糖尿病的实验室检

75g葡萄糖负荷后2小时血糖≥11.1mmol/L
实验室检查

OGTT-胰岛素（或C-肽）释放试验 HbA1c 胰岛自身抗体 尿系列蛋白
一、口服葡萄糖糖耐量试验（OGTT）
1. 禁食12-14小时，早晨空腹采抗凝静脉血2ml，测血糖， 口服75克葡萄糖（溶入200-300ml水中），3-5分钟 内全部服完，记录开始服糖时间，在服糖后2小时 （2小时的血糖值是诊断糖耐量异常或糖尿病的重要指 标）采抗凝静脉血2ml，测血糖，必要时可采服糖后 第1、3、4小时的血。
3．正常参考值（化学发光免疫测定法）： 空腹 C肽 298－1324 pmol / L， ⑴ 正常人采用75克葡萄糖法或馒头餐试验，C肽浓度在服糖后 （或馒头餐后）0.5-1小时达高峰，可比空腹C肽浓度高3-5倍， 3小时后降至接近正常水平。 ⑵ 胰高血糖素刺激后C肽峰值在6分钟左右。 4．注意事项和影响因素： ⑴ 见胰岛素释放试验。 ⑵ 胰高血糖素刺激试验禁用于对其成分过敏者和疑有肾上腺 腺瘤者，空腹血糖＜7mmol/L时试验结果不好分析，胰高血 糖素刺激试验与75克葡萄糖法或馒头餐试验比较重复性好、 时间短和不受慢性高血糖的影响。
B. 抗体的检测方法及原理

抗体的检测方法有多种，较为常用的方法有： ELISA（酶联免疫吸附法）： RIA（放射免疫法，放射配体检测法，放射结 合检测法）： 免疫组化法及间接免疫荧光法：

C.自身抗体检测的临床意义
1）对1型糖尿病的诊断与分型有重要意义 在新发的1型糖尿病血清中可以检测到多种 自身抗体，这对诊断1型糖尿病有重要作用。
HbF ()
Hb
Adult Hb
HbA (ßß)
HbA2 ()
Fetal Hb
97% Nonglycated HbA0
94%
2.5% HbA1
6% 5%
0.5% Glycated
A1a and A1b: concentration very low
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
HbA1a
HbA1b
HbA1c
- main glycohemoglobin - used since > 20 years for glycemic control HPLC



预报1型糖尿病的目的是预防其进一步发展为 糖尿病 自身抗体的检测可以预报1型糖尿病，从而为 发现高危人群提供了手段 在动物实验，多种方法可以预防1型糖尿病的 发生 但在人类预防1型糖尿病的发生还需要经过艰 苦的努力
小结
自身抗体的检测对1型糖尿病的诊断与分型、预报 及防治等方面均具有重要作用。
二、胰岛素释放试验
2．试验方法： ⑴ 3．正常参考值（化学发光免疫测定法）： 采用75克葡萄糖法同糖耐量试验。 ⑵ 采用馒头餐法，空腹采静脉血后，吃2两馒头（100克面粉） 空腹胰岛素 6－27 m IU/ L，胰岛素浓度在服糖后（或馒头 餐后）0.5-1小时达高峰，可比空腹胰岛素浓度高数倍至10倍， 3小时后降至接近正常水平。



1）自身抗体在1型糖尿病的前期就存在，而且研究发现自 身抗体阳性者以后发生1型糖尿病的机率远高于自身抗体 阴性者，因此自身抗体的检测在预测1型糖尿病中被广泛 采用。 2）研究表明无论在1型糖尿病的1级亲属还是在普通人群 （儿童）中，1型糖尿病只发生在那些最初有多个抗体阳 性者，目前大多报道认为如果初查时有2个以上抗体阳性， 那么6年后发生1型糖尿病的可能是50％；在多项大规模的 前瞻性研究中均发现最初自身抗体检测阴性者在随访6－8 年后不发现1型糖尿病。 3）IA－2As和GADA是最常用的作为筛查的第一线抗体。
2） 自身抗体对成人迟发性1型 糖尿病的诊断意义
成人迟发性1型糖尿病（LADA)是1型糖尿病的一种，目前对其诊 断指标尚未完全统一。一般指发病年龄>35岁，发病时没有酮症， 发病半年内不需要胰岛素治疗，但起病后β－功能逐步衰减，一 般在5－6年后大多（94%)需要都需要胰岛素治疗。病理上亦表 现为胰岛炎。发病时自身抗体的检测对LADA的诊断具有重要作 用，有人认为自身抗体阳性是诊断LADA的必备条件。
糖尿病的实验室检查
糖尿病（diabetes mellitus，DM）

由遗传和环境因素共同引起的一组以糖代谢紊 乱为主要表现的临床综合征。
分类

1型糖尿病 2型糖尿病 其他特殊类型糖尿病 妊娠糖尿病
诊断标准（WHO，1999）

症状+随机血糖≥11.1mmol/L 空腹血糖≥7.0mmol/L
a)5%－10％的2型糖尿病自身免疫抗体阳性； b) 58％的LADA表现为单一抗体阳性； c) 51％成年发病的1型糖尿病为单一抗体阳性； 只有14％的儿童糖尿病为单一抗体阳性， LADA的抗体滴度明显低于典型的1型糖尿病。 d) IA-2A在LADA检出率低，几乎与其他抗体同 时存在。
3) 自身抗体检测对1型糖尿病的预报作 用
一、口服葡萄糖糖耐量试验（OGTT）
⑶ 病人无急性疾病和影响试验的慢性疾病，每天至少摄入 碳水化合物150g，3天以上。 ⑷ 如已诊断糖尿病，可不作该试验（除非为作胰岛素或C肽释 放试验）。 ⑸ 儿童服葡萄糖按每公斤体重1.75g计算，总量不超过75g。 ⑹ 血糖测定采用葡萄糖氧化酶法，血清与血浆血糖无明显差别， 采血后应尽早测血糖，不要超过3时，否则血糖会降低。 ⑺ 根据WHO糖耐量试验要求，葡萄糖应是75g无水葡萄糖 或82.5g含一分子水的葡萄糖。 ⑻ 由于受体内吸收等因素的影响糖耐量试验的结果重复性较差。
三、C肽释放试验
5．临床应用与分析： ⑴ 了解胰岛β细胞的分泌功能, 协助糖尿病的分型, 特别是 正在使用胰岛素的病人。 ⑵ 帮助指导用药和胰岛素的使用，有报告认为胰高血糖素 刺激后C肽水平＜600 pmol /L时应考虑用胰岛素治疗。
HbA1c
HbA1c是葡萄糖分子和血红蛋白A某些部位分 子经缓慢而不可逆非酶促反应而形成的产物
4) 自身抗体与糖尿病的治疗


1）典型1型糖尿病发病即需要胰岛素治疗，因 此自身抗体对其治疗指导作用很小； 2）对成人发病的糖尿病，自身抗体的检测可 以预告其胰岛β细胞功能衰竭的发生，因此在 这类病人早期测定自身抗体，及时采取适当措 施，可能保护残存的β－细胞，起到稳定病情 的作用。
5)自身抗体与1型糖尿病的预防
尿系列蛋白测定

糖尿病肾病的早期诊断十分重要，临床上糖尿 病肾病的早期诊断主要依赖于对尿蛋白的检测。
尿蛋白种类

白蛋白(Alb)，最常用（中分子）


转铁蛋白(TRF，中分子）
IgG（大分子） 微球蛋白测定（a1-或B2-微球蛋白，小分子）


视黄醛结合蛋白(RBP，小分子)
胱抑素-C（小分子） Tamm–Horsfall protein (THP，远曲小管分泌）





诊断：缺点

一些血红蛋白亚型（如HbS、HbC、HbF、HbE等）会干扰HbA1c检测， 目前许多检测方法都可对大部分常见血红蛋白亚型进行校正，也可采用 不受血红蛋白亚型影响的试剂 任何改变红细胞寿命的因素都将导致HbA1c结果不准确，根据临床情况， 如果解释HbA1c结果有疑问，应使用传统诊断方法进行检测（如FPG、 2HPG） 一些临床少见的情况（如进展迅速的1型糖尿病），HbA1c可能无法“赶 上”急性血糖变化的速度，应根据症状及血糖来诊断糖尿病，尽管其 HbA1c未达到糖尿病诊断水平；
一、口服葡萄糖糖耐量试验（OGTT）
2．正常参考值： 空腹静脉血浆血糖 ﹤6.1mmol / L 服糖2小时静脉血浆血糖﹤7.8 mmol / L 3．注意事项和影响因素： ⑴ 试验中禁用茶、咖啡、食物和乙醇，禁烟，可站立、 慢走和端坐，不能激烈活动。 ⑵ 对糖代谢有影响的主要药物包括噻嗪类利尿剂、β受体 阻断剂、口服避孕药、甲状腺激素、烟酸、利福平和 水杨酸等，试验前应停用3天以上，正在服用糖皮质激素 者不适于作糖耐量试验。
HbA1c形成的动力学
寿命：120 days. 50% 的HbA1c值与过去30天内的平均血糖水平 相关 40%的HbA1c值与过去31 －90 天平均血糖水平 相关. 10% HbA1c 与 过去91 － 120天平均血糖水平 相关.
检测方法

阳离子交换树脂微柱层析法 HPLC 电泳法 亲和色谱微柱法
二、胰岛素释放试验
5．临床意义和应用： ⑴ 用于了解胰岛β细胞的功能，协助糖尿病的分型和指导治疗。 典型1型糖尿病胰岛素分泌曲线低平， 2型糖尿病胰岛素分泌与病程、体重和血糖高低关系密切， 病程短、肥胖和血糖控制好者，胰岛素分泌曲线有一定峰值， 但峰值后延。 病程长、消瘦和血糖控制差者，胰岛素分泌曲线低平。 ⑵ 用于胰岛β细胞瘤的诊断，胰岛β细胞瘤病人有空腹低血糖 和不适当增高的胰岛素水平。 ⑶ 胰岛素自身免疫综合征时胰岛素水平较高，体内同时存在 胰岛素自身抗体。
三、C肽释放试验
1．原理：同胰岛素释放试验。 2．试验方法： ⑴ 75克葡萄糖法见糖耐量试验。 ⑵ 馒头餐试验见胰岛素释放试验。 ⑶ 胰高血糖素刺激试验，胰高血糖素可刺激胰岛β细胞 分泌 胰岛素，其方法如下，清晨空腹静脉注射1mg胰高血 糖素， 在注射前和注射后6分钟采静脉血测血糖和C肽水平。
三、C肽释放试验
血红蛋白的糖基化
Glucose enters red blood cells where it reacts with the hemoglobin
成人糖化和非糖化的血红蛋白
Is increased in patients with ß-thalassemia, while HbA1c is reduced; in this case GHb should be measured
放免法
免疫比浊法 免疫竞争抑制法
影响因素
血红蛋白分子病、地中海贫血、溶血性贫血、 怀孕等红细胞寿命缩短，从而糖化血红蛋白的 量降低； 肾功能不全、慢性酒精中毒等减慢HB的代谢， 使其寿命延长，从而使糖化血红蛋白的量增加。
诊断：优点

比血糖检测稳定性好，精确度高，实验室变异系数小 个体内变异率小，日间差仅<2%（FPG日间差为12%-15%） 不受急性（如应激、疾病相关）血糖波动的影响； 无需空腹或特定时间取血，检测更便捷 血中浓度在取血后保持相对稳定（静脉血糖浓度随血样留置时间延长而逐渐下 降） HbA1c是反映慢性血糖水平的稳定指标，更符合糖尿病定义
二、胰岛素释放试验
4．注意事项和影响因素： ⑴ 如已确诊为糖尿病，为了解胰岛功能可考虑用馒头餐试验， ⑵ 对糖耐量试验有影响的药物和疾病同样会影响胰岛素释放 试验。 ⑶ 试验当天早上不能使用降糖药物和胰岛素。 ⑷ 有些药盒不能区分胰岛素原和胰岛素原裂解产物，注射外源 性胰岛素产生的胰岛素抗体可干扰胰岛素测定。 ⑸ 正在使用胰岛素的病人，特别是中长效胰岛素，会影响测定 结果（测定值包括了内源性和外源性胰岛素），应测定C-肽 水平。 ⑹ 糖尿病人的胰岛β细胞功能受糖尿病类型、体重、病程和 血糖高低等因素的影响。
血 浆 蛋 白 肾 小 球 滤 过

N-乙酰-B-氨基葡萄糖转移酶 （NAG，近曲小管排泌））

正常情况下血清蛋白：
不易被肾小球滤过 可被近端肾小管以吞饮方式重吸收



一些地区不能承受将HbA1c作为常规检查的费用，只能用点血糖测定。
胰岛素自身抗体

A.1型糖尿病自身免疫抗原及抗体 B.常用测定方法 C.临床意义
A.1型糖尿病自身抗原及抗体





1） GAD65与GADA （glutamic acid decarboxyase antibody,GADA）； 2） IA-2与IA-2As （protein tyrosine phosphatase-like protein antibodies,IA-2As） 3） 胰岛素（Insulin)与IAA (insulin autoantibody,IAA)及IA（insulin antibody） 4） ICAs （islet cell antibodies,ICAs）所对应 的抗原 5）其他：目前性质还不清楚的蛋白分子。