标准操作规程(SOP)——血清标本采集及储存

一、目的

急性期（<7d ）或恢复期（病后2～4周）血清抗体效价测定是流感诊断的主要方法之一，血清标本也可用于病毒核酸PCR 及病毒分离。为保证样品质量、不被污染、采样过程安全及保护环境，中国国家流感中心的所有技术人员，必须按照本文件相关的规程进行操作。

二、范围

适用于中国国家流感中心的所有技术人员进行血清标本的采集及储存。

三、程序

（一）生物安全要求

采集禽流感疑似病例急性期血清时，应以BSL-3级标准进行防护，可在BSL-2实验室分离。采集禽流感疑似病例密接病例血清，按BSL-2级防护。详见生物安全个人防护SOP 。

（二）材料

1．BD 负压取血管 Ref.367955 5mL

2．BD 采血配件 Ref.367237 成人或大于等于7岁儿童

3．BD 采血配件 Ref.367238 用于小于7岁儿童

4．2%碘酒，75%酒精，无菌棉签，压脉带

（三）实验步骤

1．采样

（1）被采集对象如是急性期禽流感医学观察病例、确诊病例或疑似病例，应以BSL-3级标准进行防护，穿戴防护用品顺序：戴帽子-穿一次性医用手术衣-穿防护服-戴口罩-戴上防护眼镜-穿上鞋套、或胶鞋-戴上手套,将手套套在防护服袖口外面，进入病例所处核心污染区。采集禽流感疑似病例密接病例血清，按BSL-2级防护，穿戴防护用品顺序：戴帽子-穿一标准操作规程（SOP ）储存

次性医用手术衣-戴口罩-戴上防护眼镜-穿上鞋套或胶鞋-戴上手套,将手套套在防护服袖口外面，选择干净相对无菌条件下操作。

（2）标记采血管，包括被采集对象编号、姓名、性别、年龄，准备适当规格的采血配件及负压取血管。务必仔细核对并记录。

（3）根据被采集对象具体情况，可选择肘前静脉、手背静脉或颈静脉（常用于小于3岁儿童）。在扎上止血带后，拍打注射部位3－4次，还可用大拇指按压静脉2－3次，一般静脉受刺激后血管扩张血液充盈即可明显暴露，如果暴露还是不明显，可用右手食指沿解剖部位触摸，静脉的感觉柔软且富有弹性，并呈条索状。触摸好后稍做痕迹，即可穿刺。对深而滑且看不清的静脉，可用左手食指与中指固定在静脉的上方，从而更好地暴露静脉。

（4）依次用2%碘酒及75%酒精消毒，待酒精挥发后，进行静脉穿刺。一般以右手持针，针面向上，使针头与皮肤成10～25º(静脉深浅与进针角度成正比)，从血管正中快速刺入，见回血后，针尾再向下压，使角度小于

15 º向前送针。

（5）摘下负压取血处针头，连接负压取血管，待负压取血管满后，即收集外周全血5mL。

（6）以无菌棉签按住针尖前方静脉处，迅速将采血针头拔出。在穿刺处，以棉球按住5 min以上止血。

（7）上下倒置取血管五次，用75%酒精消毒采血管表面，然后直立放置于有封口的标本袋中。

（8）将针头、取血器弃于专用锐器盒内。

（9）再次核对标记及现场采样记录、个案调查记录、实验室送检记录。（10）采血员从核心污染区退出，首先消毒并脱掉外层手套，防护服、外层鞋套，再摘下防护镜-脱掉一次性医用手术衣、内层鞋套-摘掉手套- -将手指反掏进帽子,将帽子摘下-摘口罩，弃于专用消毒容器内，洗手, 消毒。2．血清分离

（1）血标本在室温(22℃～25℃)放置30～60min，可自发完全凝集，血清自然从与血细胞接触的全血中分离出来。一般应于采血后2h内分离出血清。