多肽合成中的具体问题

20168:（methylacryamide)-GGGGRGDS
这条序列在合成过程中并不困难，卢经 理建议我在这条肽的切割过程中注意切割液 的酸浓度不要太高，我猜想有可能是因为酸 浓度过高会影响2-甲基丙烯酸的性质，从而 影响多肽的合成效果。
所以在这条肽的切割过程中主要以改变 切割液酸的浓度的方法来观察对序列产物效 果的影响。
之前季海建做过一条C端侧链接2-甲基丙烯酸 的多肽：19545 HSNGLPLGGGGK(methylacryamide) 考虑到这条肽与20168有些相似，所以拿这两条肽来 比较一下。
20168纯品分析
6.487'
19545纯品分析
mV 160
mV 6ຫໍສະໝຸດ Baidu0
560
480
120
320
80
240
60
1200
1000
800
600
0 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 min
5.383'
200
3.003'
6.293'
400
2、TFA/苯甲硫醚/苯甲醚/EDT 85/8/4/3 （粗品分析图）
640
6.487' 6.767'
mV
560
480
400
320
240
160
80
0
-80 2.4 3.2 4 4.8 5.6 6.4 7.2 8 8.8 min
由于造成多肽合成产物分析结果不同 的其他因素还有很多（比如说在序列合成 时反应条件以及切割条件 .... ），要想确 定 2- 甲基丙烯酸在多肽上的连接位置对多 肽合成产物效果的影响，还要进行更多的 实验。
谢谢！
探讨 Methacrylic acid 在多 肽合成中出现的问题
-----吴辉
Methacrylic acid
中文名：2-甲基丙烯酸
结构简式：

原料性质 ：
甲基丙烯酸为无色结晶或透明液体， 有刺激性气味。可溶于乙醇、乙醚等多 数有机溶剂。易聚合成水溶性聚合物。 可燃, 遇高热、明火有燃烧危险, 受热分 解能产生有毒气体。
8.515' 4.860' 7.842'
160
40
80
6.767'
20
0.361'
0
0
-80 2.4 3.2 4 4.8 5.6 6.4 7.2 8 8.8 min
3 6 9 12 15 18 21 24
7.211'
400
100
8.812'
140
7.948'
27min
从两条肽的纯品分析情况来看，在 19545 中将 2- 甲基丙烯酸接在侧链时得到的 多肽产物比较杂，纯度也较差；而 20168 中 将2-甲基丙烯酸接在主链上时得到的多肽产 物纯品纯度较高。并且 19545 在合成过程中， 难度也较大。 两条肽纯品分析结果差异较大可能是因 为2-甲基丙烯酸的连接位置不同，也有可能 是两条肽的主链有较大的差异（ 19545 在接 2-甲基丙烯酸前没有对直线进行分析，有可 能是直线效果不好）...
对19545（HSNGLPLGGGGK(methylacryamide) ）进 行分析，首先从主链看，序列最后接上的是组氨酸， 由于组氨酸较于其他氨基酸稳定性较差，在合成过程 中特别容易产生消旋。（查阅相关文献：多肽合成过 程中，部分氨基酸在活化的过程中会导致不同程度的 消旋，特别容易消旋的氨基酸有：Cys，His，Phe） 由于消旋化对于多肽合成和纯化工艺具有很大的重要 性，对于一个10肽,如果每个氨基酸仅发生1%的差向 异构化,则合成终产物的光学纯度就只有90.4%,而对 于一个50肽,其光学纯度则仅有60.5%。最后可能导致 纯化的分析结果很差。 目前已经将 19545 重新合成，在合成过程中可以 通过采用高效缩合试剂，减少反应时间，来减少消旋 的比例。
3、TFA/苯甲硫醚/苯甲醚/EDT 80/10/6/4 （粗品分析图）
6.148'
mV 1600
1400
1200
1000
800
600
400
200
0
-200
2.1
2.8
3.5
4.2
4.9
5.6
6.3
7
7.7
min
结论
从上面三个切割方法得到的粗品分析图 可以看出，各种切割途径下得到的粗品效果 都比较好，没有多大的区别。所以得出的结 论是在切割过程中改变酸的浓度对序列产物 效果的影响并不大。
1、TFA/苯甲硫醚/苯甲醚/EDT
90/5/3/2 2、TFA/苯甲硫醚/苯甲醚/EDT 85/8/4/3 3、TFA/苯甲硫醚/苯甲醚/EDT
80/10/6/4
保持切割时间相同，都为2.5h。
1、TFA/苯甲硫醚/苯甲醚/EDT
mV 1600
6.060'
90/5/3/2
（粗品分析图）
1400
还有在切割过程中，切割液里的EDT 可能会对2-甲基丙烯酸产生影响，所以 在切割重新合成的 19545 时要注意控制 EDT 的量，尽量减少对 2- 甲基丙烯酸的 影响。
最后猜想可能是将 2- 甲基丙烯酸接 到侧链上时，有可能会降低序列产物的 效果，而将2-甲基丙烯酸接到序列主链 上时序列产物的效果会好很多。