马铃薯多酚氧化酶制备及性质实验
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马铃薯多酚氧化酶制备及性质实验结果:
1. 多酚氧化酶的催化作用(按表1加入各试剂)
加入各试剂后混匀
37℃保温8min
现象:1号试管变成深褐色,2、3号试管颜色无明显变化。 结论:有底物和酶同时存在的情况下才发生反应。
2. 多酚氧化酶的化学性质(按表2加入各试剂)
加入各试剂后混匀
37℃保温10min
现象:1号试管变成深褐色,2号试管颜色无明显变化。
结论:5%三氯乙酸很明显的降低了多酚氧化酶的活性,为抑制剂。
3. 底物的专一性(按表3加入各试剂)
加入各试剂后混匀
37℃保温9min
现象:1号试管变成深褐色,2号试管无明显变化。 结论:多酚氧化酶对邻二苯酚有专一性。
1 2 3 1 2
1 2 1 2
1 2 1 2 3
4.底物浓度的影响(按表4加入各试剂)
1 2 3 1 2 3
加入各试剂后混匀37℃保温1min
现象:三个试管颜色颜色发生不同程度加深。1号试管颜色最浅,其次是2号,3号试管颜色最深。
结论:底物浓度的大小影响多酚氧化酶的催化速率,底物浓度越高,催化速率越快。
5.酶浓度的影响(按表5加入各试剂)
1 2 1 2
加入各试剂后混匀37℃保温2min
现象:1号试管褐色比2号试管深
结论:酶底物浓度的大小影响多酚氧化酶的催化速率,在一定范围内,酶浓度越大,催化速率越大
6.氢离子浓度的影响
1 2 3 4 5 1 2 3 4 5
加入各试剂后混匀37℃保温5min
注释:1、2、3、4、5号管的pH分别为1、3、5、7、9
现象:1、2、3号试管,颜色依次加深,4号试管颜色最深,5号试管次之。
结论:pH小于最适pH时,pH越大,酶活性越高;pH等于最适pH时活性最大;超过最适pH时,酶活性又开始降低。此多酚氧化酶的最适pH在7.0左右