实验4--水中细菌总数的测定

（6）若所有稀释度的平均菌落数均不在30—300之间，则以最近 300或30的平均菌落数乘以稀释倍数（见表ⅪⅤ-1，例6）。
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五、实验报告 1．结果 （1）自来水 （2）池水、河水或湖水等
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放水龙头使水流一定量后，以灭菌三角烧瓶接 取水样，以待分析。 （2）池水、河水或湖水应取距水面10-15cm的深 层水样，先将灭菌的带玻璃塞瓶，瓶口向下浸 入水中，然后翻转过来，除去玻璃塞，水即流 入瓶中，盛满后，将瓶塞盖好，再从水中取出， 最好立即检查，否则需放入冰箱中保存。
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2．细菌总数测定 （1）自来水（每个小组做两个平板） （a）用灭菌吸管吸取1ml水样，注入灭菌培养皿
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水中细菌总数的测定和计算
在牛肉膏蛋白胨培养基上，1ml水样， 经37℃，24h 培养后所生长出来的总 菌数。
我国饮用水的卫生学指标：在1ml自来 水中细菌总数不得超过100个。
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三、器材 牛肉膏蛋白胨琼脂培养基； 灭菌三角烧瓶，灭菌的带玻璃塞瓶，灭菌培养 皿，灭菌吸管，灭菌试管等。
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四、操作步骤 1．水样的采取 （1）自来水先将自来水龙头用消毒处理，再开
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二、基本原理 水中的细菌总数越多，说明水中有机物的含量就越高，水体被有
机物污染的程度越重。 水中细菌的种属繁多，它们对营养和其他生长条件的要求差别很
大，不可能找到一种培养基在一种条件下，使水中所有的细菌均 能生长繁殖，以一定的培养基平板上生长出来的菌落，计算出来 的水中的细菌的总数实际上是一种近似值。 肠道中的绝大多数腐生性和致病性的细菌，可在牛肉膏蛋白胨培 养基上进行生长。因此应用平板菌落计数技术来测定水样中的细 菌总数基本上能代表水样中细菌的数量。
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（2）首先选择平均菌落数在30—300之间的， 当只有一个稀释度的平均菌落数符合此范围时， 则以该平均菌落数乘其稀释倍数即为该水样的 细菌总数（见表ⅪⅤ-1，例1）。
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（4）若所有稀释度的平均菌落数均大于300，则应按稀释度最高的 平均菌落数乘以稀释倍数（见表ⅪⅤ-1，例4）。
（5）若所有稀释度的平均菌落数均小于30，则应按稀释度最低的平 均菌落数乘以稀释倍数（见表ⅪⅤ-1，例5）。
（b）自最后三个稀释度的试管中各取1ml稀释水加入空的灭菌培养皿 中，每一稀释度做两个培养皿。
（c）各倾注15ml已溶化并冷却至45℃左右的培养基，立即放在桌上 混匀。
（d）凝固后倒置于37℃培养箱中培养24小时。
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3．菌落计数方法
（1）先计算相同稀释度的平均菌落数。若其中 一个培养皿有较大片状菌苔生长时，则不应采 用，而应以无片状菌苔生长的培养皿作为该稀 释度的平均菌落数。若片状菌苔的大小不到培 养皿的一半，而其余的一半菌落分布又很均匀 时，则可将此一半的菌落数乘2以代表全培养 皿的菌落数，然后再计算该稀释度的平均菌落 数。
中。共做两个平皿。 （b）分别倾注约15ml已溶化并冷却到45℃左右
的培养基，并立即在桌上作平面旋摇，使水样 与培养基充分混匀。 （c）培养基凝固后，倒置于37℃温箱中，培养 24小时，进行菌落计数。
两个平板的平均菌落数即为1ml水样的细菌 总数。
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（2）池水、河水或湖水等 （a）取加入9ml水的灭菌试管。取1ml水样注入第一管9ml灭菌水内，
大家好
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水中细菌总数ห้องสมุดไป่ตู้测定
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一、目的要求 1．学习水样的采取方法和水样细菌总数测
定的方法。 2．了解水的平板菌落计数的原则。
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二、基本原理 生活用水的水源常被生活污水、工业废水以及
人畜粪便所污染。 腐生性微生物对人无害，而病源性微生物则能
引起传染病甚至流行病，如霍乱、伤寒、细菌 性痢疾和阿米巴性痢疾以及脊髓灰质炎和传染 性肝炎等病毒性疾病。
摇匀，再自第一管取1ml至下一管灭菌水内，如此稀释到第三管， 稀释度分别为10-1、10-2与10-3。稀释倍数以培养后平板的菌落数在30—
300个之间的稀释度最为合适，若三个稀释度的菌数均多到无法计数或少到无法 计数，则需继续稀释或减小稀释倍数。一般中等污秽水样，取10-1、10-2、10-3三 个连续稀释度，污秽严重的取10-2、10-3、10-4三个连续稀释度。