生化考研重点知识总结

生化考研重点知识总结

第一章单糖

①多糖与碘显色，至少需要的葡萄糖残基数：6

②唾液淀粉酶激活剂：Cl-

③几个典型非还原糖：蔗糖、糖原、淀粉

④形成N-糖肽键的单糖或衍生物是：

第二章油脂

①几个非饱和脂肪酸双键数：

⑴油酸：1

⑵亚油酸：2

⑶亚麻酸：3

②人不能自身合成的必须脂肪酸：亚油酸、亚麻酸

③四种脂类转运脂蛋白：

⑴CM：乳糜微粒，转运外源性三酰甘油酯

⑵VLDL：极低密度脂蛋白，转运内源性三酰甘

油酯

⑶LDL：低密度脂蛋白，转运内源性胆固醇

⑷HDL：高密度脂蛋白，转运外源性胆固醇

第三章氨基酸与蛋白质

①几种主要氨基酸及三字母缩写

⑴两特殊：Pro、Gly

⑵芳香：酪（Tyr）色（Trp/Try，吸光最强）苯（Phe）

⑶八种必需氨基酸：甲携来一本亮色书，Met/Val/Lys/Ile/Phe/Leu/Trp/Thr

⑷侧链为羟基氨基酸：苏（Thr）丝（Ser）酪（Tyr）

⑸酸性氨基酸：天（Asp）谷（Glu）※对应两酰胺：Asn、Gln

⑹碱性氨基酸：赖（Lys）精（Arg）组（His）

⑺其它：丙氨酸（Ala）

②PI

⑴PI的计算：PI=（PK1+PK2）/2=(PK1+PKR COOH)/2=(PK2+PKR NH2)/2

⑵PH的计算：PH=PK1+Lg（R/R+）=PK2+Lg（R-/R）

⑶PH =7的水中溶蛋白，PH=6，则该蛋白PI<6：蛋白溶后PH下降为6，表明蛋白的COOH

电离出H+，则产生了R-，PH=6>PI 时有R-

③蛋白二级结构

⑴α螺旋：Sn=3.613，存在Pro时不形成α螺旋，右手螺旋

⑵β折叠：同/反向，肽键中H与O成氢键，轴距0.35nm

⑶β转角：转角处为Gly

④超二级结构：无规卷曲、结构域

⑤三级结构：作用力（二硫键、疏水作用力、氢键、静电离子键、范德华力）

⑥蛋白结构分析

⑴N端分析法：FDNB（Sanger）、PITC（Edman）、DNS-Cl（丹磺酰氯）、氨肽酶法

⑵C端分析法：羧肽酶法、无水肼解法※羧肽酶A：不能水解C端为Lys、Arg、Pro的

肽键；羧肽酶B：能水解C端为Lys、Arg的肽

键；C端倒数第二位是Pro时，A、B都不能水

解

⑶打开二硫键：还原法（巯基化合物，碘乙酸保护）、氧化法（过甲酸）

⑷专一切断：胰蛋白酶（Lys、Arg-COOH肽键）；CNBr（Met-COOH肽键）；胰凝乳蛋白酶（）；

⑦显色反应

⑴Follin酚：蓝色，酚基（Tyr）、吲哚基（Trp），组分（CuSO4+磷钼酸）

⑵Millon：红色，酚基（Tyr），组分（HgNO3+Hg（NO3）2）

⑶坂口反应：红色，胍基（Arg），组分（α萘酚，NaClO）

⑷黄色反应：黄色，芳香氨基酸，组分（浓HNO3）

⑸双缩脲反应：紫红色，肽键，多肽，组分（NaOH+CuSO4）

⑹乙醛酸反应：紫色，吲哚基（Trp）

⑧几种重要氨基酸

⑴提供活性甲基的：S-腺苷Met

⑵形成N-糖肽键的：Asp

⑶胶原蛋白中含量高的氨基酸：Gly、Ala、Pro、HO-Pro、HO-Lys

⑨蛋白分离纯化技术：透析、超滤；密度梯度离心；凝胶过滤；PI法、盐析、有机溶剂

法；电泳、离子交换；吸附层析；亲和层析

※凝胶过滤大分子先出，凝胶电泳相反：机理

△分子运动速度决定因素：大小、电荷量、形状

※蛋白离子交换层析与洗脱：

※凝胶电泳三效应：电荷、分子筛、浓度效应

⑩蛋白含量测定

⑴测N：凯氏定氮、紫外吸光、双缩脲吸光、福林酚显色吸光

⑵测M：沉降离心、凝胶过滤（凝胶排阻层析）、SDS-PAGE

※凯氏定氮：HNO2反应，生成的N2中氨基酸占1/2

⑾其它

⑴分离二硫基的肽段可用：SDS-PAGE

⑵几个主要氨基酸的PI值：

⑶几种重要蛋白：

⑷镰刀贫血病：Glu→Val，第6位

⑸与烷化剂（碘乙酸）反应的氨基酸：Cys（半胱氨酸）

第四章酶学

①酶活化中心组成：结合部位、催化部位

②计算：活力单位（IU、Kat）、比活力（IU/mg）、转化数/转化周期、米氏方程

③各可逆抑制作用的动力学特点：Km、Vmax

※几个抑制作用：竞争抑制（丙二酸对琥珀酸脱氢酶）；有有机磷（与丝氨酸羟基共价不可逆）；CO、CN（作用于Cytaa3）；不可逆抑制（重金属、有机砷、CN

化物、硫化物、CO）

④酶促反应初速度与[E]、T有关

⑤以“三点结合”模型作用的酶：甘油激酶

⑥酶的专一性

⑴专一水解葡萄糖形成的二酯键的酶：

⑵以O2为直接氢受体的氧化酶：VC氧化酶、细胞色素氧化酶

⑦别构酶

⑴两独立功能部位：活性中心、变构中心

⑵动力学曲线：S型，其它为双曲线

⑶具有效应：协同效应、变构效应

※典型代表—血红蛋白：协同效应、波尔效应、变构效应

⑧酶分离纯化

⑴要求：纯化倍数高、回收率高

※纯化倍数=比活力/纯化前总比活力

回收率=活力单位数/纯化前活力单位数

⑵方法：同蛋白质

⑨竞争性抑制剂：增[S]可减弱抑制作用

⑩患尿黑酸症的病人是由于：缺少尿黑酸氧化酶（尿黑酸氧化酶遗传缺陷）

第五章核酸

①反向互补配对：ACG-CGT（U）

②N-苷键：Ψ（C1‘-C5），嘌呤（N9-C1‘），嘧啶（N1-C1’）

③SnRNA：核仁不均一RNA，功能（促进转录、）

④核酸分离技术

⑵凝胶电泳：三效应、分子运动速度决定因素见蛋白质

⑵离子交换层析：阳离子交换层析，核苷酸脱下顺序：U→G→C→A

阴离子交换层析，核苷酸脱下顺序：C→A→U→G

⑶亲和层析：可用亲和层析法分离的核酸：mRNA（PolyA尾）

⑤DNA测序三法：加减法（Sanger、1975），化学断裂法，双脱氧终止法（Sanger、

1977、原理）

⑥不能形成两性离子的核苷酸是UMP：原因

⑦cNMP

⑴最重要的cNMP：cAMP、cGMP

⑵cAMP：第二信使

⑷cAMP分子内有：环化的磷酸二酯键

cAMP与cGMP：生物作用并不是完全相反

第六章分子生物学与基因工程