总胆固醇的测定

总胆固醇的测定

1.原理：

胆固醇酯+H2O 胆固醇酯酶胆固醇+游离脂肪酸

胆固醇+O2 胆固醇氧化酶胆甾烯酮+H2O2

2H2O2 +4—氨基安替比林+酚过氧化物酶醌亚胺 +4H2O

2.标本采集与处理：

2.1受检者准备：病人必须空腹12小时，不饮酒24小时后采集血样。

2.2静脉采血：除非是卧床的病人，一般采血取坐位，(在抽血前至少应静坐5min)从肘静脉取血，使用止血带的时间不超过1分钟，穿刺成功后立即松开止血带；

2.3抗凝剂：多用血清作血脂分析。如用血浆，就用肝素钠抗凝；

2.4标本处理：室温下放置30-45min离心，放置时间不得超过3h。分离出血清，如当天不能测定，可暂存4℃冰箱可稳定4天。

2.5标本拒收：标本应无溶血。如不符合应重新采集标本.

2.6采血管要求:采血时要求使用一次性无菌注射器，一人一管，用后毁形，用500mg/L有效氯浸泡消毒３０分钟，回收、焚烧、做好登记。

3.试剂：

3.1试剂组成：

RⅠ: 胆固醇酯酶≧1.141u/ml

胆固醇氧化酶≧0.8u/ml

过氧化物酶≧6u/ml

RⅡ：磷酸缓冲液（PH7.7 ）0.1mmol/L

酚 3.5mmol/L

4—氨基安替比林0.5mmol/L

3.3质控血清：应在测量未知样本的同时检测质控物并确保质控在可接受的范围内，并且结果必须在三个标准差范围内。

3.3.1质控品批号及范围:批号022431，范围*±2st和*±3s。

3.3.2保存环境:在2—8℃保存，有效期内稳定。

3.3.3质控物保存：

3.4试剂的贮存与稳定性：

试剂在2—8℃保存，有效期内稳定。工作液在2—8℃保存稳定30天。

4.仪器：上海迅达公司的半自动生化分析仪XD811。

5.操作程序：

5.1分析参数：

方法：终点法波长： 500nm

温度： 37℃比色杯光径：1cm

6.计算方法：

CHOL=A测定/A标准×定标血清浓度

7．操作性能：线性范围12.93mmol/L，含量过高,用生理盐水稀释后样品、重测,结果乘以稀释倍数。

8．参考值： 5.17—6.46mmol/L

9．结果审核：

9．1室内质控结果的判断：对质控结果进行分析是否在控。

9．2对检验结果进行审核，包括检验项目是否漏项，打印是否清楚。

动脉硬化、肾病综合症、黄疸、重症糖尿病

恶性贫血、溶血性贫血、甲状腺机能亢进、急性感染、

营养不良。

11．参考文献：全国临床检验操作规程中华人民共和国卫生部医政司