有机化学实验薄层色谱法分离原理解析

薄层粘合剂及其他添加剂
❖石膏（10—15%）、羧甲基纤维素钠（CMC）（0.5— 1%）、淀粉（5%）、聚乙烯醇（0.5—1%）等。 ❖添加1.5%的硅酸锌锰（Zn2SiO4∶Mn），制成荧光板。 ❖加入硝酸银可制成硝酸银薄板，用于分离含π键的顺、反异 构体。 ❖添加硼酸制成的薄层板则可以分离单糖类化合物异构体。
基本原理：不同物质与吸附剂（固定相）之间的吸附力不同； 不同物质在溶剂（流动相）中的溶解度不同；达到分离的目的。
Rf的特性和应用： 在固定条件下，特定化合物的Rf值是一个常数 因此，在条件完全相同的情况下，Rf值可以作为该化 合物定性检定的物理指标，就像测定熔点或其它物 理常数一样 为了获得相同的色谱条件，通常是把未知样 和标准样同时滴加在同一块薄板上
氧化铝板200～220℃活化4h，得活性为Ⅱ级的板。150～ 160 ℃ 活化4h，得活性为Ⅲ～Ⅳ级的板。
点样
点样工具：微量注射器；玻璃毛细管。 点样方法：液体直接点样法；固体添埋法。 样点式样：点型；线型；条型。
点样应注意的问题：
点样斑点的大小：一般点样斑点直径不大于3mm； 点样量：0.25mm薄层，一般点样量为几微克～几百微克作定性 分析；2mm层厚，点样量可达几十毫克～几百毫克作制备。 点样位置：距底边约1.5~2cm的起始线上，点与点之间的距离一 般为1cm。
（三）、展开剂及其选择
•大原则：选择展开剂一般需要针对吸附剂的种类、活度 和被分离混合物的组成及各成分的性质结构和性质等情况 综合而定。 •小原则：被分离物质和展开剂之间的极性关系应符合 “相似相溶原理”。该原则可用于确定展开剂的大致范围。
四、基本操作 1．薄层板的选择和铺制 （1）薄板的选择 最常用的薄板是玻璃板，其大小选择：根 据目的、样品量、组分的数目多少和展开的方式等综合而定。 玻璃板要求：平整、光滑、干净。
薄层色谱实验
有机化学实验
色谱法 薄层色谱法(THIN LAYER CHROMATOGRAPHY, TLC)
TLC定义：把吸附剂(硅胶)铺在玻璃板上，将样品点在其上，然 后用溶剂展开，使样品中各个组分相互分离的方法。
特点：简便、快速、微量的分离分析技术，应用广泛。 基本原理：不同物质与吸附剂（固定相）之间的吸附力不同；不Байду номын сангаас同物质在溶剂（流动相）中的溶解度不同；达到分离的目的。
图 3—28 各种点样方式示意图
4．展开/展层
展开/展层的概念：
展层的容器：除了专用的色谱缸外，常见玻璃标 本缸、染色缸、广口瓶、大量筒、大试管等可作 为其代用品。
展层方式：上行法、下行法、双向法、梯次上行 法。
（a）倾斜上行法展开
（b）直立式展开
1—色谱（缸 a）2—倾薄斜 层板上行3—法展展开剂开 1—色谱缸 2—薄层板 3—展开（剂b）4直—展立开式剂展蒸气开
1—色谱缸 2—薄层板 3—展开图剂3—291—色谱缸 2—薄层板 3—展开剂
5．显色/检出
检出方法： 物理法——紫外光照射 化学法——喷洒化学试剂
6．Rf的测量及定性、定量测定
Rf值测量：斑点轮廓→斑点重心位置→斑点中心到点样原点距离→展开剂前沿到点样原点距离→Rf 值计算
标准物质比较法——比较样品和标准物质在同一薄板上的Rf值； 仪器分析法——将斑点物质分离出来，用仪器(NMR,MS)测定其物化性质并与已知物的物化 性质比较。
制板方法之湿铺法 概念：将溶剂或含粘合剂的溶剂和吸附剂按一定的比例，加 到一起，调成糊状，然后再将糊状物均匀的铺在薄板上的方 法
薄板的后处理：晾干后，活化。
硅胶板一般在105℃,最高不超过128℃ ，烘箱中烘烤半小 时，冷却后取出在干燥器中保存备用。
作为分配色谱的硅胶薄层板无需活化，在室温下放置 12h～24h后即可使用；
标准样
未知样
（二）、吸附剂
►最常用的吸附剂有硅胶、氧化铝，粒度一般为150~300目 筛孔，其次是聚酰胺和纤维素，其粒度一般分别为70~140 目筛孔和160~200目筛孔。
►氧化铝的极性比硅胶大，比较适用于分离极性较小的化合 物（烃、醚、醛、酮、卤代烃等）；相反，硅胶适用于分 离极性较大的化合物（羧酸、醇、胺等）。