黄酮类化合物提取分离.

➢乙醇或甲醇 ➢高浓度 苷元 ➢60％ 苷类。 ➢提取的次数： 2～4次。 ➢提取方法：加热 回流法或冷浸法。
➢仅用于提取苷类 ➢成本低，无污染， 适合工业化生产 ➢提取出的杂质较 多
➢用极性由小到大 的溶剂依次将同样 极性顺序的黄酮类 分别提取出来
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分离——pH梯度萃取法
原理
利用黄酮苷元中酚OH数目及位置不同, 其酸性强弱不 同的性质来分离。
酸性
7, 4'-OH > 7-或4'-OH > 一般酚OH > 3-OH, 5-OH




溶于5%NaHCO3 溶于5%Na2CO3 溶于不同浓度的NaOH中
方法
总黄酮溶于Et2O，再用5%NaHCO3, 5%Na2CO3, 0.2% NaOH, 4%NaOH依次萃取(碱性由弱强)，达到分离目的。 Page 4
黄酮类化合物 提取分离
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提取——碱溶酸沉法
➢可用碱性水溶液（如碳酸钠、氢氧化钠、氢氧化 钙等水溶液）或碱性稀醇溶液（如50％乙醇）浸出。 ➢用碱性溶剂提取时，所用的碱浓度不宜过高，以 免在强碱下加热时破坏黄酮类化合物结构。 ➢ 当有邻二酚羟基存在时，应加硼酸保护。
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提取——溶剂提取法
例： 查耳酮 > 二氢黄酮
➢当苷元相同时，被吸附的强弱顺序为： 苷元>单糖苷 >二糖苷 >三糖苷
例：在聚酰胺薄层上，吸附力 槲皮素>芸香苷（芦丁）
➢ 与介质的关系：吸附力 水（中）> 甲醇、乙醇（浓度由 低到高）> 碱性溶剂
相反，溶剂在聚酰胺柱上对黄酮类化合物洗脱能力顺序为：水（中） ＜甲醇、乙醇（浓度由低到高）＜碱性溶剂
胶
离异黄酮、二氢黄酮、二氢黄酮醇及
柱
高度甲基化（或乙酰化）的黄酮及黄 酮醇类。少数情况下，在加水去活化
色
后也可用于分离极性较大的化合物，谱ຫໍສະໝຸດ 如多羟基黄酮醇及其甙类等。
法
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分离——柱色谱法（二）
聚酰胺柱色谱分离法
原理： 氢键吸附 （酰胺基与酚羟基、醌类化合物结合形成氢键， 产生吸附） 吸附规律：与黄酮类化合物酚羟基的数目及位置等有关。
中药提取物
乙醚溶解 乙醚液
5％NaHCO3萃取
碱水液 （7,4’-二羟基黄酮）
乙醚液 5％Na2CO3萃取
碱水液 （7-或4’-羟基黄酮）
乙醚液 0.2％NaOH萃取
碱水液 （一般羟基黄酮）
乙醚液 4％NaOH萃取
碱水液 （5-羟基黄酮）
乙醚液含中性或碱 性成分
分离——柱色谱法（一）
硅
此法应用范围最广，主要适于分
酚羟基数目越多，吸附能力越强。
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➢酚羟基数目相同的情况下，酚羟基所处的位置易于形成分 子内氢键，吸附能力减弱。
OH
HO
O
OH
OH OH O
槲皮素
3-OH或5-OH黄酮的吸附力小于其他位置-OH黄酮； 邻二酚羟基黄酮的吸附力弱于间位或对位酚羟基黄酮
➢分子内芳香化程度越高，共轭双键越多，吸附力越强。