ELISA法检测梅毒抗体假阳性原因分析及其对策
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Ｄ Ｉ１． ９９ ｊｉ ｎ １ Ｏ — ９ ７． ０ ０ ０ ． ３ Ｏ ：０ ３ ６ ／． ｓ． Ｏ ６ ０ ０ ２ １． ２ ０ １ ｓ
收稿 日期 ：０ ９ Ｏ 一 Ｏ ２Ｏ一 ８ ７
果时 ， 由于反应板有划痕 ， 可使测定 Ａ值升高 ， 如果不
作者简介 ： 邰平（ ９ ９ ）男 ， １ ６一 ， 江苏泰州人 ， 副主任技师 。
自身 免疫性 疾病 ， 自身免 疫环境 改变 ， 因 或这些 疾病 可 能使 患者体 内含 有某些 治疗 性抗 体 、 嗜异性抗 体 、 自身 抗糖 尿病 体 、 风 湿 因子 、 胎 蛋 白 等 特 殊 成 分 ， 类 甲 在 Ｅ ＩＡ 反应过 程 中具有一 定 的 吸附作 用 ， 显色 反 应 ＬＳ 使
现假 阳性 。 １ ４ 方 法学 因素 ． １ ４ １ 灰带 区 现 象 ： ．． 梅毒 的 Ｅ Ｉ Ａ 测定 法 是 一 种定 ＬＳ 性试验 ， 阳性 与阴性之 间有 一条 明确 的分界线 ， 阳 在 即
在相应 的孔中， 吸光度（ Ｄ 值升高， Ｏ ） 高于临界值时， 检 测结 果呈假 阳性 。
【关 键 词 】 梅毒抗体 ； 酶联免疫吸附试验 （ ＩＳ ； Ｅ Ａ） 明胶凝集试验 （ Ｐ Ａ）假 阳性 Ｉ ＴＰ ； 【 中图分 类号】 Ｒ ３ 【 一３ １ 文献标识码】 Ｃ 【 文章编号１ １ ０ － ９７ （０ ００ －０ ５ －０ ０ ６ ０ ０ ２ １ ）２ ０ ６ ２
梅毒是由梅毒螺旋体感染 引起 的性传播疾病， 近
年来 在我 国的发病 率 呈 上升 趋 势 。准 确 、 快速 的实 验 室诊 断是 治疗 和控 制 梅 毒蔓 延 的关 键 。 目前 ， 毒 的 梅
血 清学检 测是诊 断 的主 要 方法 ， 中特 异性 检 测 主 要 其
癌、 腹腔内膜癌 、 子宫内膜癌等疾病 ， 血液病 ， 肺结核 ，
结果 出现假 阳性 。
１３ 仪 器与 洗板操作 ．
是 酶联免疫 吸 附试验 （ ＬＳ ， Ｅ ＩＡ）它具 有 高特异性 、 敏 高 感性 以及低 检 测 费 用 、 宜大 批 量检 测 的特 点［ 。但 适 １ ］
在实际工作 中发现一些个案， 无明显临床特征及不洁
性史 ， 但检测 结果 却 为 阳性 。为 防止 误 诊 和 出现 不 必 要 的医疗 纠纷 ， 文对 引起 Ｅ ＩＡ 法检 测梅毒 抗体假 本 ＬＳ 阳性 产生 的原 因加 以分析 ， 提 出解决 的办法 。 并
江苏预防医学 ２ １ 年 ３月第 ２ 卷第 ２ ００ １ 期
Ｊ ｎ ｓ Ｐ ｅ ｄ Ｍａｃ ，０ ０ Ｖｏ １ Ｎ ． ｉ ｇ ｕＪ ｒｙＭｅ ， ｒｈ ２ １ ， １ ， ｏ ２ ａ ．２
１３ ２ 反应 板底 部污染 ： 标仪 以反应 板进行 垂直 比 ．． 酶 色， 当反应板 底部 有污染 时 ， 出现吸光 度值 升高 的现 易
象 ， 致假 阳性 。 导 １ ３ ２ 洗 涤 过 程操 作 不 当 ： 涤 过 程 中如 有溢 出 现 ．． 洗
象 ，Байду номын сангаас使得 强 阳性 标本 的反 应 液 污染 临 近 的 阴性 孔 而 会 出现假 阳性 ； 洗涤 不充分 ， 致板孔 中酶试 剂残 留而 出 导
质可与底物非特异性结合 ； 具有类过氧化物酶 ］ Ｈｂ
活性 ， 其效应 与辣 根过 氧化物 酶类 似 ， 血后反 应孔 非 溶 特异 性吸 附 Ｈｂ催 化底 物产 生 一定 程 度 的显 色 ， ， 使本 底 ＯＤ值 升高 ， 造成 假 阳性 。 １ １２ 离 心处理 不彻 底 ： ．． 处理 不完 全 的血标本 中纤维 蛋 白未完全 析 出 ， 易在 板 孔 中形 成 纤 维 蛋 白薄 膜 或 絮 状物 ， 堵塞洗 板机 的洗 板 头 ， 成 洗板 不 干 净 ， 残 留 造 酶
１ Ｅ Ｓ 法检测 梅毒抗 体假 阳性原 因分析 Ｕ Ａ
１ １ 血 液标本 引起 的假 阳性 ．
１３ １ 全 自动 加样 系统 的拖带现 象 ： 自动加 样系 统 ．． 全 能准 确和快 速进 行血 液 标 本 的加 样 ， 免 了手 工 加样 避 的人 为误差 ， 保证 了加样 的一致性 ， 高了血 液检测 的 提 质量 和水平 。但 目前 的全 自动加 样仪不 能做 到一份标
本一只加样头， 虽然加完一份标本后 ， 加样仪会 自 动清 洗 ３ 外壁清洗 １ ， 次， 次 若遇到高浓度的抗原或抗体标
本， 同一加样 针 的拖 带污 染 可 能会 导 致 其后 一 孔 或 多
孔 阳性 的现象。 。 。 ｊ
１１１ 溶 血 ： 血 的血液标本 中含有大 量破裂 的血 细 ．． 溶 胞， 细胞 内液 中的各种 活 性 酶及 其 具 有 酶样 活 性 的物
的值称 为灰 带 区 ， 测定 结 果 在灰 带 区的标 本 就 容 易 出
现假 阳性结果 。
化 ， 疫功能 出现 异 常 ， 免 常产 生 一 些异 常 蛋 白抗 体 ， 干
１４２ 空 白对 照 的影 响 ： 单 波 长法 测 定 Ｅ ＩＡ 结 ．． 用 ＬＳ
扰检测结果 ， 出现假 阳性。而受 检者若 患有肠癌、 肺
江苏 预防医学 ２ １ 年 ３ ００ 月第 ２ 卷第 ２ １ 期
Ｊ ｎ ｓ Ｐ ｅ ｄ Ｍａｃ ，０ ０ Ｖ １ １Ｎｏ２ ｉ ｇ ｕＪ ｒｖＭｅ ， ｒｈ ２１ ， ｏ．２ ， ． ａ
・
毒 理 与 检 验
・
Ｅ ＩＡ法检测梅毒抗体假阳性原 因分析及其对策 ＬＳ
邰平 ， 王进
（泰 州市疾病预 防控 制 中心 ， 江 苏 泰 州 ２５０ ２ ３０）
１１３ 细 菌污染 ： ．． 被细菌污染 的血液标本 ， 因细菌体 内 可能含有 内源性 辣根过 氧化物 酶 ， 对相应 酶作标 记 的 会 测定方法产生非 特异性干扰 ， 造成弱的假 阳性结果。
１ ２ 受检 者个体 因素 ． 老 年人 由于 生理 机 能 逐 步退
性判定值（ ｕ－ｏｆ， Ｃ ｔ ｆ值左右的一定 范围 Ｃ ｔ ｆ 而 ｕ —ｏ ） ｆ
收稿 日期 ：０ ９ Ｏ 一 Ｏ ２Ｏ一 ８ ７
果时 ， 由于反应板有划痕 ， 可使测定 Ａ值升高 ， 如果不
作者简介 ： 邰平（ ９ ９ ）男 ， １ ６一 ， 江苏泰州人 ， 副主任技师 。
自身 免疫性 疾病 ， 自身免 疫环境 改变 ， 因 或这些 疾病 可 能使 患者体 内含 有某些 治疗 性抗 体 、 嗜异性抗 体 、 自身 抗糖 尿病 体 、 风 湿 因子 、 胎 蛋 白 等 特 殊 成 分 ， 类 甲 在 Ｅ ＩＡ 反应过 程 中具有一 定 的 吸附作 用 ， 显色 反 应 ＬＳ 使
现假 阳性 。 １ ４ 方 法学 因素 ． １ ４ １ 灰带 区 现 象 ： ．． 梅毒 的 Ｅ Ｉ Ａ 测定 法 是 一 种定 ＬＳ 性试验 ， 阳性 与阴性之 间有 一条 明确 的分界线 ， 阳 在 即
在相应 的孔中， 吸光度（ Ｄ 值升高， Ｏ ） 高于临界值时， 检 测结 果呈假 阳性 。
【关 键 词 】 梅毒抗体 ； 酶联免疫吸附试验 （ ＩＳ ； Ｅ Ａ） 明胶凝集试验 （ Ｐ Ａ）假 阳性 Ｉ ＴＰ ； 【 中图分 类号】 Ｒ ３ 【 一３ １ 文献标识码】 Ｃ 【 文章编号１ １ ０ － ９７ （０ ００ －０ ５ －０ ０ ６ ０ ０ ２ １ ）２ ０ ６ ２
梅毒是由梅毒螺旋体感染 引起 的性传播疾病， 近
年来 在我 国的发病 率 呈 上升 趋 势 。准 确 、 快速 的实 验 室诊 断是 治疗 和控 制 梅 毒蔓 延 的关 键 。 目前 ， 毒 的 梅
血 清学检 测是诊 断 的主 要 方法 ， 中特 异性 检 测 主 要 其
癌、 腹腔内膜癌 、 子宫内膜癌等疾病 ， 血液病 ， 肺结核 ，
结果 出现假 阳性 。
１３ 仪 器与 洗板操作 ．
是 酶联免疫 吸 附试验 （ ＬＳ ， Ｅ ＩＡ）它具 有 高特异性 、 敏 高 感性 以及低 检 测 费 用 、 宜大 批 量检 测 的特 点［ 。但 适 １ ］
在实际工作 中发现一些个案， 无明显临床特征及不洁
性史 ， 但检测 结果 却 为 阳性 。为 防止 误 诊 和 出现 不 必 要 的医疗 纠纷 ， 文对 引起 Ｅ ＩＡ 法检 测梅毒 抗体假 本 ＬＳ 阳性 产生 的原 因加 以分析 ， 提 出解决 的办法 。 并
江苏预防医学 ２ １ 年 ３月第 ２ 卷第 ２ ００ １ 期
Ｊ ｎ ｓ Ｐ ｅ ｄ Ｍａｃ ，０ ０ Ｖｏ １ Ｎ ． ｉ ｇ ｕＪ ｒｙＭｅ ， ｒｈ ２ １ ， １ ， ｏ ２ ａ ．２
１３ ２ 反应 板底 部污染 ： 标仪 以反应 板进行 垂直 比 ．． 酶 色， 当反应板 底部 有污染 时 ， 出现吸光 度值 升高 的现 易
象 ， 致假 阳性 。 导 １ ３ ２ 洗 涤 过 程操 作 不 当 ： 涤 过 程 中如 有溢 出 现 ．． 洗
象 ，Байду номын сангаас使得 强 阳性 标本 的反 应 液 污染 临 近 的 阴性 孔 而 会 出现假 阳性 ； 洗涤 不充分 ， 致板孔 中酶试 剂残 留而 出 导
质可与底物非特异性结合 ； 具有类过氧化物酶 ］ Ｈｂ
活性 ， 其效应 与辣 根过 氧化物 酶类 似 ， 血后反 应孔 非 溶 特异 性吸 附 Ｈｂ催 化底 物产 生 一定 程 度 的显 色 ， ， 使本 底 ＯＤ值 升高 ， 造成 假 阳性 。 １ １２ 离 心处理 不彻 底 ： ．． 处理 不完 全 的血标本 中纤维 蛋 白未完全 析 出 ， 易在 板 孔 中形 成 纤 维 蛋 白薄 膜 或 絮 状物 ， 堵塞洗 板机 的洗 板 头 ， 成 洗板 不 干 净 ， 残 留 造 酶
１ Ｅ Ｓ 法检测 梅毒抗 体假 阳性原 因分析 Ｕ Ａ
１ １ 血 液标本 引起 的假 阳性 ．
１３ １ 全 自动 加样 系统 的拖带现 象 ： 自动加 样系 统 ．． 全 能准 确和快 速进 行血 液 标 本 的加 样 ， 免 了手 工 加样 避 的人 为误差 ， 保证 了加样 的一致性 ， 高了血 液检测 的 提 质量 和水平 。但 目前 的全 自动加 样仪不 能做 到一份标
本一只加样头， 虽然加完一份标本后 ， 加样仪会 自 动清 洗 ３ 外壁清洗 １ ， 次， 次 若遇到高浓度的抗原或抗体标
本， 同一加样 针 的拖 带污 染 可 能会 导 致 其后 一 孔 或 多
孔 阳性 的现象。 。 。 ｊ
１１１ 溶 血 ： 血 的血液标本 中含有大 量破裂 的血 细 ．． 溶 胞， 细胞 内液 中的各种 活 性 酶及 其 具 有 酶样 活 性 的物
的值称 为灰 带 区 ， 测定 结 果 在灰 带 区的标 本 就 容 易 出
现假 阳性结果 。
化 ， 疫功能 出现 异 常 ， 免 常产 生 一 些异 常 蛋 白抗 体 ， 干
１４２ 空 白对 照 的影 响 ： 单 波 长法 测 定 Ｅ ＩＡ 结 ．． 用 ＬＳ
扰检测结果 ， 出现假 阳性。而受 检者若 患有肠癌、 肺
江苏 预防医学 ２ １ 年 ３ ００ 月第 ２ 卷第 ２ １ 期
Ｊ ｎ ｓ Ｐ ｅ ｄ Ｍａｃ ，０ ０ Ｖ １ １Ｎｏ２ ｉ ｇ ｕＪ ｒｖＭｅ ， ｒｈ ２１ ， ｏ．２ ， ． ａ
・
毒 理 与 检 验
・
Ｅ ＩＡ法检测梅毒抗体假阳性原 因分析及其对策 ＬＳ
邰平 ， 王进
（泰 州市疾病预 防控 制 中心 ， 江 苏 泰 州 ２５０ ２ ３０）
１１３ 细 菌污染 ： ．． 被细菌污染 的血液标本 ， 因细菌体 内 可能含有 内源性 辣根过 氧化物 酶 ， 对相应 酶作标 记 的 会 测定方法产生非 特异性干扰 ， 造成弱的假 阳性结果。
１ ２ 受检 者个体 因素 ． 老 年人 由于 生理 机 能 逐 步退
性判定值（ ｕ－ｏｆ， Ｃ ｔ ｆ值左右的一定 范围 Ｃ ｔ ｆ 而 ｕ —ｏ ） ｆ