胰岛素工艺流程说明

重组人胰岛素产品生产工艺流程

对从菌种库中取出的菌种进行活化及初步扩大培养

在种子罐中对菌种进行进一步的扩大培养， 至菌种到对数生长期

时转入发酵罐培养

分两阶段进行控制，第一阶段主要通过控制溶氧和补加 甘油 使菌

体达到富集的目的，第二阶段通过补加 甲醇使菌体进行高密度表

达目的产物， HPLC 检测目的产物含量

目的产物存在于发酵液上清中，此步骤主要控制目的产物收率

通过两步柱层析，分别去除发酵上清液中的色素和杂蛋白

利用紫外检测仪控制目的产物收率，主要试剂为

乙醇与异丙醇

调节 PH 值，使 P1 沉淀，再经离心干燥，得中间体 I 固体

菌种扩培

种子罐培养

发酵罐培养

发酵液固液分离

P1 纯化

P1 沉淀、干燥

控温进行转肽反应，主要试剂为

DMSO 与 1,4- 丁二醇

再通过柱层析进行提纯，主要试剂为

异丙醇

调节 PH 值，使 P2 沉淀，再经离心干燥，得中间体 II 固体

通过控制湿度与温度进行脱帽反应，得到终产物胰岛素主要试剂为 丙酮 ，产品为半固体

经过两步柱层析对胰岛素进行提纯，试剂为

Tris-HCl 和异丙醇

通过超滤对提纯后的胰岛素进行浓缩，通过管道传递到下工序

通过制备色谱对胰岛素粗品进行精制，主要试剂为色谱乙腈然后经两步结晶后通过管道过滤除菌到百级区

对胰岛素成品进行一次结晶和水洗

对水洗后的胰岛素进行过滤除菌后冻干，即得胰岛素成品

P2 纯化

P2 沉淀、干燥

脱帽

成品粗纯化

成品精纯化

过滤冻干

重组人胰岛素生产工艺流程功能间分布工序功能间名称主要操作

菌种室菌种储藏

培养基准备间培养基配制、消毒、无菌服消毒菌种接种室在超净工作台中进行无菌接种，菌种并瓶

扩培室菌种的摇瓶培养

菌种洗衣菌种区无菌服清洗

发酵室种子培养、发酵培养发酵控制室发酵过程控制

发酵配料室发酵配料

过滤室发酵液过滤分离

固液分离

洗衣洗滤布间滤布清洗

P1 纯化区中间体I 柱纯化中间体I

沉淀干燥室I 中间体I 沉淀、干燥

P2 纯化转肽操作、中间体II 柱纯化

中间体II 沉淀干燥室II 中间体II 沉淀、干燥

脱帽室脱帽操作

粗纯配液室P1 、P2 、粗纯化配液

成品粗纯化粗纯化区成品粗纯化柱纯化、超滤

清洗室P1 、P2 、粗纯化区玻璃仪器及工具清洗

精纯配液室精纯化区配液

成品精纯化

冷室结晶产物低温静置

精纯化区胰岛素成品精制、结晶

过滤冻干

制备控制

过滤冻干室

制备色谱柱电脑控制

成品无菌过滤、结晶水洗以及冻干

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