微生物检验基础知识汇总!

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一、分类细菌属于原核细胞型微生物。

最精确的方法为遗传学分类方法。

最常用的是经典传统分类法：根据细菌的亲缘关系，界门纲目科属

种型株分类。

科：由共同关系的属组成，如肠杆菌科；

属：是种的高一级分类单位，通常包含有共同特征或关系亲密的种，用以描述微生物的主要特征，如埃希氏菌属；

种：是分类等级的基本单位，同一种微生物形态、生理学特征和组

成成分基本相同，用以描述微生物的次要特征，如大肠埃希氏菌；

菌株或品系：同一种微生物中不同来源的纯培育物，如大肠埃希氏

菌CGMCC 1.3373。

二、细菌形态学及形态学检查法

细菌形态结构主要指细菌的大小、外形、排列及超微结构。细菌

结构与其生理功能、致病性、免疫性有关。

2.1形态结构

2.1.1基本形态3类：球菌、杆菌、螺旋菌，杆菌是最常见的形态。

2.1.2大小

测量细菌大小的单位为微米m。球菌以直径表示大小，杆菌以长与

宽表示大小，同一种细菌在不怜悯况下大小形态也有差别：涂片干燥、固定、染色时细菌收缩；快速生长的球菌往往呈短杆状。

菌龄与细菌大小的关系受很多因素影响，主要与代谢废物的积累及培育基中渗透压上升等因素有关。

2.1.3结构

基本结构：细胞壁、细胞膜、细胞质、核质；

特别结构：鞭毛、菌毛、荚膜、芽孢等。

菌毛是什么？

菌毛（Pilus）很多革兰氏阴性菌菌体表面遍布的比鞭毛更为细、短、直、硬、多的丝状蛋白附属器，也叫做纤毛（Fimbriae)。其化学组成是菌毛蛋白（Pilin），菌毛与运动无关。菌毛可分为一般菌毛(Commonpilus)和性菌毛(Sexpilus)两种。一般菌毛长0.3～

1.0um,直径7nm。具有粘着细胞（红细胞、上皮细胞）和定居各种细胞表面的力量，它与某些细菌的致病性有关。无菌毛的细菌则易被粘膜细胞的纤毛运动、肠蠕动或尿液冲洗而被排解，失去菌毛，致病力亦随之丢失。性菌毛有的细菌还有1～4根较长的性菌毛，比一般菌毛而粗，中空呈管状。性菌毛由质粒携带的一种致育因子（Ferility factor）的基因编码，故性菌毛又称F菌毛。带有性菌毛的细菌称为F+菌或雄性菌，无性菌毛的细菌称为F-菌或雌性菌。F+菌体内的质粒或染色体DNA可通过中空的性菌毛进入F-菌体内，这个过程称为接合（conjugation）。细菌的毒性及耐药性等性状可通过此方式传递，这是某些肠道杆菌简单产生耐药性的缘由之一。

2.2形态学检查法

分为不染色标本检查法和染色标本检查法。

不染色标本检查法：依靠一般显微镜，虽可观看细菌大小、形态，

但主要用于观看细菌的动力。

观看细菌有动力时，应选用新奇的幼龄培育物（对数期），并在20℃以上室温中进行，同时应把握区分细菌真正运动与溶胶的布朗运动。常用的方法有压滴法、悬滴法、暗视野映光法等。

染色标本检验法：分为单染色法、复染色法、特别染色法。

观看细菌菌毛应使用鞭毛染色法。

细菌学中最常用的鉴别染色法是革兰氏染色法。

基本步骤为：涂片干燥固定染色

革兰氏染色的结果与培育基成分、培育条件及操作技术等有着亲密

关系。酒精脱色为关键步骤。

三、细菌生理学

3.1化学组成

水、蛋白质、糖类、脂类、无机盐、核酸、维生素，各种组成随细

菌种类、菌龄、细菌所处环境不同而有差异。

固形成分占菌体质量15%~25%，其中碳、氢、氧、氮四种元素占

90%~97%，其他元素占3%~10%。

水分：占细菌质量75%~85%，芽孢约40%。繁殖体内主要是游离水，

芽孢内主要是结合水。结合水不易蒸发，不冻结，不能作为溶剂，

也不能渗透。

蛋白质：分布在菌体各个组成部分，占菌体固形成分50%~80%。除

少量白蛋白、球蛋白等单纯蛋白质外，绝大部分与其他物质结合成

复合蛋白质，如核蛋白、糖蛋白、脂蛋白等，其中核蛋白含量最高。蛋白质是维持细菌生命活动的最基本物质，是细菌酶类的主要组成

部分。

核酸：分RNA（细胞质、细胞膜中，约占固形成分10%）与DNA（染

色体、质粒中，占固形成分3%左右）两种。

糖类：占固形成分10%~30%，主要以多糖形式存在，如荚膜多糖、

纤维素、淀粉、糖原等。

脂类：细菌体内能量储存场所。

无机盐类：调整剂渗透压和维持酶活性的作用。

其他：生长因子主要是B族维生素，大多数是菌体内的辅酶成分。

色素种类许多，一般都是含氮的有机物。

3.2物理性状

带电现象：菌体蛋白质由很多氨基酸组成。氨基酸是兼性离子，在

等电点时，其所带正电荷与负电荷相等。革兰氏阳性菌pH2~3，革

兰氏阴性菌pH4~5。一般培育、染色、血清学试验中，多数为中性

或弱碱性环境，pH值高于细菌等电点，均带负电荷。环境中pH值

越高所带负电荷越多。带电现象与细菌的染色反应、凝集反应、抑菌、杀菌作用等都有亲密关系。

多相胶体：原生质中具有多种蛋白质，成分结构各不相同，为多相胶体，因此可同时进行各种性质不同的生化反应。细胞外浓度较低的化学物质可被原生质中的某一相选择性的汲取浓缩于细胞内。

表面积：单位体积的表面积比其他大生物的表面积大。每立方厘米葡萄球菌的表面积为60000cm细胞壁和细胞膜都有半渗透性，汲取养分和代谢产物均依靠于这种通透作用。细菌具有坚韧的细胞壁，除能耐受菌体内部的高渗透压外，还能爱护细菌在渗透压较低的环境中不致裂开，但在纯水中也不免汲取水分而胀裂。

3.3代谢

细菌为了生长繁殖，必需从环境中吸取养分物质作为能源和基本原料，并排出不需要的产物，这些生化过程称为细菌的代谢，包括分解代谢和合成代谢。

3.3.1分解代谢及生化反应

定义：将简单的养分物质分解为简洁的化合物，一方面供应合成菌体成分的原料，一方面从物质分解中获得能量。

（1）糖类：大多数细菌能利用糖，由于各种细菌所具有的酶系统不同，故分解糖类的力量也不同。基本的糖代谢过程：多糖单糖丙酮酸，而丙酸酮进一步分解的后续过程则因各种细菌而异。

1）糖发酵试验：常常用于细菌的鉴别。如大肠埃希氏菌，使丙酮酸生成甲酸，并由甲酸解氢酶分解甲酸生成CO2和H2，所以分解葡萄