小鼠术语复习课程

小鼠术语
C56BL/6N与129S6/SvEvTac差异
C56BL/6N及129S6/SvEvTac。

他们的区别在于： 129来源的ES培养相
对容易，有较强的GLT潜力，即容易得到可遗传的F1代flox杂合子。

但是，129品系的亚系非常多，遗传背景差异大，因此表型差异也比较大，有研究证明129品系不适合做神经学、免疫学等方面的研究。

因
此，用129背景做出来的敲除模型一般都需要回交到C57BL/6等清晰的
近交系背景，这需要5-10代，也就是2年左右的时间。

C57BL/6是应用最为广泛的近交系，遗传背景也很清晰，因此，在实验中的反应和表
型更一致，得到的结果重复性也会更好。

但是，相对于129品系，
C57BL/6来源的ES培养要求更高，而且GLT的能力较弱，比129背景更难得到可遗传的F1代杂合子。

C57BL/6来源的敲除模型直接与C57BL/6回交就是纯的近交系，不需要像129那样回交5-10代，因此，会节省时间。

C56BL/6J与B6CBF1差异
C56BL/6J及B6CBF1。

他们的区别在于：B6CBF1是杂合背景，有杂交优
势，生殖能力比较好；B6是纯背景的近交系，繁育能力要弱一些，对于我们来说B6背景在制作转基因小鼠上技术难度会大一些，所以费用也相对贵一些。

我们认为杂合背景可能对某些基因的表达会有一定影响，而纯背景对基因表达的反应程度比较均一，也就是说不同背景对某些基
因的表达的反应程度应该是不一样的，后期出现的表型可能也有区别。

B6背景是目前国际上运用的最广泛的小鼠，遗传背景非常清楚，公共
数据库中的小鼠基因组全序列也是用 C57BL/6基因组为模板测出来的，您可以根据您的实验来选择品系背景。

常规敲除（Traditional KO或Conventional KO）
常规敲除（Traditional KO或Conventional KO）是通过同源重组技
术，将基因组上的目的片段替换成一个Antibiotic Selection
Marker，如PGK-Neomycin等。

由于使用的neomycin标记两侧有loxp位点，即loxp-PGK-neomycin-loxp 结构，可以在中靶ES克隆中表达Cre 重组酶去除PGK-neomycin标记，当然，也可以选择在得到小鼠后，与全身表达Cre的小鼠交配的方式来去除这个标记。

G
国家遗传工程小鼠资源库
国家遗传工程小鼠资源库（NRCMM）是中国科技部唯一认证的遗传工程小鼠种子中心。

资源库致力于小鼠遗传学研究和基因组改造技术的开发。

已建立先进可靠的小鼠基因修饰平台，包括基因敲除，基因敲入，转基因，ENU化学诱变等。

NRCMM是中国现有的最大的小鼠品系保种中旬，包括多种疾病模型，如心血管，肥胖，糖尿病，免疫缺陷，老年痴呆，肿瘤等模型，并成为我国最早获得AAALAC国际动物管理认证的国家级动物中心。

我们连续3次通过了国际AAALAC 完全认证。

目前已为国内数百
家单位、包括多家跨国医药企业、大学、研究所、医院等成功制备了众
多基因改造小鼠品系。

2012年，NRCMM作为中国唯一一家单位加入国际小鼠表型分析联盟（IMPC），并发起成立亚洲小鼠表型分析平台
(AMPC)，致力于建立标准化的小鼠表型分析平台。

J
基因敲入（knock in）
基因敲入（gene knock in）是利用基因同源重组，将外源有功能基因
（基因组原先不存在、或已失活的基因），转入细胞与基因组中的同源
序列进行同源重组，插入到基因组中，在细胞内获得表达的技术。

近交系
在动、植物中，通过亲代与子代重复杂交若干代而获得的遗传型相对纯
一的纯系。

近交系中，个体的性状会逐步趋于稳定一致，然而其生活力
则降低。

指随着反复连续地近亲交配，具有不同性状的个体进行分离，成为基因纯合体系统。

最终完成的近交系为纯系，由于其后代中所有性
状不再分离，所以是精密实验的重要材料。

K
KO first敲除
KO first与conditional KO最大的不同在于neymycin标记的位置的元件更为复杂，是一个带有剪接受体位点的LacZ和Neomycin的合并体。

这样，neomycin作为筛选标记，功能与上述conditional KO中一致，LacZ就能够作为reporter在目的基因的promoter启动下，与目的基因一同表达，可以方便地对目的基因的表达进行定位。

同样，与Flpe表
达品系交配可以删除lacZ-neo标记，转变成常规的conditional KO的
flox小鼠。

Q
清洁级动物
清洁级动物：清洁级动物在微生物控制方面，除要求必须不带有人兽共
患病原和烈性传染病病原及常见传染病病原之外，还要求排除对科学实
验研究干扰大的病原体的动物。

S
SPF级实验动物
无特定病原体（Specific pathogen Free,SPF）动物是指机体内无特定
的微生物和寄生虫存在的动物，但非特定的微生物和寄生虫是容许存在
的。

一般指无传染病的健康动物，空气洁净度要求一万级，是目前国外使用最广泛的实验动物，它的来源，既可来自无菌动物繁育的后裔，亦
可经剖胎取后，在隔离屏障设施的环境中，由SPF亲代动物抚育。

它不
带有对人或动物本身致病的微生物，但不能排除可经胎盘屏障垂直传播
的微生物。

T
条件型敲除（Conditional KO）
条件型敲除（Conditional KO）策略是通过同源重组技术，在目的片段
的两侧各引入一个loxp位点，其中，1st loxp是独立的loxp位点，
2nd loxp位点旁边带有Neomycin标记，这里使用的PGK-neomycin两侧添加了FRT位点，即FRT-PGK-neomycin-FRT- loxp，可以在中靶ES克
隆中表达Flpe重组酶去除PGK-neomycin标记，也可以在小鼠中完成，
当然，也可以直接与组织特异性表达cre的品系交配，去除目的片段和筛选标记。

W
无菌级动物
所谓无菌动物，就是指不能检出任何活的微生物和寄生虫的动物。

从微
生物学的观点看，通常实验动物的体内和体外带有寄生虫，体内还常带有细菌和病毒，而且还都难于排除某些潜在的传染病。

此外，普通实验
动物的血清中含有抗体。

所以用并存普通动物进行医学科学研究，将会存在各种各样的干扰，实验结果往往不确切。

使用无菌动物作实验就可
以克服普通实验所存在缺点，使实验结果正确可靠。

Y
远交系
来自随机交配亲本、个体间遗传背景各异的小鼠。

Z
转基因小鼠模型
对于普通的转基因，表达的区域将取决于启动子。

如果选择全身表达的
启动子，如Rosa26, CAG等，将得到全身表达的转基因小鼠；如果选择
一些组织特异性表达的基因的启动子，将得到组织特异性表达的转基因
小鼠，如在AP2的promoter启动下进行表达，会得到脂肪组织特异表
达的转基因小鼠。

需要特别说明的是，这种转基因的策略是将转基因片段直接注射到小鼠的受精卵中，转基因片段将会在小鼠基因组中进行随
机插入，因为是完全随机的，有可能会插入到一些抑制区导致转入的基因不表达，也有可能插入到一些增强区导致转入的基因高表达。

通过原
核注射的方法得到的第一代转基因小鼠称为 founder（首建鼠），由于
上述随机性，每一只founder都是不一样的，以每一只founder起源的
品系称为line，不同的line 之间的表达可能会有差异。

杂交系
指两个不同近交系之间进行有计划的交配，杂交所产生的第一代动物，
具有两亲本遗传特性或产生新的遗传特性的动物。