产单核细胞李斯特菌感染白细胞引发小鼠中枢神经系统感染论文

产单核细胞李斯特菌感染白细胞引发小鼠中枢神经系统感染【摘要】感染产单核细胞李斯特菌吞噬细胞存在感染小鼠血液，但他们是否在中枢神经系统（cns）入侵发挥了作用是不清楚。细菌感染白细胞内可以建立中枢神经系统感染实验。细菌在血清和血浆抑制浓度范围1：16-1：256。然而，腹膜感染小鼠在庆大霉素处理后中枢神经系统感染发展观察，表明细胞内细菌与神经侵入有关。发现血液43.5%的细菌在白细胞内。庆大霉素处理大大降低了细胞外细菌数量的但不影响细胞内细菌数量。这些数据表明，受感染的白细胞和细胞内产单核细胞李斯特菌的保护在神经侵入中发挥重要作用。产单核细胞李斯特菌是一种兼性胞内菌感染人和家畜中枢神经系统（cns）的[1]。大多数人类感染由于摄入受污染的食物，通常表现为发热性胃肠炎[2]。更有可能发展为菌血症、中枢神经系统感染和死亡。虽然产单核细胞李斯特菌进入cns确切的机制并不清楚。

【关键词】单核细胞；李斯特菌；感染；白细胞；小鼠；中枢神经系统

感染小鼠实验表明在长期的菌血症过程中细菌侵入cns[3]。此外，与游离细菌相比神经元更容易被产单核细胞李斯特菌从巨噬细胞通过细胞间传递感染[4]。结果表明，尽管庆大霉素浓度达到杀菌水平，含有胞内细菌的白细胞仍存活在血液中并进一步中枢神经系统感染。使用此菌株获得的数据表明，白细胞是通过细胞与细胞之间的细菌的传播感染而不是从细胞外环境吞噬细菌。

1材料和方法

细菌：产单核细胞李斯特菌菌株保存在脑心浸液肉汤，在70°c，109cfu/毫升。

小鼠：雌性。关在笼子里给予食物和水。10-16周龄，体重20到25g。

小鼠感染：腹腔注射2×107cfu产单核细胞李斯特菌。在指定的时间，感染小鼠安乐死，然后通过心脏穿刺采血。

2结果

庆大霉素体内的抑菌浓度。初步实验表明，血清抑菌浓度1：8-1：16，杀菌浓度1：4-1：8。0.063到0.125μg/毫升浓度的庆大霉素没有抑制在肉汤培养基细菌生长。当≥25%（按体积）正常小鼠血清或胎牛血清添加到肉汤中抑制生长。被感染小鼠的抑菌浓度从1：16到1：256。

庆大霉素治疗组与对照组（未经处理的）相比72小时后显著降低在大脑细菌数量。

血液中的细菌数量仍显著低于抗生素治疗组4.96±

0.32log10cfu/毫升（平均值±标准差），与未经处理的动物比，6.21±0.13log10cfu/毫升（p<0.01）。相比之下，在治疗组小鼠大脑细菌数量是相似于对照组5.47±0.65和5.28±0.68log10cfu/大脑（n=10）。这些数据表明，连续输注的血液中庆大霉素浓度足以杀死细胞外的细菌和减缓体内细菌感染，但细菌仍感染大脑。

3讨论

胞外细菌的能力从血液侵入中枢神经系统说明了体外和体内感

染的模型[5]。然而，细胞内的细菌在神经入侵中的作用还不清楚。产单核细胞李斯特菌穿过细胞膜能力相对较差，不能在细胞质中达到杀菌浓度。因此，庆大霉素可以用来杀死细胞外产单核细胞李斯特菌，对细胞内的细菌复制和细菌在细胞与细胞之间的扩散没有作用[6]。对产单核细胞李斯特菌感染啮齿类动物使用不连续给予（每12h）的庆大霉素体内研究表明这种抗生素并不能显著降低细菌在血液或大脑的数量。

在庆大霉素治疗动物中枢神经系统感染的发展强烈提示，它是由循环中细胞内细菌起始的。体外实验证明可能有两种不同的机制。第一种是通过感染的单核吞噬细胞黏附在大脑内皮细胞，接着细胞内细菌从吞噬细胞到内皮的传播。这些细菌通过细胞间扩散可能继续入侵更深层次的结构。第二个机制涉及到细胞内细菌由吞噬细胞透过血脑屏障或血脑脊髓液屏障的运输。本结果正式这两种机制并存。

这些数据表明了细菌在吞噬细胞运送方式是开始于炎症细胞向

感染灶的聚集。在那里，他们吞噬和杀死细胞外细菌但本身感染细胞中细菌在实质细胞扩散。被感染的巨噬细胞进入血液，也许通过反向迁移的机理，然后运输细胞内细菌到中枢神经系统。

参考文献

[1]lorber b.（1997）listeriosis.clin.infect.dis.24：1–9.

[2]mead p.s，slutsker l，dietz v，（1999）food-related illness and death in the united states[j].emerg.infect.dis，1999，（05）：607–625.

[3]berche p.（1995）bacteremia is required for invasion of the murine central nervous system by listeria monocytogenes[j].microb.pathog，1995，（18）：323–336. [4]dramsi s，levi s，triller a，cossart p.（1998）entry of listeria monocytogenes into neurons occurs by cell-to-cell spread：an in vitro study[j].infect immun，1998，（66）：4461–4468.

[5]zhang j.r，tuomanen e.（1999）molecular and cellular mechanisms for microbial entry into the cns[j].j.neurovirol，1999，（05）：591–603.

[6]portnoy d.a，jacks p.s，hinrichs d.j.（1988）role of hemolysin for the intracellular growth of listeria monocytogenes[j].j.exp.med，1998，（167）：1459–1471.