马铃薯多酚氧化酶制备及性质实验

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马铃薯多酚氧化酶制备及性质实验结果:

1. 多酚氧化酶的催化作用(按表1加入各试剂)

加入各试剂后混匀

37℃保温8min

现象:1号试管变成深褐色,2、3号试管颜色无明显变化。 结论:有底物和酶同时存在的情况下才发生反应。

2. 多酚氧化酶的化学性质(按表2加入各试剂)

加入各试剂后混匀

37℃保温10min

现象:1号试管变成深褐色,2号试管颜色无明显变化。

结论:5%三氯乙酸很明显的降低了多酚氧化酶的活性,为抑制剂。

3. 底物的专一性(按表3加入各试剂)

加入各试剂后混匀

37℃保温9min

现象:1号试管变成深褐色,2号试管无明显变化。 结论:多酚氧化酶对邻二苯酚有专一性。

1 2 3 1 2

1 2 1 2

1 2 1 2 3

4.底物浓度的影响(按表4加入各试剂)

1 2 3 1 2 3

加入各试剂后混匀37℃保温1min

现象:三个试管颜色颜色发生不同程度加深。1号试管颜色最浅,其次是2号,3号试管颜色最深。

结论:底物浓度的大小影响多酚氧化酶的催化速率,底物浓度越高,催化速率越快。

5.酶浓度的影响(按表5加入各试剂)

1 2 1 2

加入各试剂后混匀37℃保温2min

现象:1号试管褐色比2号试管深

结论:酶底物浓度的大小影响多酚氧化酶的催化速率,在一定范围内,酶浓度越大,催化速率越大

6.氢离子浓度的影响

1 2 3 4 5 1 2 3 4 5

加入各试剂后混匀37℃保温5min

注释:1、2、3、4、5号管的pH分别为1、3、5、7、9

现象:1、2、3号试管,颜色依次加深,4号试管颜色最深,5号试管次之。

结论:pH小于最适pH时,pH越大,酶活性越高;pH等于最适pH时活性最大;超过最适pH时,酶活性又开始降低。此多酚氧化酶的最适pH在7.0左右

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