细菌鉴定仪(ATB)与手工法鉴定结果比较分析

安徽医学 2009 年第 30 卷第 4 期 Anhui Medical Journal Vol.30,No.4,Apr.2009
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菌株来源
05 质控菌 临床标本 临床标本 临床标本 ADCC25722 临床标本 临床标本 临床标本 临床标本 临床标本 临床标本 临床标本 ADCC27853 临床标本 临床标本 临床标本 临床标本 05 室间质控株 05 室间质控株 05 室间质控株 05 室间质控株 06 室间质控株 06 室间质控株 06 室间质控株 07 室间质控株 08 室间质控株 08 室间质控株 08 室间质控株 08 室间质控株
1 材料与方法
1．1 仪 器 与 试 剂 ID 32 E;rapid、ID 32 STREP、ID 32 GN ID STAPH4 种鉴定板条及相配套试剂，ATB 自动细 菌鉴定仪，均为法国梅里埃公司产品。微量生化发酵管 由杭州天河微生物有限公司提供。所有试剂均在有效期 内使用。 1．2 实验菌株 ATCC 质控菌株、2005～2008 年室间控 制部分菌株及部分临床标本菌株。 1．3 ATB 细菌鉴定仪鉴定法 根据细菌表型特征选择 相应的鉴定板条，通过阅读器自动阅读测试板条，依据 试条上的生化反应数据进行统计分析，依据相似程度（T 值）及 百 分 率（ID%）的 组 合 ，作 出 判 断 [1]。 Rapid ID动细菌鉴定仪在实际工作中的应 用.中国卫生检验杂志,2004,14（6）: 768.
［2］ 郑燕莉. 细菌鉴定仪与手工方法结合鉴定细菌 . 现代中西医 结合杂志,2007,16（34）：5 166. （2008-08-22 收稿 2009-01-08 修回）
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安徽医学 2009 年第 30 卷第 4 期 Anhui Medical Journal Vol.30,No.4,Apr.2009
ATB 细菌鉴定仪与手工法鉴定结果比较分析
·检验与临床·
邵小华
［摘 要］ 目的 通过分析比较细菌鉴定仪与手工法鉴定结果，以期建立一套现实可行的仪器与手工相结合的鉴定方法。 方法 用 ATB 细菌鉴定仪与手工法分别鉴定 29 株来自质控及临床标本菌株。 结果 鉴定 29 株细菌其中有 2 株细菌仪器与手工法的鉴定结 果不符。 结论 合理应用传统的手工法不失为仪器鉴定的一种辅助方法。手工法也可将细菌准确地鉴定到种，为没有细菌自动鉴定仪 的基层医院增强了细菌鉴定的信心。
缓症链球菌
口腔链球菌
屎肠球菌
屎肠球菌
大肠埃希菌
大肠埃希菌
铜绿假单胞菌
铜绿假单胞菌
肺克肺炎亚种
肺克肺炎亚种
表皮葡萄球菌
表皮葡萄球菌
大肠埃希菌
大肠埃希菌
宋内志贺菌
宋内志贺菌
沙门氏菌
沙门氏菌
肺克肺炎亚种
肺克肺炎亚种
阴沟肠杆菌
阴沟肠杆菌
铜绿假单胞菌
铜绿假单胞菌
嗜麦芽营养食单胞菌 嗜麦芽营养食单胞菌
雷氏普罗威斯菌
极好的鉴定结果 好的鉴定结果 可接受鉴定结果 极好的鉴定结果 极好的鉴定结果 非常好的鉴定结果 不可接受生化谱 极好的鉴定结果 极好的鉴定结果 无效鉴定结果 可接受生化谱 极好的鉴定结果 极好的鉴定结果 非常好的鉴定结果 好的鉴定结果 极好的鉴定结果 极好的鉴定结果 非常好的鉴定结果 可疑的生化谱 可疑的生化谱 极好的鉴定结果 非常好的鉴定结果 极好的鉴定结果 极好的鉴定结果 极好的鉴定结果 非常好的鉴定结果 非常好的鉴定结果 好的鉴定结果 极好的鉴定结果
作者单位： 230011 合肥市第二人民医院检验科
STREP 和 ID 32 STRAPH 两种鉴定板条，加指示剂后 5~ 10 min 内测定。 1.4 手工鉴定法 参考安徽省临床检验中心出版的《革 兰氏阴性杆菌编码手册》 及 《全国临床检验操作规程》 （第 2 版）。
2 结果
4 种鉴定板条，29 株菌株 ATB 细菌鉴定仪与手工法 鉴定结果的比较见附表。肠杆菌株基本符合，链球菌的 分辨率较低。
鉴定[2]。 细菌鉴定本是一项系统、复杂的技术工作，仪器的
使用很大程度上代替了繁琐的手工操作，提高了工作效 率，从手工到自动化，是非常巨大的进步，但进口仪器和 试剂价格昂贵成本较高，根据我国国情目前基层医院尚 难普及。通过对 ATB 鉴定仪和手工鉴定法的比较可以看 出，手工法可将细菌准确地鉴定到种，为没有细菌自动 鉴定仪的基层医院增强了细菌鉴定的信心。
雷氏普罗威斯菌
司氏普罗威斯菌
司氏普罗威斯菌
屎肠球菌
屎肠球菌
溶血葡萄球菌
溶血葡萄球菌
脑膜败血黄杆菌
产吲哚黄杆菌
产酸克雷伯菌
产酸克雷伯菌
摩根摩根菌
摩根摩根菌
(99.9/0.88) (99.74/0.87) (41.2/0.34) (99..9/0.83) (99.9/0.82) (99.7/0.64)
(99.9/0.75) (99.9/0.76) (40.0/0.73) (88.4/0.41) (99.9/0.82) (99.9/1.00) (99.9/0.51) (99.74/0.87) (99.9/0.82) (99.9/0.97) (99.6/0.72) (52.4/0.26) (99.9/0.42) (99.9/1.00) (99.9/0.53) (99.9/0.97) (99.9/0.92) (99.6/0.98) (99.8/0.59) ( 99.7/0.80) (99.9/0.64) (99.9/1.00)
附表 29 株菌手工鉴定与 ATB 细菌鉴定仪鉴定结果比较
手工鉴定
首选
ATB 鉴定仪 （ID%/T）
鉴定 仪器评语
无乳链球菌
无乳链球菌
表皮葡萄球菌
表皮葡萄球菌
表皮葡萄球菌
产色葡萄球菌
奇异变形杆菌
奇异变形杆菌
大肠埃希菌
大肠埃希菌
阴沟肠杆菌
阴沟肠杆菌
肺炎链球菌
肺炎链球菌
粪肠球菌
粪肠球菌
鲍氏不动杆菌
鲍氏不动杆菌
在现代临床医学检验中，检验工作的仪器化、电脑 化、智能化是其中的一个发展方向，微生物检验也不例 外，自上世纪 70 年代开始就有多种微生物自动鉴定系 统问世，ATB-Expression（以下简称 ATB 细菌鉴定仪）是 法国梅里埃公司（Bio Merieur）产品，是一台在微量生化 反应环节实现电脑自动化的仪器，在国内外已有较为广 泛的应用。本文选择肠杆菌科、非发酵菌，链球菌，葡萄 球菌计 29 株菌株，用 ATB 细菌鉴定仪与手工法鉴定做 对比，探讨仪器鉴定与手工鉴定不符合的原因及鉴定时 应注意的问题，以期建立一套现实可行的仪器与手工方 法相结合的细菌鉴定方法。
［关键词］ 细菌鉴定；菌株；仪器评语 doi:10.3969/j.issn.1000-0399.2009.04.054
Analysis of identifying results of ATB Expression equipment and manual method Shao Xiaohua Hefei Second People Hospital, Hefei 230011 [Abstract] Objective To establish a set of available tests ,which combine equipment and manual method by analyzing the identified results of these two methods. Methods 29 strains from QC stains clinical samples and were identified by ATB Expression and manual method. Resealts There are two different resuls of 29 strains identified by ATB Expression and manual method. Conclusion Traditional manual method can be used as complementary method of equipment ,it also can identify bacteria species correctly ,which strengthen the confi－ dence of medical laboratory workers who have no equipments. [Key words] Identification ; Strain; Equipment appraisal
符合与否
符合 符合 不符合 符合 符合 符合 符合 符合 符合 不符合 符合 符合 符合 符合 符合 符合 符合 符合 符合 符合 符合 符合 符合 符合 符合 符合 不符合 符合 符合
它不需大量的菌悬液，又可提高链球菌测定的分辨率。 由附表可见，2008 年安徽省第一次微生物室间质控
菌株：脑膜败血黄杆菌，用 ID32E 鉴定板条，鉴定为产吲 哚黄杆菌（ID 99.7.T 0.80）非常好的鉴定结果；用 ID32 GN 鉴定板条鉴定为产吲哚黄杆菌（ID 55.9.T 0.13）可疑 生化谱，虽然发酵菌的鉴定板条得出非常好的鉴定结 果，但非发酵菌不能用肠杆菌科的鉴定板条 ID32E 鉴 定，否则将得出错误的结果。因 ID32E 鉴定板条适用于 革兰氏阴性，氧化酶阴性杆菌。而 ID32 GN 鉴定板条是 由 32 个标准化、微量化的同化试验与相应的鉴定数据 库组成的自动鉴定系统，适用于包括非发酵菌在内的自 动鉴定数据库中革兰氏阴性杆菌。此时我们应该用手工 法做相应的补充生化试验，即可得到正确的结果。手工 鉴定可以作为仪器鉴定的一种辅助方法，对确认为纯培 养而 ATB 细菌鉴定仪无法鉴定者，可通过传统的手工法
3 讨论
我们选择常见 4 种鉴定板条，由附表可以看出，22 株菌，ATB 细菌鉴定仪与手工法相比其符合率为 90% （26/29）。肠杆菌科 ID 32E 的鉴定准确率极高，链球菌鉴 定的 rapid ID32 STREP 分辨率有待提高。做链球菌鉴定 时菌悬液需 4 个麦氏单位，一般原始标本很难有如此大 的菌量，故需转种一块血平板增菌后再进行测定，因而 延长了报告时间，而手工鉴定则不存在上述问题，特别 是对肺炎链球菌的鉴定，用奥普托欣实验，胆盐溶菌实 验即可。常见的粪肠球菌、屎肠球菌也可用几个简单的 生化实验如阿拉伯糖实验进行鉴定。临床最需要的是快 速药敏实验结果，链球菌鉴定可以开发普通的鉴定板 条。因此我们认为应设计更利于链球菌属的鉴定板条，