高效液相色谱法测定不同大小柚果中柚皮苷的含量

大等 优点。而 柚变种甚多, 其著名品 种有 文旦 柚、沙田 柚、 坪山柚、四季抛、大红抛等。本研究柚果 是广东梅州金柚的 幼果 , 即芸香 科植物柚 Citr us gr and is ( L ) O sbeck 的 幼果 为原 料切片干燥而成。性味辛苦温, 归肺、脾经, 具有理气
作者简介: 张 婷, 女, 硕 士, 主 要从 事 产 品 质 量 控 制 及 中 药 保 健 品 开 发, T el : ( 020) 38167249, E mail: t inca _ zh ang @ inf in tu s com cn * 通讯作者: 毛新亮, 男, 硕士, 主要从事保健食品 开发及质量监控 等研究工作, T el : ( 020) 38167252, E mail: en ginemao@ yahoo com cn
[ J] . 安徽医药, 2001, 12 ( 3) : 54 56. [ 10] 张玉, 马力, 张驰. 地 红霉 素 肠溶 微丸 胶囊 的生 物 等效 性
[ J] . 中国医院药学杂志, 2007, 27 ( 6) : 1440 1442. [ 11] 张树清, 崔文奇, 王东凯, 等. H PLC 测 定地红 霉素肠 溶微
SPD- 20A 高效液相 色谱仪 ( PD A 检测 器、L C- so lu t ion 工 作 站, 日 本岛 津) ; Sar tor ius 电 子 天平 M E215S ( 德 国) ; 超声波清洗器 ( 上海科导超声仪器有限 公司) 。 2 方法 2 1 色谱条件与系统适应性试验
色谱柱: A lltima C18 ( 150 mm % 4 6mm, 5 m) ; 流动 相: 甲醇 醋酸 水 ( 35 4 61) ; 流 速 1 5 mL min- 1 ; 柱 温: 25 & ; 检测波 长: 283 nm; 进样量 : 3 L ; 理论 塔板 数按柚皮苷计算 ∋3 000。 2 2 对照品溶液的制备
精密吸取同一份样 品溶 液 3 L, 重复 测定 6 次, 柚皮 苷的 峰面积 RSD 为 3 6% 。 2 7 重复性试验
取同一批样品 ( 批号: 20090612) 6 份, 分别按 ( 2 4) 项下 方法制备, 精密吸取 3 L 进样, 测得 柚果中 柚皮 苷平 均含 量 169 8 mg g- 1 , RSD 为 1 6% 。 2 8 稳定性试验
为了有效控制柚果中柚皮苷的含量, 本实验在前面研究 工作的基础上[ 12] , 通过 摸索 并优化 条件 及反 复测 定, 建立 了 H PL C 法测定不同 大小 的柚 果中 柚皮 苷的 含量, 现 报道 如下。 1 材料与仪器 Hale Waihona Puke Baidu 1 材料
金柚幼果 3 批 [ 采自广东省梅县, 经中国科学研究院华 南植物研究所标本馆叶华谷研究员鉴定为原植物系芸香科柚 属柚 Citr us gr andis ( L ) Osbeck] ; 柚皮 苷对 照品 ( 纯度: 98% , 供含量测 定 用, 中国 药 品 生 物 制 品 检 定 所, 批 号: 110722 200610) ; 甲醇 ( 色 谱纯 ) ; 水 为 蒸馏 水; 其 他 试剂 均为分析纯。 1 2 仪器
称取五氧化二磷减压干燥 24 h 的柚皮 苷对照 品 20 mg, 精密称定, 置 10 mL 量 瓶中, 加 甲醇 至刻 度, 摇 匀, 即得 ( 含柚皮苷 2 mg mL- 1 ) 。 2 3 标准曲线的制备
精密吸取对照品溶液 1、2 5、5、7 5、10 L, 依次进 样测定。以质量 Y ( g) 为纵坐标, 峰面积 X 为横坐标, 绘 制标准曲线, 并进行线 性回归。其 回归方 程和相 关系 数为: Y = 112 1 4X + 235 3, r = 0 999 0, 柚皮苷在 2 0~ 20 0 g 与峰面积线性关系良好。 2 4 供试品溶液的制备
中国 药典 2010 版 一 部 化 橘红 为 芸 香 科 化 州 柚 Citr us gr and is ! T o mento sa∀ 或柚 Citr us gr and is ( L ) Osbeck 的未 成熟的或近成熟的干燥外层果皮。芸香科植物柚作为化橘红 药材正宗来源的一种, 与化州柚相比, 具有分布广泛, 产量
din, et a1. C haract erisati on of dirit h romycin an d spiramycin u sing high perf orm an ce liquid ch rom at ography and direct inf us ion mass spect romet ry [ J] . A nalyt ica Chimi ca A cta, 2004, 503 ( 2) : 247 256. [ 9] 关荣 才, 周志 凌. 反相 高效 液相 色谱法 测定 地红 霉素的 含量
现代药理、临床研究以及成分研究表明, 柚祛痰止咳的 主要有效成分是黄酮类物质, 而柚植物以幼果中黄酮类物质 的含量为最高。柚果所含黄酮类, 主要有效成分为二氢黄酮 类, 且主成分为柚皮苷 ( nar ing in) [5] 。现代药理 研究表明柚 皮苷具有多种 生 物活 性, 如 抗 氧 化、抗 突变、 镇咳、 祛痰 等, 在医药、食 品和化 妆品等 领域均有 广泛应 用。 # M er ch Index∃ ( 12 版) 报道, 在植物柚的花、叶、果实中均含有丰 富的柚皮苷, 并且在未成熟的果实中含量最高。
而下降。结论 柚果果径大小可作为控制药材质量的标准之一。
关键词: 柚果; 柚皮苷; 高效液相色谱
中图分类号: R927 2, R284 1
文献标识码: A
文章编号: 1672 2981 ( 2010) 11 0839 03
do i: 10 3969/ j issn 1672 2981 2010 11 013
流速为 1 5 mL min- 1 , 检测波长为 283 nm。结果 柚皮苷的线性范围为 2 0~ 20 0 g ( r = 0 999 0) , 柚 果中柚
皮苷平均含量为 169 8 mg g - 1 , RSD 1 6% , 加样回收率为 97 4% , R SD 为 2 0% , 柚皮苷含量随 柚果果径增大
中南药学 2010 年 11 月第 8 卷第 11 期 Cen tral Sout h Pharmacy. N ovember 2010, V ol 8 N o 11
2004, 517 ( 2) : 53 63. [ 7] 朱志宏, 梁胜华. 高效液相色谱 法测定地红霉素 肠溶片中地红
霉素的含量 [ J] . 中南药学, 2007, 5 ( 2) : 89 90. [ 8] M ar a J os G on z lez de la H ueb ra, U rsul a V in cent , G uy Bor
精密吸取同一份样品 溶液 3 L, 0、2、4、6、8、10 h 测定 , R SD 为 1 2% , 说明被 测溶液在 10 h 内基本稳定。 2 9 加样回收试验
得。 2 5 测定法
分别精密吸取对照 品溶 液与供 试品 溶液 各 3 L, 注入 高效 液相色谱仪, 测定, 即得, 见图 1。
图 1 柚果对照品 ( A ) 及供试品 ( B) 高效液相色谱图 Fig 1 HPLC chromat ogram of ref erence subs tance ( A ) and sampl e ( B) 2 6 精密度试验
丸的有关物质 [ J] . 中国实用医药, 2008, 1 ( 6) : 57 59. [ 12] 许卫. 高 效液相 色 谱法 测定 红霉 素的 含量 [ J ] . 海 峡 药学,
2004, 16 ( 5) : 147 149. ( 收稿日期: 2010 10 08; 修回日期: 2010 10 23)
Determination of naringin from different sizes of Citrus grandis ( L ) Osbeck by HPLC
ZH A NG T ing1 , M A O Xin liang1* , G U O Xiao lei1, W EN Y u ting 2 , YU Q iao2 , L U O A i qin2 ( 1. I nif initus ( Chi na) Comp any Ltd , Guangz hou 510665; 2. Schoo l of Phar maceutical Sciences , S un Y at sen Univer sity , Guangz hou 51 00 80 )
称取适量柚果细粉 ( 约 0 05 g) , 精密 称定, 置 10 mL 量瓶中, 加 甲 醇 7 mL , 超 声处 理 ( 功 率 240 W, 频 率 45 kHz) 10 min, 取出, 冷 却至 室 温, 加 甲 醇至 刻 度, 摇 匀, 置具塞试管中于 3 000 r m in- 1离 心 10 min, 取上清液, 即
Abstract: Objective T o det ermine the nar ingin from differ ent sizes the Citr us gr andis ( L ) O sbeck. Methods H PL C method w as used. M ethano l acetic acid water ( 35 4 61) w as used as the mobile phase. T he flow rat e was 1 5 mL min- 1 , and the deter minatio n wav elength was 283 nm. Results T he linear r ang e of nar ingin was 2 0- 20 0
g ( r = 0 999 0) . T he av erag e co ntent of nar ingin in Citr us g randis ( L ) O sbeck was 169 8 mg g- 1 w ith RSD of 1 6% . T he recov ery w as 97 4% w ith RSD of 2 0% . T he nar ingin content declined w ith the incr ease of the diameter of Citr us gr andis ( L ) O sbeck. Conclusion T he size o f Citr us gr and is ( L ) Osbeck can be used as a quality contro l crit erio n fo r medicinal herbs. Key words: Citr us g r andis ; nar ing in; H PL C
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Cent ral Sout h Pharmacy. N ovember 2010, V ol 8 N o 11 中南药学 2010 年 11 月第 8 卷第 11 期
宽中、燥湿化痰功能[1] 。对柚果的化学成分及其药理作用已 有系统的研究, 其主要有效成分有挥发油类[ 2 4] 、黄 酮类[5] 、 多糖类、香豆素类[6 9] 、柠檬苦素 及其他三 萜类成 分[10] , 尤 其以黄酮类和挥发油成分研究较多。柚果主要有升压、抗凝 血、保肝、抗肿瘤、抑菌等作用[11] 。
高效液相色谱法测定不同大小柚果中柚皮苷的含量
张婷1 , 毛新亮1* , 郭晓蕾1 , 温玉婷2 , 余巧2 , 罗爱勤2 ( 1. 无 限极 ( 中国) 有 限公司, 广州 510665; 2. 中山
大学药学院, 广州 510080)
摘要: 目的 测定不同大小柚果中柚皮苷的含量。方法 采用 H P LC 法, 以甲醇 醋酸 水 ( 35 4 61) 为流动 相,