微生物检验相关知识考核试题答案

微生物检验相关知识

培训试题答案

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一、填空题（每空3分，共75分）

1、微生物计数试验环境应符合微生物限度检查的要求。检验全过程必须严格遵守无菌操作，防止再污染，防止污染的措施不得影响供试品中微生物的检出。单向流空气区域、工作台面及环境应定期进行监测

2、计数方法包括平皿法、薄膜过滤法和最可能数法（MPN法）。检查时，按已验证的计数方法进行供试品的需氧菌总数、霉菌和酵母菌总数的计数。

3、做微生物检测实验的前期准备工作中，应开启微生物检测室紫外灯和空调净化系统，并使其工作不低于30min。

4、将供试品及所有工具、稀释液、培养基等移至传递窗内。每次试验所用物品必须事先计划，准备足够用量，避免操作中出入操作间。

5、操作前先用75%乙醇棉球擦手，再用75%乙醇棉球擦拭供试品瓶、盒、袋等的开口处周围，待干后用灭菌的手术镊或剪将供试品启封。

6、根据供试品的理化特征与生物学特性，采取适宜的方法制备供试液。供试液制备若需加温时，应均匀加热，且温度不应超过45℃。供试液从制备至加入检验用培养基，不得超过1小时。

7、检验量即一次试验所用的供试品量（g、ml、cm2）。一般应随机抽取不少于2个最小包装的供试品，混合，取规定量供试品进行检验。

8、平皿法检测时，每稀释级每种培养基至少制备2个平板。将预先配制并灭菌的培养基（需氧菌总数计数用胰酪大豆胨琼脂培养基，霉菌和酵母菌总数计数用沙氏葡萄糖琼脂培养基）置45℃水浴中，备用。将45℃左右的培养基倾注上述各个平皿约25ml ，以顺时针或反时针相同一方向方向快速转动平皿（勿使培养基溢出）使供试液与培养基混匀，放置，使其冷凝。

9、阴性对照系以稀释液代替供试液进行阴性对照试验，阴性对照试验应无菌生长。如果阴性对照有菌生长，应进行偏差调查。

10、需氧菌总数计数平板倒置于30～35℃培养箱中培养5 天。霉菌和酵母菌总数计数平板倒置于20～25℃培养箱中培养7 天。

11、如各稀释级的平板均无菌落生长，或仅最低稀释级的平板有菌落生长，但平均菌落数小于1时，以＜1乘以最低稀释倍数的值报告菌数。

12、薄膜过滤法所采用滤膜孔径应不大于0.45µm ，直径约为50mm。滤器及滤膜使用前应采用适宜的方法灭菌。使用时，应保证滤膜在过滤前后的完整性。

13、检测纯化水时，用0.9%无菌氯化钠溶液冲洗滤膜。冲洗后取出滤膜，菌面朝上贴于R2A琼脂培养基上培养。每种培养基至少制备一张滤膜。滤膜贴于平板上时不得有空隙或气泡，否则影响微生物的生长。每片滤膜上的菌落数应不超过100cfu 。

14、供试品检出控制菌或其他致病菌时，按一次检出结果为准，不再复试。阳性对照试验方法同供试品的控制菌检查，对照菌的加量应不大于100cfu 。阳性对照试验应检出相应的控制菌。

15、供试品的制备：取供试品10g，用pH7.0无菌氯化钠－蛋白胨缓冲液稀释制成1：10供试液；检测沙门菌时，应取10g或10ml供试品直接接种至100ml胰酪大豆胨液体培养基中。

二、判断题（每题5分，共25分）

1、若麦康凯琼脂培养基平板上有菌落生长，则判判供试品检出大肠埃希菌。（×）

2、麦康凯液体培养物划线接种于麦康凯琼脂培养基平板上，30～35℃培养至多48小时。RV沙门增菌液体培养物划线接种于木糖赖氨酸脱氧胆酸盐琼脂培养基平板上，40～44℃培养18～48小时。（×）

3、鉴定木糖赖氨酸脱氧胆酸盐琼脂培养基平板上生长的菌落是否为沙门菌时应选用三糖铁琼脂培养基。（√）

4、水溶性液体制剂也可用混合的供试品原液作为供试液。水不溶性非油脂类供试品

中分散力较差的供试品，可在稀释液中加入表面活性剂如0.1﹪的聚山梨酯80，使供试品分散均匀。（√）

5、供试液的稀释，取1:10均匀供试液1ml，加入装有9mlpH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液的试管中混匀，即为1:100供试液。以此类推，根据供试品污染程度，可稀释至1:1000、1:10000等适宜稀释级。每递增1稀释剂，可不另换一支吸管。（×）