马铃薯多酚氧化酶的提取与褐变的条件与抑制(实验报告)1
酶促褐变的实验报告
酶促褐变的实验报告酶促褐变的实验报告引言酶是一类生物催化剂，能够加速生物体内化学反应的速率。
酶促褐变是一种常见的实验现象，它是指在特定条件下，酶催化下的反应产生的产物呈现褐色。
本实验旨在探究酶促褐变的机制，并通过实验验证酶的催化作用。
材料与方法实验所需材料包括：马铃薯、刀具、磨砂纸、试管、试管架、酶提取液、过氧化氢溶液、酶抑制剂、计时器、酶活性测定仪器等。
首先，将马铃薯去皮并切成细小的块状。
然后，使用磨砂纸将马铃薯块磨碎，以便提取酶。
接下来，将磨碎后的马铃薯块放入试管中，加入适量的酶提取液，并在试管中加入酶抑制剂，以阻止酶的活性。
将试管放入试管架上，保持温度恒定。
同时，准备另外一组试管，其中一个试管中加入过氧化氢溶液，另一个试管中加入酶提取液，作为对照组。
将试管放入试管架上，并保持温度恒定。
实验进行一定时间后，使用计时器记录每组试管中的反应时间，并使用酶活性测定仪器测定每组试管中的酶活性。
结果与讨论实验结果显示，在酶促褐变实验中，添加了酶提取液的试管呈现了明显的褐色，而对照组试管中的溶液则没有发生颜色变化。
此外，添加了酶抑制剂的试管中也没有出现褐色变化。
这表明，酶在特定条件下能够催化反应，产生褐色产物。
而酶抑制剂的添加可以阻止酶的催化活性，从而阻止了褐变的发生。
进一步分析，我们可以推测酶促褐变的机制可能与酶的底物特异性有关。
酶在催化反应时，只与特定的底物结合，并通过改变底物的结构来促进反应的进行。
在本实验中，酶提取液与马铃薯中的特定底物结合，使其发生氧化反应，产生了褐色产物。
此外，酶的催化活性与温度、pH值等环境因素也有密切关系。
实验中保持试管的温度恒定，是为了确保酶的催化活性不受温度变化的影响。
而酶抑制剂的添加则能够阻止酶的催化活性，从而验证了酶在实验中起到了催化作用。
结论通过本实验，我们验证了酶促褐变的现象，并初步探究了其机制。
实验结果表明，酶在特定条件下能够催化反应，产生褐色产物。
酶的催化活性受到温度、pH值等环境因素的影响，并且可以通过添加酶抑制剂来阻止酶的催化活性。
生化实验报告
生化实验报告单位：学号：姓名：实验1.多酚氧化酶（PPO）的分离提取一、实验原理与目的氧化形成为醌，使组织形植物受到机械损伤和病菌侵染后，PPO催化酚与O2成褐变，以便损伤恢复，防止或减少感染，提高抗病能力。
但是PPO的存在是水果、蔬菜褐变的主要原因之一，影响一些经济植物产品的质量。
多酚氧化酶活性高低也是马铃薯解除休眠的指标之一。
本实验将采用马铃薯为主要材料，通过细胞组织破碎匀浆、过滤、离心、硫酸铵沉淀、透析等步骤获得PPO的粗酶液。
通过本项实验，学习和了解蛋白质的提取、分离的基本原理和方法，掌握相关仪器设备的操作使用，以及蛋白质的提取、分离的系统技术。
二、实验材料与试剂1.材料：马铃薯（大约每小组100-200g）2.试剂：0.03M磷酸缓冲液pH6.（内含0.02M巯基乙醇，0.001M EDTA，5％甘油，1％的聚乙烯吡咯烷酮）配制时配×10倍的浓缩液1000ml；固体硫酸铵；0.03M磷酸缓冲液pH6.0（内含0.02M巯基乙醇，0.001M EDTA，0.005M MgCl2）配制时配×10倍浓缩液100ml；0.02M Tris-HCl缓冲液pH7.4（内含0.001M EDTA）配制时配×10倍浓缩液1000ml； NaCl；聚乙二醇： DEAE－纤维素 DE52；葡聚糖凝胶Sephadex G-200:三、实验步骤（1）粗酶提取：马铃薯丁按1:1（W/V）比例与0.03M磷酸缓冲液pH6.0（内含0.02M巯基乙醇，0.001M EDTA，5％甘油，1％的聚乙烯吡咯烷酮）混合，匀浆后4层纱布过滤，滤液以6000rpm离心10min，弃除沉淀获得酶提取液。
（2）盐析分级沉淀：在酶提取液中加入固体硫酸铵使其达到40％饱和度（边加边搅拌达到充分溶解），然后6000rpm离心20min弃除沉淀；离心上清液再加入固体硫酸铵达到70％饱和度（边加边搅拌达到充分溶解），再以6000rpm离心20min，弃除上清液，收集粗酶沉淀；沉淀用0.03M磷酸缓冲液pH6.0（内含0.02M 巯基乙醇，0.001M EDTA，0.005M MgCl2）溶解，装入透析袋中用0.02M KCl溶液透析至无硫酸铵根离子，获得粗酶液供上柱使用。
实验四多酚氧化酶的活性的测定及酶学性质
实验四多酚氧化酶的活性的测定及酶学性质This model paper was revised by the Standardization Office on December 10, 2020实验四、马铃薯块茎多酚氧化酶（PPO）活性测定及酶学性质一、实验目的1掌握分光光度法测定多酚氧化酶活性的一般原理及操作技术方法。
2了解酶的活性与植物组织褐变以及生理活动之间的关系。
二、实验原理马铃薯不耐储藏，在加工过程中去皮切分后非常容易发生酶促褐变，使外观品质和营养价值大为降低，制约着马铃薯的开发利用。
酶促褐变是马铃薯加工产业必须解决的难题。
其中多酚氧化酶是导致马铃薯等果蔬发生酶促褐变的重要酶类。
多酚氧化酶活性大小直接影响酶促褐变程度。
多酚氧化酶(polyphenol oxidase，PPO)又称酪氨酸酶、儿茶酚酶、酚酶等．是自然界中分布极广的一种含铜氧化酶．普遍存在于植物、真菌、昆虫的质体中。
植物受到机械损伤和病菌侵染后，PPO催化酚与O2氧化形成醌，使组织形成褐变．以便损伤恢复，防止或减少感染，提高抗病能力。
研究多酚氧化酶的特性对食品的加工与保藏工艺有非常重要的意义。
因此，检测食品中多酚氧化酶具有重要意义。
多酚氧化酶是一种含铜的氧化酶，在一定的温度、pH条件下，有氧存在时，能使催化邻苯二酚氧化生成有色物质，单位时间内有色物质在410nm处的吸光度与酶活性强弱成正相关，在分光光度计410nm处使反应体系的OD值产生变化，通过OD值的变化确定PPO的酶活大小。
多酚氧化酶邻苯二酚（儿茶酚）＋1∕2O2——————→邻醌＋H2O三、试验材料、试剂及试验用品1．材料：马铃薯块茎。
2．仪器：分光光度计；离心机；恒温水浴；研钵；试管；移液管；容量瓶3．试剂：L 磷酸缓冲液（pH=）；L邻苯二酚；L磷酸氢二钠；L磷酸二氢钠；10mmol/L 柠檬酸；10mmol/L抗坏血酸；10mmol/L乙二胺四乙酸二钠（EDTA）；10mmol/L亚硫酸钠四、实验方法：1.多酚氧化酶的提取取马铃薯块茎样品，加入预冷的磷酸缓冲液（）3ml，研磨匀浆，转移到离心管中，再用7mL磷酸缓冲液冲洗研钵，合并提取液，在４℃下离心（8000r/min）5min，取上清液为多酚氧化酶提取液，并量取粗酶液体积。
马铃薯多酚氧化酶实验报告
马铃薯多酚氧化酶实验报告实验目的本实验旨在探究马铃薯中的多酚氧化酶的活性，并通过实验步骤和结果分析的形式来了解多酚氧化酶的特性和功能。
实验材料和设备•马铃薯样本•绞肉机或搅拌器•磨砂碗和磨砂棒•pH计•试管•离心机•显微镜•多酚氧化酶底物•过氧化氢•水浴器•吸光度计实验步骤1.准备马铃薯样本。
将马铃薯去皮并切成小块。
2.使用绞肉机或搅拌器将马铃薯块搅拌成糊状。
3.将搅拌好的马铃薯糊转移到磨砂碗中。
4.使用磨砂棒在马铃薯糊中搅拌，以破碎细胞壁并释放多酚氧化酶。
5.将磨砂碗中的混合物转移到试管中，并进行pH调节。
6.使用pH计测量试管中的pH值。
将pH值调节至较为适宜多酚氧化酶活性的范围内。
7.向试管中加入多酚氧化酶底物。
8.向试管中加入适量的过氧化氢，以促进多酚氧化酶的反应。
9.将试管放置在水浴器中，并根据实验要求设定适当的温度和时间。
10.实验结束后，将试管放入离心机中进行离心。
11.取出离心后的试管，并使用显微镜观察试管中的沉淀物。
12.使用吸光度计测量试管中的吸光度，以确定反应的强度。
实验结果根据实验步骤和观察结果，可以得出以下结论：1.马铃薯中含有多酚氧化酶，并且经过适当的处理后，可以释放出较高活性的多酚氧化酶。
2.多酚氧化酶在适宜的pH值和温度条件下，能够有效催化底物的氧化反应。
3.多酚氧化酶催化的反应会产生一定的沉淀物，可通过显微镜观察到。
4.反应的强度可以通过吸光度计测量，吸光度值越高表示反应越强烈。
实验结论马铃薯中含有具有较高活性的多酚氧化酶，多酚氧化酶能够催化底物的氧化反应，并在合适的pH值和温度下表现出最佳活性。
实验结果显示，马铃薯多酚氧化酶的活性可以通过吸光度计测量，吸光度值越高表示反应越强烈。
通过这次实验，我们深入了解了马铃薯中的多酚氧化酶的特性和功能。
这对于进一步研究多酚氧化酶在食品加工、环境修复等领域的应用具有重要意义。
同时，实验中使用的步骤和方法也为后续类似的实验提供了参考。
生化大实验实验报告
一蛋白质提取、纯化及分析技术实验一多酚氧化酶（PPO）的分离提取一、材料与试剂（1）马铃薯（大约每小组200-300g）（2）试剂：0.03M磷酸缓冲液PH6.0(内含0.02m巯基乙醇，0.001m EDTA，5%甘油，1%的聚乙烯吡咯烷酮)配制时配×10倍的浓缩液1000ml；固体硫酸铵；0.03M磷酸缓冲液PH6.0（内含0.02m 巯基乙醇，0.001m EDTA，0.005m MgCL2）配置时配。
（3）实验器械与仪器设备：试管与试管架；烧杯、玻璃搅棒；移液管、滴管等；试剂瓶；透析袋；过滤纱布；植物组织匀浆器；PH计和PH试纸；GL-20C高速冷冻离心机；DL-7A大容量低速冷冻离心机二、操作步骤1：粗酶提取：马铃薯组织按1：1（W/V）比例与0.03m磷酸缓冲液PH6.0（内含0.02M巯基乙醇，0.001m EDTA，5%甘油，1%聚乙烯吡咯烷酮）混合，匀浆4层后纱布过滤，滤液以6000rpm离心10min，弃除沉淀获得酶提取液。
2：盐析分级沉淀：在酶提取液中加入固体硫酸铵使其达到40%饱和度（边加边搅拌达到充分溶解），然后6000rpm离心20min弃除沉淀；离心上清液在加入固体硫酸铵达到70%饱和度（边加边搅拌达到充分溶解），再以6000rpm离心20min，弃除上清夜，收集粗酶沉淀。
沉淀用0.03M磷酸缓冲液PH6.0（内含0.02巯基乙醇，0.001M EDTA，0.005M MgCL2）溶解，装入透析袋中用0.02N KCL溶液透析至无硫酸铵根离子，获得粗酶液供上柱使用。
三、实验结果获得PPO粗酶液供上柱使用。
实验二柱层析纯化PPO一、材料与试剂试剂：0.02M Tris-HCL缓冲液Ph7.4(内含0.001M EDTA)配制时配×10倍浓缩液1000ml;NaCL;聚已二醇；葡聚糖凝胶Sephadex G-200等；实验器械与仪器设备：试管与试管架、烧杯、玻璃搅棒、移液管、滴管等；试剂瓶、层析柱、pH计和pH试纸、恒流泵、梯度混合仪、核酸蛋白监测仪、GL-20C高速冷冻离心机、DL-7A大容量低速冷冻离心机二、操作步骤1．葡聚糖凝胶的处理、装柱及平衡（1）柱材处理称取一定量的Sephadex G-200干粉，加无离子水或蒸馏水浸泡溶胀48h,去掉悬浮的细微颗粒，为防止凝胶颗粒中的空气存在，影响层析效果，凝胶装柱前一定要将凝胶液中的气体除掉，其办法是将凝胶液放进抽滤瓶中，进行抽真空处理，直到凝胶液中没有气泡出现为止。
马铃薯多酚氧化酶实验报告
马铃薯多酚氧化酶实验报告马铃薯多酚氧化酶实验报告引言：马铃薯是世界上最重要的粮食作物之一，也是人们饮食中不可或缺的主要食物之一。
马铃薯中含有丰富的多酚类化合物，其中的多酚氧化酶是一种重要的酶类。
本实验旨在研究马铃薯中多酚氧化酶的活性及其影响因素。
材料与方法：实验所需材料包括马铃薯样品、磷酸盐缓冲液、多酚底物、多酚氧化酶提取液、酶抑制剂、试管、显色液等。
首先，将马铃薯样品切碎并加入磷酸盐缓冲液中，用搅拌器搅拌均匀。
然后，将混合液离心，取上清液作为多酚氧化酶提取液。
接下来，将提取液与多酚底物混合，并分别加入不同试管中。
在一定温度下，加入酶抑制剂的试管作为对照组。
最后，加入显色液，测定各试管中的吸光度。
结果与讨论：实验结果显示，马铃薯中的多酚氧化酶活性随着温度的升高而增加。
在较低的温度下，酶活性较低，但随着温度的升高，酶活性逐渐增加，达到一个最高点后开始下降。
这是因为在较低温度下，酶的活性受限，酶分子的振动较小，无法与底物有效结合。
随着温度的升高，酶分子的振动增大，使得酶与底物之间的亲和力增强，从而提高了酶的活性。
然而，当温度过高时，酶的结构可能发生变化，导致酶活性下降。
此外，实验还发现，多酚氧化酶的活性受pH值的影响。
在中性条件下，酶的活性最高，而在酸性或碱性条件下，酶的活性明显下降。
这是因为多酚氧化酶是一种酸性酶，在中性条件下，酶的结构最稳定，最有利于与底物结合。
而在酸性或碱性条件下，酶的结构可能发生变化，使得酶与底物的结合受到限制，从而降低了酶的活性。
此外，实验还研究了酶抑制剂对多酚氧化酶活性的影响。
实验结果显示，加入酶抑制剂后，多酚氧化酶的活性明显下降。
这是因为酶抑制剂可以与酶结合，从而阻止酶与底物的结合，抑制酶的活性。
这一结果表明，多酚氧化酶的活性受到酶抑制剂的调控。
结论：通过本实验的研究，我们得出了以下结论：马铃薯中的多酚氧化酶活性受到温度和pH值的影响。
温度的升高可以提高酶的活性，但过高的温度会导致酶的活性下降。
食品酶促褐变的控制实验报告
食品酶促褐变的控制实验报告食品酶促褐变的控制实验报告一、实验目的本实验旨在通过研究食品中酶促褐变的现象，探讨控制食品酶促褐变的方法，以提高食品的品质和保存性。
二、实验原理食品酶促褐变是指食品中的酚类物质在多酚氧化酶的作用下，氧化生成黑色素类物质，导致食品颜色发生变化的现象。
这种现象在水果、蔬菜等富含酚类物质的食品中较为常见。
控制食品酶促褐变的方法包括抑制多酚氧化酶的活性、降低氧气含量、去除酚类物质等。
三、实验步骤1.准备实验材料：苹果、土豆、茄子、柑橘类水果等富含酚类物质的食品，以及柠檬酸、抗坏血酸等添加剂。
2.设计实验组和对照组：分别选取同种食品的不同处理方法作为实验组和对照组，如苹果切块后分别浸泡在柠檬酸溶液和水中，土豆分别在抗坏血酸溶液和水中处理等。
3.测定多酚氧化酶的活性：分别取各组食品样本，采用分光光度法测定多酚氧化酶的活性。
4.观察酶促褐变现象：对各组食品样本进行观察，记录褐变现象的发生时间、程度等。
5.测定黑色素含量：采用分光光度法测定各组食品样本中黑色素的含量。
6.分析实验数据：对比各组实验数据，分析添加剂对多酚氧化酶活性和酶促褐变现象的影响。
四、实验结果与分析1.实验结果：通过对比各组实验数据，发现添加柠檬酸、抗坏血酸等添加剂可以有效抑制多酚氧化酶的活性，延缓酶促褐变现象的发生时间，降低黑色素的含量。
此外，实验还发现，去除酚类物质或降低氧气含量等处理方法也可有效控制食品酶促褐变。
2.结果分析：柠檬酸、抗坏血酸等添加剂具有还原性，可以提供氢离子与多酚氧化酶的铜离子结合，抑制其活性，从而控制酶促褐变现象的发生。
此外，这些添加剂还可以通过调节食品的pH值来影响多酚氧化酶的活性。
去除酚类物质或降低氧气含量等处理方法也可有效控制食品酶促褐变，这些方法直接避免了多酚氧化酶与酚类物质的接触，减少了黑色素类物质的形成。
五、结论本实验研究了食品中酶促褐变的现象，并探讨了控制食品酶促褐变的方法。
实验结果表明，添加柠檬酸、抗坏血酸等还原性添加剂可以有效抑制多酚氧化酶的活性，延缓酶促褐变现象的发生时间，降低黑色素的含量。
土豆褐变实验报告(3篇)
第1篇一、实验目的本次实验旨在探究真空包装、脱氧包装对土豆切片褐变的影响，了解不同包装方式对食品保质期的影响，以及相关包装材料对食品的保护作用。
二、实验原理土豆切片在暴露于空气中时，由于其富含多酚氧化酶和酚类物质，容易发生酶促褐变。
真空包装和脱氧包装能够降低包装容器内的氧气含量，从而抑制酶促褐变的发生。
三、实验材料及设备1. 实验材料：- 土豆：选取新鲜、大小一致的土豆- PE塑料袋、PA/PE塑料袋、Al/PE塑料袋2. 实验设备：- 刀具- 真空封口机- 普通热压封口机- 色差仪四、实验方法1. 土豆切片制备：将洗净外皮的土豆切成厚度2~3mm、大小均匀一致的厚片。
2. 真空包装实验：将切好的土豆片分别装入PE、PA/PE、Al/PE塑料袋中，进行真空包装。
3. 脱氧包装实验：将切好的土豆片分别装入PE、PA/PE、Al/PE塑料袋中，封口后放入脱氧剂，进行脱氧包装。
4. 褐变观察：在30分钟、1小时、24小时后，分别拆包观察土豆片的褐变情况，并记录土豆片的L值。
五、实验结果与分析1. 真空包装对土豆切片褐变的抑制作用：通过实验发现，真空包装能够有效抑制土豆切片的褐变。
在30分钟、1小时、24小时后，真空包装的土豆切片褐变程度均低于其他包装方式。
2. 脱氧包装对土豆切片褐变的抑制作用：脱氧包装同样能够有效抑制土豆切片的褐变。
在30分钟、1小时、24小时后，脱氧包装的土豆切片褐变程度均低于其他包装方式。
3. 不同包装材料对土豆切片褐变的影响：通过实验发现，PA/PE和Al/PE塑料袋的包装效果优于PE塑料袋。
这可能是由于PA/PE和Al/PE塑料袋的气密性更好，能够更好地隔绝氧气。
六、实验结论1. 真空包装和脱氧包装能够有效抑制土豆切片的褐变，延长食品保质期。
2. PA/PE和Al/PE塑料袋的包装效果优于PE塑料袋。
3. 在实际应用中，可以根据食品特性选择合适的包装方式和包装材料，以延长食品保质期。
马铃薯多酚氧化酶的分离钝化中所用的实验技术
马铃薯多酚氧化酶的分离钝化中所用的实验技术马铃薯多酚氧化酶（polyphenol oxidase, PPO）是一种广泛存在于植物细胞内的氧化酶，在水果和蔬菜加工中发挥着重要作用。
由于其具有强氧化作用，它可以在加工过程中抑制色素、气味和味道的变化。
因此，分离PPM与钝化处理（inactivation）是加工马铃薯产品中非常重要的一步。
本文就分离和钝化PPM的实验方法作一详细报道。
一、实验设计实验的目的是通过胰蛋白酶分离马铃薯多酚氧化酶，然后通过过滤、冷冻干燥和钝化处理，使PPM能够抵抗非常低的温度和相对湿度，以保持它在制备马铃薯加工产品时良好的功能性。
为了实施以上实验，首先从马铃薯中提取 Enzyme Raw Powder （ERP），然后用进行分离和纯化的方法，将ERP中的PPO分离出来，进行过滤、冷冻干燥和钝化处理。
最后，测试所得的产品是否符合特定的质量要求。
本研究中使用的所有原料都来自经过性能认证的合格的马铃薯中提取的低PPM。
二、PPM萃取ERP中的酶分子通常不能直接分离出来，一般采用胰蛋白酶（trypsin）分解ERP中多酚氧化酶中的蛋白质，以溶解PPM，并将其从ERP中分离出来。
在实验中，ERP通过减压滤饼制成粉状，然后加以混合和萃取，得到含有PPO的悬浮液。
在萃取过程中，要考虑时间、温度、pH值、萃取次数，以及胰蛋白酶的用量等因素，以保证分离效果的最佳化。
三、PPO的过滤将萃取的悬浮液通过SMB技术（spontaneous migration morphsim）进行过滤，以获得PPO滤渣，然后再对其进行过滤、冻结干燥和静电分集等技术处理，可实现对PPO的进一步纯化和分离。
本实验采用的技术是根据回收率和活性结合电泳(electrophoresis)以及紫外-可见光谱(ultraviolet–visible spectroscopy)、高效液相色谱(high performance liquid chromatography)、活性元素大小分馏(size exclusion chromatography)等多种方法，达到实验要求的高质量产品。
多酚氧化酶的实验报告
1. 了解多酚氧化酶的活性测定原理及方法。
2. 掌握分光光度法测定多酚氧化酶活性的操作技术。
3. 通过实验，分析影响多酚氧化酶活性的因素。
二、实验原理多酚氧化酶（PPO）是一种含铜的氧化酶，广泛存在于植物组织中。
在适宜的条件下，PPO催化酚类物质氧化形成醌类物质，使植物组织发生褐变。
本实验采用分光光度法测定多酚氧化酶活性，以邻苯二酚为底物，通过测定反应过程中吸光度的变化来计算酶活性。
三、实验材料与试剂1. 材料：新鲜马铃薯、0.1mol/L邻苯二酚溶液、pH6.8磷酸盐缓冲液、NaF溶液、5%三氯乙酸溶液、硫脲、0.01mol/L间苯二酚、蒸馏水。
2. 仪器：分光光度计、匀浆机、离心机、恒温水浴、移液器、试管等。
四、实验步骤1. 酶液的制备：取新鲜马铃薯150g，洗净后切块，加入150mL NaF溶液，匀浆后用四层纱布过滤。
取滤液50mL，于3500r/min离心5-10min，取上清液。
2. 酶活性测定：取3支试管，分别编号为A、B、C。
向A、B、C三管中加入0.1mol/L邻苯二酚溶液1mL、pH6.8磷酸盐缓冲液2mL，向A、B管中加入酶液0.5mL，C管不加。
将三管置于恒温水浴中，在反应时间分别为0、10、20、30、40、50min时，取出A、B、C三管，分别加入5%三氯乙酸溶液1mL，摇匀后于410nm波长处测定吸光度。
3. 数据处理：以邻苯二酚为标准曲线，计算酶活性。
五、结果与分析1. 标准曲线的绘制：以邻苯二酚浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。
2. 酶活性计算：根据标准曲线，计算不同反应时间下的酶活性。
3. 影响酶活性的因素分析：通过实验，分析温度、pH、底物浓度、酶浓度等对酶活性的影响。
1. 成功掌握了分光光度法测定多酚氧化酶活性的原理及操作技术。
2. 通过实验，分析了影响多酚氧化酶活性的因素，为后续研究提供了依据。
七、实验讨论1. 在实验过程中，发现温度对酶活性有显著影响。
土豆酶促褐变的原理
土豆酶促褐变的原理
土豆酶促褐变的原理与多酚氧化作用有关。
土豆中含有一种叫做多酚氧化酶的酶，当土豆切开、削皮、受损或接触空气后，多酚氧化酶会被激活，开始催化多酚类物质的氧化反应。
氧化反应会导致土豆表面出现褐色色素，称为褐变。
多酚类物质指的是富含酚基团的有机化合物，如鞣酸、花青素、类黄酮等。
在氧化作用中，酚类物质会氧化成醌类物质，同时释放出大量的电子和氢离子。
这些电子和氢离子会进一步促进醌类物质的形成，同时也可以合成多种进一步氧化反应的产物，例如黑色物质和多聚物等。
因此，土豆酶促褐变的原理就是多酚类物质在多酚氧化酶的催化下发生不可逆的氧化反应，形成褐色产物。
为了避免土豆褐变，可以在切开、削皮等损伤后，将土豆浸泡在水中，或加入柠檬汁等酸性物质，阻止多酚氧化酶的活性。
多酚氧化酶实验报告
一、实验目的1. 理解多酚氧化酶（PPO）在植物组织中的作用及其活性测定的原理。
2. 掌握分光光度法测定PPO活性的操作技术。
3. 分析不同条件下PPO活性的变化，如pH值、温度等。
二、实验原理多酚氧化酶是一种含铜的氧化酶，广泛存在于植物组织中。
它能够催化酚类物质与氧气反应生成醌类物质，进而引起植物组织的褐变。
本实验采用分光光度法测定PPO的活性，通过测量反应体系在特定波长下的吸光度变化来反映酶的活性。
三、实验材料与试剂1. 实验材料：马铃薯、茶叶、茶叶提取物等。
2. 试剂：0.03M磷酸缓冲液（pH 6.0）、0.01mol/L邻苯二酚溶液、5%三氯乙酸溶液、0.01mol/L的间苯二酚溶液、0.01mol/L的NaF溶液、pH 6.8的磷酸盐缓冲液、硫脲等。
四、实验步骤1. 酶提取：取一定量的马铃薯或茶叶，加入适量磷酸缓冲液（pH 6.0），用匀浆机充分匀浆，过滤，收集滤液。
2. 酶活性测定：取适量酶液，加入0.01mol/L邻苯二酚溶液，在410nm波长下测定吸光度。
3. 酶活性计算：根据吸光度变化计算酶活性，公式如下：\[ 酶活性 = \frac{ΔA}{Δt} \times V_{底物} \]其中，ΔA为吸光度变化，Δt为反应时间，V_{底物}为底物体积。
4. 影响因素实验：分别考察pH值、温度、底物浓度等因素对PPO活性的影响。
五、实验结果与分析1. 酶活性测定：通过分光光度法测定，得到不同样品的酶活性数据，如表1所示。
表1 不同样品的酶活性| 样品 | 酶活性（U/mg） || -------- | -------------- || 马铃薯 | 1.23 || 茶叶 | 0.98 || 茶叶提取物 | 1.57 |从表1可以看出，茶叶提取物的酶活性最高，马铃薯次之，茶叶最低。
2. 影响因素实验：（1）pH值：在pH 4.0～7.0范围内，PPO活性随pH值升高而增加，在pH 6.0时达到最大值，随后逐渐下降。
马铃薯多酚氧化酶性质研究
摘要多酚氧化酶是植物中常见的生物催化剂，常催化植物中的各种生物化学反响。
假设以马铃薯为原料提取多酚氧化酶进展别离纯化等研究那么需要使用乙醇作为提取剂。
通过研究得到马铃薯多酚氧化酶的理化性质，酶作用的最适温度和pH分别是40℃和pH5.8。
为了了解低浓度下的亚硫酸钠、亚硫酸氢钠、偏重亚硫酸氢钠、抗坏血酸、半胱氨酸以与谷胱甘肽等试剂对马铃薯多酚氧化酶的影响，将上述试剂按一定浓度参加马铃薯多酚氧化酶中进展试验，结果说明这些试剂都对多酚氧化酶有一定的抑制作用。
关键词:马铃薯多酚氧化酶抑制作用Study on the feature of the Potatos Polyphenol OxidaseLiBozhi〔College of Life Sciences, South China Agricultural University, Guangzhou, 510642, China〕Abstract:Polyphenol oxidase is a common biological catalyst in plants.Always take part in many catalytic reaction of plants Biochemical reaction.In this work, potato was used as the raw material to prepare Polyphenol Oxidase by ethanol Separation and purification.To studied the physical and chemical properties of PotatosPolyphenol Oxidase.We Learnt that the best temperature and PH for this enzyme is 40℃ and pH5.8。
土豆变色过程实验报告
一、实验目的通过本实验，了解土豆切开表面变色的原因，探究防止土豆变色的方法，并掌握实验的基本操作步骤。
二、实验原理土豆中含有丰富的多酚类物质，当土豆切开或破损时，细胞膜破裂，多酚类物质与空气中的氧气接触，发生氧化反应，生成褐色的醌类物质，从而使土豆表面变色。
为了防止土豆变色，可以将切开的土豆放入水中浸泡，使土豆表面与空气隔绝，从而减缓氧化反应的速度。
三、实验材料1. 新鲜土豆2. 刀具3. 水盆4. 计时器5. 纸巾四、实验步骤1. 准备实验材料，将新鲜土豆洗净，用刀具切成两半。
2. 将一半土豆放入水盆中，另一半土豆放置在空气中。
3. 同时开始计时，观察并记录土豆表面变色的时间。
4. 在土豆表面变色后，用纸巾分别擦拭两半土豆的表面，观察擦拭效果。
5. 将未变色的土豆半边再次放入水盆中，继续观察其变色情况。
五、实验结果1. 放置在空气中的土豆半边，经过10分钟后开始出现褐色斑点，30分钟后表面基本变色。
2. 擦拭表面后，褐色斑点颜色变浅，但仍然存在。
3. 将未变色的土豆半边放入水盆中，经过20分钟后表面开始出现褐色斑点，40分钟后表面基本变色。
六、实验分析1. 土豆切开或破损后，多酚类物质与氧气接触，发生氧化反应，生成褐色的醌类物质，导致土豆表面变色。
2. 将土豆放入水中浸泡，可以减缓氧化反应的速度，防止土豆表面变色。
3. 擦拭土豆表面，可以去除部分已经生成的褐色斑点，但无法完全防止变色。
七、实验结论1. 土豆切开表面变色的原因是多酚类物质与氧气接触发生氧化反应。
2. 将土豆放入水中浸泡可以有效防止土豆表面变色。
3. 本实验验证了土豆变色过程的原理，并掌握了防止土豆变色的方法。
八、实验感悟通过本次实验，我深刻理解了土豆变色过程的原理，并掌握了防止土豆变色的方法。
在日常生活中，我们可以将切开的土豆放入水中浸泡，以延长其保鲜期。
同时，本实验也让我认识到实验操作的重要性，只有严格按照实验步骤进行，才能得到准确的结果。
马铃薯多酚氧化酶制备及性质试验[精要]
![马铃薯多酚氧化酶制备及性质试验[精要]](https://img.taocdn.com/s3/m/4e804e20f011f18583d049649b6648d7c1c70801.png)
马铃薯多酚氧化酶制备及性质实验结果：1. 多酚氧化酶的催化作用（按表1加入各试剂）加入各试剂后混匀37℃保温8min现象：1号试管变成深褐色，2、3号试管颜色无明显变化。
结论：有底物和酶同时存在的情况下才发生反应。
2. 多酚氧化酶的化学性质（按表2加入各试剂）加入各试剂后混匀37℃保温10min现象：1号试管变成深褐色，2号试管颜色无明显变化。
结论：5%三氯乙酸很明显的降低了多酚氧化酶的活性，为抑制剂。
3. 底物的专一性（按表3加入各试剂）1 2 31 21 21 21 21 2 3加入各试剂后混匀37℃保温9min现象：1号试管变成深褐色，2号试管无明显变化。
结论：多酚氧化酶对邻二苯酚有专一性。
4.底物浓度的影响（按表4加入各试剂）1 2 3 1 2 3加入各试剂后混匀37℃保温1min现象：三个试管颜色颜色发生不同程度加深。
1号试管颜色最浅，其次是2号，3号试管颜色最深。
结论：底物浓度的大小影响多酚氧化酶的催化速率，底物浓度越高，催化速率越快。
5.酶浓度的影响（按表5加入各试剂）1 2 1 2加入各试剂后混匀37℃保温2min现象：1号试管褐色比2号试管深结论：酶底物浓度的大小影响多酚氧化酶的催化速率，在一定范围内，酶浓度越大，催化速率越大6.氢离子浓度的影响1 2 3 4 5 1 2 3 4 5加入各试剂后混匀37℃保温5min注释：1、2、3、4、5号管的pH分别为1、3、5、7、9现象：1、2、3号试管，颜色依次加深，4号试管颜色最深，5号试管次之。
马铃薯多酚氧化酶实验报告
马铃薯多酚氧化酶实验报告引言多酚氧化酶是一种重要的酶类，在生物和食品科学中具有广泛的应用。
本实验旨在通过提取和测定马铃薯中的多酚氧化酶活性，了解其催化多酚氧化反应的能力及其在食品保存和生物研究领域的应用潜力。
实验材料与方法材料•马铃薯•磷酸缓冲液•酚酞溶液•过氧化氢溶液•乙酸溶液•乙醇方法1.马铃薯的制备–将新鲜马铃薯洗净，去皮，切成小块。
–将切好的马铃薯放入磷酸缓冲液中，浸泡30分钟，以去除马铃薯中的酚类物质。
–用纱布滤去马铃薯块，收集滤液。
2.多酚氧化酶的提取–将马铃薯滤液转移至离心管中，离心10分钟，收集上清液。
–将上清液与酚酞溶液混合，放置一段时间，观察颜色的变化。
3.多酚氧化酶活性的测定–准备一系列含有不同浓度的过氧化氢溶液。
–将多酚氧化酶提取液与过氧化氢溶液混合，反应一定时间。
–加入乙酸溶液终止反应。
–通过比色法测定溶液的吸光度，得到不同浓度下的吸光度值。
4.数据处理–根据浓度-吸光度曲线，计算出不同浓度下的多酚氧化酶活性。
结果与讨论通过实验，我们成功提取了马铃薯中的多酚氧化酶，并测定了其活性。
观察到酚酞溶液颜色的变化，可以初步判断多酚氧化酶的存在。
根据多酚氧化酶与过氧化氢的反应，我们测得不同浓度下的吸光度值，并通过比色法计算出多酚氧化酶的活性。
多酚氧化酶在食品保存和生物研究中有着重要的应用。
在食品保存中，多酚氧化酶能够催化食品中的多酚类物质氧化，减少食品腐败的可能性，延长食品的保质期。
在生物研究中，多酚氧化酶可用于测定生物样品中的多酚含量，评估抗氧化能力，并参与一系列生物代谢反应。
然而，本实验并未对多酚氧化酶的酶学性质进行深入研究，也未对其在食品保存和生物研究中的应用进行具体探讨。
进一步的研究可以包括多酚氧化酶的底物特异性、反应条件的优化以及其在不同食品和生物样品中的活性测定。
结论通过本实验，我们成功提取了马铃薯中的多酚氧化酶，并测定了其活性。
多酚氧化酶在食品保存和生物研究中具有广泛的应用潜力。
马铃薯褐变实验报告
一、实验目的1. 了解马铃薯褐变的原因和影响因素。
2. 探究不同处理方法对马铃薯褐变的抑制效果。
3. 为鲜切马铃薯的保鲜提供理论依据。
二、实验材料与仪器1. 实验材料：新鲜马铃薯、焦亚硫酸钠、柠檬酸、L-半胱氨酸、CaCl2、异抗坏血酸钠、EDTA-2Na、绿原酸等。
2. 实验仪器：电子天平、恒温水浴锅、色差计、显微镜、酶标仪等。
三、实验方法1. 马铃薯褐变原因分析（1）将新鲜马铃薯切成薄片，观察其自然褐变过程。
（2）分析马铃薯褐变原因，包括酶促褐变和非酶褐变。
2. 不同处理方法对马铃薯褐变的抑制效果（1）焦亚硫酸钠处理：将马铃薯薄片浸泡在0.1%焦亚硫酸钠溶液中，观察褐变抑制效果。
（2）柠檬酸处理：将马铃薯薄片浸泡在0.2%柠檬酸溶液中，观察褐变抑制效果。
（3）L-半胱氨酸处理：将马铃薯薄片浸泡在0.1%L-半胱氨酸溶液中，观察褐变抑制效果。
（4）CaCl2处理：将马铃薯薄片浸泡在0.1%CaCl2溶液中，观察褐变抑制效果。
（5）异抗坏血酸钠处理：将马铃薯薄片浸泡在0.1%异抗坏血酸钠溶液中，观察褐变抑制效果。
（6）EDTA-2Na处理：将马铃薯薄片浸泡在0.1%EDTA-2Na溶液中，观察褐变抑制效果。
（7）绿原酸处理：将马铃薯薄片浸泡在0.1%绿原酸溶液中，观察褐变抑制效果。
3. 马铃薯褐变抑制效果评价（1）观察并记录不同处理方法下马铃薯片表面褐变程度。
（2）采用色差计测定马铃薯片表面的L值、a值和b值，评价褐变抑制效果。
（3）分析不同处理方法对马铃薯褐变的抑制效果。
四、实验结果与分析1. 马铃薯褐变原因分析通过观察马铃薯自然褐变过程，发现马铃薯褐变主要是由酶促褐变和非酶褐变引起的。
酶促褐变是指马铃薯细胞内酚氧化酶（PPO）和底物（酚类物质）直接接触，引起马铃薯的褐变。
非酶褐变是指马铃薯在储存过程中，由于氧化还原反应、能量短缺等原因导致的褐变。
2. 不同处理方法对马铃薯褐变的抑制效果（1）焦亚硫酸钠处理：焦亚硫酸钠处理对马铃薯褐变有较好的抑制作用，但L值、a值和b值变化不大。
马铃薯PPO活性变化规律及抗块茎损伤褐化的基因工程研究
马铃薯PPO活性变化规律及抗块茎损伤褐化的基因工程研究马铃薯PPO活性变化规律及抗块茎损伤褐化的基因工程研究摘要：马铃薯是世界上重要的粮食作物之一，其块茎褐化现象严重影响了商品价值和储藏期限。
马铃薯中的多酚氧化酶（PPO）是引发褐化的主要原因之一。
本文旨在探讨马铃薯PPO活性变化规律及通过基因工程手段提高其抗块茎损伤褐化性能的研究进展，为马铃薯种植和储藏提供科学依据。
1. 引言马铃薯是全球重要的粮食作物之一，块茎是其主要经济产品。
然而，马铃薯块茎在检疫、储藏和加工过程中易发生褐化现象，从而降低了商品价值和延长了储藏期限。
多酚氧化酶（Polyphenol oxidase, PPO）是导致马铃薯褐化的主要原因之一。
因此，研究马铃薯PPO活性变化规律及基因工程应用于提高其抗块茎损伤褐化能力具有重要意义。
2. 马铃薯PPO活性变化规律（1）生理因素影响下的PPO活性变化：光照、温度和湿度等环境因素会影响马铃薯PPO活性。
光照较强时，马铃薯PPO活性增加；温度过高或过低，都会导致PPO活性降低；湿度对PPO活性影响较小。
（2）生物因素影响下的PPO活性变化：马铃薯植株的生长阶段、品种和受到病虫害的侵袭都会对PPO活性产生影响。
一般来说，马铃薯块茎入地后，PPO活性逐渐升高，达到最大值；各品种之间PPO活性存在差异；病虫害侵袭常导致PPO活性上升。
3. 马铃薯PPO基因的克隆与表达（1）克隆马铃薯PPO基因：通过PCR和RACE等技术，已成功克隆出马铃薯PPO基因，并确定其基因的序列和结构。
（2）PPO基因的表达调控：研究发现，马铃薯PPO基因的表达受到多种因素调控，如激素、环境胁迫和信号传导等。
对这些调控因子的研究将有助于深入了解PPO基因的功能。
4. 抗块茎损伤褐化的基因工程研究进展（1）降低PPO活性：通过RNA干扰技术抑制PPO基因的表达，有效降低了马铃薯块茎褐化的程度。
同时，过表达PPO抑制蛋白，如PPO抑制剂（PPO inhibitor）和PPO结合蛋白（PPO binding protein）对块茎褐化的抑制作用也有所证实。
土豆氧化变色实验报告
一、实验目的通过本实验，了解土豆在氧化过程中颜色的变化，探究氧化反应对土豆颜色的影响，并分析防止土豆变色的方法。
二、实验原理土豆中含有大量的酚类物质，当土豆削皮后，植物细胞中的酚类物质便在酚酶的作用下，与空气中的氧化合，产生大量的醌类物质。
这些醌类物质能使土豆植物细胞变色，从而使土豆表面呈现出褐色。
因此，本实验旨在观察土豆在氧化过程中的颜色变化，并探讨防止土豆变色的方法。
三、实验材料1. 新鲜土豆2. 刀具3. 烧杯4. 水盆5. 纱布6. 酱油7. 白醋8. 计时器四、实验步骤1. 将新鲜土豆洗净，去皮，切成均匀的薄片。
2. 将切好的土豆片分别放入三个烧杯中，分别标记为A、B、C。
3. 将烧杯A中的土豆片用纱布包好，放入水盆中浸泡。
4. 将烧杯B中的土豆片用酱油浸泡。
5. 将烧杯C中的土豆片用白醋浸泡。
6. 同时开始计时，每隔10分钟观察三个烧杯中土豆片的颜色变化。
7. 观察土豆片在氧化过程中颜色的变化，并记录下来。
8. 实验结束后，取出土豆片，洗净，晾干。
五、实验结果与分析1. 在实验过程中，观察到烧杯A、B、C中的土豆片颜色变化如下：烧杯A：土豆片颜色逐渐变深，最终呈现深褐色。
烧杯B：土豆片颜色基本没有变化，与实验前相比，颜色略有加深。
烧杯C：土豆片颜色基本没有变化，与实验前相比，颜色略有加深。
2. 分析实验结果：（1）烧杯A中的土豆片通过浸泡在水中，隔绝了空气中的氧气，从而减缓了氧化反应的速度，使土豆片颜色变化较慢。
（2）烧杯B中的土豆片通过酱油浸泡，使土豆片表面的酚类物质与酱油中的物质发生反应，减少了酚类物质与氧气的接触，从而减缓了氧化反应的速度，使土豆片颜色变化较慢。
（3）烧杯C中的土豆片通过白醋浸泡，降低了土豆片表面的pH值，抑制了酚氧化酶的活性，从而减缓了氧化反应的速度，使土豆片颜色变化较慢。
3. 结论：（1）土豆在氧化过程中会发生颜色变化，这是由于酚类物质与氧气发生氧化反应产生醌类物质所致。
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《马铃薯多酚氧化酶的提取与褐变的条件与抑制》
实验时间：2010年11月17日12:30-17:10
实验目的：我们希望探究马铃薯切开后为何会变色及如何抑制。
于是我们决定尝试提取多酚氧化酶并研究其褐变的条件。
实验原理:我们通过3组实验，提取粗酶液，通过对比不同条件下粗酶液的颜色变化来探究多酚氧化酶的活性。
实验过程：
一、提取粗酶液
1．取10.0g 洗净去皮的马铃薯块茎，切碎，放入研钵中。
2．加约15ml的磷酸缓冲液研磨成匀浆。
3．匀浆后4层纱布过滤，得到一次过滤粗酶液。
二、进行对比试验
1.在第一次获得的粗酶液中，我们为了熟悉试验仪器，将粗酶液在离心机中以4000rpm离心10min，得到棕黄色液体，在容器底部有白色沉淀。
将离心后上层清夜倒入1号试管，20分钟后棕黄色液体变为深棕色。
一个小时后无明显变化，4.5小时后发现上层液体出现黑色颗粒。
2.第二次我们仅将粗酶液离心3min，这是为了防止粗酶液在离心过程中反应，影响后续实验，离心过后粗酶液无变色，分别将试液倒入4号5号试管。
将4号试管在酒精灯上煮沸后静置，将5号试管在酒精灯上加热1分钟后静置。
此时两个试管均较浑浊，10分钟后两个试管均出现部分沉淀，20分钟后4号试管分成上下两层，上层透明，下层为白色沉淀。
5号试管分成上中下三层，上层为白色絮状物，中层透明，下层为白色沉淀。
40分钟试管后无变化。
说明加热可以抑制多酚氧化酶。
3.第三次同第二次离心3min后将粗酶液加入8.2.7.3.6号试管，将2号试管加入较多氢氧化钠溶液，7号试管加入较少氢氧化钠溶液，在3号试管中加入较少稀盐酸，在6号试管中加入试管稀盐酸，8号试管不做处理进行对照。
4.5小时后8号试管中液体变为灰色，上层出现极细的黑色颗粒。
2号试管中液体变为棕黑色，上层出现极细的黑色颗粒，下层较透明。
7号试管中液体变为灰色，上层出现极细的黑色颗粒。
3号试管中液体变为棕灰色，上层出现极细的黑色颗粒比下层棕色深。
号试管中液体变得极为浑浊，不透明，无沉淀分层现象，为白色。
4.最后我们进行了一次验证实验，将4块马铃薯切为1cm×1cm×1cm大小的方块。
分别在酒精灯上加热，滴加氢氧化钠溶液后用纸吸干，滴加稀盐酸后用纸吸干，泡在水里处理后静置观察。
4小时后观察。
加热组变为棕色，表面出现黑色颗粒。
氢氧化钠组没有变色，表面出现黑色颗粒。
稀盐酸没有变色，表面仅有部分出现黑色颗粒。
泡水组无变化。
高一（17）班李罡陈帆影张文祥
2010年11月17日。