葡萄糖淀粉酶

VVm：是通气比的单位 （立方米／立方米﹡分钟） 通气比是指每分钟通气量与罐体 实际料液体积的比重 通气比=通气速率／发酵体积
发酵：
培养基配比为玉米粉12%，黄豆饼4%， 麸皮1%，α-淀粉酶添加量为100U／g （淀粉），pH调至4.5以下。于 30~32℃下通风培养90~110h。通风量 1~12h为0.5VVm，12~14h为0.8VVm， 24~28h为1VVm，84h后为0.8VVm。 培养84h后每隔8h测定pH、还原糖、酶 活、并镜检菌体形态。当pH降到3.4， 还原糖降到1.8%以下，酶活力上升至 13600U ／ml以上时，即可放罐。
葡萄糖淀粉酶的生产工艺
制作人：生化121
葡萄糖淀粉酶的简介
• 葡萄糖淀粉酶又称糖化酶 。 • 糖化酶用于以葡萄糖作发酵培养基的各 种抗生素、有机酸、氨基酸、维生素的 发酵；本品还大量用于生产各种规格的 葡萄糖。总之，凡对淀粉、糊精必需进 行酶水解的工业上，都可适用。 最多应 用于酒精、淀粉糖、味精、抗菌素、柠 檬酸、啤酒等工业以及白酒、黄酒。
糖化酶工业生产是用根霉属的固态培 养和液体培养方式，也有用拟内孢霉 属的液体培养，但是以上菌种培养液 里所产酶单位较少，不宜于工业化生 产。现在工业上主要采用黑曲霉的液 体深层培养法，所产的糖化酶耐酸， 耐热，产量也高，是我国糖化酶主要 的生产方法。
葡萄糖淀粉酶的生产工艺流程图 ——黑曲霉液体深层培养法
葡萄糖淀粉酶的性质
• 糖化酶是一种糖蛋白。 • 糖化酶随作用的温度升高活力增大，超 过65℃又随温度升高而活力急剧下降， 本品是最适作用温度是60-62℃。最适 作用PH舒值在4.0-4.5左右 。 • 一般性质
葡萄糖淀粉酶的使用Fra Baidu bibliotek点
• 1、 糖化酶对设备没有腐蚀性，使用安全。使 用糖化酶工艺简单、性能稳定、有利于各厂 的稳定生产。本品质量稳定，使用方便，利 于连续糖化，提高产品质量，降低成本。糖 化酶一般无任何毒副作用. • 2、 使用糖化酶对淀粉水解比较安全，可提高 出酒率，麸曲法能减少杂菌感染，节约粮食 可降低劳动强度，改善劳动条件。 • 3、 使用糖化酶有利于生产机械化，有利于实 现文明生产。
一般性质 项目 等电点 一般性质 3.4~7.0
最适pH 最适温度
热稳定性 对金属离子要求 底物 来源
4.0~5.0 40~60℃
＜60 ℃ 无 直链淀粉、支链淀粉、 糖原、糊精、麦芽糖 根霉、曲霉
深层培养是利用深层培养基的厌氧 环境来培养厌氧细菌，但不能培养 严格厌氧细菌,多用于兼性厌氧菌和 微耗氧菌的培养。
为什么要除去糖苷酶？ 葡萄糖苷转移酶（a-葡萄糖苷酶）可切 开麦芽糖的a-1、4键，并将游离出的一 个葡萄糖残基转移到另一个葡萄糖活麦 芽糖分子a-1，6位，生成非发酵性的潘 糖和异麦芽糖等低聚糖，对糖化酶的质 量造成了很大的影响，使用这种糖化酶 会降低葡萄糖的转化率和纯度。
提取：
按硫酸铵盐盐析工艺提取酶制剂。硫酸铵 加量为55%，盐析静置12h，过滤，湿酶 在40℃以下烘干称量，测定糖化酶的活力， 调至成品规定的活力。调制时加入适量膨 润土，吸附夹杂的糖苷转移酶，可提高产 品质量。
液体酶制剂的制备：
液体酶制剂是将发酵液加入苯甲酸钠 作防腐剂而成，或是经超滤浓缩一倍 后加防腐剂、稳定剂等（如异抗坏血 酸、山梨醇）而成。
烘干 粉碎 成品
滤饼 过滤 盐析 发酵液 防腐剂，稳定剂
辅料
滤液（回收）
斜面菌种
固体孢子培养
种子罐
发酵罐
超滤浓缩
液体酶制剂
黑曲霉液体深层培养法的优缺点
• 优点是可深层培养、生产效率高、容易 自动化控制、可对过程进行多种手段精 确调控。 • 缺点是设备投入大、一般要严格灭菌、 操作较复杂、对操作人员素质要求高、 产生大量发酵污水 。
固体孢子培养： 在茄型瓶中加入10g麸皮和10ml睡，拌 均后灭菌30min，冷却后接入一环斜面 菌种，于31℃培养6~7d备用。
种子罐培养：
玉米粉6%，黄豆饼粉2%，麸皮2%。 在31℃下通风培养32h,通风量为 0.5VVm。当pH下降到3.8，酶活在 500U／ml左右，镜检菌丝生长正常， 无杂菌污染时即可接入二级种子罐 或发酵罐。