夫精人工受精
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式。
AIH适应证
男方少精、弱精、液化异常、 性功能障碍、生殖器畸形 女方宫颈因素 女方生殖道畸形或心理因素 致性交不能 免疫性不育 原因不明性不育 轻度子宫内膜异位症
AIH禁忌证
男女双方或其中一方: 患有生殖泌尿系统急性感染或性传播疾病 患有严重的遗传、躯体疾病或精神心理疾病 接触致畸量的射线毒物药品并处于作用期 有吸毒等不良嗜好 对人工受精有顾虑 女方: 双侧输卵管梗阻 生殖器官严重发育不全或畸形
2、密度梯度离心: 密度梯度离心法利
用不同成熟阶段的精子与精液中其他细胞
成分的密度差异,在离心力的作用下,使 其分别停留在不同溶液的不同密度界面上, 将其进行分离,尤其对精液十分粘稠和少、 弱精患者标本有较好的分离效果。
(1)在离心管底部加入1.5~ 2.0ml高密度精 子分离液,在上层再加入1.5~ 2.0ml低密度 精子分离液,最上层再加入1.5~ 2.0ml精液, 每层之间要有清晰的界面; (2)300g离心15~20分钟; (3)去上清,加入2.0ml培养液悬浮, 200g 离心5分钟; (3)去上清,加入适量培养液悬浮,调整精 子密度10~30 106/ml,备用。
常用促排卵方案1
CC+HCG:于月经周期的第5-9天口服克罗 米酚(CC),每日一次,每次50-100mg,接着 口服小剂量雌激素,己烯雌酚0.25mg/d或补佳 乐0.5mg/d,连用7-15天。自月经周期第11天 起开始B超监测卵泡发育,主导卵泡直径达到 18mm以上时,肌肉注射HCG10000IU。
2、子宫内膜监测:A型子宫内膜:呈三 线状,在子宫纵切面可以看到三条线形强回 声。B型子宫内膜:内膜与周围肌层等回声, 中线回声可见但不强。C型子宫内膜:内膜与 周围肌层相比较呈均匀的强回声。A、B型子 宫内膜,厚度在8mm以上时,妊娠率相对较 高。
3、激素测定:(1)E2:卵泡发育过 程中主要分泌雌二醇,循环中95%的E2来自 优势卵泡,排卵前24-36小时E2达到高峰, 排卵后循环中的E2迅速下降,3天时间降到 最低值,约为峰值的50%,排卵后一周左右 黄体形成,E2再度升高形成第二峰。LH峰 之前每个直径17mm以上的卵泡E2水平平均 250-500pg/ml。
常见的方法有上游法、密度梯度法、 洗涤法等。 1、上游法:利用精子可以主动 游过液体界面进入不同培养液的能 力,将活动精子与死亡/不动精子、 凝集精子、细胞杂质分离。此方法 适用于正常精液标本,精子回收率 较高,回收的精子中活动精子可在 90%以上。
直接上游法: (1)取试管数只,每管加入2.0ml培养液; (2)每个试管底部加入0.5ml液化后的精液 标本,小心不要破坏分界面; (3)将试管倾斜45º 放置在37°C、5%CO2 培养箱中30~60分钟; (4)收集各试管含有精子的上层培养液, 200g离心5分钟; (5)去上清,加入2.0ml培养液悬浮, 200g 离心5分钟; (6)去上清,加入适量培养液悬浮,调整精 子密度10~30 106/ml,备用。
授 精
授精时间 LH阴性:注射HCG后 月36小时授精。 LH阳性:注射HCG后 月36小时授精。 授精方法 取膀胱截石位,生理 盐水擦洗外阴、阴道及宫颈, 抬高臀部,注射器内先吸取 培养液,接上授精导管,将 培养液推出,冲洗授精导管, 抽取0.5ml制备好的精子悬 液,经宫颈进入5~6cm处, 将精子液注入子宫,缓慢退 出导管,原位休息15~30分 钟。
洗涤后上游法: (1)取适量液化后的精液,加入等体积或 2~3倍体积的培养液,混匀后200g离心5分 钟; (2)去上清,加入2.0ml培养液悬浮, 200g 离心5分钟; (3)去上清,将沉淀轻轻打散,小心加入 2.0ml培养液,将试管倾斜45º 放置在37°C 、5%CO2培养箱中30~60分钟; (4)收集含有精子的上层培养液,调整精子 密度10~30 106/ml,备用。
精液通常在IUI前2小时采集, 之后进行体外优化处理。IUI时 注入宫腔内的前向运动精子 (a+b级精子)总数不低于 1×106个。 1.精液采集 采集精液前应禁欲3-5天, 手淫法采集标本到无细胞毒性 的无菌容器中,要标明姓名、 日期和采集时间。标本采集要 完整,部分前列腺炎症或白细 胞精子症患者可采用分段法采 集。精液标本采集后置于2535º C环境中,待其液化后进行 处理,处理前放置时间应不超 过一个小时。
药物促排卵和监测卵泡发育
人工授精可以在自然周 期或药物促排卵周期进行, 多数资料显示,促排卵周期 实施人工授精治疗可以取得 相对较高的妊娠率。由于促 排卵后多胎妊娠比例明显上 升,因此应严格掌握促排卵 的指征和促排卵药物的品种、 剂量,控制好卵泡发育的个 数,尽可能避免多胎妊娠。 一旦发生多胎妊娠,及时实 施选择性减胎术治疗。
2、异常精液标准
(1)少精子症 <20 106/ml; 密度
(2)弱精子症 V级活 动精子<25%或~V级活动 精子<50%; (3)畸精子症 态精子低于30%; 正常形
(4)少、弱、畸精子症
精液处理方法:首先肉眼观察精液 的外观、体积、黏稠度、液化时间, 其次显微镜下观察精子的密度、做 活力的评估、观察是否凝聚。
人工授精术前准备工作
女方:采集病史、体格检查、妇科检查、辅 助检查(超声、乙肝五项、HIV(艾滋)、 HCV(丙肝)、梅毒、血型、甲功、性激素检 查。 男方:精液检查(明确生育能力)、生殖器检 查、辅助检查(除超声外同女方) 介绍成功率、花费、并发症、还要随访,签 署同意书、检查三证(结婚证、身份证、生 育证)。
卵巢过度刺激综合征(OHSS)
OHSS是药物促排卵治疗特有的最严重的并发症。在接受促 排卵治疗的患者中,OHSS总体发生率约为23.3%,重度 OHSS发生率约为0.008%~10%(一般﹤2%),可危及患者 的生命。严重OHSS的主要的病理改变是:①卵巢增大,特 征是卵泡囊肿及黄体囊肿形成,间质水肿;②毛细血管通透 性增加,引起急性血液外移、胸腹水,甚至全身水肿,血液 浓缩,肝、肾灌注量减少,严重肝、肾功能损害,低血容量 休克,凝血障碍,血栓形成。后者是发病与死亡的主要原因。 OHSS的发生与严重程度与患者的敏感性、药物的种类、剂 量和是否妊娠等有关。药物中以HMG(人绝经后促性腺激 素 )最易导致OHSS,而氯米芬的危险性最小,受孕周期的 OHSS发生率为非受孕周期的4倍。(OHSS的分类及机制和 治疗以后再共同学习)
(2)LH测定:卵泡成熟,E2达到高峰诱 导LH峰的出现,LH(内源性黄体生成素)峰 引发排卵。血LH峰的起始在排卵前32小时、 顶峰在排卵前16.5小时出现,尿LH峰比血LH 峰晚出现6-7小时,与血LH水平有很好的相关 性且尿LH检测快捷方便。在卵泡近成熟时, 每隔4-6小时测定一次,排卵一般在尿LH峰出 现的14-28小时内发生。
常用促排卵方案3
HMG+HCG:于月经周期的第5天起每日注 射HMG75-150IU,自月经周期第10天起开始
B超监测卵泡发育,根据卵泡发育情况,每57天增加注射HMG75IU,主导卵泡直径达到 18mm以上时,肌肉注射HCG10000IU。
卵泡发育的监测
1、卵泡监测:进入监测期 间后可以隔天或每天进行B 超监测。卵泡成熟征象:卵 泡直径18mm,部分卵泡 内壁可见半月形的突起,称 为“卵丘征”。排卵征象: 成熟卵泡消失或明显缩小或 形状不规则、内部结构模糊, 有时子宫直肠凹内可见游离 液体。
常用促排卵方案2
CC+HMG(人绝经后促性腺激素 )+HCG :于月经周期的第3-7天口服克罗米酚(CC) ,每日一次,每次50-100mg,月经周期第8、 第10天每日注射HMG75-150IU,自月经周期 第11天起开始B超监测卵泡发育,根据卵泡发 育情况,隔日注射HMG75-150IU,主导卵泡 直径达到18mm以上时,肌肉注射 HCG10000IU。
CM Insler 评分表
评 分 黏液量ml 拉丝度ml 结 晶 黏稠度 白细胞计数
0 无 0 无 极粘稠 ≥11个/HP
1 0.1 1~4 不典型结晶 中间型 6~10个/HP
2 0.2 5~8 主干+分支 轻度 1~5个/HP
3 0.3 ﹥9 主干+2级分支 稀薄 偶有
精液标本处理
精液常规检查
正常精液标准(WHO1994年):(1)2ml或更多;(2)
pH7.2-8.0;(3)密度20106/ml或更多;(4)射精后一小
时内V级活动精子25%以上或~V级活动精子50%以上; (5)正常形态精子不低于30%;(6)活精子75%以上; (7)白细胞<1 106/ml。
OFra Baidu bibliotekSS
人工受精的并发症
1、卵巢过度刺激综合 征(OHSS) 2、出血 3、腹痛及休克 4、感染 5、多胎妊娠 6、女性生殖器肿瘤
人工授精失败后的处理
通常在有效的人工授精3次失败后,可以考虑 重新评估患者的不孕原因。如果不明原因, 可继续尝试4~6次。 有效的人工授精是指:在监测卵泡的过程中, 女方卵泡发育、子宫内膜状况、排卵时机都 非常理想,男方精液处理后精子质量也很好。 如果女方卵巢功能尚好,可以考虑腹腔镜诊 疗,以明确盆腔不孕因素并同时治疗。如果 卵巢功能减退,建议考虑IVF助孕。如果是男 方因素所致,建议ICSI助孕。
术后黄体支持 授精后次日起黄体酮20mg肌肉注射或自授精 日起HCG2000IU肌肉注射,隔日一次,共3~5次。 妊娠后继续黄体支持到孕10周。 自然周期的IUI是否需要黄体支持存在争议。
影响人工授精妊娠率的因素
1、年龄 2、适应症 3、自然周期与促排卵周 期 4、HCG注射与授精时间 5、精子制备技术 6、授精技术 7、单次与重复授精
夫精人工授精(AIH)
生殖医学科
——王 娟
夫精人工受精(AIH)是通过非性交方式将 丈夫精液注入女性生殖道内,使精卵自然结 合达到妊娠生育的 一种辅助生殖技术,是 不孕症治疗方法之一。 夫精人工授精种类常见的有三种:阴道内人 工受精(IVI)、宫颈内人工授精(ICI)、 宫腔内人工授精(IUI)。另外还有输卵管内人 工授精(ITI)、腹腔内人工授精(IPI)、卵泡内 人工授精、宫颈帽人工授精。IUI为主要方
P测定:正常卵泡期血中P值﹤3.2nmol/L,晚 卵泡期如果P值升高,预示即将排卵。如果P 值﹥9.6nmol/L,提示已经排卵。
4、宫颈评分:宫颈及分泌的黏液随E2水平的变化呈 现周期性变化。随着卵泡的发育,体内E2分泌增加, 分泌黏液量增多,清澈透明象蛋清样,宫颈口松弛张 开,拉丝度增加,出现羊齿状结晶。排卵后受孕激素 作用,黏液分泌量减少,变为浓稠,形成黏液栓,宫 颈口闭合。综合评分在9分以上,表明反应良好。