HIV检测及临床意义

IgM / IgG 抗体 HIV-1 / -2 / -O p24 抗原
检测结果的报告和处理
阴性反应出具HIV抗体阴性报告， 如果近期有高危行为，如性乱、注射毒品等，或有急 性流感样症状等情况，为排除“窗口期”的可能，可 以进行HIV-1 P24抗原或HIV核酸检测，或2－3个月以 后再做抗体检测。 筛查实验呈阳性发现反应，可出具“HIV抗体待复查” 的报告，不能出阳性报告。
1. 直接检测病毒或其组成部分
2. 检测人体HIV免疫反应——HIV特异性抗体
从感染到血清抗体阳转有一段窗口期，平均为 1-3 个 月，有一小部分HIV感染者出现延迟反应
HIV感染后抗原和抗体的变化 及其与疾病关系

HIV 感染人体后出现一过性病毒血症， 6-8 周后血 清抗体阳转，病毒滴度降低，在随后的 5-8年无症
状带毒期里 HIV抗体一直存在，但病毒难查到。进
入AIDS期后血浆中病毒再次出现。

故诊断HIV 感染多数时间用抗体检测诊断，极早期 （窗口期）用抗原检测。
HIV抗体诊断
目前临床上实际应用的是测定特异性HIV抗体，包括初筛和 确认实验。
一、检测试剂
筛查试剂必须是HIV-1/2混合型、经国家药品监 督管理局注册批准、批批检合格、临床评估质 量优良、在有效期内的试剂。 目前常用的筛查试剂有酶联免疫、颗粒凝集和 其它快速诊断试剂。采供血机构进行血液筛查 应采用酶联免疫试剂。 自采自供血的单位必须进行HIV抗体检测，在 尚未建立艾滋病筛查实验室的偏远地区可由经 过培训的技术人员在规定的场所用快速试剂进 行血液筛查。
0 2 3 5 23 29 52 38 126 136 230 125 947 1045 171 299 216 261 274 531 1567 2649 3343 3306 4677 4527 1342 9824
年
份
HIV的检测
HIV感染可通过两种途径检测
HIV抗体确认
常用的确认实验方法是免疫印迹法（WB）。 免疫印迹试剂有HIV-1/2混合型和单一型。
一般先用HIV-1/2混合型试剂进行检测
蛋白印迹实验（WB）
——广泛使用的确认实验

用聚丙烯酰胺凝胶电泳将纯化的 HIV 蛋白抗原分开后转移到硝酸纤维膜上。标本中 存在的HIV抗体与条带上的抗原结合，再加入酶偶联的抗人 IgG抗体和底物，在抗原 抗体结合的部位会出现有色条带
HIV感染 CD4+T细胞数量下降
CD4+T淋巴细胞介导的免疫 功能逐渐丧失 CTL丧失必要的体内环境， 功能下降
CD4+T淋巴细胞小于350/ul（结合病毒载量，确定治疗时机）
有效
HAART
治疗8周后CD4+T淋巴 细胞数量增加50/ul 无效
谢谢
PCR对与缩短窗口期
病毒 HCV
抗体试验 82天
PCR 23天
缩短 72﹪
HBV HIV
59天 22天
34天 11天
41﹪ 50﹪
1、辅助诊断

某些非典型的抗体反应，特别是不确定反应时，RNA的测 定可提供非常有用的证据。
单纯使用 RNA 测定不能完全确定感染与否，但当 RNA 测定 出现较高拷贝数的阳性结果时（>1000）提示感染发生的 可能性非常大。
CD4 T细胞是 HIV的主要靶细胞 ,感染后随着病程进展， CD4 T细胞不断下 降 < 500/mm3——有临床诊断意义 < 200/mm3——AIDS病程进展， AIDS诊断和疗效观察的指标
HIV感染几周内，出现类流感症状，也称为血清阳转期 ， CD4细胞的数量降低。随之出现的免疫应答可以控制急 性症状，恢复 CD4 细胞的数量，但并不能清除病毒。随着 CD4 细胞不断下降，当降至 500/ul 左右时，开始出现机会 性感染或其它疾病，进入症状期。当 CD4 低于 200/ul 时， 即进入艾滋病期。
可疑反应 阴性报告
每3个月随访一次，共2次，仍属可疑，则作阴性报告如随访期间出现阳性反应则报告阳性
P24抗原测定
（一）适用范围 HIV-1抗体不确定或窗口期的辅助诊断。 HIV-1阳性母亲所生婴儿的鉴别诊断。 第四代HIV-1抗原/抗体ELISA试剂检测呈
阳性反应， 但HIV-1抗体确认阴性者的诊
其可检测标本中针对HIV不同抗原的抗体，故被用做确认试剂。 不同的研究机构有不同的判定标准

HIV抗体确认检测流程图
免疫印迹法(HIV1/2混合型)
出现HIV-2指带
阴性反应 HIV-1阳性反应 可疑反应 免疫印迹法（HIV-2） 阴性报告 HIV-1阳性报告 阳性反应 阴性反应
报告HIV-2血清学阳性反 应报告必要时测核酸


使用此指标应综合其他检测数据和样品背景情况进行综 合分析与判断。
2、窗口期辅助诊断

在窗口期抗原峰出现前后通常出现一个病毒载量的高峰， 通常此高峰高于发病时的血浆病毒水平，早期病毒 RNA 测 定具有特殊的意义。

目前国际上正在尝试使用这种检测对采供血样品进行多个 样品混合后的RNA检测以降低窗口期传播的残余危险度。
2、确认试剂必须经国家药品监督 管理局注册批准。确认试剂包括免疫 印迹试验、条带免疫试验及免疫荧光 试验试剂。目前以免疫印迹试剂最为
常用。
1. ELISA方法：
目前最常用的初筛实验，自 1985 年首次
检测HIV-1抗体的试剂盒供市以来，已从
第一代的全病毒抗原间接法发展到第四
代的以重组的多肽抗原及抗 P24抗体包被
HIV检测及临床意义
中国每年新发现的HIV/AIDS 病例数（1985~2002）
15000
病例数
AIDS HIV(+)
10000 5000 0
AIDS HIVwenku.baidu.com+)
198 198 198 198 198 199 199 199 199 199 199 199 199 199 199 200 200 200 5 6 7 8 9 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 0 1 2 1 5 0 1 2 9 0 7
的双夹心法，使窗口期缩短了2-3周。
四代艾滋病酶联免疫试剂比较
solid phase conjugate -IgG抗体 specific detection of IgG 抗体 HIV-1
第一代
病毒裂解液 HIV-1
第二代
病毒裂解液 重组抗原合成肽 HIV-1 / -2
IgG抗体
IgG 抗体 HIV-1 / -2
第三代
病毒裂解液 重组抗原合成肽 HIV-1 / -2 / -O
病毒裂解液 重组抗原合成肽 HIV-1 / -2 / -O
IgM / IgG 抗体 HIV-1 / -2 / -O
第四代
病毒裂解液 重组抗原合成肽 HIV-1 / -2 / -O anti-p24 Ab
病毒裂解液 重组抗原合成肽 HIV-1 / -2 / -O anti-p24 抗体
3、病程监控

由于 HIV 感染发生后病毒载量的变化具有一定规律，并且 这种变化与疾病的进程有着密切的相关性。

通常在感染后无症状期内发生的临床症状很难与 AIDS发病 时的症状区别，病毒载量测定可以帮助医生判断一个刚发 生的症状是否与HIV感染有关。
4、指导治疗方案及疗效测定

并非在任何情况下感染者都应该进 行抗病毒治疗，这不但是经济上的 原因，更重要的是在于抗病毒药物 的副作用和疗效。通常在病毒载量 达到一定水平后（如 >35000-50000 拷贝/毫升）才具有良好的效果。 只有通过治疗后病毒水平的检测才 能确定治疗是否有效，通常治疗后 病毒水平降低 50% 才被认为临床有 效。

艾滋病免疫指标的检测

随着政府加速对国产抗艾滋病药物上市的批 准，我国艾滋病人的治疗已经出现了曙光。 艾 滋 病 临 床 治 疗 中 各 种 免 疫 指 标 (CD4+ 、 CD8+T细胞 等)对于确定感染状态、预测发病、 评价药物疗效及新药开发具有重要的作用。

CD4 T淋巴细胞：（流式细胞术）
断。 监测病程进展和抗病毒治疗效果。
（三）结果报告和解释
1、HIV-1 P24抗原的阳性结果必须经过中和试验 确认。 2 、 HIV-1 P24 抗原阳性仅作为 HIV 感染的辅助诊 断依据，不能依此确诊。 3、HIV-1 P24抗原阴性结果只表示在本试验中无
反应，不能排除HIV感染。
HIV核酸检测
样
本
选用初筛试剂
初筛检测
阳性反应
原有试剂＋另一 种原理初筛试剂
阴性反应
重复检测
阴性报告
均阳性反应 送确认
一阴一阳
均阴性反应 阴性报告
HIV抗体初筛检测流程图
快速诊断试剂：

采用乳胶凝集、免疫斑点和免疫层析三种原理


快速、不需特殊仪器
敏感度、特异度低于ELISA，且价格贵 适用于血站覆盖不到的边远地区/城市大医院急诊手术前检查 快速诊断阳性结果还需经ELISA方法验证