血细胞形态学
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(RAS)、地中海贫血、 慢性病贫血
红细胞缗钱状排列
红细胞沿长轴一个个 相
联,多见于浆 细胞疾病
2 粒细胞系统
在正常骨髓中约占50%-65% 嗜中性粒细胞在粒细胞系统占绝大部分,嗜酸
性粒细胞小于5% 嗜碱性粒细胞小于1% 嗜酸粒细胞增多,见于CML,嗜酸粒细胞增多 症,嗜酸粒细胞白血病,过敏性疾病等 嗜碱性粒细胞增多,见于CML,嗜碱性粒细胞 白血病。
细胞大小、形状 胞浆量多少、颜色、颗粒 细胞核形状、染色质结构(粗细、凝聚)、核
仁数目、大小。 核、浆比例。
(二) 各系列各阶段细胞形态
1 红细胞系统:临床四阶段划分(有些
学者提出六阶段划分) 正常骨髓中 约占15%-25%
原始红细胞
细胞圆形或椭圆形,直径15—25μm 胞核圆形或椭圆形,居中 染色质粗颗粒网状,深紫红色,核仁2—3个
晚幼红和淋巴细胞鉴别
尤其小淋巴细胞与碳核样晚幼红鉴别: 相同点:胞体小,胞浆量少,无颗粒,核致密、
固缩,无结构。 不同点:晚幼红胞浆颜色接近成熟红细胞,核 膜不如淋巴细胞光滑、刀切样。 多见于IDA、AA。
淋巴细胞与晚幼红比较
4 单核细胞系统
原始、幼稚、成熟阶段,在正常骨髓中仅见成
倍 ,多见于HA,MDS、MegA等
点彩红细胞
红细胞胞浆有许多大小
不一,形状不整嗜碱性 点状物。(瑞氏) 注意与网织红细胞鉴别 (煌焦油蓝染色)
靶形红细胞
红细胞周边、中央
着色深,间隔空白 带,见于地贫
(小细胞低色素)中心浅染
成熟红细胞中浅染区扩大, 多见于IDA、MDS
晚幼粒(嗜中性、嗜酸性、嗜碱 性)
直径10-16μm 胞核肾型,有凹陷,凹陷度在假设圆径1/2-3/4,
小于1/2为中幼粒,大于3/4为杆状核 约占7.9+-1.97%
杆状核(嗜中性、嗜酸性、嗜碱 性)
直径10-13μm 胞核如杆状、带状,胞核之凹陷度大于3/4 染色质凝固块状。
熟单核细胞 原始单核细胞 不规则形或圆形,直径14-25μm 胞核不规则,,有折叠扭曲, 染色质纤细网状,紫红色 ,核仁大,1-3个 胞浆灰兰色,浅兰色 ,似毛玻璃,不透亮,有 伪足,有时有内外浆,无颗粒 (见于单核细胞白血病)
幼稚单核细胞
染色质纤细,有凝聚,或粗网状,核仁不清楚
血细胞形态学
概论
血液和骨髓细胞瑞氏染色形态学 检查法
通过分析血液和骨髓中有核细胞数量、相对构 成比、形态改变,了解骨髓造血功能状态和异常改 变的形态学检查方法。
形态学检查方法的价值
发现血细胞构成和形态异常
了解骨髓造血功能状态
对血液病提供确诊依据或提供重要线索 是各种血液病形态学检查的基础
H----J小体
成熟红细胞或幼红细胞胞浆内1个或多个直径
1μm暗紫红色小体 见于HA、MDS、MEGA
异形红细胞
红细胞呈不规则形,盔甲形、梨形、半月形等,
是红细胞破坏加速的证据之一 见于HA,TTP。(根据病种 不同)
球形红细胞
小而实心,中心浅染区
消失,见于HS。
多嗜性红细胞
临床分类过程中,增生程度介于两者之间,以
+/-号表示。如:增生活跃+或-。
第二部分
正常骨髓细胞形态
(一) 骨髓细胞分化
正常情况下,在造血干细胞分化、发育、 成熟的整个演变过程中,存在一定的规律性。 造血干细胞逐级分化形成各系列、各阶段的骨 髓血细胞,造血干、祖细胞在形态上无法鉴别, 分化发育为各系列原始、幼稚细胞后,其形态 学特征才较明显,才能辨认。
中幼粒
胞浆出现特异性颗粒
嗜中性中幼粒:粉黄底色,不透亮,约占6.49+2.04%。 嗜酸性中幼粒:大小一致,圆形颗粒, 灰黄色 嗜碱性中幼粒:大小不一,暗褐色,分布散乱, 覆盖核上
嗜中性、酸性、碱性颗粒比较
胞体圆形或椭圆性,直径15-20μm,核偏于一
侧,肾型或半圆型,染色质粗网状,凝聚,核 仁消失。
急、慢性髓系细胞白血病多为 (++)或(+++) 淋巴细胞白血病多无粒、无油 骨髓小粒细胞面积及细胞成分: 慢性再障多在50%以下,以非造血细胞为主 各种白血病及增生性贫血多在75%以上,以 造血细胞为主。
油滴分级(1)
(-) 无油滴 (+) 油滴少且小,细沙状均匀分布,
涂片后于血膜尾部有很少油滴 (++)油滴稍多且大,有的直径达1mm 以上,涂片后血膜尾部易见油 滴。 (+++)油滴聚集成片,不易干燥
自然晾干后备检。 瑞氏染液含美蓝和伊红两种成分 美蓝偏碱性,与细胞内酸性物质有亲和力(胞 浆), 染成兰色; 伊红偏酸性,与细胞内碱性物质有亲和力(胞核),染 成紫红色。
偏酸
合适
偏碱
五
光学显微镜使用
显微镜使用注意事项 低倍镜(10倍): 判断取材、涂片、染色是否满意,小粒、油滴分级 骨髓增生程度 估计小粒细胞面积 计数全片巨核细胞数目 寻找瘤细胞团 油镜下(100倍):观察单个血细胞形态。
油滴分级(2)
临床意义: 正常骨髓一般(+-++) 慢性再障:最为多见,达++或+++
各型急、慢性白血病多数为(-),少数为(+)
ห้องสมุดไป่ตู้
增生程度分级
增生程度
增生极度活跃 增生明显活跃 增生活跃 增生减低 增生极度减低
RBC与有核细胞之比 常见病
1:1 10:1 20:1 50:1 300:1 各类白血病 各类白血病 增贫 正常骨髓、某些贫血 慢性再障、MDS 急性再障 、急停
粒细胞系统
嗜中性 中幼粒 晚幼粒 杆状核 分叶核
原始粒细胞 早幼粒 中幼粒(特异性颗粒) 嗜酸性 嗜碱性 中幼粒 中幼粒 晚幼粒 晚幼粒 杆状核 杆状核 分叶核 分叶核
原始粒细胞
胞体圆形或椭圆行,直径12—20μm 胞核圆形或椭圆形,居中或稍偏 染色质淡紫红色细颗粒,细颗粒网状,均匀平
约占23.72+-3.5%
分叶核(嗜中性、嗜酸性、嗜碱 性)
直径10-13μm 核呈分叶状,3 -4 叶,很少5叶,叶与叶之间
有一丝相连或断开 染色质块状,分叶小于2叶,见于pelger-huet 畸形,粒细胞分叶能力减退,(MDS),分叶 大于5叶,见于 Meg A 约占9.44+-2.92%
骨髓小粒分级(1)
肉眼及低倍镜下观察: (-) 无骨髓小粒 (+) 骨髓小粒稀疏,相隔较远
(++)骨髓小粒较密集,于血膜尾部甚
易发现 (+++)骨髓小粒十分密集,彼此紧密 相连,全片都易发现
骨髓小粒分级(2)
显微镜(100 倍油镜):
估计骨髓小粒细胞面积:各种有核细胞(除脂
或消失 胞浆量多,灰兰色,许多细小沙砾状嗜天青颗 粒 (见于急、慢性单核细胞白血病)
成熟单核细胞
胞体稍小,直径12-20μm 核居中或偏一侧,形状不规则 染色质凝聚如筛底或粗线条状,不形成块状
胞浆浓(深)蓝色,着色不均,边缘着色深,
核周浅染,无颗粒,有钝伪足 比例 0.03-0.05%
早幼红细胞
圆形,直径15---18μm 核圆形,略偏位,染色质开始凝聚,核仁消失 胞浆量增多,蓝色,无颗粒
比例 0.92-0.41%
中幼红细胞
胞体圆形,直径8—18μm 核圆形,居中,或偏位,染色质凝聚小块直至碎 墨块状 核、浆各占半,浆灰兰色,淡兰色 比例 7.41-1.91%
肪细胞外)占整个骨髓小粒面积的百分比,在 正常骨髓中,小粒细胞面积50-75%。
小粒分级(3)
细胞成份分析:造血细胞、非造血细胞。 造血细胞: 幼稚粒、红细胞 非造血细胞: 脂肪细胞、成熟淋巴细胞、 浆细胞、组织嗜碱细胞、 网状细胞等。
骨髓小粒分级(4)
临床意义 骨髓小粒:正常骨髓中+-++
形态学检查方法的局限性
不能了解骨髓结构
不能了解细胞分子生物学特性和功能
内
容
第一部分 标本制作 第二部分 单个血细胞形态(重点) 第三部分 骨髓和外周血有核细胞构成比
第四部分 骨髓报告书写格式(重点)
第一部分
标 本 制 作
一、骨髓血细胞检查适应症
多次检查外周血有异常(数量、形态) 原因未明的肝、脾、淋巴结肿大 不明原因的发热
幼稚淋巴细胞
体积与原淋相似,胞核有小凹陷 染色质粗糙,核仁消失 胞浆淡蓝色,偶有少许嗜天青颗粒
(ALL,CLL)
成熟淋巴细胞
直径5-18μm 染色质致密块状,有假核仁 胞浆量少,兰色,透亮,少许嗜天青颗粒,大
淋巴细胞,胞浆量多 存在于正常骨髓中,约占15%-25%
胞核:
体积由大---小,成熟红细胞无核 染色质: 细致疏松---粗糙紧密块状 核膜: 不显著---显著 核仁: 清楚---不清---消失 胞核与胞浆体积之比: 大----小 细胞发育成熟过程: 原始---早幼---中幼---晚幼---成熟细胞
以红细胞系统的成熟过程为例
1-2 单个细胞观察顺序
晚幼红细胞
直径7—13μm 核圆形,偏位明显,染色质凝聚成大块或团块
状,甚至固缩不能看出任何结构(碳核) 胞浆量增多,淡灰或粉红色 比例 10.75-2.36%
成熟红细胞
呈双面凹圆盘形,直径7-8μm 中央为1/3淡染区
原始红、早、中、晚幼红比较
巨幼细胞贫血(MegA)
嗜酸性中、晚、杆、分
3 淋巴细胞系统
原始淋巴细胞 圆形或椭圆形,直径10-20μm, 核居中,略偏位,有切迹,
染色质深紫红色,粗糙,正副染色质不透亮,
排列成粗网状,厚,核仁模糊1-2个,有凹陷 胞浆天兰色,兰色窄带绕核,透亮,无颗粒 (正常骨髓中见不到,多见于ALL,或淋巴细 胞增殖性疾病)
叶酸、VB12 缺乏,骨髓中出现巨幼红细胞, 分早巨幼红细胞、中巨幼红细胞、晚巨幼红细
胞三个阶段 与相对应阶段的正常幼红细胞比,其特点: 1 胞体大 2 胞浆丰富 3 核发育落后于浆,染色质疏松
早巨幼和早幼红
中巨幼和中幼红
晚巨幼和晚幼红
病理情况下成熟红细胞 形态
胞浆灰红或灰兰色,为晚幼红脱核后,反映骨
髓造血旺盛,HA时多见,再障时少见。
Cabot环
淡紫红色线条,“8”形,
圆形。多见于HA。
椭圆形红细胞
见于遗传性椭圆形红细
胞增多症。
口形红细胞
红细胞中心一条苍白裂
隙,似金鱼嘴。
泪滴形红细胞
多见于骨髓纤维化。
红细胞大小不均
同一患者涂片红细胞大小显著,直径相差2-3
坦,淡蓝色小核仁3-5个,外凸 胞浆量少,天蓝色透亮,无颗粒(1型 )
原粒1型
原粒11型
在I型基础上 胞浆有少数 细小颗粒, 但无Golgi区
早幼粒
胞体较原始细胞大,胞浆稍多 胞浆出现粗大嗜天青颗粒, Golgi发育(核附
近有淡染区) 胞核圆形,有偏位 染色质粗网状,聚集,核仁1-4个或消失 约占1.57±0.6
必要时行胸骨穿刺,胫骨(儿童) 骨髓穿刺成功的标志: 1.抽吸骨髓时患者感锐痛 2.外观红色粘稠状、有骨髓小粒、油滴。 3.显微镜下见有骨髓成分(如幼红细胞、幼粒 细胞、巨核细胞、浆细胞、网状细胞等)
三、血液和骨髓标本的 制作
四、血液和骨髓标本的瑞氏染色
选取长短厚薄适宜的涂片 (骨髓2张、血片2张) 瑞氏染液:缓冲液 1:2,时间1小时,小水流冲洗,
恶性肿瘤史 有无转移,不名原因骨痛、骨质破
坏等。 助诊溶酶体贮积症(即类脂质沉积病) 进行血液病鉴别诊断和疗效观察
骨髓血细胞检查禁忌症
凝血因子严重缺乏的出血性疾病,如血友病。
穿刺部位有炎症或畸形
晚期妊娠的妇女做髂骨穿刺要谨慎
二、血液和骨髓标本的来源
部位: 髂前上棘或髂后上棘穿刺
1-1 血细胞成熟过程规律
胞体:大 小 巨核 小 大 胞浆: 细胞越幼稚,染色越深;
细胞越成熟,染色越浅淡 胞浆染色:深蓝(原始)---蓝色(早幼)---浅 蓝(中幼)---粉色 颗粒变化:无颗粒(原始)---嗜天青颗粒(早 幼)---特异性颗粒(中性粒、嗜酸 粒、嗜碱粒)。 胞浆量: 少 多