为0.25 mol/L样品2:乳酸含量为0.15 mol/L样品3:乳酸含量为0.18 mol/L2.酸奶样品中蛋白质含量的测定结果如下:样品1:蛋白质含量为10 g/L样品2:蛋白质含量为8 g/L样品3:蛋白质含量为12 g/L实验讨论:通过实验测定,我们可以得出以下结论:1.不同酸奶品牌的乳酸含量有所差异,这可能是由于酸奶生产过程中所使用的发酵菌种和发酵时间不同导致的。

2.不同酸奶品牌的蛋白质含量也有所差异,这可能与生产工艺和原料质量有关。

根据实验结果,我们可以选择乳酸含量较高且蛋白质含量适中的酸奶品牌作为日常饮食的选择。

此外,对于需要补充乳酸和蛋白质的人群,可以更有针对性地选择酸奶品牌。

实验结论:通过本次实验,我们成功测定了酸奶样品中乳酸和蛋白质的含量。

不同品牌的酸奶乳酸含量和蛋白质含量有所差异。

我们建议根据个人需求选择乳酸含量和蛋白质含量适中的酸奶品牌作为日常饮食的选择。

乳酸含量的测定方法

乳酸含量的测定方法

乳酸含量的测定方法乳酸是一种重要的有机酸,在食品、饮料、药品等领域被广泛应用。

测定乳酸含量对于质量控制和生产过程的监控非常重要。

本文将介绍乳酸含量的测定方法,并提供实训指导。

一、测定原理乳酸的测定可以采用物理、化学或微生物方法。

其中较为常用的方法有化学法和酶法:1.化学法:乳酸的化学法测定主要基于酸碱滴定、紫外分光光度法、气相色谱法等。

其中,酸碱滴定法常用于测定乳酸含量,通过滴定一定浓度的碱液至乳酸溶液反应终点的酸碱滴定终点,从而计算出乳酸的含量。

2.酶法:乳酸的酶法测定主要基于乳酸脱氢酶催化下的反应。

通过将乳酸与乳酸脱氢酶反应生成丙酮酸,再通过酶促反应,将丙酮酸转化为产生可检测信号的化合物(如NADH),从而测定乳酸含量。

二、实验步骤1.样品准备:根据需要,从待测样品中取得适量样品。

2.样品处理:将样品转移到适当容器中,加入酸或碱,以调节pH值,以促进乳酸的形成或稳定乳酸的含量。

3.滴定法测定(化学法):a.取适量的乳酸标准溶液,加入适量试剂,并进行反应。

b.将反应液转移到滴定容器中,用滴定管滴加滴定剂至反应终点,记录滴定次数。

c.根据滴定剂浓度和滴定次数的关系,计算出乳酸含量。

4.酶法测定:a.取适量的乳酸样品,加入乳酸脱氢酶和其他反应物。

b.在酶的作用下,测定产生的可检测信号,如吸光度、荧光等。

c.根据标准曲线,计算出乳酸的含量。

三、注意事项1.实验条件:根据具体方法的要求,确保实验在适当的温度、湿度和pH条件下进行。

2.试剂准备:对于化学法和酶法,应按照要求准备好所有试剂,避免试剂过期或受污染。

3.校准和标准曲线:根据需要,使用标准物质进行校准,并根据标准曲线计算样品中的乳酸含量。

4.仪器设备:根据方法要求使用适当的仪器设备,如紫外分光光度计、滴定仪或荧光仪等。

5.数据处理:根据所选方法的原理和公式,对实测数据进行处理,得出最终结果。

四、安全注意事项1.实验操作:在进行实验操作时,佩戴实验手套和安全眼镜,避免化学品直接接触皮肤和眼睛。

乳酸含量的测定方法

乳酸含量的测定方法

乳酸含量的测定方法嘿,朋友们!今天咱来聊聊乳酸含量的测定方法。

你可别小瞧了这乳酸,它在咱们身体里那可是相当重要的角色呢!咱就说,这乳酸就像是个调皮的小精灵,在我们运动或者身体有各种活动的时候,它就会出现。

那怎么知道它到底有多少呢?这就需要一些特别的办法啦!比如说,有一种方法就像是给乳酸小精灵拍个特写照片一样。

通过一些化学试剂和它反应,然后根据反应的结果来判断乳酸的含量。

这就好比你要找个隐藏在人群中的小伙伴,你得有个特别的标志或者信号才能找到他,对吧?还有一种方法呢,就像是给乳酸小精灵量身高。

利用一些仪器和技术,精确地测量出它的数值。

这可需要点技术和耐心哦,就像你要小心翼翼地量自己最心爱的宝贝一样,不能有一点马虎。

那你可能会问啦,为啥要测定乳酸含量呀?这用处可大啦!就好像你知道天气情况能决定你穿什么衣服一样,知道乳酸含量能让我们更好地了解身体的状态。

比如运动后测一测,就能知道自己是不是运动过度啦,是不是该休息一下啦。

想象一下,如果没有这些测定方法,我们就像在黑暗中摸索,不知道身体里的乳酸小精灵在搞什么鬼。

但有了这些方法,我们就像是有了一盏明灯,能清楚地看到乳酸的动向。

而且哦,这些方法操作起来也不难。

只要你认真学一学,就像学骑自行车一样,一开始可能有点摇晃,但慢慢就熟练啦。

你可以在实验室里像个小科学家一样,专注地进行测定。

测定乳酸含量的过程也很有趣呢!就像是一场小小的冒险,每一步都充满了新奇和挑战。

你会期待着结果,就像等待一份神秘的礼物一样。

总之呢,乳酸含量的测定方法是我们了解身体的一个重要途径。

它能帮助我们更好地照顾自己,让我们的身体更健康。

所以啊,大家可别小瞧了这些方法哦!它们就像是我们身体的小卫士,时刻守护着我们呢!现在,你是不是对乳酸含量的测定方法更感兴趣啦?赶紧去试试吧!。

乳酸测定

乳酸测定

总有机酸检测试剂:NaOH标准溶液(邻苯二甲酸氢钾标定),酚酞指示剂仪器:磁力搅拌器离心机方法:(1)取发酵后鲜样品5g 置于150ml烧杯中加入溶于95ml去离子水,在磁力搅拌器上浸提30min。

(2)取部分浸提样离心10min(3000r/min)。

(3)取上清液10ml, 加30ml去离子水稀释(以消除底色的影响),加酚酞指示剂四滴,用0.1molNaOH标准溶液滴定,并记录到终点消耗NaOH体积。

(终点到溶液呈现粉红)计算乳酸(%)=N(NaOH)×V(NaOH) ×0.09008/(5×10/100)N(NaOH):NaOH标准溶液的浓度;V(NaOH) :消耗NaOH标准溶液体积;0.09008:乳酸的毫克当量。

0.1mol氢氧化钠的配制与标定1、配制:称取10g氢氧化钠,溶于100ml水中配置成饱和溶液,摇匀,注入聚乙烯容器中,密闭放置至溶液清亮。

用塑料管虹吸5.6ml的上清液,注入1000ml 无二氧化碳水中(将去离子水煮沸5分后冷却),摇匀。

2、标定称取0.4g于105~110℃烘至恒重的基准的邻苯二甲酸氢钾,准确至0.0001g,溶于50ml的无二氧化碳水中,加4滴酚酞指示剂(0.1%),用配制好的氢氧化钠溶液滴定至溶液呈粉红色,同时作空白试验。

3、计算氢氧化钠标准溶液的浓度按下式计算c(NaOH)=m/(V1-V2)×0.2042式中c(NaOH)——氢氧化钠标准溶液之物质的量的浓度,mol/l;V1——滴定用邻苯二甲酸氢钾之用量,ml;V0——空白试验氢氧化钠溶液之用量,ml;m——邻苯二甲氢钾之质量,g;• 0.2042——与1.00ml氢氧化钠标准液[c(NaOH)=1.000mol/l]相当的以克表示的邻苯二甲氢钾之用量。

0.1%酚酞指示剂的配制:称取1.000克酚酞,溶解与100ml95%的试剂酒精中,混匀即得。

生化实验报告血乳酸(3篇)

生化实验报告血乳酸(3篇)

第1篇一、实验目的本实验旨在通过生化方法测定血乳酸浓度,了解机体代谢状态,为临床诊断提供参考。

二、实验原理乳酸脱氢酶(LDH)是一种糖酵解酶,广泛存在于机体所有组织细胞的胞质内。

在缺氧或无氧条件下,乳酸脱氢酶催化丙酮酸与乳酸之间的可逆反应,生成乳酸和NADH。

通过测定血中乳酸的浓度,可以反映机体代谢状况和缺氧程度。

三、实验材料1. 标本:静脉血5ml2. 试剂:乳酸测定试剂盒(包括乳酸脱氢酶、NADH、NAD+、缓冲液等)3. 仪器:全自动生化分析仪、恒温水浴箱、移液器、试管等四、实验方法1. 取静脉血5ml,加入含有抗凝剂的试管中,混匀。

2. 按照试剂盒说明书进行操作,将血样加入反应管中,加入乳酸测定试剂盒中的其他试剂,充分混匀。

3. 将反应管放入恒温水浴箱中,在37℃下孵育一定时间。

4. 取出反应管,用全自动生化分析仪测定血乳酸浓度。

五、实验结果本次实验测定血乳酸浓度为2.5mmol/L。

六、结果分析1. 正常人血乳酸浓度为1.0-2.5mmol/L,本次实验结果在正常范围内。

2. 血乳酸浓度升高可能见于以下情况:- 缺氧:如慢性阻塞性肺疾病、心力衰竭等;- 营养不良:如糖尿病、蛋白质营养不良等;- 药物作用:如某些抗生素、抗癫痫药物等;- 先天性代谢缺陷:如乳酸酸中毒等。

七、讨论1. 本实验通过测定血乳酸浓度,可以初步了解机体代谢状态和缺氧程度。

但在实际临床应用中,需要结合患者的病史、症状、体征和其他检查结果进行综合判断。

2. 影响血乳酸浓度的因素较多,如药物、饮食、运动等,因此在实验过程中应严格控制实验条件,确保实验结果的准确性。

3. 血乳酸检测作为一种无创、简便、快速的方法,在临床诊断中具有广泛的应用前景。

八、结论本次实验成功测定了血乳酸浓度,为临床诊断提供了参考。

在今后的工作中,我们将进一步研究血乳酸检测在临床诊断中的应用价值。

九、注意事项1. 实验操作过程中,应严格遵守操作规程,确保实验结果的准确性。

乳酸测定方法

乳酸测定方法

乳酸测定方法本页仅作为文档封面,使用时可以删除This document is for reference only-rar21year.March乳酸的测定:对羟基联苯比色法(参照高庆,2005)1.材料、试剂与仪器无水乳酸锂、对羟基联苯、钨酸钠、硫酸铜、氢氧化钙、浓硫酸、蔗糖、无水葡萄糖均为分析纯试剂。

主要溶液:①钨酸溶液:L硫酸及10%(W/V)钨酸钠(Na2WO4·2H2O)溶液等体积混合,当天使用前配制;②20%(W/V)硫酸铜溶液:称取硫酸铜(CuSO4·5H2O) 20g,加蒸馏水70ml,加热使之溶解,再加入蒸馏水定容至 100ml;③对羟基联苯溶液:称取对羟基联苯溶于100ml 的L氢氧化钠溶液中( 配制时加热助溶,溶解后为澄清液体) ,贮存于棕色瓶中,保存于 4℃冰箱,可使用一个月;④乳酸标准储存液(1mg/ml):精确称取无水乳酸锂,溶于50ml 蒸馏水中,加 L 硫酸20ml,后加蒸馏水定容至 100ml,混匀后保存于 4℃冰箱。

⑤4%(W/V)硫酸铜溶液:20%硫酸铜溶液10mL加蒸馏水稀释至50mL。

⑥乳酸标准应用液(200µg/mL):使用时取储存液10mL用蒸馏水稀释至50mL。

在冰箱中可保存数天。

主要仪器:UNIC UV-2100 紫外可见分光光度计、TGL-16B 离心机、恒温水浴锅、具塞试管5ml及具塞比色管20ml。

2. 方法青贮浸提液样品预处理取适量青贮浸提液样品5000r/min离心10min,取上清液适当稀释,吸取稀释液于洁净离心管中,加入钨酸溶液,混匀,室温静置,直至溶液中出现明显絮状物(约30~45min),10000r/m 离心10min,取上清液置于5ml 洁净具塞试管中,60℃水浴保温30min 左右,冷却待用。

标准曲线的制作①用200Lg/mL乳酸应用标准液同青贮样品浸提液预处理方法一样预处理后(可以不稀释),按下表数量在预先编好号的试管中加入标准乳酸滤液和蒸馏水。

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乳酸的测定:
对羟基联苯比色法(参照高庆,2005)
1.材料、试剂与仪器
无水乳酸锂、对羟基联苯、钨酸钠、硫酸铜、氢氧化钙、浓硫酸、蔗糖、无水葡萄糖均为分析纯试剂。

主要溶液:
①钨酸溶液:L硫酸及10%(W/V)钨酸钠(Na2WO4·2H2O)溶液等体积混合,当天使用前配制;
②20%(W/V)硫酸铜溶液:称取硫酸铜(CuSO4·5H2O)20g,加蒸馏水70ml,加热使之溶解,再加入蒸馏水定容至 100ml;
③对羟基联苯溶液:称取对羟基联苯溶于100ml 的L氢氧化钠溶液中( 配制时加热助溶,溶解后为澄清液体) ,贮存于棕色瓶中,保存于 4℃冰箱,可使用一个月;
④乳酸标准储存液(1mg/ml):精确称取无水乳酸锂,溶于50ml 蒸馏水中,加 L 硫酸20ml,后加蒸馏水定容至 100ml,混匀后保存于 4℃冰箱。

⑤4%(W/V)硫酸铜溶液:20%硫酸铜溶液10mL加蒸馏水稀释至50mL。

⑥乳酸标准应用液(200µg/mL):使用时取储存液10mL用蒸馏水稀释至50mL。

在冰箱中可保存数天。

主要仪器:
UNIC UV-2100 紫外可见分光光度计、TGL-16B 离心机、恒温水浴锅、具塞试管5ml及具塞比色管20ml。

2. 方法
青贮浸提液样品预处理
取适量青贮浸提液样品5000r/min离心10min,取上清液适当稀释,吸取稀释液于洁净离心管中,加入钨酸溶液,混匀,室温静置,直至溶液中出现明显絮状物(约30~45min),10000r/m 离心10min,取上清液置于5ml 洁净具塞试管中,60℃水浴保温30min 左右,冷却待用。

标准曲线的制作
①用200Lg/mL乳酸应用标准液
同青贮样品浸提液预处理方法一样预处理后(可以不稀释),按下表数量在预先编好号的试管中加入标准乳酸滤液和蒸馏水。

②各管中分别加入氢氧化钙粉末100mg,混匀,8000r/min离心5min,取上清液,加入预先加有20mg氢氧化钙粉末的小试管中,混匀,加 20%硫酸铜溶液,称重,迅速混匀,沸水浴3min,水浴冷却,补足重量,3000r/min离心5min,各吸上清液加入比色管中。

③在各管加入25µL的4%硫酸铜溶液,混匀后置冰水浴内冷却。

④将预冷的浓硫酸缓缓加入各管中,每管各加,边加边摇,混匀后置沸水浴中准确加热5min,取出后迅速置冰水浴中冷却3min左右。

⑤在各管中加%对羟基联苯溶液,充分振摇后,放置,其间每10min混摇一次。

⑥各管置于沸水浴中准确加热90s,立即放入冰水浴中冷却。

在波长565nm处用lcm 比色皿,1管作为参比,分别测定吸光度(A)。

所得数据以乳酸含量为横坐标,以565nm处的光吸收为纵坐标,作标准曲线。

青贮样品浸提液中乳酸含量的测定
取青贮样品浸提液滤液按标准曲线的测定方法,以蒸馏水为空白测定其在560nm处的光吸收,所得数据在标准曲线上查得相应的乳酸含量,即为青贮样品浸提液中的乳酸含量。

样品中乳酸含量=计算值×稀释倍数
需要试剂:
无水乳酸锂、对羟基联苯、钨酸钠、硫酸铜、氢氧化钙、浓硫酸、蔗糖、无水葡萄糖均为分析纯试剂。

需要器材:
分光光度计、离心机、离心管、恒温水浴锅、具塞试管5ml及具塞比色管20ml。

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